豬繁殖與呼吸綜合征流行情況及其疫苗的研究與應(yīng)用

豬繁殖與呼吸綜合征（PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome，PRRS），俗稱藍(lán)耳病。是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種高度接觸性傳染病。自2006年我國(guó)出現(xiàn)高致病性PRRS后，該病的防控要求愈加嚴(yán)格，因此該文對(duì)近些年我國(guó)豬繁殖與呼吸綜合征的流行趨勢(shì)及其疫苗的研發(fā)與免疫情況進(jìn)行了綜述。

01我國(guó)PRRSV流行優(yōu)勢(shì)毒株的演變豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）最早于1887年在美國(guó)發(fā)現(xiàn)，后來(lái)傳播到歐洲和亞洲。1991年荷蘭學(xué)者首先分離出了豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV），PRRSV為有囊膜的單股正鏈RNA病毒，目前有兩種血清型，為歐洲型（PRRSV1）和美洲型（PRRSV2）。歐洲型代表性毒株為L(zhǎng)V株，美洲型代表性毒株為VR2332株。我國(guó)在1995年首次報(bào)道本病，1998年仇華吉等[1]首次在母豬出現(xiàn)流產(chǎn)的胎兒中分離出PRRSV并命名為CH-1a。2006年5月至2007年底，我國(guó)很多省份和地區(qū)暴發(fā)了高致病性PRRSV，經(jīng)科學(xué)家們的研究發(fā)現(xiàn)，該類PRRSV在Nsp2基因中出現(xiàn)了30個(gè)氨基酸的不連續(xù)缺失。代表毒株為JXA1，HuN4、TJ等毒株，該病毒毒性強(qiáng)，傳播速度塊，很快成為我國(guó)主要流行的PRRS病毒毒株。2008年美國(guó)研究人員首次分離出一種新的毒株為NADC30，這個(gè)病毒的毒株在Nsp2基因上有131氨基酸不連續(xù)的缺失，但是我國(guó)并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)NADC30毒株的流行。2013年，周峰等[2]在我國(guó)首先發(fā)現(xiàn)了一種Nsp2基因存在不連續(xù)的393個(gè)核苷酸缺失的類NADC30PRRSV。2016年以來(lái)，類NADC30PRRSV正逐步成為我國(guó)現(xiàn)階段流行的優(yōu)勢(shì)毒株。可以看出，自我國(guó)首次報(bào)道本病以來(lái)，在我國(guó)部分地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征一直存在和發(fā)生。我國(guó)臨床檢出以美洲株及其變異株為主。PRRSV優(yōu)勢(shì)毒株的流行趨勢(shì)由經(jīng)典毒株向基因缺失變異株演變，高致病毒株為部分地區(qū)的優(yōu)勢(shì)毒株。

02PRRS流行特點(diǎn)與趨勢(shì)近幾年，PRRS仍舊是我國(guó)豬場(chǎng)威脅較大的疾病。2016—2020年，全國(guó)各地區(qū)都不同程度地開(kāi)展了豬繁殖與呼吸綜合征的流行病學(xué)調(diào)查與研究。該病的流行情況在各個(gè)地區(qū)也有所不同。祝閏琦等[3]在安徽地區(qū)采集疑似感染PRRSV豬的血清、唾液、精液等416份樣品檢測(cè)，其中陽(yáng)性樣品的比率為53.6%。其中，美洲型經(jīng)典毒株占19.7%，高致病性PRRSV占44.8%，類NADC30PRRSV占13.0%，表明安徽地區(qū)的流行調(diào)查中的優(yōu)勢(shì)毒株為高致病性PRRSV；通過(guò)對(duì)廣西地區(qū)疑似感染臟器1547份進(jìn)行檢測(cè)，PRRSV陽(yáng)性率為29.9%，檢測(cè)出1株與類NADC30株同源性較高，檢出1株與GM2株同源性較高，其余均與高致病性PRRSV同源性較高，表明江西地區(qū)以流行高致病PRRSV為主，同時(shí)出現(xiàn)了類NADC30株和GM2株新毒株的流行[4]；石青青等[5]在天津地區(qū)利用RT-PCR方法檢測(cè)疑似感染PRRSV樣品，檢出陽(yáng)性率為40.47%，并且呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)。類NADC30的檢出陽(yáng)性率為28.74%，占整個(gè)陽(yáng)性樣品的71.01%，可見(jiàn)天津地區(qū)類NADC30毒株已經(jīng)成為PRRS的主要流行毒株。山東地區(qū)檢測(cè)493份疑似PRRSV樣品，檢出陽(yáng)性率為22.5%，通過(guò)對(duì)34份毒株的ORF5基因核苷酸及GP5精氨酸序列分析比較，表明類NADC30PRRSV可能已成為山東地區(qū)優(yōu)勢(shì)野毒毒株[6]；趙小月等[7]采集了河南地區(qū)部分豬場(chǎng)的414份臟器樣品進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)，檢出PRRSV陽(yáng)性率為25.48%，經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的鑒定，陽(yáng)性樣品中檢出70.48%為類NADC30毒株，可見(jiàn)河南地區(qū)類NADC30毒株為流行優(yōu)勢(shì)毒株。賈云飛等[8]在山西地區(qū)的散養(yǎng)戶中采集了19份疑似病料進(jìn)行檢測(cè)，陽(yáng)性率為21.2%，進(jìn)一步鑒定1份為類NADC30毒株，其他均為經(jīng)典毒株。通過(guò)對(duì)我國(guó)西南4?。ㄋ拇ā⒅貞c、貴州和云南）采集292份疑似PRRS感染的病料樣本進(jìn)行檢測(cè)，檢出PRRSV的陽(yáng)性率為44.18%，經(jīng)測(cè)序分析，類NADC30病毒株陽(yáng)性檢出率為70.3%、高致病性病毒株（高致病性PRRSV）陽(yáng)性檢出率為12.5%?？梢?jiàn)，我國(guó)西南地區(qū)類NADC30毒株感染率高，已成為西南地區(qū)流行的優(yōu)勢(shì)毒株[9]。從以上研究可以看出，在我國(guó)部分地區(qū)高致病性毒株檢出率高，為優(yōu)勢(shì)流行毒株，少數(shù)地區(qū)類NADC30毒株檢出率較高。由毒株的流行特點(diǎn)和不斷演變可以看到，我國(guó)豬繁殖與呼吸綜合征的免疫與防控面臨著巨大的挑戰(zhàn)。

03PRRSV疫苗免疫研究及應(yīng)用我國(guó)自發(fā)現(xiàn)豬繁殖與呼吸綜合征以來(lái)，疫苗的研發(fā)和應(yīng)用也隨著流行特點(diǎn)和毒株的變化不斷地深入，從21世紀(jì)初開(kāi)始，疫苗研發(fā)對(duì)疾病的防控起到了非常重要的作用，控制了本病的發(fā)生和流行。隨著分子生物學(xué)的高速發(fā)展，基因工程疫苗成了現(xiàn)如今研發(fā)的熱點(diǎn)。2000年郭寶清[10]采用國(guó)內(nèi)分離的CH-1a株作為疫苗用毒株，進(jìn)行轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)制備了豬繁殖與呼吸綜合征病毒甲醛滅活疫苗。2005年CH-1a株疫苗是我國(guó)國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的第一支商品化豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，此疫苗首次免疫后豬體產(chǎn)生抗體時(shí)間短，5d即可檢測(cè)到特異性抗體，免疫后28d抗體滴度可達(dá)到高峰且保護(hù)持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，免疫效果較好；2007年蔡雪輝等[11]利用PRRSVCH-1a株進(jìn)行連續(xù)傳代細(xì)胞培養(yǎng)，將毒株致弱，研發(fā)了豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗CH-1R株，胡守萍等[12]通過(guò)對(duì)比試驗(yàn)得出，CH-1R株弱毒疫苗對(duì)高致病性變異株的免疫效果好于變異性毒株滅活疫苗。因此，目前該疫苗常應(yīng)用于肉用豬群豬繁殖與呼吸綜合征的免疫預(yù)防，保護(hù)率相對(duì)較高的疫苗，免疫效果較好。以上是我國(guó)研發(fā)人員利用經(jīng)典毒株研發(fā)的滅活疫苗和弱毒疫苗情況，自從2006年我國(guó)發(fā)生高致病性豬繁殖與呼吸綜合征以來(lái)，這些疫苗對(duì)豬場(chǎng)防控本病起到了很好的免疫預(yù)防作用。2008年以來(lái)，由于高致病性毒株的廣泛流行，高致病性毒株的活疫苗成為研發(fā)的熱點(diǎn)。田克恭[13]研發(fā)了高致病毒株JXA1-R株活疫苗，通過(guò)臨床的應(yīng)用，本疫苗免疫一次后抗體有效期可長(zhǎng)達(dá)4個(gè)月，且無(wú)臨床不良反應(yīng)。2009年，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)和瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司共同研發(fā)了R98株豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗，R98株是從北美引進(jìn)的PRRSV抗體陽(yáng)性的臨床健康仔豬血清中分離到的，屬于自然致弱美洲株。本毒株毒力穩(wěn)定，對(duì)普通型豬繁殖與呼吸綜合征臨床保護(hù)率高，種豬群免疫應(yīng)用較為廣泛。田志軍研制了HuN4-F112株商品化弱毒疫苗，此疫苗株是將高致病性PRRSV毒株HuN4在傳代細(xì)胞上進(jìn)行連續(xù)性傳代致弱而制成。張洪亮等[15]將HuN4-F112株商品化弱毒疫苗對(duì)類NADC30PRRSV的免疫保護(hù)效果進(jìn)行了試驗(yàn)研究，結(jié)果表明HuN4-F112株弱毒疫苗對(duì)類NADC30PRRSVSD53-1603株可以提供較好的臨床保護(hù)。因此，雖然目前沒(méi)有針對(duì)類NADC30PRRSV的商品化疫苗，該研究為評(píng)價(jià)我國(guó)現(xiàn)有疫苗是否對(duì)類NADC30PRRSV具有保護(hù)效果提供了參考依據(jù)。高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒TJM-F92疫苗株（高致病性PRRSVTJM-F92）是一株自然基因雙缺失疫苗，本毒株經(jīng)過(guò)測(cè)序后發(fā)現(xiàn)在Nsp2基因存在不連續(xù)30個(gè)氨基酸（aa）缺失，同時(shí)還存在一段連續(xù)缺失120個(gè)aa的弱毒疫苗株。經(jīng)研究，TJM-F92疫苗株對(duì)豬瘟免疫應(yīng)答不會(huì)產(chǎn)生干擾，并在多地區(qū)的養(yǎng)殖生產(chǎn)實(shí)踐中得到證實(shí)。在2016年，高致病性豬繁殖與呼吸綜合征疫苗聯(lián)合豬瘟二聯(lián)活疫苗商品化生產(chǎn)（TJM-F92株+C株），實(shí)現(xiàn)了PRRSV和豬瘟聯(lián)合預(yù)防[16]。2015年，GDr180株是廣東永順研發(fā)的商品化高致病性毒株弱毒疫苗。GDr180株是通過(guò)在傳代細(xì)胞上連續(xù)傳180代后致弱，篩選出的一株免疫原性高，安全性高的良好疫苗株。接種后可使豬只獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫保護(hù)，抗體在體內(nèi)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，保護(hù)力強(qiáng)。臨床應(yīng)用上與豬瘟疫苗同時(shí)免疫，不影響豬瘟疫苗免疫效果。武漢中博生物在2018年9月研發(fā)出我國(guó)首個(gè)豬繁殖與呼吸綜合征基因工程疫苗PC株[17]，此疫苗為嵌合病毒活疫苗，將豬繁殖與呼吸綜合征病毒（SP株）和高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒（GD株）利用反向遺傳操作技術(shù)嵌合而成。利用PC株進(jìn)行免疫可同時(shí)預(yù)防經(jīng)典藍(lán)耳病和高致病性藍(lán)耳病，具有免疫豬不排毒、無(wú)毒力返強(qiáng)、安全性高等基因工程疫苗所具有的優(yōu)勢(shì)，有利于豬場(chǎng)進(jìn)行豬繁殖與呼吸綜合征的凈化。

04小結(jié)我國(guó)豬場(chǎng)自出現(xiàn)豬繁殖與呼吸綜合征的流行以來(lái)，病毒流行的優(yōu)勢(shì)毒株不斷發(fā)生演變和變異，從經(jīng)典株變化為高致病性毒株和基因缺失毒株。為了更好地防控豬繁殖與呼吸綜合征，我國(guó)科學(xué)家一直在不斷地進(jìn)行著疫苗的研發(fā)與應(yīng)用研究。通過(guò)該文的詳述可以看出，由于高致病性豬繁殖與呼吸綜合征的出現(xiàn)，近些年很多研究人員一直致力于高致病性毒株弱毒疫苗的研發(fā)，防控高致病性豬繁殖與呼吸綜合征方面取得