農(nóng)產(chǎn)品檢測之稱量分析技術(shù)

萃取稱量法利用待測組分在兩種不互溶溶劑中溶解度或分配比的不同來分離、提取或純化待測組分，然后用稱量分析法定量測定。01萃取02反萃取03概念把待測組分由有機(jī)相分離到水的過程。把待測組分由水相分離到時(shí)有機(jī)相的過程。脂肪

甘油三酸酯95％甘油三酸酯95％甘油三酸酯95％類脂脂肪酸、磷脂、糖脂、甾醇、脂溶性維生素、蠟等大多數(shù)動(dòng)物性食品和某些植物性食品（如種子、果實(shí)、果仁）含有天然脂肪或脂類化合物，但含量各不相同。食品中的脂類物質(zhì)和脂肪含量游離態(tài)

動(dòng)物性脂肪及植物性油脂甘油三酸酯95％甘油三酸酯95％結(jié)合態(tài)天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白及某些加工（如焙烤食品及麥乳精等）中的脂肪，與蛋白質(zhì)或碳水化合物形成結(jié)合態(tài)。對大多數(shù)食品來說，游離態(tài)脂肪是主要的，結(jié)合態(tài)脂肪含量較少。食品中脂肪存在形式溶劑的選擇乙醚石油醚溶解脂肪的能力強(qiáng)。乙醚沸點(diǎn)低（34.6℃），易燃。乙醚可飽和2%的水。含水乙醚在萃取脂肪的同時(shí)，會(huì)抽提出糖分等非脂成分。必須用無水乙醚作提取劑，被測樣品也要事先烘干。石油醚的沸點(diǎn)比乙醚高，不太易燃，溶解脂肪能力比乙醚弱，吸收水分比乙醚少，允許樣品含微量的水分。有時(shí)也采取乙醚+石油醚共用。

乙醚、石油醚都只能提取樣品中游離態(tài)的脂肪。對于結(jié)合態(tài)的脂類，必須預(yù)先用酸或堿及乙醇破壞脂類與非脂類的結(jié)合后，才能提取。脂類的方法索氏抽提法A酸水解法C蓋勃氏法E巴布科克氏法B羅氏—哥特里法D索氏提取法至今仍被認(rèn)為是測定多種食品脂類含量的有代表性的方法，但對于某些樣品測定結(jié)果往往偏低。酸水解法能對包括結(jié)合態(tài)脂類在內(nèi)的全部脂類進(jìn)行定量。而羅氏—哥特里法主要用于乳制品中脂類的測定。索氏提取法原理將經(jīng)前處理的、分散且干燥的樣品用乙醚或石油醚等溶劑回流提取，使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中，回收溶劑后所得到的殘留物，即為粗脂肪。

一般食品用有機(jī)溶劑浸提，揮干有機(jī)溶劑后得到的重量主要是游離脂肪，此外，還含有磷脂、色素、樹脂、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等物質(zhì)，所以用索氏提取法測得的脂肪，也稱粗脂肪。裝置的搭建脂肪測定儀ABCDEF樣品瓶的恒重、稱量樣品制備回收溶劑濾紙筒的制備抽提樣品瓶烘干、稱量測定流程樣品瓶的恒重、稱量濾紙筒的制備

將索氏提取器各部分充分洗滌并用蒸餾水清洗、烘干。瓶底在101-103°C的電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)干燥至恒重（前后兩次稱量差不得超過2mg）

將濾紙裁成8cm×15cm大小，以直徑位2.0cm的大試管為模型，將濾紙緊靠試管壁卷成圓筒型，把底端封口，內(nèi)放一小片脫脂棉，用白細(xì)線扎好定型，在100~105℃烘箱中烘至恒量（準(zhǔn)確至0.0002g）。樣品處理用潔凈稱量皿稱取約為5g試樣，精確至1mg含有水量為40%以上的試樣，加入適量海砂，置于水浴上蒸發(fā)水分。用一端扁平的玻璃棒不斷攪拌，直至松散；含水量為40%以下的試樣，加適量海砂，充分?jǐn)嚢?。然后將樣品全部轉(zhuǎn)移只濾紙筒內(nèi)，用有無水乙醚或石油醚的脫脂棉擦凈稱量皿和玻璃棒，一并放入濾紙筒內(nèi)。濾紙筒上方添少量脫脂棉。將盛有試樣的濾紙筒移入電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)，在101-103°C溫度下烘干2h。西式糕點(diǎn)應(yīng)在88-92°C烘干2h。抽提將干燥后盛有試樣的濾紙筒放入索氏提取筒內(nèi)，連接已干燥只恒重的底瓶，注入無水乙醚或石油醚至虹吸管高度以上。帶提取液流凈后，再加提取液只虹吸管高低的三分之一處。連接回流冷凝管。將底瓶放在水浴鍋上加熱。用少量脫脂棉塞入冷凝管上口。注：水浴溫度應(yīng)控制在使提取液沒6-8min回流一次。肉制品、豆制品、谷物、油炸類、糕點(diǎn)等食品提取6-12h，堅(jiān)果制品提取月16h。提取結(jié)束時(shí)，用磨砂玻璃棒接取一滴提取液，磨砂玻璃棒上無油斑表明提取完畢。注：水浴溫度應(yīng)控制在使提取液沒6-8min回流一次。肉制品、豆制品、谷物、油炸類、糕點(diǎn)等食品提取6-12h，堅(jiān)果制品提取月16h。提取結(jié)束時(shí)，用磨砂玻璃棒接取一滴提取液，磨砂玻璃棒上無油斑表明提取完畢。溶劑回收樣品瓶烘干、稱量

取出濾紙筒，用抽提器回收乙醚，取走濾紙筒，繼續(xù)蒸餾。當(dāng)乙醚在提脂管內(nèi)在快要虹吸時(shí)立即取下提脂管，將其下口放到盛乙醚的試劑瓶口，使之傾斜，使液面超過虹吸管，乙醚即經(jīng)虹吸管流入瓶內(nèi)。按同法繼續(xù)回收，將乙醚完全蒸出后，取下提脂燒瓶，于水浴上蒸去殘留乙醚。

用脫脂濾紙擦凈底瓶外部，在101-103°C的干燥箱內(nèi)干燥1h，取出，置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫，稱量。重復(fù)干燥0.5h的操作，冷卻，稱量。前后兩次稱量差不得超過2mg。計(jì)算X=×100%式中：X----樣品中粗脂肪的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%;m----樣品的質(zhì)量,g;m0---底瓶的質(zhì)量,g;m1---粗脂肪和底瓶的質(zhì)量,g.計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)有一位同一樣品的兩次測定之差不得超過兩次測定平均值的5%。01注意事項(xiàng)02

樣品必須干燥，樣品中含水分會(huì)影響溶劑提取效果，造成非脂成分的溶出。濾紙筒的高度不要超過回流彎管，否則超過彎管中的品的脂肪不能提盡，帶來測定誤差。乙醚回收后，剩下的乙醚必須在水浴上徹底揮凈，否則放入烘箱中有爆炸的危險(xiǎn)。乙醚在使用過程中，室內(nèi)應(yīng)保持良好的通風(fēng)狀態(tài)，一起周圍不能有明火，以防空氣中有乙醚蒸氣而引起著火或爆炸。03注意事項(xiàng)04

脂肪接收瓶反復(fù)加熱時(shí)，會(huì)因脂類氧化而增重，質(zhì)量增加時(shí)，應(yīng)以增重前的質(zhì)量為恒重。

抽提是否完全，可用濾紙或毛玻璃檢查，由抽提管下口滴下的乙醚滴在濾紙或毛玻璃上，揮發(fā)后不留下油跡表明已抽提完全。05

抽提所用的乙醚（或石油醚）要求無水、無醇、無過氧化物，揮發(fā)殘?jiān)康?。因水和醇?huì)導(dǎo)致糖類及水溶性鹽類等物質(zhì)的溶出，使測定結(jié)果偏高。過氧化物會(huì)導(dǎo)致脂肪氧化，在烘干時(shí)還有引起爆炸的危險(xiǎn)。乙醚中過氧化物的檢查方法取6ml乙醚，加2ml10%的碘化鉀溶液，用力振搖，放置1分鐘，若出現(xiàn)黃色，則證明有過氧化物存在。（或取乙醚10ml加入100g/L碘化鉀溶液2ml，用水振搖放置1分鐘，若碘化鉀層出現(xiàn)黃色證明有過氧化物存在。）此乙醚需經(jīng)處理后方可使用?！み^氧化物如:H2O2、Na2O2、CaO2、BaO2、ZnO2、MgO2等乙醚的處理

于乙醚中加入1/10~1/20體積的200g/L硫代硫酸鈉溶液洗滌，再用水洗，然后加入少量無水氧化鈣或無水硫酸鈉脫水，于水浴上進(jìn)行蒸餾。蒸餾時(shí)，水浴溫度一般調(diào)至稍高于溶劑沸點(diǎn)，能達(dá)到燒瓶內(nèi)沸騰即可。棄去最初及最后的1/10餾出液，收集中間餾出液備用。03本法適合于結(jié)合態(tài)脂類，特別是磷脂含量高的樣品，如魚、貝類，肉、禽、蛋及其制品，大豆及其制品等。特點(diǎn)02此法適用于各類、各種狀態(tài)的食品中脂肪測定。特別是加工后的混合食品，易吸濕，不好烘干的，用索氏提取法不行的樣品，效果更好。

適用范圍01

將試祥與鹽酸溶液一同加熱進(jìn)行水解，使結(jié)合或包藏在組織里的脂肪游離出來，再用乙醚和石油醚提取脂肪，回收溶劑，干燥后稱量，提取物的重量即為脂肪含量。原理酸水解法01

利用氨一乙醇溶液破壞乳的膠體性狀及脂肪球膜使非脂成分溶解于氨一乙醇溶液中，而脂肪游離出來，再用乙醚—石油醚提取出脂肪，蒸餾去除溶劑后，殘留物即為乳脂肪。原理02

本法適用于各種液狀乳，煉乳、奶粉、奶油及冰淇淋等能在堿性溶液中溶解的乳制品，也適用于豆乳或加水呈乳狀的食品。本法為乳及乳制品脂類定量的國際標(biāo)準(zhǔn)法。適用范圍與特點(diǎn)羅氏——哥特里法

乳類脂肪雖然也屬于游離脂肪，但因脂肪球被乳中酪蛋白鈣鹽包裹，又處于高度分散的膠體分散系中，故不能直接被乙醚、石油醚提取，需預(yù)先用氨水處理，故此法也稱為堿性乙醚提取法。01

用濃硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白質(zhì)等非脂成分，將牛奶中的酪蛋白鈣鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的重硫酸酪蛋白，使脂肪球膜被破壞，脂肪游離出來，再利用加熱離心，使脂肪完全迅速分離，直接讀取脂肪層的數(shù)值，便可知被測乳的含脂率。原理02

這兩種方法都是測定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)方法，適用于鮮乳及乳制品脂肪的測定。對含糖多的乳品(如甜煉乳、加糖乳粉等)，采用此方法時(shí)糖易焦化，使結(jié)果誤差較大，故不適宜。此法操作簡便，迅速。對大多數(shù)樣品來說測定精度可滿足要求，但不如重量法準(zhǔn)確。適用范圍與特點(diǎn)巴布科克法和蓋勃法12

學(xué)習(xí)目標(biāo)掌握電子天平選擇的依據(jù)明確電子天平準(zhǔn)確度級別判定指標(biāo)了解電子天平準(zhǔn)確度等級判定方法3電子天平選擇的依據(jù)01Max：最大稱樣量d：實(shí)際分度值電子天平選擇的依據(jù)1、準(zhǔn)確度級別2、最大稱樣量（Max）注意：d代表天平的可讀性，不能直接反應(yīng)天平的準(zhǔn)確度。電子天平準(zhǔn)確度級別判定指標(biāo)02電子天平的準(zhǔn)確度級別摘自JJG1036-2008《電子天平檢定規(guī)程》電子分析天平準(zhǔn)確度級別應(yīng)達(dá)到Ⅱ級以上檢定分度值e檢定分度值e與實(shí)際分度值de：“檢定分度值”代表天平精確度d：“實(shí)際分度值”代表天平可讀性二者的關(guān)系：所有天平滿足d≤e≤10d電子天平滿足d＜e≤10d，其中e=10d最為常見。用于劃分天平級別與進(jìn)行計(jì)量檢定的，以質(zhì)量單位表示的值。檢定分度數(shù)nn：“檢定分度數(shù)”n＝Max/e是劃分天平準(zhǔn)確度級別的重要指標(biāo)之一。電子天平準(zhǔn)確度等級判斷方法03判定電子天平準(zhǔn)確度級別的步驟1、計(jì)算“檢定分度值”e；e＝10d2、計(jì)算“檢定分度數(shù)”n；n＝Max/e3、對照電子天平準(zhǔn)確度分級標(biāo)準(zhǔn)，確定其準(zhǔn)確度級別練習(xí)賽多利斯（sartorius）BS224S電子分析天平，最大稱樣量為220g，實(shí)際分度值為0.1mg，則其準(zhǔn)確度等級為幾級？解：步驟1、檢定分度值：e=10d=1mg步驟2、檢定分度數(shù)：n=Max/e=220g/0.001g=2.2×105步驟3：按分級表可知，其屬于I級天平，為特種準(zhǔn)確度級。e=1mg，n=2.2×105小結(jié)12

學(xué)習(xí)目標(biāo)掌握分析天平的功能掌握分析天平稱量的適用范圍4了解電子分析天平種類熟悉常見的分析天平種類3分析天平的功能01

分析天平是定量分析工作中準(zhǔn)確稱取物質(zhì)質(zhì)量的重要儀器，一般至少能精確稱量到0.0001g(即0.1mg)。按照其稱量精確程度可分為：常量分析天平、微量分析天平和超微量分析天平。分析天平的功能分析天平類型實(shí)際標(biāo)尺分度值（d）最小稱樣量俗名常量分析天平0.1mg0.2g萬分之一天平微量分析天平0.01mg0.02g十萬分之一天平超微量分析天平0.001mg0.002g百萬分之一天平分析天平稱量的適用范圍021、稱取——用天平進(jìn)行的稱量，其準(zhǔn)確度要求用數(shù)值的有效數(shù)位表示，如“稱取20.0g……”指稱量準(zhǔn)確至±0.1g；“稱取20.00g……”指稱量準(zhǔn)確至±0.01g。2、準(zhǔn)確稱取——用分析天平進(jìn)行稱量操作，其稱量準(zhǔn)確度為±0.0001g。3、準(zhǔn)確稱取約——必須精確至0.0001g，但可接近所列數(shù)值，一般不超過所列數(shù)值的10%。物質(zhì)稱量的要求分析天平稱量的適用范圍

分析天平是精密稱量儀器，只有當(dāng)稱量確實(shí)需要精確到0.1mg時(shí)，才使用分析天平稱量。當(dāng)稱量要求為“準(zhǔn)確稱取”、“準(zhǔn)確稱取約”或者“稱量”準(zhǔn)確度要求達(dá)到±0.0001g時(shí)，才使用分析天平稱量，否則應(yīng)用托盤天平或百分之一天平等非分析級天平稱量。分析天平的常見種類03天平的分類依據(jù)

分析天平常見兩種類型，一種是機(jī)械加碼電光分析天平，一種是電子分析天平。電子分析天平是最新一代的天平，它是根據(jù)電磁力平衡原理設(shè)計(jì)的，具有準(zhǔn)確性高、操作簡單、環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn)，廣泛使用于生產(chǎn)科研領(lǐng)域。電光分析天平電子分析天平最新一代天平應(yīng)用廣泛電子分析天平的種類類型最大稱量質(zhì)量（max）分度值超微量電子分析天平2~5g＜max*10-6微量電子分析天平3~50g＜max*10-5半微量電子分析天平20~100g＜max*10-5常量電子分析天平100~200g＜max*10-5精密電子天平是準(zhǔn)確度級別為II級電子天平的總稱。小結(jié)12

學(xué)習(xí)目標(biāo)掌握試樣稱量方法的種類；熟悉三種稱量方法操作上的差異；能夠清楚三種稱量方法的適用范圍，根據(jù)實(shí)際情況，正確選擇稱量方法。3試樣稱量方法的種類01

試樣稱量的三種方法1.直接稱量法，也稱直接法2.差減稱量法，也稱減重法3.固定質(zhì)量稱量法，也稱增重法三種稱量法操作上的差異02