臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢（院級(jí)）

心內(nèi)臨床微生物標(biāo)本

--采集與送檢主

要內(nèi)容標(biāo)本規(guī)范采集的意義標(biāo)本的運(yùn)送與拒收原則臨床標(biāo)本的采集微生物標(biāo)本采集規(guī)范化的意義研究表明，分析前和分析后是當(dāng)代檢驗(yàn)誤差的主要來(lái)源。有報(bào)道，有70%的實(shí)驗(yàn)室誤差來(lái)自分析前，分析前階段的質(zhì)量控制是整個(gè)檢驗(yàn)質(zhì)量控制中一個(gè)容易被忽視卻非常重要的環(huán)節(jié)。合格的標(biāo)本是獲得準(zhǔn)確檢驗(yàn)結(jié)果的先決條件。不當(dāng)?shù)臉?biāo)本可導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果的假陰性、假陽(yáng)性結(jié)果。協(xié)助明確疾病診斷推測(cè)病程進(jìn)展

制定治療措施觀察病情規(guī)范標(biāo)本采集的意義快速、準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷來(lái)自于哪里？? 選擇合適的標(biāo)本種類（血液、組織、無(wú)菌體液）? 留取合格的標(biāo)本（無(wú)菌操作、根據(jù)采集手冊(cè)的要求）? 有很高的診斷價(jià)值標(biāo)本，鼓勵(lì)多送檢

組織和無(wú)菌體液（血、骨髓、腦脊液、關(guān)節(jié)液、胸腹腔穿刺液等）行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T

640-2018于2019-6實(shí)施微生物標(biāo)本采集原則及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本采樣時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作采樣后立即送檢（為保持微生物的生物活性，標(biāo)本采集后應(yīng)立即送到實(shí)驗(yàn)室，床旁接種可提高病原菌檢出率）采取適當(dāng)?shù)慕馄饰恢谩⒓夹g(shù)與容器，收集足量的樣本，盡量不用棉花拭子收集標(biāo)本（喉嚨及生殖道除外）微生物標(biāo)本采集原則標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑送檢標(biāo)本應(yīng)注明來(lái)源和檢驗(yàn)?zāi)康臉颖静杉?、運(yùn)送及保存過(guò)程中，避免感染他人標(biāo)本的運(yùn)送原則①所有的標(biāo)本都必須立即送往實(shí)驗(yàn)室，最好在2h內(nèi),保存時(shí)間不應(yīng)超過(guò)24h.②最佳的臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本的量.量少的標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.③對(duì)環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對(duì)低溫敏感）應(yīng)立即處理，禁止冷藏腦脊液、生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本、血液培養(yǎng)標(biāo)本。標(biāo)本的拒收原則1.樣本上無(wú)病人標(biāo)簽或病人標(biāo)簽與檢驗(yàn)申請(qǐng)單不符；2.樣本以不當(dāng)?shù)臏囟?、運(yùn)送培養(yǎng)基及容器運(yùn)送；3.樣本量不足、已被防腐劑固定或運(yùn)送時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；4.樣本外漏、容器破損及明顯受污染的標(biāo)本；5.樣本的檢驗(yàn)項(xiàng)目申請(qǐng)不適合進(jìn)行；6.當(dāng)日重復(fù)送標(biāo)本（除血培養(yǎng)外）。臨床大夫如何選擇檢驗(yàn)項(xiàng)目？無(wú)菌體液標(biāo)本、組織、痰、BALF、尿液、膿液標(biāo)本等：宜同時(shí)選擇標(biāo)本直接涂片染色鏡檢和培養(yǎng)懷疑隱球菌感染的腦脊液標(biāo)本：宜同時(shí)選擇墨汁染色、隱球菌莢膜抗原檢驗(yàn)和隱球菌培養(yǎng)

懷疑分枝桿菌感染的標(biāo)本：宜同時(shí)選擇抗酸染色、分枝桿菌培養(yǎng)和分枝桿菌核酸檢驗(yàn)臨床醫(yī)生如何選擇檢驗(yàn)項(xiàng)目？

懷疑厭氧菌感染的標(biāo)本：宜同時(shí)選擇革蘭染色和厭氧培養(yǎng)，不能排除需氧菌時(shí)，宜同時(shí)做需氧培養(yǎng)

懷疑諾卡菌感染的標(biāo)本：宜同時(shí)選擇革蘭染色、弱抗酸染色和培養(yǎng)

懷疑侵襲性真菌感染的標(biāo)本：宜同時(shí)選擇10%KOH壓片、真菌培養(yǎng)和真菌抗原檢驗(yàn)；另可進(jìn)行乳酸酚棉蘭染色或熒光染色等什么樣的標(biāo)本適合/不適合？

普通細(xì)菌培養(yǎng)什么樣的標(biāo)本適合/不適合？

厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)、部位、方法？應(yīng)在抗微生物藥物治療之前或在起始治療后立即采集、疾病初發(fā)時(shí)采集首份標(biāo)本

治療中評(píng)估療效、治療后評(píng)估結(jié)局應(yīng)避免感染部位周圍以及感染部位附近皮膚或粘膜定植菌群的污染呼吸道病毒：宜采用植絨拭子采集鼻咽標(biāo)本懷疑細(xì)菌、真菌、厭氧菌感染：除了血液標(biāo)本外，其他所有標(biāo)本均宜進(jìn)行革蘭染色鏡檢標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)、部位、方法？無(wú)菌體液：無(wú)菌管送檢，或注入一定量（最好10mL）到血培養(yǎng)瓶中增菌培養(yǎng)外科手術(shù)標(biāo)本：應(yīng)送液體或組織做涂片和培養(yǎng)，拭子標(biāo)本僅用于特殊情況病毒血清學(xué)檢驗(yàn)：應(yīng)根據(jù)不同病毒選擇不同的采集時(shí)間和抗體類型特殊情況下（如懷疑厭氧菌感染時(shí)）：可以考慮床旁采樣

標(biāo)本采集應(yīng)符合生物安全規(guī)定臨床微生物重要體液標(biāo)本的采集血培養(yǎng)適應(yīng)證及采集套數(shù)

抗菌藥物使用前采集血培養(yǎng)血培養(yǎng)-臨床溝通

至少

雙

抽四瓶：

成人應(yīng)至少送檢兩套（四瓶）套數(shù)：穿刺點(diǎn)的數(shù)量每套：1個(gè)需氧瓶和1個(gè)厭氧瓶。正視厭氧瓶功能—提高陽(yáng)性率

增加采血量

增加兼性厭氧菌的分離機(jī)會(huì)

增加厭氧菌的分離機(jī)會(huì)

厭氧瓶平均報(bào)陽(yáng)時(shí)間快于需氧瓶血培養(yǎng)標(biāo)本1采血時(shí)間及次數(shù)：一般應(yīng)在抗生素治療前，發(fā)熱初期或高峰時(shí)抽血，對(duì)已用抗生素又不能停藥者，可在下次用藥前采集。2為了提高病人血培養(yǎng)的陽(yáng)性率，最好的抽血時(shí)間是預(yù)計(jì)寒戰(zhàn)或體溫驟生之前，但很難做到，所以一般都在發(fā)熱初期或發(fā)熱高峰期采集。采血部位及采血量

以無(wú)菌方法從患者肘靜脈采血。采血量以培養(yǎng)基的1/5~1/10為宜，成人一次采血5-10ml，兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml。血液抽出后，立即以無(wú)菌手續(xù)注入血培養(yǎng)瓶，充分混合后送檢。骨髓標(biāo)本的微生物學(xué)檢查

采集部位：骨髓穿刺法從髂骨采集標(biāo)本。

采集時(shí)間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期

當(dāng)骨髓炎時(shí)或長(zhǎng)期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽(yáng)性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng)

腦脊液標(biāo)本采集★標(biāo)本采集注意事項(xiàng)：①嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作，采集的腦脊液分別放入3個(gè)無(wú)菌試管，每管不少于1ml,立即送檢；如果只采集1管，應(yīng)先送微生物室，做完培養(yǎng)或涂片剩余標(biāo)本再做其他項(xiàng)目。②腦脊液標(biāo)本嚴(yán)禁冷藏，不能及時(shí)送檢應(yīng)在室溫保存。不要加防腐劑。③做腦脊液培養(yǎng)時(shí)，建議同時(shí)做血培養(yǎng)。腦脊液的采集

盡可能在抗菌藥物使用前采集

采集方法：?

去枕側(cè)臥位，低頭曲頸，使椎間隙張開(kāi)便于進(jìn)針?

確定穿刺點(diǎn)：腰3～腰4椎間隙?

嚴(yán)格無(wú)菌操作，對(duì)腰椎穿刺點(diǎn)及其周圍15cm區(qū)域的皮膚消毒?

待消毒劑干燥后（約1min），再以75%酒精擦拭兩遍?

覆蓋無(wú)菌孔巾，待消毒劑徹底揮發(fā)，1%～2%利多卡因在穿刺點(diǎn)行皮內(nèi)、皮下浸潤(rùn)麻醉?

左手固定麻醉點(diǎn)，右手進(jìn)針，對(duì)準(zhǔn)脊椎間隙刺入皮下，針尖斜向與脊柱平行采集腦脊液?

分別放入3個(gè)無(wú)菌螺帽管中，做好標(biāo)記；疑似細(xì)菌性腦膜炎，應(yīng)取2~4瓶腦脊液?

最小標(biāo)本量要求：細(xì)菌≥1mL，真菌≥2mL，分枝桿菌≥5mL，病毒≥2mL注明患者年齡，可為病原體診斷提供線索；嬰幼兒：可選擇腰4～腰5或腰5～骶1椎間隙穿刺進(jìn)針，以免損傷脊髓腦脊液的送檢

不要冷凍腦脊液標(biāo)本

首瓶極易被皮膚定植菌污染，不應(yīng)做涂片、培養(yǎng)和分子檢測(cè)胸、腹水的采集和送檢

胸水? 坐位或半臥位，用超聲或叩診方法定位穿刺點(diǎn)? 無(wú)菌操作采集10mL或更多液體，置于無(wú)菌容器，室溫立即送檢

腹水? 依患者狀況和腹水量，酌情取平臥、側(cè)臥或半臥坐位? 無(wú)菌操作采集10mL或更多液體，置于無(wú)菌容器，室溫立即送檢

腹膜透析液? 收集50mL腹膜透析液，置于無(wú)菌容器，室溫立即送檢? 同時(shí)床旁接種5～10mL，分別打入需氧和厭氧血培養(yǎng)瓶，室溫立即送檢? 若不能馬上送檢，血培養(yǎng)瓶應(yīng)置于37℃條件下孵育皮膚、結(jié)締組織標(biāo)本的采集和送檢

閉合性膿腫? 消毒皮膚后，用注射器抽取膿腫物，無(wú)菌轉(zhuǎn)移至厭氧轉(zhuǎn)運(yùn)裝置

開(kāi)放性膿腫? 無(wú)菌生理鹽水或75%酒精去除表面分泌物? 盡可能采集抽吸物，或?qū)⒉蓸邮米硬迦胫敛≡畹牡撞炕蚰撃[壁取其新鮮邊緣部分*活檢標(biāo)本和抽吸物（膿液、滲出液）優(yōu)于拭子標(biāo)本皮膚、結(jié)締組織標(biāo)本的采集和送檢

膿皰或水皰? 酒精消毒揮發(fā)后，挑破膿皰，用拭子收集膿液? 較大的膿皰:消毒后宜直接用注射器抽取? 陳舊的膿皰:去除損傷表面，用拭子擦拭損傷基底

蜂窩織炎液化后? 宜先注射無(wú)菌生理鹽水隨后抽吸? 若患者病情迅速進(jìn)展，或蜂窩織炎沒(méi)有液化則需要采集組織活檢標(biāo)本傷口標(biāo)本的采集和送檢

傷口標(biāo)本? 應(yīng)區(qū)分淺表傷口標(biāo)本、深部傷口標(biāo)本及外科手術(shù)傷口標(biāo)本? 宜從感染進(jìn)展的前緣采集活檢標(biāo)本

燒傷傷口? 清潔并清除燒傷創(chuàng)面，有液體滲出時(shí)，用拭子擦拭取樣? 燒傷的組織宜做定量培養(yǎng)，定量檢驗(yàn)結(jié)果≥105CFU/g則可預(yù)示有可能