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關于微生物破傷風實驗實驗材料(1)菌種:破傷風梭菌(2)試劑與藥物:破傷風抗毒素、破傷風痙攣毒素、小白鼠、酒精與碘酒(3)器材:無菌注射器、無菌棉簽第2頁,共11頁,2024年2月25日,星期天實驗目的了解并掌握破傷風梭菌的致病機制和免疫性第3頁,共11頁,2024年2月25日,星期天實驗方法1.實驗組:取小鼠一只,于一側后腿肌肉注射稀釋毒素濾液0.1ml。2.對照組:另取一只小鼠,做好標記,于腹腔注射破傷風抗毒素0.1ml,10min后于該小鼠后腿肌肉注射同樣稀釋毒素濾液0.1ml。第4頁,共11頁,2024年2月25日,星期天實驗預測結果注射破傷風抗毒素的小鼠(有標記)可能不會發(fā)病,而未注射破傷風抗毒素的小鼠(沒有標記)可能會發(fā)病。第5頁,共11頁,2024年2月25日,星期天實驗討論1.什么是外毒素?怎樣發(fā)揮作用?①細菌進行新陳代謝過程中在細胞內合成后分泌到細胞外的毒性蛋白質,主要由革蘭陽性菌產生。②作用:外毒素的分子結構由A和B兩種亞單位組成。A亞單位是外毒素的活性部分,決定其毒性效應;B亞單位無毒,能與宿主易感細胞表面的特殊受體結合,介導A亞單位進入細胞,使A亞單位發(fā)揮其毒性作用。所以,外毒素必須A、B兩種亞單位同時存在才有毒性。第6頁,共11頁,2024年2月25日,星期天2.為什么在受傷之后注射破傷風抗毒素?由于破傷風桿菌(厭氧性芽胞桿菌)廣存于人畜糞便、塵土和環(huán)境中,它不能侵入正常皮膚和粘膜,只能在機體有創(chuàng)傷時侵入機體。傷口愈深其越易感染而發(fā)病。3.為什么在注射毒素之前注射抗毒素?破?傷?風?抗?毒?素??是?一?種?異?性?蛋?白?質?,?注?射?時?容?易?出?現(xiàn)?過?敏?反?應?,?因?此?在?注?射?之?前?,?必?須?先?做?過?敏?試?驗?。
第7頁,共11頁,2024年2月25日,星期天4.破傷風痙攣毒素的致病作用是什么?(P159)破傷風毒痙攣毒素是一種神經毒素,為蛋白質,毒性非常強烈,僅次于肉毒毒素。破傷風梭菌沒有侵襲力,只在污染的局部組織中生長繁殖,一般不入血流。當局部產生破傷風痙攣毒素后,引起全身橫紋肌痙攣。毒素在局部產生后,通過運動終板吸收,沿神經纖維間隙至脊髓前角神經細胞,上達腦干,也可經淋巴吸收,通過血流到達中樞神經。毒素能與神經組織中的神經節(jié)苷脂結合,封閉了脊髓抑制性突觸末端,阻止釋放抑制沖動的傳遞介質甘氨酸和γ氨基丁酸,從而破壞上下神經原之間的正常抑制性沖動的傳遞,導致超反射反應(興奮性異常增高)和橫紋肌痙攣。第8頁,共11頁,2024年2月25日,星期天5.破傷風抗毒素的保護作用是什么?(P159)破傷風抗毒素含特異性抗體,具有中和破傷風毒素的作用,可用于破傷風梭菌感染的預防和治療。機體對破傷風的免疫是典型的抗毒素免疫。破傷風痙攣毒素可刺激機體產生抗毒素,抗毒素與游離的外毒素結合可阻斷毒素與神經細胞膜受體的結合,發(fā)揮中和作用,但對已與受體結合的毒素無中和作用。第9頁,共11頁,2024年2月25日,星期天實驗組別:8組成員:王會(20120201403)
熊婕妤(20120201406)鄧翠琴(20120201407)吳長瓊(20120201409)董曌(2012020141
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