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顯微鏡的結(jié)構(gòu)和使用一、顯微鏡的結(jié)構(gòu)1.鏡座:是顯微鏡的底座,用以支持整個(gè)鏡體。2.鏡柱:是鏡座上面直立的局部,用以連接鏡座和鏡臂。3.鏡臂:取放顯微鏡時(shí)手握部位。4.鏡筒:連在鏡臂的前上方,鏡筒上端裝有目鏡,下端裝有物鏡轉(zhuǎn)換器。5.載物臺(tái):在鏡筒下方,形狀有方、圓兩種,用以放置玻片標(biāo)本,中央有一通光孔,兩側(cè)有壓片夾,用以固定玻片標(biāo)本。6.遮光器:上有大小不等的圓孔,叫光圈.可調(diào)節(jié)光線強(qiáng)弱7.調(diào)節(jié)器:是裝在鏡柱上的大小兩種螺旋,調(diào)節(jié)時(shí)使鏡臺(tái)作上下方向的移動(dòng)。①粗準(zhǔn)焦螺旋:可使鏡臺(tái)作快速和較大幅度的升降,能迅速調(diào)節(jié)物鏡和標(biāo)本之間的距離使物象呈現(xiàn)于視野中,通常在使用低倍鏡時(shí),先用粗調(diào)節(jié)器迅速找到物象。②細(xì)準(zhǔn)焦螺旋:可使鏡臺(tái)緩慢地升降,多在運(yùn)用高倍鏡時(shí)使用,從而得到更清晰的物象。8.反光鏡:裝在鏡座上面,可向任意方向轉(zhuǎn)動(dòng),它有平、凹兩面,凹面鏡聚光作用強(qiáng),適于光線較弱的時(shí)候使用,平面鏡聚光作用弱,適于光線較強(qiáng)時(shí)使用。9.目鏡與物鏡比擬鏡頭透鏡大小鏡頭長短視野亮度物像大小細(xì)胞數(shù)目鏡低倍大長亮小多高倍小短暗大少物鏡低倍大短亮小多高倍小長暗大少二、顯微鏡的使用取鏡和安放1.翻開顯微鏡箱,一手握鏡臂,一手托鏡座,將顯微鏡取出。2.把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的前方稍偏左,便于用左眼觀察物像,用右眼看著畫圖。3.讓鏡筒向前,鏡臂向自己,然后安放好目鏡和物鏡。(二)對光1.轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍鏡對準(zhǔn)通光孔。2.轉(zhuǎn)動(dòng)載物臺(tái)下的遮光器,選一較大的光圈對準(zhǔn)光孔。3.左眼注視目鏡,(右眼也要睜開),轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi),通過目鏡,可看到白亮的視野。當(dāng)光線強(qiáng)時(shí),讓平面鏡對著光源,光線弱的時(shí)候,用凹面鏡對著光源。(三)低倍鏡觀察1.把所要觀察的玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上,用壓片夾壓住,標(biāo)本要正對通光孔的中心。2.眼睛從側(cè)邊看著物鏡頭和標(biāo)本之間,轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止。3.左眼看目鏡內(nèi),同時(shí)反向緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒上升,直到看到物象為止,再稍稍轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使看到的物象更加清晰。4.看不到物像的重復(fù)第2、3兩個(gè)步驟?!菜摹掣弑剁R觀察1.移動(dòng)裝片,在低倍鏡下使需要放大的局部移動(dòng)到視野中央。2.轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,移走低倍物鏡,換上高倍物鏡。3.緩緩調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使物象清晰。4.調(diào)節(jié)光圈,使視野亮度適宜。注意:換上高倍物鏡后禁止向下轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋。三、根底知識和應(yīng)用一、不同放大倍數(shù)下細(xì)胞數(shù)目問題顯微鏡的放大倍數(shù)=目鏡的放大倍數(shù)×物鏡的放大倍數(shù)。該放大倍數(shù)指的是長度或?qū)挾鹊姆糯蟊稊?shù),而不是面積或體積的放大倍數(shù)。【例】(2005上海生物,28)顯微鏡目鏡為10×,物鏡為10×,視野中被相連的64個(gè)分生組織細(xì)胞所充滿。假設(shè)物鏡轉(zhuǎn)換為40×后,那么在視野中可檢測到的分生組織細(xì)胞數(shù)為A.2個(gè)B.4個(gè)C.8個(gè)D.16個(gè)【解析】顯微鏡的放大倍數(shù)指的是長度或?qū)挾鹊姆糯蟊稊?shù),而不是面積或體積的放大倍數(shù)。假設(shè)一個(gè)標(biāo)本被放大了40倍,實(shí)際上是指它的長度和寬度分別被放大了40倍,即物體被放大了1600倍。該題中“目鏡為10×,物鏡為10×,視野中被相連的64個(gè)分生組織細(xì)胞所充滿?!奔僭O(shè)物鏡轉(zhuǎn)換為40×后,原先的分生組織細(xì)胞被放大了4×4=16倍,即視野相應(yīng)減小到原來的1/16,所以視野中的細(xì)胞數(shù)目變?yōu)樵瓉淼?/16,即4個(gè)細(xì)胞。【答案】B【例】當(dāng)顯微鏡的目鏡為10×,物鏡為10×?xí)r,可看到在視野中央有一行相連的8個(gè)細(xì)胞。假設(shè)目鏡不變,物鏡換成40×?xí)r,那么在視野中可以看到幾個(gè)完整細(xì)胞()【解析】在放大倍數(shù)10×10〔即目鏡10×,物鏡10×〕時(shí),觀察到視野中央有一行細(xì)胞共8個(gè),假設(shè)把物鏡換成40×,即放大倍數(shù)比原來增大4倍,那么觀察到的細(xì)胞數(shù)目為8÷4=2個(gè)。【答案】A【誤區(qū)點(diǎn)擊】①視野中是一行細(xì)胞還是充滿整個(gè)視野的細(xì)胞,②放大倍數(shù)比原來的放大倍數(shù)增大了幾倍。如果是一行細(xì)胞,那么觀察到的細(xì)胞數(shù)目與放大倍數(shù)的變化成反比;如果是充滿整個(gè)視野的細(xì)胞,那么觀察到的細(xì)胞數(shù)目與放大倍數(shù)的變化的平方成反比。二、物像移動(dòng)與實(shí)物位置的關(guān)系使用顯微鏡觀察標(biāo)本時(shí),首先在低倍鏡下找到要觀察的物像,然后將其移動(dòng)到視野中央,再換用高倍鏡觀察。由于在顯微鏡下看到的是放大后的倒像,即上下、左右均是顛倒的。因此在移動(dòng)裝片時(shí)要把握一個(gè)原那么:“偏哪移向哪”。即要觀察的目標(biāo)在哪個(gè)方向,就要向哪個(gè)方向移動(dòng)。比方要把左上方的目標(biāo)移動(dòng)到視野中央,應(yīng)該把裝片向左上方移?!纠吭陲@微鏡視野中觀察黑藻細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)環(huán)流時(shí),視野中一葉綠體位于液泡右下方,細(xì)胞質(zhì)環(huán)流方向?yàn)槟鏁r(shí)針,如下圖,實(shí)際上葉綠體的位置和細(xì)胞質(zhì)環(huán)流的方向分別為A.葉綠體位于液泡右下方,環(huán)流方向?yàn)槟鏁r(shí)針B.葉綠體位于液泡左上方,環(huán)流方向?yàn)槟鏁r(shí)針C.葉綠體位于液泡右上方,環(huán)流方向?yàn)轫槙r(shí)針D.葉綠體位于液泡左下方,環(huán)流方向?yàn)轫槙r(shí)針【解析】顯微鏡呈倒立的像,上下左右全顛倒,故葉綠體實(shí)際在左上方,但環(huán)流方向一致?!敬鸢浮緽三、顯微鏡下視野的大小、明暗問題一般來說在低倍鏡下物像較小,所看到的細(xì)胞數(shù)目較多,由于物鏡與玻片的距離遠(yuǎn),所看到的視野范圍就大,視野也較明亮;相反,在高倍鏡下物像較大,所看到的細(xì)胞數(shù)目較少,由于物鏡與玻片的距離非常近,所看到的視野范圍就較小,視野也較暗。因此,由低倍鏡轉(zhuǎn)換到高倍鏡后,視野范圍變小,亮度變暗。為解決高倍鏡下視野較暗的問題,將光圈由小變大,反光鏡由平面轉(zhuǎn)換為凹面鏡以增加視野的亮度?!纠考僭O(shè)用同一顯微鏡觀察同一標(biāo)本4次,每次僅調(diào)整目鏡、物鏡和細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,結(jié)果得到如以下圖A、B、C、D,試問其中視野最暗的是()【解析】放大倍數(shù)最大的視野最暗。而A、B、C、D中放大倍數(shù)最大的為C,因?yàn)镃視野中細(xì)胞數(shù)目最少?!敬鸢浮緾四、污染物的位置判斷用顯微鏡觀察時(shí),往往會(huì)由于操作過程中不慎沾染上污物,在視野中形成污點(diǎn),影響觀察效果。因此需要及時(shí)判斷污點(diǎn)的位置以便于盡快將其去除。視野中出現(xiàn)的污染物不外乎三個(gè)位置:物鏡鏡頭、目鏡鏡頭和裝片上。因此,可以先移動(dòng)裝片,如果移動(dòng)裝片時(shí)視野中的污點(diǎn)隨之移動(dòng),說明在裝片上;否那么不在裝片上。如果初步判斷不在裝片上,可以轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,更換物鏡鏡頭,如果更換物鏡后污染物消失,說明污物在物鏡上,如果污點(diǎn)仍在,說明不在物鏡上。【例】〔2001上?!衬硨W(xué)生用顯微鏡觀察裝片時(shí),見視野中有甲、乙、丙三異物。為判斷異物的位置,他先轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡,見甲異物動(dòng),然后轉(zhuǎn)換物鏡,三異物仍存在。據(jù)此,三異物可能在〔多項(xiàng)選擇〕
A.目鏡
B.物鏡
C.反光鏡
D.裝片【答案】AD五、低倍鏡轉(zhuǎn)換至高倍鏡的操作考前須知(1)調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋使鏡筒下降時(shí),兩眼要注視物鏡與玻片之間的距離,到快接近時(shí)(距離約為0.5cm)停止下降。(2)首先用低倍鏡觀察,找到要放大觀察的物倬。移到視野中央,然后換上高信物鏡。(3)換上高信物鏡后,不能再轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋.而只能用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋來調(diào)節(jié)。在用顯微鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須先在低倍鏡下降物像移至視野中央,然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,換用高倍鏡進(jìn)行觀察,而不能直接用高倍鏡。一旦轉(zhuǎn)換成高倍鏡,千萬不能調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋,只能慢慢調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,直至找到清晰的物像?!纠?】(2005年江蘇.26)觀察細(xì)胞中染色體行為并計(jì)數(shù)時(shí).使用光學(xué)顯微鏡的正確方法是()A.低倍鏡對焦,將觀察目標(biāo)移至視野中央,轉(zhuǎn)用高倍鏡并增加進(jìn)光量,調(diào)焦觀察B.低倍鏡對焦,將觀察目標(biāo)移至視野中央,轉(zhuǎn)用高倍鏡并減少進(jìn)光量,調(diào)焦觀察C.低倍鏡對焦,轉(zhuǎn)用高倍鏡,將觀察目標(biāo)移至視野中央,減少進(jìn)光量,調(diào)焦觀察D.高倍鏡對焦.將觀察目標(biāo)移至視野中央.增加進(jìn)光量.調(diào)焦觀察【解析】使用顯微鏡必須先低倍鏡后高倍鏡,換高倍鏡時(shí).因視野范圍要變小,視野變暗,所以要將觀察目標(biāo)移到視野中央,并增加進(jìn)光量?!敬鸢浮緼六、目鏡與物鏡的識別與判斷【例8】下面甲圖示洋蔥根尖生長點(diǎn)連續(xù)分裂的細(xì)胞在各個(gè)時(shí)期細(xì)胞核內(nèi)DNA含量的測定結(jié)果,乙圖是一組目鏡標(biāo)有5×和16×字樣、物鏡標(biāo)有10×和40×字樣的鏡頭,丙圖是某同學(xué)在乙圖中選用的一組能放大160倍的鏡頭組合所觀察到的圖像。欲將丙圖視野中處于甲圖e時(shí)期的細(xì)胞移至視野中央進(jìn)行640倍高倍鏡觀察,正確的鏡頭組合及操作程序應(yīng)是〔〕丙丙一個(gè)細(xì)胞內(nèi)DNA含量abcdefg1234甲乙⑴⑵⑶⑷A.⑴×⑶;左上方B.⑴×⑶;右下方C.⑵×⑶;右下方D.⑵×⑶;左上方【解析】此題考查目鏡與物鏡的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其長短與放大倍數(shù)的關(guān)系?!?〕目鏡與物鏡的識別:物鏡通過螺紋安裝在轉(zhuǎn)換器上,而目鏡是直接放入鏡筒的,所以帶有螺紋的是物鏡〔乙圖中的3、4〕,沒有螺紋的是目鏡〔乙圖中的1、2〕。⑵放大倍數(shù)與鏡頭長短的關(guān)系①物鏡越長放大倍數(shù)越大,距裝片距離越近,如H1。②目鏡越長放大倍數(shù)越小。因此要實(shí)現(xiàn)最大的放大倍數(shù)的組合〔640倍〕,必須選擇放大倍數(shù)最大的目鏡〔2〕和物鏡〔3〕進(jìn)行組合。甲圖示洋蔥根尖生長點(diǎn)連續(xù)分裂的細(xì)胞在各個(gè)時(shí)期細(xì)胞核內(nèi)DNA含量,由圖示可知,e時(shí)期屬于有絲分裂后期,對應(yīng)到丙圖,應(yīng)該是左上方圖像。由于顯微鏡下觀察到的是倒像,要將目標(biāo)移到視野中央,根本的原那么就是:物像在哪個(gè)方向,就向哪個(gè)方向移動(dòng)?!敬鸢浮緿【綜合演練】1.在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用普通光學(xué)顯微鏡,答復(fù)〔1〕顯微鏡視野中用于指示的“指針”是用頭發(fā)制作的,這根頭發(fā)應(yīng)放在A.物鏡內(nèi)
B.目鏡內(nèi)
C.鏡筒內(nèi)
D.載玻片上〔2〕一個(gè)細(xì)小物體假設(shè)被顯微鏡放大50倍,這里的“被放大50倍”是指A.體積
B.外表積
C.像的面積
D.長度或?qū)挾取?〕在光照明亮的實(shí)驗(yàn)室里,用白色洋蔥表皮細(xì)胞做質(zhì)壁別離實(shí)驗(yàn)。在顯微鏡底下能看得到細(xì)胞壁,但是看不清細(xì)胞是否發(fā)生了質(zhì)壁別離。為便于觀察,此時(shí)應(yīng)A.改用凹面反光鏡,放大光圈
B.改用凹面反光鏡,縮小光圈C.改用平面反光鏡,放大光圈
D.改用平面反光鏡,縮小光圈〔4〕在觀察細(xì)胞有絲分裂裝片時(shí),高倍鏡觀察時(shí)視野非常模糊,調(diào)整細(xì)準(zhǔn)焦螺旋不能解決問題,轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡無明顯變化,以下所列的原因中不可能的是
A.載玻片放置反了
B.高倍鏡鏡頭被污染
C.目鏡被污染
D.在玻片被污染〔5〕顯微鏡在使用過程中,你認(rèn)為判斷其好壞優(yōu)劣的關(guān)鍵是A.放大倍數(shù)
B.分辨率
C.調(diào)焦螺旋靈敏度
D.反光鏡的反射效果
2.正確的顯微鏡操作步驟是①對光
②裝鏡頭
③放置
④升鏡筒
⑤降鏡筒
⑥低倍鏡觀察
⑦調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺
⑧尋找物象A.③②①④⑤⑥⑦⑧
B.③②①⑤④
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