高考復(fù)習(xí)二輪專項練習(xí)生物專題突破練12細(xì)胞工程和基因工程

專題突破練12細(xì)胞工程和基因工程一、單項選擇題1.(2021山東濟(jì)南聯(lián)考)芥酸會降低菜籽油的品質(zhì)。油菜有兩對獨立遺傳的等位基因(H和h,G和g)控制菜籽的芥酸含量。下圖是獲得低芥酸油菜新品種(HHGG)的技術(shù)路線,已知油菜單個花藥由花藥壁(2n)及大量花粉(n)等組分組成,這些組分的細(xì)胞都具有全能性。據(jù)圖分析,下列敘述錯誤的是()A.①②過程均需要植物激素來誘導(dǎo)細(xì)胞脫分化B.與④過程相比,③過程可能會產(chǎn)生二倍體再生植株C.圖中3種途徑中,利用花粉培養(yǎng)篩選低芥酸油菜新品種(HHGG)的效率最高D.F1植株的細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂時,H基因所在的染色體會與G基因所在的染色體發(fā)生聯(lián)會2.(2021山東濟(jì)南針對性訓(xùn)練)NRP1是人體血管內(nèi)皮生長因子的受體,在腫瘤新生血管形成與腫瘤細(xì)胞遷移、黏附、侵襲等方面起重要調(diào)控作用。為探究NRP1MAb(NRP1的單克隆抗體)對乳腺癌的治療作用,研究人員以兔子為實驗材料進(jìn)行了相關(guān)實驗,得到如下圖所示的結(jié)果。下列敘述錯誤的是()A.據(jù)圖推測,NRP1MAb能夠有效降低腫瘤的體積,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著B.NRP1MAb的制備過程中利用滅活病毒誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合,其原理是利用了病毒表面的糖蛋白和相關(guān)酶能夠與細(xì)胞膜表面的糖蛋白發(fā)生作用C.反復(fù)給兔子注射NRP1,提取已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,再經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生NRP1MAbD.治療機(jī)理可能為NRP1MAb與NRP1特異性結(jié)合,阻止了NRP1與血管內(nèi)皮生長因子的結(jié)合,從而抑制了腫瘤血管的生成以及腫瘤細(xì)胞的分散和轉(zhuǎn)移3.(2021山東濱州二模)細(xì)胞融合不僅在自然條件下常見,在現(xiàn)代生物技術(shù)中也經(jīng)常應(yīng)用。下圖表示細(xì)胞融合的簡要過程。下列說法正確的是()A.細(xì)胞融合過程都涉及細(xì)胞膜的流動性,常用聚乙二醇融合法、電融合法等進(jìn)行處理B.若細(xì)胞a、b分別取自優(yōu)良奶牛,則采集的卵母細(xì)胞和精子可直接體外受精C.若細(xì)胞a、b分別代表白菜、甘藍(lán)細(xì)胞,則完成融合的標(biāo)志為細(xì)胞核的融合D.若細(xì)胞d是雜交瘤細(xì)胞,則在選擇培養(yǎng)基中篩選后即可大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體4.(2021山東聊城二模)單克隆抗體可抑制病毒對宿主細(xì)胞的侵染。下列關(guān)于單克隆抗體制備的敘述,錯誤的是()A.為提高單克隆抗體制備的成功率,往往需要多次給實驗動物注射同一種抗原B.給實驗動物注射抗原后,相應(yīng)抗體檢測呈陽性,說明發(fā)生了體液免疫C.單克隆抗體的制備過程中需用到PCR技術(shù)和抗原—抗體雜交技術(shù)D.動物體內(nèi)存在很多種B淋巴細(xì)胞,每種B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體5.(2021山東日照二模)實踐表明,普通的單克隆抗體易被人體的免疫系統(tǒng)識別為異源蛋白質(zhì)而被清除。為解決這一問題,科研工作者對人源單克隆抗體進(jìn)行了研究,具體的操作過程如下:先用人的抗體基因取代小鼠的抗體基因,獲得轉(zhuǎn)基因小鼠;然后從接受抗原刺激的轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)獲取B淋巴細(xì)胞,使這些B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)過篩選之后獲得雜交瘤細(xì)胞用于單克隆抗體的制備。下列敘述錯誤的是()A.獲取轉(zhuǎn)基因小鼠時,常用顯微注射法將目的基因?qū)胄∈笫芫袯.B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合時,可以利用滅活病毒進(jìn)行誘導(dǎo)C.對融合后獲得的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)即可獲得大量的單克隆抗體D.人源單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、抗原性低等特點6.(2021山東泰安二模)細(xì)胞毒素可有效殺傷腫瘤細(xì)胞,但沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時還會對健康細(xì)胞造成傷害?？贵w—藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如下圖所示。下列敘述正確的是()A.單克隆抗體制備過程中需要使用TaqDNA聚合酶B.ADC進(jìn)入腫瘤細(xì)胞需要膜上載體蛋白的協(xié)助C.細(xì)胞毒素具有與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的能力D.溶酶體裂解導(dǎo)致其中的水解酶釋放,加速了腫瘤細(xì)胞凋亡7.(2021山東濟(jì)南聯(lián)考)材料11890年,Heape將2個4細(xì)胞時期的安哥拉兔胚胎移植到一只受精的比利時兔的輸卵管中,產(chǎn)下了4只比利時兔和2只安哥拉兔,這是第一次成功移植哺乳動物胚胎。材料2Dziuk等研究了利用促卵泡素進(jìn)行超數(shù)排卵的方法,有報道指出,使用透明質(zhì)酸作為稀釋劑注射1或2次促卵泡素的效果與用鹽水為稀釋劑多次注射促卵泡素的效果一致。下列有關(guān)敘述正確的是()A.胚胎工程是對早期胚胎細(xì)胞進(jìn)行多種顯微操作和處理的技術(shù)B.比利時兔產(chǎn)下2種兔的生理學(xué)基礎(chǔ)是比利時兔已經(jīng)受精形成自己的受精卵,安哥拉兔的胚胎可與比利時兔建立正常的生理和組織上的聯(lián)系,在比利時兔體內(nèi)安哥拉兔的遺傳特性不受影響C.材料2中得到的眾多卵細(xì)胞一定需要體外培養(yǎng)D.從材料2中可得出超數(shù)排卵的數(shù)量只與稀釋劑的種類有關(guān)8.(2021山東青島三模)精子載體法(SMGT)是將精子適當(dāng)處理,使其攜帶外源基因,通過人工授精、體外受精等途徑獲得轉(zhuǎn)基因動物的方法。該技術(shù)也是目前所報道的轉(zhuǎn)基因效率最高的方法之一。下圖是某研究所利用SMGT法獲得轉(zhuǎn)基因鼠的示意圖。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.完成過程①時需要將標(biāo)記的外源基因與載體連接,以構(gòu)建基因表達(dá)載體B.將外源基因整合到精子的染色體上,是保證外源基因穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵C.過程②為受精作用,所需卵細(xì)胞應(yīng)為初級卵母細(xì)胞D.進(jìn)行過程④操作前,通常需要用一定的激素處理代孕母體9.(2021山東泰安二模)經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),PVYCP基因位于某種環(huán)狀DNA分子中。將PVYCP基因?qū)腭R鈴薯,使之表達(dá)即可獲得抗PVY病毒的馬鈴薯。下圖表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程,相關(guān)酶切位點如下表所示。下列說法錯誤的是()A.推測Klenow酶的功能與DNA聚合酶類似B.由步驟③獲取的目的基因有1個黏性末端C.步驟④應(yīng)選用的限制酶是BamHⅠ和SmaⅠD.NPTⅡ基因可能是用于篩選的標(biāo)記基因10.(2021山東煙臺一模)研究人員通過基因工程技術(shù)將T細(xì)胞激活,并裝上定位導(dǎo)航裝置CAR(腫瘤嵌合抗原受體),改造成CART細(xì)胞。它能專門識別體內(nèi)腫瘤細(xì)胞,并通過免疫作用釋放多種效應(yīng)因子,高效地殺滅腫瘤細(xì)胞。下列說法錯誤的是()A.CART細(xì)胞免疫療法需要從腫瘤患者血液中分離出T細(xì)胞并純化B.改造T細(xì)胞時可利用病毒載體把CAR基因?qū)隩細(xì)胞C.擴(kuò)增培養(yǎng)CART細(xì)胞時,培養(yǎng)液中需要通入純凈的O2D.CART細(xì)胞經(jīng)體外擴(kuò)增后需通過靜脈回輸?shù)交颊唧w內(nèi),該免疫療法屬于體外基因治療11.(2021山東聯(lián)考)PC1基因表達(dá)能誘導(dǎo)正常鼠成纖維細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。在PC1分子N端(氨基端)有46個氨基酸組成的特異序列,這是許多轉(zhuǎn)錄因子激活靶基因轉(zhuǎn)錄所具有的共同序列特征;在哺乳動物細(xì)胞中驗證了PC1的轉(zhuǎn)錄激活作用,通過缺失突變的基因改造,發(fā)現(xiàn)該作用存在于該分子N端的46個氨基酸組成的特異序列區(qū)域,說明PC1全長分子極大部分的特異功能均由N端的此區(qū)域表達(dá),為制備特異性更高的抗PC146單克隆抗體提供了依據(jù)。下列說法正確的是()A.PC1分子通過激活靶基因轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)鼠成纖維細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化B.擴(kuò)增PC1基因只需用此特異性序列所對應(yīng)的核苷酸序列作引物C.用哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因的方法驗證PC1的轉(zhuǎn)錄激活作用時,必須用受精卵作受體細(xì)胞D.可將PC1基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞制備抗PC146單克隆抗體12.(2021山東濱州一模)構(gòu)建基因表達(dá)載體時,可利用堿性磷酸單酯酶催化載體的5'P變成5'OH,如下圖所示。將經(jīng)過該酶處理的載體與外源DNA連接時,由于5'OH與3'OH不能連接而形成切口(nick)。下列說法錯誤的是()A.經(jīng)堿性磷酸單酯酶處理的載體不會發(fā)生自身環(huán)化B.外源DNA也必須用堿性磷酸單酯酶處理C.T4DNA連接酶可連接黏性末端和平末端D.重組DNA經(jīng)過2次復(fù)制可得到不含nick的子代DNA二、不定項選擇題13.(2021山東臨沂二模)為了檢測藥物X、Y和Z的抗癌效果,在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個孔中加入相同數(shù)量的肺癌細(xì)胞,使其貼壁生長。實驗組分別加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞砜(溶劑)的藥物X、Y或Z,培養(yǎng)過程及結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的是()A.細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染B.計數(shù)時用胃蛋白酶處理貼壁細(xì)胞,使肺癌細(xì)胞脫落下來C.對照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞砜溶劑排除體積和溶劑等無關(guān)變量的影響D.根據(jù)實驗結(jié)果,藥物X的抗癌效果比藥物Y好,藥物Z沒有抗癌作用14.(2021山東濟(jì)寧二模)下圖是我國科學(xué)家制備小鼠孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞的相關(guān)研究流程,其中Oct4基因在維持胚胎干細(xì)胞全能性和自我更新中發(fā)揮極其重要的作用。下列敘述正確的是()A.受精卵發(fā)育過程中桑葚胚前的細(xì)胞都是全能性細(xì)胞B.推測Oct4基因的表達(dá)有利于延緩衰老C.過程③胚胎干細(xì)胞細(xì)胞核大,核仁明顯D.從卵巢中獲取的卵母細(xì)胞可直接用于過程①15.(2021山東德州二模)戊型肝炎病毒是一種RNA病毒,其基因組中ORF2基因編碼的pORF2蛋白是戊型肝炎病毒的表面抗原。我國科研人員利用基因工程,將編碼pORF2的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞,最終從大腸桿菌中提取pORF2蛋白并制成疫苗。下列分析正確的是()A.利用特定引物對病毒RNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增即可獲得目的基因B.戊型肝炎病毒與大腸桿菌的遺傳物質(zhì)相同,所以能實現(xiàn)基因重組C.構(gòu)建基因表達(dá)載體時,需將編碼pORF2的基因與啟動子連接D.利用該方法獲得的疫苗不會誘發(fā)細(xì)胞免疫但可以產(chǎn)生記憶細(xì)胞三、非選擇題16.(2021山東泰安三模)子宮內(nèi)膜異位癥患者常伴有不孕癥狀,患者腹腔液中含有較高濃度的白細(xì)胞介素(IL)。為探明腹腔液中存在的IL對生殖活動的影響,科研人員利用重組人IL1β、IL5、IL6對小鼠體外受精及胚胎早期發(fā)育的影響進(jìn)行了研究?；卮鹣铝袉栴}。(1)實驗過程中,需要從雌性小鼠體內(nèi)獲得多枚卵母細(xì)胞,一般可采取的方法是。用電刺激法刺激雄性小鼠的射精中樞獲得精子,經(jīng)處理后,將精子與成熟的卵母細(xì)胞在HTF基礎(chǔ)培養(yǎng)液中混合培養(yǎng),完成受精。為了培養(yǎng)的細(xì)胞能正常生長繁殖,需要保持培養(yǎng)液的環(huán)境。

(2)將處理后的精子和卵細(xì)胞置于HTF基礎(chǔ)培養(yǎng)液中進(jìn)行不同處理,培養(yǎng)適宜時間后,觀察受精情況,得到的實驗結(jié)果如下圖所示。實驗組的處理方法是。培養(yǎng)后取培養(yǎng)液用顯微鏡觀察,若觀察到,則卵細(xì)胞已完成受精。分析實驗結(jié)果,可得出的結(jié)論是。

(3)若要研究IL對小鼠胚胎早期發(fā)育的影響,則需要利用上述培養(yǎng)液,繼續(xù)觀察統(tǒng)計。

17.(2021山東濟(jì)南聯(lián)考)下圖是利用工程菌(大腸桿菌)生產(chǎn)人生長激素的實驗流程。所用的pBR322質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切割位點各一個,且3種酶切割形成的末端各不相同,而AmpR表示氨芐青霉素抗性基因,TetR表示四環(huán)素抗性基因。請回答下列相關(guān)問題。(1)目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因,也可以是一些具有的因子。①過程所用到的組織細(xì)胞是,過程③的目的是,過程⑤常用處理大腸桿菌細(xì)胞。

(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ對圖中質(zhì)粒進(jìn)行切割,形成的DNA片段種類有種,這些種類的DNA片段中含有完整氨芐青霉素抗性基因的DNA片段和四環(huán)素抗性基因的DNA片段分別有種和種。

(3)如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和質(zhì)粒,完成過程④⑤后(受體大腸桿菌不含AmpR、TetR),將錐形瓶內(nèi)的大腸桿菌先接種到甲培養(yǎng)基上,形成菌落后用無菌牙簽挑取培養(yǎng)基甲上的單個菌落,分別接種到乙和丙兩個培養(yǎng)基的相同位置上,一段時間后,菌落的生長狀況如上圖中乙、丙所示。接種到甲培養(yǎng)基上的目的是篩選的大腸桿菌;接種到乙培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落,能存活的大腸桿菌體內(nèi)導(dǎo)入的是。含有目的基因的大腸桿菌在乙和丙兩個培養(yǎng)基上的生存情況是。

18.(2021山東濰坊二模)DBN9936是國內(nèi)首批獲得農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全證書的玉米品種,對危害玉米的玉米螟等主要鱗翅目害蟲具有良好的抗性,同時能耐受較高濃度的草甘膦(除草劑的有效成分)。其基因操作的受體是玉米品種DBN318,目的基因cry1Ab來源于蘇云金桿菌,其表達(dá)產(chǎn)物能夠?qū)Ｒ挥行У匾种朴衩酌?、棉鈴蟲及黏蟲等玉米鱗翅目害蟲;目的基因epsps來源于土壤農(nóng)桿菌,其表達(dá)產(chǎn)物使轉(zhuǎn)化體可耐受草甘膦除草劑。同樣獲批安全證書的國產(chǎn)轉(zhuǎn)基因玉米品種DBN9858耐除草劑,但不抗蟲,可作為DBN9936的庇護(hù)材料使用。回答下列問題。(1)DBN9936的轉(zhuǎn)化過程之一是將含有epsps基因表達(dá)載體的與玉米DBN318幼胚經(jīng)過程形成的愈傷組織共同培養(yǎng),該過程需在培養(yǎng)基中添加酚類化合物,且在無菌、(填“黑暗”或“光照”)的環(huán)境中進(jìn)行。

(2)利用PCR技術(shù),可以鑒定共同培養(yǎng)后的愈傷組織中是否含有基因epsps。epsps基因的部分序列如下所示。5'——ATGGCT……AGGAAC——3'3'——TACCGA……TCCTTG——5'根據(jù)上述序列應(yīng)制備引物(填序列)對基因epsps進(jìn)行PCR,鑒定后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過程獲得DBN9936幼苗。幼苗移栽至大田前還需“煉苗”,“煉苗”時需逐漸降低濕度、(填“增加”或“降低”)光照強(qiáng)度。

(3)DBN9858和DBN9936兩個玉米品種混合種植,更有利于生態(tài)可持續(xù)發(fā)展。請從生物進(jìn)化的角度闡釋兩個品種混合種植的優(yōu)點:

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(4)玉米為異花傳粉,花粉飄散的距離很遠(yuǎn),容易造成基因漂移,有同學(xué)提出將DBN9936的目的基因cry1Ab整合到玉米受體細(xì)胞的葉綠體基因組中。你同意該同學(xué)的觀點嗎?請說明理由。

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19.(2021山東棗莊模擬)CEA癌胚抗原是在1965年首先從結(jié)腸癌和胚胎組織中提取出的一種腫瘤相關(guān)抗原,是一種酸性糖蛋白。常用CEA抗體檢測血清中的CEA含量,進(jìn)行相關(guān)疾病的臨床診斷。下圖是CEA單克隆抗體的制備流程示意圖。請據(jù)圖回答下列問題。(1)①表示從cDNA文庫中擴(kuò)增獲取大量目的基因的過程,那么A和人體內(nèi)的CEA基因的結(jié)構(gòu)上的區(qū)別是。制備重組質(zhì)粒過程時,為確保目的基因與質(zhì)粒準(zhǔn)確連接,應(yīng)采用圖示中的酶的切割位點。過程②常用法。

(2)誘導(dǎo)融合成為雜交瘤細(xì)胞時,常用的方法有(答出三點即可)。細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要的氣體條件是

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(3)③表示過程,獲得的C細(xì)胞的特點是。

(4)應(yīng)用獲得的單克隆抗體搭載抗癌藥物制成“生物導(dǎo)彈”治療癌癥,具有的優(yōu)點是

。

專題突破練12細(xì)胞工程和基因工程1.D解析:由題意可知,①②過程均為脫分化,都需要植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)的誘導(dǎo),A項正確。單個花藥由花藥壁(2n)及大量花粉(n)等組分組成,因此③過程可能產(chǎn)生二倍體再生植株,而④過程只能產(chǎn)生單倍體植株,B項正確。題圖3種途徑中,利用花粉培養(yǎng)篩選低芥酸油菜新品種(HHGG)的周期短,得到低芥酸油菜新品種(HHGG)的概率高,C項正確。減數(shù)分裂時,發(fā)生聯(lián)會的染色體是同源染色體,而H基因所在的染色體與G基因所在的染色體為非同源染色體,不會發(fā)生聯(lián)會,D項錯誤。2.C解析:由題圖可知,NRP1MAb能夠有效降低腫瘤的體積,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的更顯著,A項正確。滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝集,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合,B項正確。經(jīng)過選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞并不能產(chǎn)生單一的抗體,還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測,最終篩選出只能產(chǎn)生NRP1MAb的雜交瘤細(xì)胞,C項錯誤。由題干可知,NRP1MAb可能與NRP1特異性結(jié)合,阻止NRP1與血管內(nèi)皮生長因子的結(jié)合,從而抑制了腫瘤血管的生成以及腫瘤細(xì)胞的分散和轉(zhuǎn)移,D項正確。3.A解析:利用細(xì)胞膜具有流動性的結(jié)構(gòu)特點,使用電融合法、PEG融合法等方法都能誘導(dǎo)細(xì)胞融合,A項正確。精子獲能后才能與培養(yǎng)成熟的卵母細(xì)胞融合,完成受精作用,B項錯誤。植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁,C項錯誤。單克隆抗體的制備過程中需要進(jìn)行兩次篩選,第一次選擇培養(yǎng)基篩選得到的是雜交瘤細(xì)胞,第二次單孔培養(yǎng)基篩選才能得到產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞,D項錯誤。4.C解析:為提高單克隆抗體制備的成功率,往往需要多次給實驗動物注射同一種抗原,使其產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞,A項正確?？贵w是體液免疫中B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,給實驗動物注射抗原后,相應(yīng)抗體檢測呈陽性,說明發(fā)生了體液免疫,B項正確?；蚬こ讨行栌玫絇CR技術(shù)和抗原—抗體雜交技術(shù),單克隆抗體的制備中沒有用到PCR技術(shù),C項錯誤。每種成熟的B淋巴細(xì)胞表面只有一種抗原受體,只能識別一種抗原,因此每種B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體,D項正確。5.C解析:在動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)中,常采用顯微注射法將目的基因?qū)雱游锏氖芫?A項正確。常用滅活病毒誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合,其原理是病毒表面的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞相互凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合,B項正確。用特定的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)之后,篩選得到的雜交瘤細(xì)胞需經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,多次篩選才能獲得分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞,C項錯誤。經(jīng)過轉(zhuǎn)基因技術(shù)改造小鼠之后,獲得的抗體是由人的抗體基因編碼的,所以稱為人源單克隆抗體,能夠有效解決鼠源單克隆抗體被人體識別為異源蛋白質(zhì)的問題,即具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、抗原性低等特點,D項正確。6.D解析:PCR過程中要用到TaqDNA聚合酶,單克隆抗體制備過程包括細(xì)胞融合和細(xì)胞培養(yǎng),該過程中不需要使用TaqDNA聚合酶,A項錯誤。ADC進(jìn)入腫瘤細(xì)胞是通過胞吞的方式,不需要膜上載體蛋白的協(xié)助,B項錯誤。細(xì)胞毒素殺傷腫瘤細(xì)胞沒有特異性,能與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的是抗體,C項錯誤。溶酶體裂解使其中的蛋白酶等多種水解酶釋放出來,破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),加速腫瘤細(xì)胞凋亡,D項正確。7.B解析:胚胎工程是指對生殖細(xì)胞、受精卵或早期胚胎細(xì)胞進(jìn)行多種顯微操作和處理,然后將獲得的胚胎移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)后代,以滿足人類的各種需求,A項錯誤。由材料1可知,比利時兔已經(jīng)受精形成自己的受精卵,安哥拉兔的胚胎可與比利時兔建立正常的生理和組織上的聯(lián)系,在比利時兔體內(nèi)安哥拉兔的遺傳特性不受影響,因而比利時兔能產(chǎn)下2種兔,B項正確。若從輸卵管中沖出卵細(xì)胞則無需體外培養(yǎng),若是從卵巢中獲得卵母細(xì)胞需體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂Ⅱ中期,因此材料2中得到的眾多卵細(xì)胞不一定需要體外培養(yǎng),C項錯誤。由材料2可知,超數(shù)排卵的數(shù)量與稀釋劑的種類和注射的次數(shù)有關(guān),D項錯誤。8.C解析:完成過程①時需要將標(biāo)記的外源基因與載體連接,以構(gòu)建基因表達(dá)載體,然后將基因表達(dá)載體通過顯微注射的方法導(dǎo)入受體細(xì)胞中,A項正確。將外源基因整合到精子的染色體上,使外源基因可以隨精子染色體的復(fù)制而復(fù)制,是保證外源基因穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵,B項正確。過程②為受精作用,卵細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)至MⅡ期才能進(jìn)行受精,此時為次級卵母細(xì)胞,C項錯誤。進(jìn)行過程④胚胎移植操作前,通常需要用一定的激素對代孕母體進(jìn)行同期發(fā)情處理,D項正確。9.C解析:由題圖可知,步驟②中用Klenow酶處理后,黏性末端變成平末端,說明Klenow酶能催化DNA鏈的合成,從而將DNA片段的黏性末端變成平末端,故Klenow酶的功能與DNA聚合酶類似,A項正確。經(jīng)過步驟③后,目的基因(PVYCP)的一側(cè)是BamHⅠ切割形成的黏性末端,目的基因(PVYCP)的另一側(cè)是平末端,B項正確。由于目的基因只有一個黏性末端,質(zhì)粒是順時針轉(zhuǎn)錄,使用BamHⅠ切割會導(dǎo)致目的基因無法轉(zhuǎn)錄,需選擇一種黏性末端相同的限制酶,另一種選擇平末端限制酶,故步驟④中選用的限制酶是BglⅡ和SmaⅠ,C項錯誤。NPTⅡ基因可能是用于篩選的標(biāo)記基因,D項正確。10.C解析:由題意可知,CART細(xì)胞免疫療法需要從腫瘤患者血液中分離出T細(xì)胞并純化,A項正確。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,可以先將CAR基因整合到逆轉(zhuǎn)錄病毒載體中,再利用病毒的侵染性導(dǎo)入并將CAR基因整合到T細(xì)胞的染色體DNA上,B項正確。在培養(yǎng)動物細(xì)胞(如CART細(xì)胞)時,培養(yǎng)液中需要通入CO2,作用是維持pH的穩(wěn)定,C項錯誤。將一個含有能識別腫瘤細(xì)胞且激活T細(xì)胞的嵌合抗原受體的病毒載體轉(zhuǎn)入T細(xì)胞,把T細(xì)胞改造成CART細(xì)胞,這屬于基因工程技術(shù);故CART細(xì)胞經(jīng)體外擴(kuò)增后需通過靜脈回輸?shù)交颊唧w內(nèi),該免疫療法屬于體外基因治療,D項正確。11.A解析:PC1分子具有激活靶基因轉(zhuǎn)錄的共同序列特征,可誘導(dǎo)正常鼠成纖維細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化,A項正確。目的基因的全序列或其兩側(cè)的序列,可以通過合成一對與模板DNA互補的引物,從而十分有效地擴(kuò)增出含目的基因的DNA片段,故擴(kuò)增PC1基因不能只用此特異性序列所對應(yīng)的核苷酸序列作引物,B項錯誤。用哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因的方法驗證PC1的轉(zhuǎn)錄激活作用時,應(yīng)用成纖維細(xì)胞作受體細(xì)胞,C項錯誤?？贵w是B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,只有骨髓瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體,且PC1基因表達(dá)出來的是抗原,D項錯誤。12.B解析:將經(jīng)過該酶處理的載體與外源DNA連接時,由于5'OH與3'OH不能連接而形成切口(nick),因此經(jīng)堿性磷酸單酯酶處理的載體不會發(fā)生自身環(huán)化,A項正確。外源DNA不能用堿性磷酸單酯酶處理,如用堿性磷酸單酯酶處理,載體與外源DNA連接不能連接形成重組DNA,B項錯誤。DNA連接酶可以連接DNA鏈的3'OH末端和另一條DNA鏈的5'P末端,使二者形成磷酸二酯鍵,從而使相鄰的DNA片段相連,T4DNA連接酶可連接黏性末端和平末端,C項正確。DNA的復(fù)制方式是半保留復(fù)制,重組DNA經(jīng)過2次復(fù)制,可得到2個不含nick的子代DNA,D項正確。13.CD解析:抗生素具有殺菌作用,為防止培養(yǎng)液被細(xì)菌污染,可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素,但其不能殺滅病毒,A項錯誤。要使貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來,需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,B項錯誤。加入等體積的二甲基亞砜溶劑作為空白對照,排除體積和溶劑等無關(guān)變量的影響,C項正確。由題表可知,加入藥物X的癌細(xì)胞個數(shù)是6.7×104個,加入藥物Y的癌細(xì)胞個數(shù)是5.3×105個,說明藥物X的抗癌效果比藥物Y好,加入藥物Z的癌細(xì)胞個數(shù)是8.0×106個,與空白對照相比無抗癌作用,D項正確。14.ABC解析:由于桑葚胚期的細(xì)胞沒有出現(xiàn)分化,桑葚胚前的細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能,是全能性細(xì)胞,A項正確。由題干可知,Oct4基因在維持胚胎干細(xì)胞全能性和自我更新中發(fā)揮極其重要的作用,可推測Oct4基因的表達(dá)有利于延緩衰老,B項正確。過程③胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性,體積較小,細(xì)胞核大,核仁明顯,C項正確。卵巢中取出來的是未成熟的卵細(xì)胞,要培養(yǎng)到減數(shù)分裂Ⅱ中期才能受精,不能直接用于過程①,D項錯誤。15.CD解析:需先將病毒的RNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA,再根據(jù)DNA序列設(shè)計出特異性的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增目的基因,A項錯誤。戊型肝炎病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,大腸桿菌的遺傳物質(zhì)是DNA,B項錯誤?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等,要使目的基因在受體細(xì)胞中特異性表達(dá),在構(gòu)建基因表達(dá)載體時,需將目的基因ORF2與啟動子等調(diào)控組件重組在一起,C項正確。該蛋白疫苗不會侵染細(xì)胞,不產(chǎn)生細(xì)胞免疫,但疫苗屬于抗原,會刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫,可以產(chǎn)生記憶細(xì)胞(記憶B細(xì)胞),D項正確。16.答案(1)向多只雌性小鼠體內(nèi)注射一定量的促性腺激素,從輸卵管中沖出多枚卵母細(xì)胞獲能無菌、無毒(2)向每組HTF基礎(chǔ)培養(yǎng)液中按比例分別添加IL1β、IL5、IL6中的一種,控制IL的質(zhì)量濃度分別為0.05ng/mL、0.5ng/mL、5ng/mL、30ng/mL兩個極體或者雌、雄原核IL能抑制小鼠的受精,且隨質(zhì)量濃度的升高,抑制作用增強(qiáng)(3)不同發(fā)育時期胚胎的發(fā)育情況(成活率)解析:(1)促性腺激素能促進(jìn)超數(shù)排卵,獲得更多的卵母細(xì)胞,實驗過程中,需要從雌性小鼠體內(nèi)獲得多枚卵母細(xì)胞,具體方法是向多只雌性小鼠體內(nèi)注射一定量的促性腺激素,從輸卵管中沖出多枚卵母細(xì)胞。精子經(jīng)獲能處理后才能受精。為了培養(yǎng)的細(xì)胞能正常生長繁殖,需要保持培養(yǎng)液無菌、無毒的環(huán)境。(2)對照組在培養(yǎng)液中不添加IL,實驗組的處理方法是向每組HTF基礎(chǔ)培養(yǎng)液中按比例分別添加IL1β、IL5、IL6中的一種,控制IL的質(zhì)量濃度分別為0.05ng/mL、0.5ng/mL、5ng/mL、30ng/mL。培養(yǎng)后取培養(yǎng)液用顯微鏡觀察,若觀察到兩個極體或者雌、雄原核,則卵細(xì)胞已完成受精。分析實驗結(jié)果,與對照組相比,可得出的結(jié)論是IL能抑制小鼠的受精,且隨質(zhì)量濃度的升高,抑制作用增強(qiáng)。(3)若要研究IL對小鼠胚胎早期發(fā)育的影響,則需要利用上述培養(yǎng)液,繼續(xù)觀察統(tǒng)計不同發(fā)育時期胚胎的發(fā)育情況(成活率)。17.答案(1)調(diào)控作用人垂體組織細(xì)胞將平末端處理為黏性末端Ca2+(2)933(3)含四環(huán)素抗性基因完整的pBR322質(zhì)粒(或含有AmpR、TetR的質(zhì)粒)在丙中能存活,在乙中不能存活解析:(1)目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因,也可以是一些具有調(diào)控作用的因子,垂體產(chǎn)生生長激素,過程①所用到的組織細(xì)胞是人垂體組織細(xì)胞。過程③表示獲取人生長激素基因,需要用限制酶切割,將平末端處理為黏性末端。過程⑤將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌,常用Ca2+處理大腸桿菌細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。(2)假設(shè)PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ3種酶的切割位點分別用1、2、3表示。一種酶分別酶切時,一共可以得到3種片段1→1、2→2、3→3;任意2種酶分別同時酶切時,可得到1→2、2→1、2→3、3→2、1→3、3→1共6種片段;3種酶同時酶切時,可得到1→2、2→3、3→1共3種片段。綜上所述,共計9種不同的片段(1→1、1→2、1→3、2→1、2→2、2→3、3→1、3→2、3→3)。其中片段3→2、2→2、3→3共3種含有完整氨芐青霉素抗性基因,片段2→1、2→2、1→1共3種含有完整四環(huán)素抗性基因。(3)用限制酶PstⅠ切割目的基因和質(zhì)粒,會破壞AmpR(氨芐青霉素抗性基因),但TetR(四環(huán)素抗性基因)沒有被破壞。在甲培養(yǎng)基