導(dǎo)致液相色譜柱失效的4個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題及解決辦法 液相色譜解決方案

第第頁(yè)導(dǎo)致液相色譜柱失效的4個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題及解決辦法液相色譜解決方案液相色譜儀的色譜柱在使用一段時(shí)間后，會(huì)出現(xiàn)一定的常見(jiàn)故障，如果不能很好的判斷并解決就會(huì)影響色譜柱的使用效果，從而影響樣品的分析結(jié)果。液相色譜柱1篩板堵塞色譜柱入口篩板堵塞是zui常見(jiàn)的問(wèn)題之一，會(huì)導(dǎo)致柱壓升高、色譜峰拖尾、塔板數(shù)降低等問(wèn)題。通常分析樣品中微粒雜質(zhì)zui右可能堵塞色譜柱入口，因此分析時(shí)，需要先過(guò)濾或者離心，乳濁或渾濁樣品應(yīng)以0.25m濾膜處理，也可用針頭過(guò)濾器過(guò)濾。進(jìn)樣器與泵密封墊的磨損也會(huì)帶入微粒，在進(jìn)樣閥與色譜柱之間使用0.25m或0.45m的在線過(guò)濾器，通常可以避免這類問(wèn)題。2強(qiáng)保留樣品組分強(qiáng)吸附性的樣品組分吸附在柱頭填料上，能嚴(yán)重地影響色譜柱壽命。像生物組織或體液的提取物、天然產(chǎn)物等復(fù)雜樣品，極易造成柱頭的污染。相對(duì)較純的樣品，一般不會(huì)出現(xiàn)這一問(wèn)題。色譜柱應(yīng)用中，色譜峰嚴(yán)重拖尾或分裂往往是強(qiáng)保留污染物在柱頭吸附的體現(xiàn)。3色譜柱裝填不良裝填不良的色譜柱，在短時(shí)間應(yīng)用后，填充床的壓縮通常使柱頭處產(chǎn)生塌陷，導(dǎo)致柱效突然降低。色譜柱的初始評(píng)價(jià)指標(biāo)，如塔板數(shù)、不對(duì)稱因子等往往不能很好地表征色譜柱床層的穩(wěn)定性，這種情緒只能在實(shí)際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)。4壓力因素液相色譜儀色譜柱使用過(guò)程中的驟然壓力波動(dòng)、機(jī)械撞擊或溫度驟然變化都會(huì)對(duì)色譜柱床層產(chǎn)生影響，導(dǎo)致峰形變差和柱效降低。進(jìn)樣過(guò)程中，進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)動(dòng)太慢可引起壓力波動(dòng)，使色譜柱床產(chǎn)生裂隙，在柱切換時(shí)也存在同樣的問(wèn)題。使用填充良好的色譜柱，在較低柱壓下操作，可大大減少由壓力波動(dòng)造成的色譜柱損壞。高效液相色譜儀常見(jiàn)故障解決方法

高效液相色譜儀是由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、查看器、記錄儀等幾有些構(gòu)成。儲(chǔ)液器中的活動(dòng)相被高壓泵打入體系，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入活動(dòng)相，被活動(dòng)相載入色譜柱（固定相、內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不一樣的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)重復(fù)屢次的吸附-解吸的分配進(jìn)程，各組分在移動(dòng)速度上發(fā)生較大的不一樣，被別離成單個(gè)組分順次從柱內(nèi)流出，經(jīng)過(guò)查看器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜方式打印出來(lái)。高效液相色譜儀常見(jiàn)故障解決方法：故障1活動(dòng)相內(nèi)有氣泡，封閉泵，翻開(kāi)泄壓閥，翻開(kāi)purge鍵，清潔脫氣，氣泡不斷從過(guò)濾器冒出，進(jìn)入活動(dòng)相，不管翻開(kāi)purge鍵幾回，都無(wú)法清除不斷發(fā)生的氣泡。因素過(guò)濾器長(zhǎng)時(shí)刻沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過(guò)濾器內(nèi)部由于霉菌的成長(zhǎng)繁衍，構(gòu)成菌團(tuán)，阻塞了過(guò)濾器，緩沖液難以流暢地經(jīng)過(guò)過(guò)濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過(guò)濾器進(jìn)入活動(dòng)相。處理過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清潔幾分鐘即可；亦可將過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時(shí)，悄悄震蕩幾回，再將過(guò)濾器用純水清潔幾回，翻開(kāi)泄壓閥，翻開(kāi)purge鍵，清潔脫氣，如仍有氣泡不斷從過(guò)濾器冒出，持續(xù)將過(guò)濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒(méi)有氣泡不斷從過(guò)濾器中冒出，闡明過(guò)濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸損壞，活動(dòng)相能夠流暢地經(jīng)過(guò)過(guò)濾器。翻開(kāi)泄壓閥，翻開(kāi)泵，流速調(diào)至1.0～3.0ml/min，純水沖刷過(guò)濾器1小時(shí)擺布。即可將過(guò)濾器清潔潔凈。封閉泄壓閥，純甲醇沖刷半小時(shí)即可。故障2柱壓高因素：緩沖液鹽分如（乙酸銨等）堆積于柱內(nèi)；樣品污染堆積。處理關(guān)于第一種狀況先用40～50℃的純水,低速正向沖刷柱子，待柱壓逐步降低后，相應(yīng)進(jìn)步流速?zèng)_刷，柱壓大幅度降低后，用常溫純水沖刷，之后用純甲醇沖刷柱子30分鐘；關(guān)于第二種狀況，由樣品的堆積導(dǎo)致污染的C18柱，和純水反向沖刷柱子，然后換成甲醇沖刷，接著用甲醇+異丙醇（4+6）沖刷柱子（沖刷時(shí)刻的長(zhǎng)短由樣品污染的狀況而定），再用換成甲醇沖刷，然后用純水沖刷，最終甲醇沖刷正向沖刷柱子30分鐘以上。故障3既無(wú)壓力指示，又無(wú)液體流過(guò)[1；。泵密封墊圈磨損；很多氣泡進(jìn)入泵體。處理關(guān)于第一種狀況，替換密封墊圈；關(guān)于第二種狀況，在泵作用的一起，用一個(gè)50ml的玻璃針筒在泵的出口處協(xié)助抽出空氣。故障4壓力動(dòng)搖大，流量不穩(wěn)定.因素體系中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。處理作業(yè)中留意調(diào)查活動(dòng)相的量，確保不銹鋼濾器沉入儲(chǔ)液器瓶底，防止吸入空氣，活動(dòng)相要充沛脫氣[2；。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清潔.故障5出峰欠安，峰分叉。因素色譜柱被污染；柱頭填料陷落。處理關(guān)于第一種狀況，先用純水反向沖刷柱子，然后換成甲醇沖刷，接著用甲醇+異丙醇（4+6）沖刷柱子（沖刷時(shí)刻的長(zhǎng)短由樣品污染的狀況而定），再換成甲醇沖刷，然后用純水沖刷，最終甲醇沖刷正向沖刷柱子30分鐘以上。如沖刷后仍然出峰欠安，則考慮第二種狀況。關(guān)于第二種狀況,擰開(kāi)柱頭，查看柱填料是不是硬結(jié)或陷落。去掉硬結(jié)有些(污染的填料