《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》全套教學(xué)課件

醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)Laboratory

Animal

Science第1章緒論第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的基本概念及研究范疇第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)發(fā)展概況第三節(jié) 國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理與法規(guī)第四節(jié)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生命科學(xué)研究領(lǐng)域作用及地位第五節(jié) 動(dòng)物福利、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理學(xué)和“3R”原則3/10/202223/10/20223一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物

二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)及其研究范疇第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的基本概念及研究范疇3/10/20224根據(jù)為人類所利用動(dòng)物的分類√

食品動(dòng)物（Food

Animals) 肉乳禽魚√役用動(dòng)物（Labor

Animals)騎耕馱拉√經(jīng)濟(jì)動(dòng)物（Economic

Animals)裘毛皮、藥材√寵物（Pets)觀賞、陪伴√

護(hù)衛(wèi)動(dòng)物 緝毒、偵探、撲抓敵人√醫(yī)用動(dòng)物（Medical

Animals)生物制品原料、異種器官移植供體√實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（Laboratory

Animals)3/10/202253/10/20226什么是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物？實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物（Experimental

Animals），廣義上來說，所有用于科學(xué)研究、檢測鑒定和教學(xué)示范的動(dòng)物，包括野生動(dòng)物、家畜家禽、寵物等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（Laboratory

Animals）特指的是人工培

育，遺傳背景明確或來源清楚，對其攜帶的微生物

和寄生蟲實(shí)行控制，用于生命科學(xué)研究、教學(xué)、藥

品與生物制品生產(chǎn)和檢定以及其它科學(xué)研究的動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物具有以下幾個(gè)特點(diǎn)¤遺傳限定人工培育遺傳背景明確來源清楚¤攜帶的微生物和寄生蟲得到控制對動(dòng)物自身的控制對環(huán)境的控制對飼料、水的控制近交系封閉群突變系雜交群無菌動(dòng)物和悉生動(dòng)物（GF

&

GN)無特定病原體動(dòng)物（SPF）清潔動(dòng)物（CL）3/10/20227¤適宜環(huán)境和均衡營普養(yǎng)通動(dòng)保物證（證CV其）健康生長繁育需要提供最適宜的生活環(huán)境和均衡營養(yǎng)¤應(yīng)用于科學(xué)研究為什么我們一般不用野生動(dòng)物和家畜家禽做實(shí)驗(yàn)？3/10/20228什么是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)？※實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)(laboratory

animal

science，LAS)是以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為研究對象，專門研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)繁殖及育種、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)化、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量監(jiān)測、野生動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化及其開發(fā)應(yīng)用以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)的學(xué)科?！鶎?shí)驗(yàn)動(dòng)物的研究范疇包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)兩大部分。3/10/20229綜合性學(xué)科：綜合了動(dòng)物學(xué)、畜牧獸醫(yī)學(xué)、組織學(xué)、胚胎學(xué)、生理學(xué)、病理學(xué)、遺傳學(xué)、營養(yǎng)學(xué)、悉生生物學(xué)、環(huán)境工

程學(xué)、微生物及寄生蟲學(xué)等多個(gè)學(xué)科的

相關(guān)知識(shí)，積累了本學(xué)科的研究成果，

形成了完整、獨(dú)立的理論體系?；A(chǔ)性學(xué)科：是生命科學(xué)研究的基礎(chǔ)。生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)的發(fā)展都離不開實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)知識(shí)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的分支學(xué)科實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳育種學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物醫(yī)學(xué)比較醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)管理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理學(xué)中醫(yī)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)3/10/2022103/10/202211※比較醫(yī)學(xué)（Comparative

medicine）比較醫(yī)學(xué)是對不同種動(dòng)物（包括人）的基本生命現(xiàn)象，以及健康和疾病狀態(tài)進(jìn)行類比研究的科學(xué)。通過對比較醫(yī)學(xué)的研究，達(dá)到探索生命科學(xué)的奧秘，控制動(dòng)物和人類的疾病、延長人類壽命的目的。分支學(xué)科有比較解剖學(xué)、比較生理學(xué)、比較病理學(xué)、比較免疫學(xué)、比較基因組學(xué)等等。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的核心內(nèi)容之一是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)化，它包括實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的3/10/202212遺傳學(xué)控制標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)控制標(biāo)準(zhǔn)設(shè)施環(huán)境控制標(biāo)準(zhǔn)飼料營養(yǎng)控制標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化的意義在于用符合標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，在標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)、實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件下，所做的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)無論在時(shí)間的先后上，還是在世界的不同實(shí)驗(yàn)室里，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該具有可重復(fù)性和可對比性。3/10/202213一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)源于古代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的發(fā)展二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)科的形成和發(fā)展第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)發(fā)展概況沒有對活的動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)與觀察，人們就無法認(rèn)識(shí)有機(jī)界的各種現(xiàn)象。這是無可爭辯的……------巴甫洛夫3/10/2022143/10/202215*

比較解剖學(xué)古希臘希波克拉底(Hippocrates，公元前460-377)和亞里斯多德（Aristotle，公元前384-公元前322年）解剖了大量動(dòng)物，觀察并記錄不同動(dòng)物臟器的異同,建立了動(dòng)物分類系統(tǒng)。埃拉西斯特拉塔（Erasistratus，公元前

304-公元前258年）解剖豬，確定了肺和氣管的功能。古代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的重大發(fā)現(xiàn)（1）古代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的重大發(fā)現(xiàn)（2）*

血液循環(huán)的發(fā)現(xiàn)William.Harvey（1628）放棄了一般科學(xué)家只研究人一個(gè)種和研究死人的方法，而采取比較解剖和活體解剖不同動(dòng)物的方法，了解心臟跳動(dòng)的實(shí)際情況。通過對魚、螃蟹、青蛙、蛇的解剖觀察證實(shí)了心臟和循環(huán)系統(tǒng)的功能，宣稱：我的發(fā)現(xiàn)來源于對活的或死的動(dòng)物的解剖、觀察和實(shí)踐。他提出了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是研究生理學(xué)的必要工具。3/10/2022163/10/202217病原微生物和疾病之間的關(guān)系德國醫(yī)生科赫（RobertKoch，1878年）從患炭疽病的牛上分離出病原菌，并提出確定病原體的科赫三原則。從具有相同癥狀的患病動(dòng)物身上可分離出同一種病原體；病原體可在體外獲得純培養(yǎng)，并能傳代；病原體接種到易感動(dòng)物身上可復(fù)制出相同的疾病。古代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的重大發(fā)現(xiàn)（3）3/10/202218發(fā)現(xiàn)年代研究者所用動(dòng)物腫瘤的病毒病因1910Peyton

Rous雞胰島素1921Banting

&

Best犬休克的治療1927Blalock

&

Phemister犬抗細(xì)菌藥物（Prontosil）1935G.Domagk小鼠心肺旁路機(jī)1953John

Gibbon貓脊髓灰質(zhì)炎疫苗1954Jonas

Salk恒河猴腦退行性病變的病毒病因?qū)W1965Gajdusek

&

Gibbs黑猩猩心臟移植1967Christian

Barnard犬近代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的重要貢獻(xiàn)3/10/202219據(jù)美國哈佛醫(yī)學(xué)院1996年統(tǒng)計(jì)，之前50年內(nèi)人類與健康研究中51項(xiàng)重大突破性成果中22項(xiàng)是通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究獲得。1901年至1997年通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)取得的31項(xiàng)重大成果中有18項(xiàng)獲得諾貝爾獎(jiǎng)。1901年-2008年期間，有67.5%諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)研究成果是用實(shí)

驗(yàn)動(dòng)物或其它動(dòng)物獲得的，涉及動(dòng)物25種119次。Nature、Science國際著名雜志中，用使用動(dòng)物模型研究成果發(fā)表的生物醫(yī)學(xué)論文占其總數(shù)的

35%-46%。由此可見，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在推動(dòng)生物醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展和進(jìn)步中起著重要的作用。3/10/202220為什么會(huì)形成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)隨著生命科學(xué)的發(fā)展，科學(xué)家們認(rèn)識(shí)到靠家畜、家禽、寵物、野生動(dòng)物等是不能滿足研究的進(jìn)一步發(fā)展，迫切要求能夠有專門用于科學(xué)研究的體型小、生長周期短、繁殖力強(qiáng)的人工飼養(yǎng)動(dòng)物，在數(shù)量上和質(zhì)量上滿足科學(xué)研究的需要。其次，進(jìn)入二十世紀(jì)特別是二十世紀(jì)下半葉以來，對生命科學(xué)的研究已從大體的觀察、比較、定性分析逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)榫?xì)的定量分析，從個(gè)體、器官、細(xì)胞水平逐漸深入到分子水平，并需要在個(gè)體整體水平上考察生物分子的表達(dá)以及藥物的作用情況，對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有了更高的質(zhì)量要求。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)無論在廣度還是在深度上都需要有很大的發(fā)展。在這種情況下，對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的數(shù)量和內(nèi)在質(zhì)量提出了更高的要求，逐漸分化出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的產(chǎn)業(yè)和專門研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)學(xué)科。1944年，美國科學(xué)院在紐約召開會(huì)議，首次把實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化提上議事日程，標(biāo)志著實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)作為一門學(xué)科形成的起點(diǎn)。1956年，聯(lián)合國教科文組織發(fā)起成立了“國際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)理事會(huì)（International

council

forLaboratory

Animal

Science,ICLAS）”，并與

世界衛(wèi)生組織（WHO）、國際科學(xué)聯(lián)盟理事會(huì)（ICSU）、國際醫(yī)學(xué)科學(xué)組織理事會(huì)（CIOMS）、世界獸醫(yī)學(xué)會(huì)（WVA）建立官方關(guān)系，標(biāo)志著實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的真正形成。3/10/202221實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的形成和發(fā)展實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)理論體系的形成對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)理論具有重大影響的事件和里程碑實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物和環(huán)境控制理論：1885年無菌豚鼠的培育成功推動(dòng)了無菌動(dòng)物和悉生生物學(xué)的發(fā)展，也提出了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的環(huán)境控制理論。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳控制理論：1909年DBA近交系小鼠的培育成功開創(chuàng)了近交育種的研究，推動(dòng)了腫瘤學(xué)和免疫學(xué)的發(fā)展。疾病動(dòng)物模型的應(yīng)用：1914年致癌模型的誘發(fā)成功證實(shí)了化學(xué)物質(zhì)可以致癌的理論。遺傳工程動(dòng)物技術(shù)的創(chuàng)立：80年代基因工程的發(fā)展為生物醫(yī)學(xué)研究提供了各種個(gè)性化的遺傳工程動(dòng)物，豐富了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的內(nèi)容。3/10/202222一、遺傳工程動(dòng)物的研究與開發(fā)這些品系資源的建立為不同的醫(yī)學(xué)研究、生命科學(xué)探索和藥學(xué)研究提供有力的支持，已經(jīng)成為解析基因功能和研究疾病發(fā)病機(jī)理的重要技術(shù)手段和方法。從基因結(jié)構(gòu)到基因功能的闡明，從單基因到多基因的作用的研究都離不開在動(dòng)物完整個(gè)體上進(jìn)行研究。因此，遺傳工程小鼠在今后相當(dāng)長的時(shí)期內(nèi)還將成為研究開發(fā)的熱點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的發(fā)展趨勢3/10/202223二、動(dòng)物資源的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究開發(fā)自然界的野生動(dòng)物和其他動(dòng)物資源，發(fā)現(xiàn)其特有的生物學(xué)特性，并進(jìn)一步使其實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化，這是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)學(xué)科發(fā)展的方向之一。哺乳類動(dòng)物：鼠兔、東方田鼠、黑線倉鼠水生魚類：劍尾魚、青鳉3/10鼠/202兔2東方田鼠黑線倉鼠劍尾魚青鳉24三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)新技術(shù)、新方法的應(yīng)用隨著生物技術(shù)的發(fā)展，一些新技術(shù)逐漸應(yīng)用到動(dòng)物實(shí)驗(yàn)上來，如動(dòng)物個(gè)體電子標(biāo)簽技術(shù)無創(chuàng)傷心電、血壓呼吸遙測技術(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用磁共振成像技術(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用熒光成像技術(shù)可以預(yù)計(jì)，隨著科學(xué)的進(jìn)步，新技術(shù)、新方法將會(huì)更多的應(yīng)用到動(dòng)物實(shí)驗(yàn)上來。3/化10/學(xué)20或22

熒光成像技術(shù)動(dòng)物PET/CT動(dòng)物MRI25利用遺傳工程技術(shù)，將

具有表達(dá)活性蛋白的基

因轉(zhuǎn)移到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)，使其在乳汁、血液、尿

液等體液中表達(dá)基因產(chǎn)

物，成為四條腿活的生

物反應(yīng)器。將其中的基

因產(chǎn)物分離純化后，就

可以得到人們期望得到

的生物藥品。在生物反

應(yīng)器研究中，對乳腺生

物反應(yīng)器的開發(fā)應(yīng)用最

多。3/10/202226四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)可以用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)的基因藥物α1-胰蛋白酶抑制因子（AAT）人抗凝血酶Ⅲ人組織型血纖維蛋白溶酶原激活因子（tPA）人乳鐵蛋白（hLF）五、動(dòng)物福利和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的替代方法研究出于對生命的尊重和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理上的考慮，如何減少科學(xué)研究中動(dòng)物的使用數(shù)量，尋找動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的替代方法，優(yōu)化動(dòng)物實(shí)驗(yàn)程序以及注重動(dòng)物福利已經(jīng)成為生命科學(xué)研究者共同思考的問題和發(fā)展的方向。有的已經(jīng)應(yīng)用到實(shí)踐中去了，但更多的還是停留在“原則”層次上，在理論和實(shí)踐上存在較大的差距。3/10/202227第三節(jié) 國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理與法規(guī)國際組織：國際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)委員會(huì)（ICLAS）美國國際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理評估及認(rèn)證協(xié)會(huì)（AAALAC）發(fā)達(dá)國家：美國：通過國家立法、以官方和民間雙重渠道管理。日本：以民間方式成立學(xué)會(huì)、協(xié)會(huì)及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中央研究所英國：加拿大：3/10/2022283/10/202229國外關(guān)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用的法規(guī)ICLAS:Guideline

for

the

regulation

of

animal

experiment(1974).USA:Dept.

agriculture

(1966/1970/1976)

:

Animal

Welfare

Act.NIH(1978/1985):

Guide

forthe

care

and

use

of

laboratory

animals.UK:Protection

of

animals

act

(1911).Canada:Canadian

Regulation(1971):

The

animals

forresearch

ActAustralia:Australian

Agriculture

Council(1985):

Code

of

practice

for

the

careand

use

of

experimental

animals.Germen:Germen

law

for

protection

of

animals

(1972).Denmark:Denmark

Parliament

(1977):

Law

on

animal

experimentation

No.2203/10/202230我國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的發(fā)展※1949年解放前，我國僅有少量研究單位飼養(yǎng)和使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。解放后，隨著科學(xué)事業(yè)的發(fā)展，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作也開始起步，各高等院校、研究所、藥廠、藥品檢定所和衛(wèi)生防疫站等相繼建立了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)繁殖室?！穗A段有以下特點(diǎn)：大多數(shù)單位以自繁自用為主飼養(yǎng)條件簡陋實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無標(biāo)準(zhǔn)、無質(zhì)量檢測控制手段飼養(yǎng)人員文化素質(zhì)低無專門的管理機(jī)構(gòu)3/10/202231二十世紀(jì)七十年代中期，改革開放給科學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)發(fā)展帶來了生機(jī)。

1981年，根據(jù)全國人大和政協(xié)的提案，國務(wù)院責(zé)成原國家科委就實(shí)驗(yàn)動(dòng)物問題進(jìn)行調(diào)研。

1982年，WHO和原國家科委在上海第一醫(yī)學(xué)院組織實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)培訓(xùn)班，標(biāo)志著國際上先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)理念傳入我國。

1982年和1985年原國家科委先后召開了全國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技工作會(huì)議，研究制定我國的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技發(fā)展戰(zhàn)略。

1983年、1988年、1992年和1999年衛(wèi)生部四次召開醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作會(huì)議，布置醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作。我國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的發(fā)展我國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的管理模式實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)單位實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用單位申請生產(chǎn)許可證申請使用許可生產(chǎn)許可證使用許可證質(zhì)量保證書科

技

部制定法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等各省市動(dòng)管會(huì)質(zhì)量監(jiān)督監(jiān)測站3/10/2022323/10/202233我國與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有關(guān)的法規(guī)國家法規(guī)國家科委：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例（1988.11.14）全國人大：中華人民共和國動(dòng)物防疫法

（1997.7.3）國家科委、國家技術(shù)監(jiān)督局：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量管理辦法（1997.12.11）科學(xué)技術(shù)部：國家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種子中心管理辦法（1998.5.12）科學(xué)技術(shù)部：國家嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種子中心引種、供種實(shí)施細(xì)則

（1998.9.30）科學(xué)技術(shù)部、衛(wèi)生部、教育部、農(nóng)業(yè)部、國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫局、國家中醫(yī)藥管理局、中國人民解放軍總后勤部衛(wèi)生部：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法（試行）

（2001.12.5）農(nóng)業(yè)部：動(dòng)物防疫條件審核管理辦法

（2002.5.24）地方法規(guī)我國的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳控制質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲學(xué)等級(jí)及監(jiān)測實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料通用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大鼠、小鼠、地鼠、地鼠、兔、猴、犬配合飼料（系列標(biāo)準(zhǔn)共6項(xiàng)）強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)（共12項(xiàng)）推薦性標(biāo)準(zhǔn)（共81項(xiàng)）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)檢測方法（系列標(biāo)準(zhǔn)共55項(xiàng)）SPF雞微生物學(xué)檢測方法（系列標(biāo)準(zhǔn)共10項(xiàng)）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲學(xué)檢測方法（系列標(biāo)準(zhǔn)共10項(xiàng)）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物近交系小鼠、大鼠生化標(biāo)記檢測方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物近交系小鼠、大鼠皮膚移植法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料常規(guī)營養(yǎng)成分的測定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料氨基酸的測定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料維生素的測定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物配合飼料礦物質(zhì)和微量元素的測定3/10/2022343/10/202235實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種質(zhì)資源共享平臺(tái)國家嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種子中心（北京）及上海分中心國家遺傳工程小鼠資源庫（南京）國家實(shí)驗(yàn)用小型豬種質(zhì)資源基地國家實(shí)驗(yàn)用兔種質(zhì)資源基地國家實(shí)驗(yàn)用獼猴種源基地國家SPF禽類種質(zhì)資源基地試驗(yàn)用比格犬種源基地3/10/202236實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息資源平臺(tái)¤中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息網(wǎng)¤北京實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息網(wǎng)

¤上海市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源信息網(wǎng)www.la-¤江蘇科技條件網(wǎng)

¤福建實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息網(wǎng)¤河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息網(wǎng)¤山東實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息網(wǎng)

¤四川實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在線

3/10/202237實(shí)驗(yàn)動(dòng)物人才培養(yǎng)體系課程教育《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》已成為高等醫(yī)學(xué)院校研究生和本科生公共課程。學(xué)歷教育高職大專實(shí)驗(yàn)動(dòng)物專業(yè)本科實(shí)驗(yàn)動(dòng)物專業(yè)碩士研究生3/10/202238實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從業(yè)人員上崗培訓(xùn)¤培訓(xùn)依據(jù)：根據(jù)國家科委1988年頒布的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》。¤培訓(xùn)對象：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、供應(yīng)、經(jīng)營和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的科技人員、專業(yè)管理人員、技術(shù)工人?！枧嘤?xùn)形式：單位內(nèi)部崗前培訓(xùn)上崗證培訓(xùn)3/10/202239學(xué)會(huì)中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)會(huì)（1987年）各省市有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一級(jí)或二級(jí)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)刊物《中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)》（1993年）《中國比較醫(yī)學(xué)雜志》（1991年）《上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)》（1981年）《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理》（1983年）專業(yè)學(xué)會(huì)和學(xué)術(shù)雜志3/10/202240第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在生命科學(xué)研究領(lǐng)域中的作用及地位生命科學(xué)研究所必需的四個(gè)基本條件：

AEIRAnimal

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Equipment 儀器設(shè)備Information 信息Reagent 試劑3/10/202241實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用領(lǐng)域（1）※在生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用探索生命的奧秘，從而揭示生命的本質(zhì)?！卺t(yī)學(xué)上的應(yīng)用疾病機(jī)理及診療方法(包括藥物、物理治療與手術(shù)等)研究,特別是烈性傳染病、放射病研究和致癌、致突變試驗(yàn)，新醫(yī)療器械的應(yīng)用等，都不能直接在人身上進(jìn)行，而必須先在動(dòng)物身上反復(fù)試驗(yàn)，然后才能在保證安全的情況下推及至人?！谥扑幮袠I(yè)的應(yīng)用進(jìn)行藥理、藥效學(xué)和新藥的安全性評價(jià)研究，保證新藥的安全有效。3/10/202242實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用領(lǐng)域（2）※在化學(xué)工業(yè)上的應(yīng)用化妝品、農(nóng)藥、化工產(chǎn)品在生產(chǎn)前必須進(jìn)行安全性評價(jià)。※輕工業(yè)及食品工業(yè)上的應(yīng)用保健品、飲料在生產(chǎn)前必須進(jìn)行安全性評價(jià)?！镏破返纳a(chǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物既是某些生物制品的原料，又是某些生物制品檢定的工具。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)用領(lǐng)域（3）※畜牧業(yè)和農(nóng)業(yè)科學(xué)上的應(yīng)用動(dòng)物疫苗、免疫血清的制備和鑒定、胚胎學(xué)研究、農(nóng)藥殘留的監(jiān)測等?！詈胶蛙娛驴茖W(xué)上的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作為人的替身，在宇航、核武器、化學(xué)、細(xì)菌、激光武器的試驗(yàn)中發(fā)揮作用。※環(huán)保上的應(yīng)用用于檢測水質(zhì)、空氣的污染、汽車尾氣的治病作用。3/10/202243動(dòng)物實(shí)驗(yàn)涉及多學(xué)科的發(fā)展3/10/2022443/10/202245第五節(jié) 動(dòng)物福利、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理學(xué)和“3R”原則什么是動(dòng)物福利？動(dòng)物福利是指動(dòng)物在整個(gè)生命過程中應(yīng)得到人類的保護(hù)，其基本原則是要善待動(dòng)物，保證動(dòng)物的健康和快樂?！膛_(tái)灣學(xué)者夏良宙（1990年）把動(dòng)物福利概括成兩句話：善待活著的動(dòng)物，減少動(dòng)物死亡的痛苦。應(yīng)該再加一句：死后應(yīng)得到妥善處理。在國際上被普遍認(rèn)可的動(dòng)物福利內(nèi)容應(yīng)提供給動(dòng)物滿足生長發(fā)育和繁衍后代的營養(yǎng)食物和清潔的飲水，使其免受饑渴。---吃好喝好應(yīng)提供給動(dòng)物適當(dāng)?shù)臈⒅睾惋曫B(yǎng)場所，使其能休息和睡眠。---休息睡眠好應(yīng)提供預(yù)防動(dòng)物疾病和患病后及時(shí)診療的措施，使其免受疾病和傷害的痛苦。---健康應(yīng)提供給動(dòng)物安靜的飼養(yǎng)環(huán)境，無刺激動(dòng)物發(fā)生應(yīng)激和恐懼的場面和聲音。---無人為干擾應(yīng)提供給動(dòng)物同類一起自由玩耍、表達(dá)天性的空間和自由。---表達(dá)天性3/10/202246實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利具有特殊性，表現(xiàn)在：①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是生命科學(xué)研究的支撐條件和工具，為了獲得高質(zhì)量的研究成果，必須要有高質(zhì)量的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，因而必須充分保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利；②實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作為人類的替難者，一生中不得不承受人為施加的各種痛苦（實(shí)驗(yàn)刺激），并最終在痛苦中終止生命。從人類的“感恩”倫理上，必須高度重視實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利。3/10/2022473/10/202248動(dòng)物保護(hù)主義的興起動(dòng)物保護(hù)主義是隨著人類大規(guī)模利用動(dòng)物來獲取經(jīng)濟(jì)利益或其他目的（其中包括用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行科學(xué)研究）的應(yīng)用而逐漸興起的。在西方，各種社會(huì)人士千方百計(jì)想通過立法、組織社會(huì)團(tuán)體來阻止虐待、濫殺動(dòng)物。3/10/202249動(dòng)物保護(hù)主義對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的正確主張要求善待動(dòng)物：給與動(dòng)物以舒適的居住環(huán)境；給與動(dòng)物以足夠營養(yǎng)的飼料和清潔飲水；給與需要的動(dòng)物以鎮(zhèn)靜劑、麻醉劑；給與動(dòng)物人道處死，實(shí)行安樂死；溫和保定、善良憮慰，減少應(yīng)激反應(yīng)。3/10/202250動(dòng)物保護(hù)主義的過激主張和活動(dòng)在國外，有的國家的動(dòng)物保護(hù)主義組織已發(fā)展成為社會(huì)性、政治性團(tuán)體，類似人權(quán)組織和環(huán)保組織，有上百萬成員，募集到大量資金，直接干預(yù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)工作。上世紀(jì)后期，有些地方已經(jīng)被迫停止用貓狗做實(shí)驗(yàn)；有的地方限制動(dòng)物房建設(shè)；有些設(shè)施被搗毀，甚至有的科學(xué)家因此而被起訴。從動(dòng)物保護(hù)主義到動(dòng)物解放運(yùn)動(dòng)動(dòng)物保護(hù)主義過激的行為：搗毀實(shí)驗(yàn)室、放生動(dòng)物、焚燒實(shí)驗(yàn)資料、威脅科學(xué)家?，F(xiàn)在美國有幾千個(gè)動(dòng)物保護(hù)組織，多個(gè)激進(jìn)的解放動(dòng)物陣線組織，成員有200多萬，最后發(fā)展成為“動(dòng)物解放運(yùn)動(dòng)”。3/10/202251Peter

Singer教授的《動(dòng)物解放》1975年美國普林斯頓大學(xué)哲學(xué)系教授Peter

Singer發(fā)表《動(dòng)物解放》一書，宣稱：18世紀(jì)婦女解放、男女平等，是性別解放。19世紀(jì)林肯領(lǐng)導(dǎo)解放黑奴，是種族解放?，F(xiàn)在是要解放動(dòng)物，是物種解放。3/10/2022523/10/202253動(dòng)物解放運(yùn)動(dòng)主張什么？完全禁止用動(dòng)物進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)提倡素食禁食野味禁用畜產(chǎn)品（皮革、裘皮、羊毛等）禁止籠養(yǎng)雞、工廠化養(yǎng)豬禁止馬戲團(tuán)野蠻訓(xùn)練禁止活體取藥（熊膽汁、麝香等）有沒有可能不用動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)？沒有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生命科學(xué)無法得到發(fā)展新的醫(yī)療器械只好直接在人身上應(yīng)用新藥在人身上觀察藥效和毒性反應(yīng)外科新技術(shù)在病人身上進(jìn)行試驗(yàn)┅┅至今，我們?nèi)匀粵]有任何辦法來完全替代實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。相反地，隨著生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展，應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類和數(shù)量也在逐年增加。3/10/2022543/10/202255科技界提出對策針對動(dòng)物保護(hù)主義，科技界的對策是：堅(jiān)持原則、堅(jiān)持科學(xué)、堅(jiān)持動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。為動(dòng)物福利立法，號(hào)召“善待動(dòng)物”。進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查。提倡動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的“3R”原則。 Replacement 替代 Reduction 減少 Refinement 優(yōu)化生命系統(tǒng)離體培養(yǎng)的細(xì)胞、組織、器官替代動(dòng)物個(gè)體。低等動(dòng)物替代高等動(dòng)物。微生物替代動(dòng)物。利用植物細(xì)胞。非生命系統(tǒng)物理、化學(xué)方法代替動(dòng)物。用in

vitro代替in

vivo。計(jì)算機(jī)模擬實(shí)驗(yàn)可部分替代。3/10/202256動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的“3R原則”1.替代（Replacement）替代是指用其它實(shí)驗(yàn)方法替代用哺乳類動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

綜合利用。例如實(shí)驗(yàn)結(jié)束后不用的動(dòng)物可用作教學(xué)。

合理設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，使少量動(dòng)物可得到更多數(shù)據(jù)。

使用低等動(dòng)物。有的實(shí)驗(yàn)可用無脊椎動(dòng)物代替非人靈長類。使用高質(zhì)量動(dòng)物。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)戒律：只能以質(zhì)量代替數(shù)量，而不能以數(shù)量代替質(zhì)量。3/10/2022572.減少（Reduction）減少是指某一研究必須要使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，而又沒有可靠的替代方法時(shí)，應(yīng)考慮把使用動(dòng)物的數(shù)量減少到實(shí)驗(yàn)研究目的所必需的最少數(shù)量。利用無線遙控裝置利用無損傷裝置

使用麻醉劑，減輕動(dòng)物痛苦

捉拿、保定、運(yùn)輸時(shí)盡量不要驚動(dòng)動(dòng)物，減小應(yīng)激反應(yīng)3/10/2022583.優(yōu)化（Refinement）優(yōu)化是指通過改進(jìn)和完善實(shí)驗(yàn)程序、利用先進(jìn)儀器設(shè)備，減輕或避免給動(dòng)物造成痛苦和不安，提高動(dòng)物福利的同時(shí)，獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。3/10/202259國際上對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理的要求

動(dòng)物居住空間應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)，注意日常飼養(yǎng)管理，不使動(dòng)物陷入饑餓、缺水和患病。

盡可能的采用替代法最少地使用和犧牲動(dòng)物。

在必須使用犬、貓和猴時(shí)，在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行訓(xùn)練，盡可能地減少動(dòng)物的恐懼和不安。

實(shí)驗(yàn)結(jié)束和動(dòng)物不可能恢復(fù)時(shí)，應(yīng)采取安樂死。

要愛護(hù)動(dòng)物和對由于試驗(yàn)死亡的動(dòng)物應(yīng)持有憐憫和感激之情。3/10/202260

從動(dòng)物福利考慮，判斷動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的倫理標(biāo)準(zhǔn)是：

必須權(quán)衡動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所獲得的知識(shí)與動(dòng)物因此而受到的可能傷害。如果該動(dòng)物實(shí)驗(yàn)意義不大就沒有必要進(jìn)行。

必須清楚而明確“沒有任何替代方法可達(dá)到同樣的試驗(yàn)?zāi)康摹边@個(gè)前提。動(dòng)物的痛苦、壓迫和不適必須減到最低。3/10/202261科技部2006年9月13日頒布《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》形成了我國第一部動(dòng)物福利的指導(dǎo)性文件：總則飼養(yǎng)管理中的要求應(yīng)用過程中的要求運(yùn)輸過程中的要求相關(guān)措施附則我們在動(dòng)物福利方面做的工作制定動(dòng)物飼養(yǎng)管理和使用的規(guī)章制度進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理審查進(jìn)行實(shí)驗(yàn)人員的培訓(xùn)通報(bào)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程中的違規(guī)行為加強(qiáng)管理的硬件建設(shè)3/10/202262銘記實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為人類做出的貢獻(xiàn)！3/10/2022633/10/202264復(fù)習(xí)題名詞解釋實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化

AIER

3R 動(dòng)物福利思考題實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)化包括哪些內(nèi)容？它有什么意義？生命科學(xué)研究所必需的四個(gè)基本條件是什么？什么是動(dòng)物福利？動(dòng)物福利包括那幾個(gè)內(nèi)容？針對動(dòng)物保護(hù)主義，科技界的對策是什么？判斷動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理的標(biāo)準(zhǔn)有哪些？什么是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的“3R原則”？第2章

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳學(xué)控制第一節(jié)概述第二節(jié)近交系動(dòng)物第三節(jié)封閉群動(dòng)物第四節(jié)雜交群動(dòng)物第五節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳學(xué)質(zhì)量監(jiān)測第一節(jié)

概述一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在動(dòng)物分類學(xué)上的位置在分類學(xué)上，根據(jù)動(dòng)物的解剖、外形、生理生化等相似程度，在界的下面再依次分為門、綱、目、科、屬、種六個(gè)基本階元。動(dòng)物界脊椎動(dòng)物門哺乳動(dòng)物以小鼠為例界（Kingdom）門（Phylum）綱（class）綱常用哺乳類實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物分類學(xué)地位目的名稱動(dòng)物名稱貧齒目Edentata犰狳食蟲目Insectivora刺猬、鼩鼱、鼴鼠翼手目Chiroptera蝙蝠靈長目Primates獼猴、狨猴、樹鼩兔形目Lagomorpha兔、鼠兔嚙齒目Rodentia大鼠、小鼠、豚鼠、金黃地鼠、旱獺、黑線倉鼠、棉鼠、長爪沙鼠、鯨目Cetacea須鯨、齒鯨、白鰭豚食肉目Carnivore貓、犬、鼬鰭足目Pinnipedia海豹長鼻目Proboscidea亞洲象奇蹄目Perissodactyla馬、驢、騾、犀牛偶蹄目Artiodactyla牛、羊、鹿、豬二、種、品種與品系的概念¤種（Species）：是生物分類學(xué)上的基本單位，由自然選擇形成。各種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雖然來源于其野生型祖先，但它們已經(jīng)經(jīng)過人工長期選擇、馴化與培育與其祖先有著極為顯著的差異，如實(shí)驗(yàn)小鼠大鼠等在遺傳概貌、生活習(xí)性等方面不同于其野生型。特別是遺傳工程動(dòng)物，可以說在某種程度上是“人造動(dòng)物”。¤品種（stock）：是種以下的非自然分類單位，由人工選擇和定向培育出來的，具有某些生物學(xué)特性，能穩(wěn)定遺傳。¤品系（strain）：是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分類學(xué)上專用名詞，采用一定的交配方式繁殖且祖先明確的動(dòng)物群。三大特征：獨(dú)特的生物學(xué)特性，相似的外貌特性，穩(wěn)定的遺傳特性。三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按遺傳學(xué)控制的分類方法按遺傳學(xué)控制分類，可將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為：近交系封閉群（遠(yuǎn)交系）雜交群不同類別動(dòng)物其交配和保種方式不同。第二節(jié)

近交系動(dòng)物什么是近交？什么是近交系？近交(inbreeding)即近親交配。從一個(gè)動(dòng)物群體中有意識(shí)地選用血緣關(guān)系比較接近的雌雄個(gè)體進(jìn)行交配。近親交配有三種形式：兄妹交配、母子交配和父女交配，最常用的形式是全同胞兄妹交配。近交系(inbredstrain）是指采用連續(xù)全同胞兄妹交配（brother-Sisterinbreeding）20代以上而培育成的動(dòng)物。近交系動(dòng)物因其基因型高度純合，等位基因趨于完全一致，近交系數(shù)可達(dá)98.6%，血緣系數(shù)達(dá)99.6%，個(gè)體間差異極小，因而用于實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，對各種刺激反應(yīng)均一，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確。近交系數(shù)：是指在近親交配情況下各代減少異質(zhì)基因/增加純合基因的百分?jǐn)?shù)。近交系數(shù)的計(jì)算公式：Fn

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（1

–

ΔF）n代數(shù)F代數(shù)F0011.9081.25012.9262.37513.9403.50014.9514.59415.9615.67216.9686.73417.9747.78518.9798.82619.9839.85920.98610.886血緣系數(shù)：一個(gè)群體中個(gè)體之間基因組成的相似程度用數(shù)值來表示。（二）近交系命名由于近交系動(dòng)物品系繁多，命名頗為雜亂。國際上已規(guī)范近交系動(dòng)物的命名，其規(guī)則是根據(jù)動(dòng)物的來源、歷史和培育經(jīng)過，以一系列字母和數(shù)字作為品系代碼（straincode）來表示。以一個(gè)或數(shù)個(gè)大寫英文字母表示，如A、DBA等。大寫英文字母加數(shù)字命名，如C57BL、C3H。用數(shù)字表示，如129、615等。有時(shí)還標(biāo)注近交代數(shù)。通常在品系代碼后加括號(hào)，先寫“F”，后寫代數(shù)；如615(F25)表示615小鼠，近交代數(shù)為第25代。亞系（Substrain)：亞系的概念和形成原因近交系的亞系分化是指一個(gè)近交系內(nèi)各個(gè)分支的動(dòng)物之間，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)或十分可能存在遺傳差異的現(xiàn)象。通常下述三種情況會(huì)發(fā)生亞系分化。

在兄妹交配代數(shù)達(dá)40代以前形成的分支（即分支發(fā)生于F20至F40之間）；

從共同祖先分開20代以上，因突然變異和遺傳漂變導(dǎo)致品系內(nèi)遺傳分化；

經(jīng)遺傳分析已發(fā)現(xiàn)一個(gè)分支與其他分支存在遺傳差異。產(chǎn)生這種差異的原因可能是殘留雜合、突變或遺傳污染（genetic

contamination）（即一個(gè)近交系與非本品系動(dòng)物之間雜交引起遺傳改變）。亞系命名：品系名稱后加斜線、數(shù)字和培育者的縮寫。近交系、亞系綜合命名法實(shí)例：C57BL/6J：C代表Cold

Spring

HarborLaboratory(冷泉港實(shí)驗(yàn)室)，57為第57號(hào)雌鼠，BL即Black(黑色)，6為亞系，J代表Jackson(杰克遜)實(shí)驗(yàn)室。常用近交系縮寫符號(hào)品系全稱縮寫符號(hào)BALB/cCC57BLBC57BL/6B6C57BL/10B10C57BRBRC3HC3CBACBDBA/1D1DBA/2D2AKRAKRⅢR3HRS/JHR幾種特殊類型的近交系1.重組近交系（recombinant

inbredstrain，RI）由兩個(gè)近交系雜交后，再經(jīng)連續(xù)20代以上兄妹交配培育成的近交系，稱為重組近交系。命名：親代近交系X親代近交系如：AKXB-1,2,3……近交系A(chǔ)×近交系BF1代兄妹交配兄妹交配連續(xù)20代以上幾種特殊類型的近交系2.重組同類系（recombinantcongenic

strain，RC）由兩個(gè)近交系雜交后，子代與兩個(gè)親代近交系中的一個(gè)近交系進(jìn)行數(shù)次回交（通?；亟?次），再經(jīng)不對特殊基因選擇的連續(xù)兄妹交配（通常大于14代）而育成的近交系。

命名 兩個(gè)親代近交系的中間加小寫英文字母c。近交系A(chǔ)×近交系BF1代×近交系B子代×近交系B兄妹交配連續(xù)20代以上同源導(dǎo)入近交系（Congenic

inbred

strain）： 是指通過雜交-互交和回交的方式將個(gè)體的一個(gè)基因?qū)氲浇幌抵?，由此形成一個(gè)新的近交系。這個(gè)新的近交系與原來的近交系只是在一個(gè)很小的染色體片段上的基因不同。命名：接受基因的近交系.提供基因的近交系-基因名稱如：B10.129-H-12b幾種特殊類型的近交系A(chǔ)系腫瘤代次

A系（腫瘤易感）

B系（腫瘤抵抗）013414+—

—

+++—

——

—A系（腫瘤抵抗）育同源導(dǎo)入近交系2enic

resistant

line）思考：在飼養(yǎng)繁殖中發(fā)現(xiàn)一只無毛小鼠，已知無毛基因hr/hr是隱性基因，根據(jù)Snell發(fā)明的基因?qū)朐?，如何將此基因?qū)氲紺57BL/6J小鼠體內(nèi)？14代次0C57BL/6J無毛小鼠123-

+++4-+++5同源突變近交系（coisogenic

inbredstrain）指兩個(gè)近交系除了在一個(gè)確定位點(diǎn)等位基因不同外，其它遺傳基因全部相同。命名：發(fā)生突變的近交系-突變基因 如：C57BL/6J-bgBALB/c-nu/nu裸鼠幾種特殊類型的近交系近交系動(dòng)物的培育原始材料的選擇從野生動(dòng)物中選擇從現(xiàn)有的各種近交系、封閉群、雜交群中選擇近交系小鼠的培育示意圖雌雄一對，可以傳代。子代死胎、流產(chǎn)或不育，不能傳代。近交后引起的變化近交可以降低基因的雜合性，增加純合性近交可以使突變的隱性雜合基因暴露

近交可將群體分離為不同基因型的近交品系近交可引起近交衰退近交系保種和生產(chǎn)流程圖B×SB×SB×SB

×

S或隨機(jī)交配隨機(jī)交配核心群增殖群生產(chǎn)群供實(shí)驗(yàn)用近交系動(dòng)物的特點(diǎn)基因的純合性（近交系動(dòng)物的每個(gè)個(gè)體）遺傳組成的同源性（一個(gè)近交系動(dòng)物的所有個(gè)體）遺傳組成的獨(dú)特性（不同近交系比較）遺傳特征的可辨別性（不同近交系比較）遺傳的穩(wěn)定性（所有近交系）表現(xiàn)型的一致性（同一近交系個(gè)體間）背景資料的可查性國際分布的廣泛性對某一實(shí)驗(yàn)刺激的反應(yīng)缺乏普遍性。對環(huán)境適應(yīng)能力差。生長發(fā)育慢，繁殖力差。近交系動(dòng)物的缺點(diǎn)近交系動(dòng)物的應(yīng)用

應(yīng)用最廣泛的是近交系小鼠，其次是近交系大鼠。常用的近交系小鼠有：BALB/c、C57BL/6、DBA/1、DBA/2、C3H等。常用的近交系大鼠有：Wistar、F344等。近交系豚鼠、兔的品系很少。

廣泛應(yīng)用于遺傳學(xué)、免疫學(xué)和腫瘤學(xué)等研究領(lǐng)域。第三節(jié)

封閉群動(dòng)物定義：封閉群（closed

colony）是指以非近親交配方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的一個(gè)種群，在不從外部引入新個(gè)體的條件下，至少連續(xù)繁殖4代以上的動(dòng)物群體。---從群體角度遠(yuǎn)交系(Outbred stock)：同一種群內(nèi)無血緣關(guān)系的個(gè)體之間隨機(jī)交配所產(chǎn)生的后代稱為遠(yuǎn)交系。---從個(gè)體角度由于封閉群動(dòng)物采用隨機(jī)非近親交配的方式，它的遺傳組成比較接近于自然狀態(tài)下的動(dòng)物群體結(jié)構(gòu)。在引種和飼養(yǎng)繁殖時(shí)，應(yīng)注意封閉群的“有效群體大小”。有效群體數(shù)量太小，導(dǎo)致該群體近交系數(shù)上升。國際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)委員會(huì)規(guī)定封閉群動(dòng)物每代近交系數(shù)增加不能超過1%，因此種群至少要達(dá)到

25對(50只)以上。封閉群：小鼠：

KM、ICR、NIH、Laca大鼠：Sprague-Dawley（SD）、Wistar封閉群的繁殖方法封閉群采用循環(huán)交配法。最常用的是三級(jí)循環(huán)交配，即將種群分為A、B、C組，在留取種群繁殖下一代時(shí)，把不同組留取的♂和♀種鼠組合進(jìn)行交配。交配組合圖如下所示：A

B

CC原種群新種群AB♂♀新A♂B♀CBCACAB封閉群的特點(diǎn)及應(yīng)用封閉群動(dòng)物的特點(diǎn)保持群體動(dòng)物基因的雜合性和基因頻率的穩(wěn)定性，因而無近交衰退，易飼養(yǎng)、抗病力強(qiáng)、繁殖率高、產(chǎn)仔多對實(shí)驗(yàn)刺激的反應(yīng)接近自然種屬的反應(yīng)特點(diǎn)封閉群動(dòng)物的應(yīng)用藥物篩選和毒性試驗(yàn)一般實(shí)驗(yàn)研究廣泛用于預(yù)實(shí)驗(yàn)和學(xué)生教學(xué)封閉群：品系內(nèi)大部分等位基因處于雜合狀態(tài)，其群體基因組成占種群基因庫的一部分。近交系：品系內(nèi)幾乎所有等位基因處于純合狀態(tài)，其群體基因組成完全一致，占種群基因庫的一小部分。近交系和封閉群動(dòng)物遺傳組成的比較同一近交系小鼠的不同個(gè)體間的等位基因都是純合的同一封閉群的不同個(gè)體間的等位基因大都處在雜合狀態(tài)，但群體的基因頻率保持相對穩(wěn)定，接近種屬的自然狀態(tài)定義：由兩種不同的近交系雜交所繁殖的第一代雜交動(dòng)物稱為雜交群（Hybrid），又稱為系統(tǒng)雜交動(dòng)物，或“F1”代。雜交群動(dòng)物的雙親來自兩個(gè)不相關(guān)的近交系，它具有以下幾種特征：各個(gè)個(gè)體的基因型相同，是其父母基因型的組合。表型一致，對試驗(yàn)反應(yīng)均一。具有雜交優(yōu)勢，生活力和抗病力比近交系強(qiáng)。具備雙親的生物學(xué)特性。由于基因互作，可產(chǎn)生不同于雙親的新性狀。第四節(jié)

雜交群動(dòng)物國際上常用的雜交群小鼠組合第五節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳學(xué)質(zhì)量監(jiān)測為什么要進(jìn)行遺傳監(jiān)測？

1.基因突變殘留雜合基因的分離人為造成遺傳污染監(jiān)測目的近交系動(dòng)物：保證近交系動(dòng)物遺傳質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)一致，基因的高度純合。淘汰各種原因引起的遺傳變異的個(gè)體。突變系動(dòng)物：防止突變基因在繁殖過程中丟失。封閉群動(dòng)物：防止群體內(nèi)個(gè)體之間發(fā)生近交，保持整個(gè)群體各位點(diǎn)的基因頻率穩(wěn)定在一定的范圍。近交系動(dòng)物遺傳質(zhì)量監(jiān)測常用方法原

理方

法評

價(jià)形態(tài)學(xué)1.下頜骨形態(tài)分析法較復(fù)雜，需要經(jīng)過復(fù)雜計(jì)算，捕殺大量動(dòng)物2.毛色基因測試法簡單，但需長時(shí)間觀察3.染色體帶紋分析法較復(fù)雜，準(zhǔn)確性較差免疫學(xué)1.同系異體植皮法簡單，有權(quán)威性，得到結(jié)果時(shí)間長2.H-2復(fù)合體監(jiān)測法較復(fù)雜，費(fèi)用高，準(zhǔn)確性較高3.混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)較復(fù)雜，費(fèi)用高，需一定設(shè)備生物化學(xué)生化標(biāo)記電泳法經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確性高，普遍采用近交系小鼠生化標(biāo)記示意圖aababa–+Gpi-1（磷酸葡萄糖異構(gòu)酶1）：Chr.7帶型：Gpi-1aGpi-1bBalb/cNC57BL/6Naab

baa–+Es-1（酯酶1）：Chr.8帶型：Es-1a

C57BL/6NEs-1b

CBA/N通過對多個(gè)生化標(biāo)記位點(diǎn)的檢測可區(qū)分不同的小鼠近交系符號(hào)染色體位置位點(diǎn)名稱AAKRC3H/HeC57BL/6CBA/NBalb/cDBA/1DBA/2TA1TA2615Car-23碳酸酐酶-2babaababbaaCe-217過氧化氫酶-2abbabbbbabbEs-18酯酶-1bbbabbbbabbEs-311酯酶-3cccacaccaccEs-1014酯酶-10abbababbbaaGpd-14葡萄糖6磷酸脫氫酶-1bbbabbabbbbGpi-17葡萄糖磷酸異構(gòu)酶-1aabbbaaaabaHbb7血紅蛋白β鏈dsdsddddsdsId-11異檸檬算脫氫酶abaababbaaaMod-19蘋果酸酶-1ababbabbaaaMup-14尿主蛋白-1aaabaaaabbbPgm-15磷酸葡萄糖變位酶aaaababbabbTrf9轉(zhuǎn)鐵蛋白bbbbabbbbbb近交系小鼠的生化標(biāo)記及常用近交系小鼠的生化遺傳概貌近交系動(dòng)物遺傳監(jiān)測結(jié)果的判斷與處理檢測結(jié)果判

斷處

理與標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌完全一致未發(fā)現(xiàn)遺傳變異，遺傳質(zhì)量合格有一個(gè)位點(diǎn)的標(biāo)記基因與標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌不一致可疑增加檢測位點(diǎn)和方法重新檢測，確認(rèn)只有一個(gè)位點(diǎn)改變，可命名為同源突變系兩個(gè)或兩個(gè)以上位點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)遺傳概貌不一致不合格淘汰，重新引種復(fù)習(xí)題名詞解釋：種、品種、品系、近交、近交系、封閉群、同源突變近交系、同源導(dǎo)入近交系、重組近交系思考題：按遺傳學(xué)控制分類，可將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為哪幾類？什么叫品系？試述作為一個(gè)品系所具備的特征。什么叫亞系？試述亞系形成的原因。什么叫系統(tǒng)雜交動(dòng)物？試述其具有的幾種特征。試述近交系動(dòng)物的特點(diǎn)和缺點(diǎn)。在飼養(yǎng)繁殖中發(fā)現(xiàn)一只雄性無毛小鼠，已知無毛基因hr/hr是隱性基因，如何將此基因?qū)氲?/p>

C57BL/6J小鼠體內(nèi)？敘述雜交群動(dòng)物的概念和特征。第三章

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)控制第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)控制的分類第二節(jié)無菌級(jí)動(dòng)物和悉生動(dòng)物第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)質(zhì)量監(jiān)測第一節(jié)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)分類法按對微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)質(zhì)量的控制，可將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四個(gè)級(jí)別：普通級(jí)動(dòng)物(Conventional

animal,

CV)清潔級(jí)動(dòng)物(Clean

animal,

CL)無特定病原體級(jí)動(dòng)物(Specific

pathogenfree

animal,

SPF)無菌級(jí)動(dòng)物(Germfree

animal,

GF)和悉生動(dòng)物(Gnotobiotic

animal,

GN)一、普通級(jí)動(dòng)物（Conventional

animal，簡稱CV動(dòng)物）定義：不帶有國家標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的人獸共患病病原體和動(dòng)物烈性傳染病病原體的動(dòng)物。來源：經(jīng)微生物學(xué)檢查不帶有上述病原體的動(dòng)物。飼養(yǎng)條件：普通開放環(huán)境應(yīng)用：豚鼠、兔、犬、猴等大動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)研究。二、清潔級(jí)動(dòng)物（Cleananimal，簡稱CL動(dòng)物）定義：指除普通級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，不攜帶對動(dòng)物危害大和對科學(xué)研究干擾大的病原體的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。來源：SPF動(dòng)物擴(kuò)群飼養(yǎng)條件：屏障系統(tǒng)大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用：各種科研、教學(xué)用大小鼠三、無特定病原體級(jí)動(dòng)物（Specific

pathogenfree

animal，簡稱SPF動(dòng)物)定義：指除清潔動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原體的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。來源：將無菌動(dòng)物/悉生動(dòng)物轉(zhuǎn)移到屏障系統(tǒng)中飼養(yǎng)繁殖飼養(yǎng)條件：屏障系統(tǒng)內(nèi)大規(guī)模生產(chǎn)/隔離器內(nèi)保種應(yīng)用：SPF大小鼠為國際通行的科研用動(dòng)物四、無菌動(dòng)物（Germfree

animal，簡稱GF）定義：指用現(xiàn)有的檢測技術(shù)和方法在動(dòng)物體內(nèi)外的任何部位均無可檢出一切生命體的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。來源：第一代通過無菌剖腹產(chǎn)術(shù)，人工哺乳獲得；以后通過無菌動(dòng)物雌雄交配繁殖或無菌剖腹產(chǎn)術(shù)，奶媽代奶擴(kuò)群。飼養(yǎng)條件：無菌隔離器內(nèi)悉生動(dòng)物（Gnotobiotic

animal，簡稱GN）定義：又稱已知菌動(dòng)物，指動(dòng)物體內(nèi)帶有明確的微生物種類的動(dòng)物。來源：人為將已知的微生物投給無菌動(dòng)物，使其體內(nèi)帶有已知菌單菌動(dòng)物雙菌動(dòng)物多菌動(dòng)物悉生動(dòng)物與無菌動(dòng)物相比，生長發(fā)育正常，容易飼養(yǎng)管理飼養(yǎng)條件：無菌隔離器內(nèi)采用普通級(jí)大小鼠作實(shí)驗(yàn)時(shí), 實(shí)驗(yàn)處理可能誘發(fā)隱性感染動(dòng)物發(fā)生顯性感染，并出現(xiàn)有關(guān)組織器官的結(jié)構(gòu)、生理生化與免疫學(xué)改變，可能會(huì)不同程度影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,因而目前我國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國家標(biāo)準(zhǔn)中已經(jīng)取消普通級(jí)大小鼠，這意味著科研教學(xué)用的大小鼠必須使用清潔級(jí)或SPF級(jí)。用普通級(jí)犬、猴等做研究時(shí)應(yīng)加強(qiáng)檢疫，做好飼養(yǎng)管理工作，防止傳染性疾病對實(shí)驗(yàn)的干擾。在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，應(yīng)考慮排除這些因素對實(shí)驗(yàn)的影響。不同微生物級(jí)別動(dòng)物用于實(shí)驗(yàn)的比較項(xiàng)目GF/GN動(dòng)物SPF動(dòng)物CV動(dòng)物傳染病無無有或可能有寄生蟲無無有或可能有實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確準(zhǔn)確有疑問應(yīng)用動(dòng)物數(shù)少少多統(tǒng)計(jì)學(xué)價(jià)值好可能好不準(zhǔn)確長期實(shí)驗(yàn)可能好可能好困難實(shí)驗(yàn)中死亡率很低低高長期實(shí)驗(yàn)存活率約100%約90%約40%實(shí)驗(yàn)的正確設(shè)計(jì)可能可能不可能實(shí)驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)價(jià)值很高高有疑問無菌動(dòng)物（悉生動(dòng)物）因其制作和維持成本昂貴，雖然沒有病原微生物的感染，但也沒有存在于體表體內(nèi)的正常菌群，因而是非生態(tài)的，一般僅限用于一些特定的研究。采用SPF級(jí)和清潔級(jí)動(dòng)物, 則可基本排除病原微生物感染對實(shí)驗(yàn)的干擾，適用于絕大多數(shù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。豚鼠/兔一般只用普通級(jí)，但藥物安全性評價(jià)中過敏原性試驗(yàn)規(guī)定要用清潔級(jí)豚鼠。犬、猴只有普通級(jí)。是不是用無菌動(dòng)物/悉生動(dòng)物做試驗(yàn)就一定好第二節(jié)

無菌級(jí)動(dòng)物和悉生動(dòng)物一、無菌級(jí)動(dòng)物和悉生動(dòng)物的由來和發(fā)展悉生動(dòng)物：廣義的悉生動(dòng)物包括無菌動(dòng)物和已知菌動(dòng)物。最初是研究微生物和動(dòng)物（人）之間的依存關(guān)系而建立發(fā)展起來的。發(fā)展史：1.1895年-1910年：解決了動(dòng)物可在無菌狀態(tài)下生存的問題。2.1910年-1940年：因技術(shù)問題沒有解決，悉生生物研究進(jìn)展緩慢。3.1940年-：技術(shù)問題解決，悉生動(dòng)物研究進(jìn)展迅速。最初報(bào)道的無菌動(dòng)物動(dòng)物培育者及育成時(shí)間小鼠Pleasants,

1958大鼠Reyniers等，1946 Gustafsson,

1948Pleasants,

1959豚鼠Miyakawa等，1958

Tanami,1959兔Wostmann和Pleasants,1959貓Bleby,

1969犬Glims,

1946悉生動(dòng)物技術(shù)應(yīng)用到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上，成為用來預(yù)防和消除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自身疾病，提供高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的手段。形成一門新興學(xué)科--悉生生物學(xué)。二、無菌動(dòng)物的生物學(xué)特性（一）形態(tài)學(xué)改變

1.消化系統(tǒng)⑴盲腸肥大，故GF動(dòng)物的糞便比CV動(dòng)物要稀，排尿量則少。⑵腸壁變薄，絨毛短，腸蠕動(dòng)緩慢，食物通過腸道時(shí)間延長。⑶肝臟重量下降。

2.血液循環(huán)系統(tǒng)心臟相對變小、白血球少、且數(shù)量波動(dòng)范圍小，這一特點(diǎn)與無病原體入侵有關(guān)。免疫系統(tǒng)由于無菌動(dòng)物幾乎沒有受過抗原刺激，其免疫機(jī)能基本上是處于原始狀態(tài)。胸腺、淋巴結(jié)發(fā)育不良；脾臟小，無二級(jí)濾泡。泌尿系統(tǒng)腎臟較小。（二）生理功能改變1.免疫系統(tǒng)⑴免疫球蛋白及其合成率明顯降低，血清中IgM、IgG水平低，無IgA。當(dāng)用低分子無抗原飼料喂無菌動(dòng)物時(shí)，其血清中幾乎不存在丙種球蛋白和特異性抗體。⑵應(yīng)答速度慢，過敏反應(yīng)、對異體移植物的排斥反應(yīng)以及自身免疫現(xiàn)象消失或減弱。⑶對微生物感染異常敏感。2.消化系統(tǒng)腸上皮細(xì)胞更新率低，腸蠕動(dòng)慢。代謝腸道中膽汁酸含量高。初級(jí)結(jié)合的膽汁酸在低部腸道更容易吸收，隨糞便的排出量大大減少。生殖無菌狀態(tài)對生殖影響不大。抗輻射能力GF動(dòng)物有較強(qiáng)的抗輻射能力。普通動(dòng)物受輻射后

往往是由于細(xì)菌感染引起的并發(fā)癥而造成動(dòng)物死亡

GF動(dòng)物就不存在這一問題，抗輻射的耐受量高。生長發(fā)育無菌狀態(tài)下不同種屬的生長發(fā)育有所不同。GF小鼠生長曲線在育成期與普通動(dòng)物(CV)相似，以后則逐漸減慢，最終GF動(dòng)物的成年體重小于CV動(dòng)物。繁殖性能兩者相似。壽命GF動(dòng)物比CV動(dòng)物要長得多。三、無菌動(dòng)物和悉生動(dòng)物的應(yīng)用（一）在微生物學(xué)研究中的應(yīng)用

1.病原體的致病作用正常菌群相互間的依存性和拮抗性關(guān)系生態(tài)預(yù)防和生態(tài)治療（二）在免疫學(xué)研究中的應(yīng)用（三）在放射醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用（四）在營養(yǎng)代謝研究中的應(yīng)用（五）在老年病學(xué)研究中的應(yīng)用（六）在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用（七）在腫瘤研究中的應(yīng)用四、無菌動(dòng)物的生產(chǎn)與維持（一）無菌動(dòng)物的獲得1.預(yù)產(chǎn)期判斷2.剖宮產(chǎn)術(shù)3.人工哺乳/奶媽代乳（二）無菌動(dòng)物質(zhì)量檢測1.無菌隔離器內(nèi)環(huán)境檢測2.無菌隔離器內(nèi)動(dòng)物檢測第三節(jié)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物學(xué)和寄生蟲血質(zhì)量監(jiān)測一、進(jìn)行微生物學(xué)監(jiān)測的意義所謂微生物監(jiān)測是指用微生物學(xué)的方法對不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行定期的抽樣檢

查，以確認(rèn)該等級(jí)動(dòng)物是否感染了某些病

原體。因此，微生物學(xué)監(jiān)測是一個(gè)群體的、流行病學(xué)上的概念，它是通過從一個(gè)群體

中定期抽取少量樣本進(jìn)行檢測，從而判斷

整個(gè)群體中某一疾病流行情況的一種方法。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)檢測國家標(biāo)準(zhǔn)

(教材p43-48)普通級(jí)清潔級(jí)SPF級(jí)病毒細(xì)菌寄生蟲病毒細(xì)菌寄生蟲病毒細(xì)菌寄生蟲小鼠510511167大鼠21057167地鼠621943155豚鼠621943156兔521763137犬442475猴142566三、取樣原則、樣本數(shù)、檢查頻率和檢查方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)：隨機(jī)采樣動(dòng)物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制：設(shè)立哨兵動(dòng)物所謂的“哨兵動(dòng)物”是指為微生物檢測所設(shè)置的指示動(dòng)物。微生物檢測的方法細(xì)菌學(xué)檢測取樣---細(xì)菌分離---可疑菌落生化鑒定---血清學(xué)反應(yīng)病毒學(xué)檢測血清學(xué)檢測病毒抗體分離病毒寄生蟲檢測體外寄生蟲：腸道寄生蟲：復(fù)習(xí)題思考題：根據(jù)對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)的控制，可將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為哪幾類？各類動(dòng)物的定義是什么？應(yīng)飼養(yǎng)在什么環(huán)境中？一般動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是否用無菌動(dòng)物/悉生動(dòng)物做實(shí)驗(yàn)，其結(jié)果一定比用SPF動(dòng)物要好？試述無菌動(dòng)物的生物學(xué)特性。舉例說明無菌動(dòng)物在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用。什么叫哨兵動(dòng)物？第四章

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的環(huán)境控制第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施第三節(jié) 特殊動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施第四節(jié) 設(shè)施的維護(hù)和管理第五節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施的環(huán)境監(jiān)測演出型基因型發(fā)育環(huán)境表現(xiàn)型周圍環(huán)境1959年Russell和Bruch提出的動(dòng)物遺傳和環(huán)境之間相互關(guān)系的學(xué)說在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中。為了使動(dòng)物經(jīng)過實(shí)驗(yàn)處理后的反應(yīng)保持穩(wěn)定，就必須要求每個(gè)動(dòng)物的表現(xiàn)型和演出型都保持穩(wěn)定；而要求每個(gè)動(dòng)物的表現(xiàn)型和演出型保持穩(wěn)定，就必須對動(dòng)物的生存環(huán)境進(jìn)行控制。1959-1962年孕婦服用反應(yīng)停后出生的海豹兒環(huán)境對動(dòng)物實(shí)驗(yàn)處理的影響 R

=

(A

+

B

+

C)×

D

+

E式中：R:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的總反應(yīng)A:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬的共同反應(yīng)

B：動(dòng)物品種及品系特有的反應(yīng)C:動(dòng)物的個(gè)體反應(yīng)（個(gè)體差異）D:環(huán)境的影響（包括實(shí)驗(yàn)處理）E:實(shí)驗(yàn)誤差第一節(jié)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的概念√外環(huán)境大環(huán)境√內(nèi)環(huán)境小環(huán)境二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的分類及控制指標(biāo)1. 普通環(huán)境（conventional

environment）普通環(huán)境符合動(dòng)物居住的基本要求，不能完全控制傳染因子，但能控制野生動(dòng)物的進(jìn)入，適用于飼養(yǎng)普通級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。普通環(huán)境溫度犬、兔、猴、小型豬等控制在16-28℃，豚鼠、地鼠控制在18-29℃范圍；日溫差≤4℃，相對濕度控制在40-70%，換氣次數(shù)最少8次/h。屏障環(huán)境（barrier

environment）屏障環(huán)境符合動(dòng)物居住的要求，嚴(yán)格控制人員、物品和空氣的進(jìn)出，適用于飼育清潔級(jí)及無特定病原體級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。屏障環(huán)境是專門為清潔級(jí)、SPF級(jí)動(dòng)物飼養(yǎng)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的環(huán)境，符合動(dòng)物居住的要求。通過對

出入屏障環(huán)境的人員、物品、動(dòng)物和空氣潔凈度

的控制，避免各種可能的傳染因子傳入屏障環(huán)境

內(nèi)；通過對溫濕度、噪聲和換氣次數(shù)等各種理化

因子的控制，給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的繁育營造良好的環(huán)境。屏障環(huán)境溫度控制在20-26℃，日溫差≤4℃；相對濕度控制在40-70%，換氣次數(shù)控制在10-20次/h，空氣潔凈度7級(jí)。隔離環(huán)境（isolation

environment）采用無菌隔離裝置以保持無菌狀態(tài)或無外來污染物。隔離裝置內(nèi)的空氣、飼料、水、墊料和設(shè)備應(yīng)無菌，動(dòng)物和物料的動(dòng)態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng)，該系

統(tǒng)既能保證與環(huán)境的絕對隔離，又能滿足轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)物時(shí)保持內(nèi)環(huán)境一致。適用于飼育無特定病原體、悉生及無菌實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。隔離環(huán)境溫度控制在20-26℃，日溫差≤4℃；相對濕度控制在40-70%，換氣次數(shù)控制在10-20次/h，飼養(yǎng)無菌動(dòng)物或悉生動(dòng)物的隔離裝置空氣潔凈度為

5級(jí)。為了保證良好的隔離環(huán)境，隔離裝置內(nèi)外的靜壓差要保持在50Pa。指

標(biāo)單

位范

圍其

他溫度攝氏（℃）20-26日溫差≤4℃濕度相對濕度（%）40

-

70換氣量次/小時(shí)≥15氣流速度米/秒≤0.2梯度壓差帕斯卡（Pa）≥10清潔走廊>飼養(yǎng)室>次清潔走廊空氣潔凈度級(jí)7級(jí)美國宇航局標(biāo)準(zhǔn)落下菌數(shù)個(gè)/平皿≤3氨濃度毫克/立方米（mg/m3）≤14噪聲分貝（dB）≤60工作照度勒克斯（Lux）≥20012小時(shí)明12小時(shí)暗SPF動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制指標(biāo)環(huán)境分類使用功能適用動(dòng)物等級(jí)普通環(huán)境---實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫普通動(dòng)物屏障環(huán)境正壓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫清潔動(dòng)物、SPF動(dòng)物負(fù)壓動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫清潔動(dòng)物、SPF動(dòng)物隔離環(huán)境正壓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫SPF動(dòng)物、悉生動(dòng)物、無菌動(dòng)物負(fù)壓動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、檢疫SPF動(dòng)物、悉生動(dòng)物、無菌動(dòng)物不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的使用功能和適用動(dòng)物等級(jí)保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化。保障實(shí)驗(yàn)研究獲得正確結(jié)果。

合乎標(biāo)準(zhǔn)的環(huán)境為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)工作者提供適宜的工作環(huán)境，避免不利的因素對人的傷害。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境控制的意義第二節(jié)

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施是為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提供能夠控制的、穩(wěn)定的、適合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生長/繁殖環(huán)境依據(jù)功能，可分為 生產(chǎn)繁殖設(shè)施

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施一、普通設(shè)施普通設(shè)施應(yīng)符合普通環(huán)境控制要求，用于飼養(yǎng)普

通級(jí)動(dòng)物。設(shè)施通常為單走廊專用房舍，有空調(diào)

和送、排風(fēng)裝置，有防野鼠、防昆蟲措施。此外

還應(yīng)配置動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室、手術(shù)室、清洗室、籠器具

和飼料墊料倉庫。因普通級(jí)大動(dòng)物糞尿排泄量大，在設(shè)施建造設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)注意足夠的通風(fēng)換氣量和通

暢的下水管道?；\具要定期清洗消毒，飼料應(yīng)確

保未污染和霉變。工作人員進(jìn)入時(shí)應(yīng)采取一定的

防護(hù)措施，如穿著工作服，戴口罩、帽子和手套。二、屏障設(shè)施根據(jù)屏障控制規(guī)模的大小，分為：1.全屏障系統(tǒng)2.屏障單元：單間飼養(yǎng)室/動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室凈化控制雙走廊屏障系統(tǒng)內(nèi)人、動(dòng)物、物品的移動(dòng)路向全屏障系統(tǒng)一般設(shè)計(jì)為雙走廊或三走廊空氣要經(jīng)過初、中、高效三級(jí)，其空氣潔凈度要達(dá)到10000級(jí)。屏障系統(tǒng)內(nèi)保持正壓，通過設(shè)定清潔走廊、飼養(yǎng)室/動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室和污物走廊之間的壓差調(diào)節(jié)氣流走向。屏障系統(tǒng)的出入口一般都設(shè)兩道門，形成緩沖間（氣閘），防止開門時(shí)外界空氣逆流進(jìn)入屏障系統(tǒng)內(nèi)。氣流走向清潔走廊外部區(qū)域人員走向：更衣室物實(shí)驗(yàn)室物品移動(dòng)走向 耐高壓物品：物品飼養(yǎng)室/動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室 次清潔走廊淋浴（風(fēng)淋）次清潔走廊清潔走廊更衣室飼養(yǎng)室/動(dòng)高壓滅菌內(nèi)準(zhǔn)備室次清潔走廊清潔走廊外部區(qū)域飼養(yǎng)室/動(dòng)物飼養(yǎng)室不耐高壓物品：物品 傳遞窗噴霧消毒內(nèi)準(zhǔn)備室清潔走廊飼養(yǎng)室/動(dòng)物飼養(yǎng)室 次清潔走廊外部區(qū)域屏障系統(tǒng)內(nèi)人流、物流、氣流走向（以雙走廊為例）3.局部屏障設(shè)備：層流架獨(dú)立通氣籠盒（IVC）層流架獨(dú)立通氣籠盒（IndividuallyVentilated

Cages，IVC）三、隔離設(shè)施隔離設(shè)施是采用特制的隔離裝置以營造與外界隔離的環(huán)境，用于無菌動(dòng)物的制備、無菌動(dòng)物和悉生動(dòng)物的維持和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。亦可用于SPF動(dòng)物的保種和一般的感染性試驗(yàn)。可置于室內(nèi)普通環(huán)境中運(yùn)轉(zhuǎn)。無菌隔離器可用硬質(zhì)或軟質(zhì)材料制成。硬質(zhì)材料采用PVC塑料或不銹鋼，軟質(zhì)材料通常采用聚乙烯透明塑料，通氣后鼓脹成型。目前全世界應(yīng)用最廣泛的是聚氯乙烯全透明薄膜隔離器。隔離器的基本構(gòu)造示意圖第三節(jié)特殊動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施感染性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施放射性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施特殊化學(xué)物質(zhì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施危險(xiǎn)度1級(jí)（無或極低的個(gè)體和群體危險(xiǎn)）不太可能引起人或動(dòng)物致病的微生物。如大腸桿菌、乳酸桿菌等危險(xiǎn)度2級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)中等，群體危險(xiǎn)低）病原體能夠?qū)θ嘶騽?dòng)物致病，但對實(shí)驗(yàn)室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴(yán)重危害。實(shí)驗(yàn)室暴露也許會(huì)引起嚴(yán)重感染，但對感染有有效的預(yù)防和治療措施，并且疾病傳播的危險(xiǎn)有限。如傷寒桿菌、沙門氏菌、致病性大腸桿菌等危險(xiǎn)度3級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)高，群體危險(xiǎn)低）病原體通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，但一般不會(huì)發(fā)生感染個(gè)體向其他個(gè)體的傳播，并且對感染有有效的預(yù)防和治療措施。如霍亂弧菌、炭疽桿菌等危險(xiǎn)度4級(jí)（個(gè)體和群體的危險(xiǎn)均高）病原體通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，并且很容易發(fā)生個(gè)體之間的直接或間接傳播，對感染一般沒有有效的預(yù)防和治療措施。如SARS病毒、甲流病毒等WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊》第三版中文版感染性微生物的危險(xiǎn)度等級(jí)分類感染性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施設(shè)計(jì)理念防護(hù)措施：二段封閉防護(hù)：病原體和人隔離開，感染性實(shí)驗(yàn)室和外界環(huán)境隔離開。感染性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的等級(jí)ABSL-1（Animal

facility-Biosafety

Level-1，P1)ABSL-2（Animal

facility-Biosafety

Level-2，P2）ABSL-3（Animal

facility-Biosafety

Level-3，P3）ABSL-4（Animal

facility-Biosafety

Level-4，P4）不同級(jí)別感染性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室的要求ABSL-1適用：危險(xiǎn)度1級(jí)（無或極低的個(gè)體和群體危險(xiǎn)）動(dòng)物飼育室要求：①飼育籠具應(yīng)有防逃出裝置；②感染實(shí)驗(yàn)區(qū)應(yīng)與其他區(qū)域分開,有防昆蟲和嚙齒類動(dòng)物侵入的裝置；③靠近出口處設(shè)洗手池；④地面、墻壁應(yīng)使用耐水耐消毒藥的材料。ABSL-2適用：危險(xiǎn)度2級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)中等，群體危險(xiǎn)低）ABSL-2是在ABSL-1的操作規(guī)范、處理方法、安全設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室要求的基礎(chǔ)上建立起來的。飼養(yǎng)室門應(yīng)保持關(guān)閉，有明顯的“生物危害”標(biāo)志牌。動(dòng)物飼育室要求：應(yīng)分別設(shè)置動(dòng)物飼育室和實(shí)驗(yàn)操作室、檢疫觀察室。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)宜在隔離器、

IVC和生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。門應(yīng)帶鎖、可自動(dòng)關(guān)閉。實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)具有可視窗。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室不宜設(shè)下水地漏。應(yīng)設(shè)置恒溫恒濕空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)和空氣凈化機(jī)組，一般宜采用全新風(fēng)。應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器。污物處理應(yīng)保證滿足實(shí)驗(yàn)室運(yùn)轉(zhuǎn)和控制污染的要求。固體廢棄物經(jīng)高壓蒸汽滅菌后交環(huán)保部門統(tǒng)一處理；污染的廢水必須經(jīng)過有效消毒。有害污染廢棄物要與一般廢棄物分開放置應(yīng)有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明。保證緊急情況下基本設(shè)備的用電需要。(7)應(yīng)按規(guī)定設(shè)置火災(zāi)報(bào)警、消防器材以及洗眼設(shè)施。ABSL-3適用:危險(xiǎn)度3級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)高，群體危險(xiǎn)低）三級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室（ABSL-3）適用于飼養(yǎng)接種了危險(xiǎn)度3級(jí)微生物的動(dòng)物。這種病原微生物對人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，主要通過氣溶膠使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致命疾病，或?qū)?dòng)植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。實(shí)驗(yàn)人員需接受過專門操作訓(xùn)練，并由具有上述工作經(jīng)驗(yàn)的能勝任的科學(xué)人員監(jiān)督管理。ABSL-3要有雙重密封門或氣閘室（緩沖隔離室）和外界隔離的實(shí)驗(yàn)區(qū)。外部空氣通過高效過濾器送入室內(nèi)，排出的空氣亦需經(jīng)高效過濾器過濾。感染材料的所有操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)或其他封閉設(shè)備內(nèi)進(jìn)行。所有傳染性液體或固體廢棄物應(yīng)先經(jīng)過高溫高壓或化學(xué)處理去除污染后再處理ABSL-3設(shè)施設(shè)備要求：應(yīng)為全封閉系統(tǒng)，有清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)組成，各區(qū)之間設(shè)緩沖間。室內(nèi)配管線應(yīng)內(nèi)藏，適應(yīng)熏蒸消毒和沖洗消毒的需要。動(dòng)物飼養(yǎng)區(qū)和生物安全柜內(nèi)應(yīng)保持負(fù)壓，排出的氣體應(yīng)經(jīng)過高效過濾器過濾。每個(gè)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室出口處附近要有自動(dòng)開關(guān)洗手池。在適當(dāng)?shù)奈恢冒仓酶邏簻缇鳎腥拘詮U棄物在運(yùn)出ABSL-3前必須經(jīng)高壓滅菌。ABSL-4適用:危險(xiǎn)度4級(jí)（個(gè)體和群體的危險(xiǎn)均高）四級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室（ABSL-4）是最高

度安全實(shí)驗(yàn)室。適用于未知的或能引起致命疾病