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高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1山東省濰坊市安丘市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月月考試題一、單項(xiàng)選擇題(共15小題,每題2分)1.藍(lán)莓酒和藍(lán)莓醋被稱為“液體黃金”“口服化妝品”等。下圖是以鮮藍(lán)莓為原料天然發(fā)酵制作藍(lán)莓酒和藍(lán)莓醋的過(guò)程簡(jiǎn)圖。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.發(fā)酵過(guò)程中的菌種不需要專門接種,先清洗后去梗是為了較少雜菌污染B.過(guò)程③在氧氣、糖源都充足條件下可直接發(fā)酵為藍(lán)莓醋C.過(guò)程③、④中主要發(fā)酵菌種的細(xì)胞結(jié)構(gòu)不同,后者在過(guò)程⑤中已經(jīng)失去了發(fā)酵能力D.過(guò)程④⑤發(fā)酵條件不同,過(guò)程④所需的最適溫度高于過(guò)程⑤〖答案〗D〖祥解〗直接利用原材料中天然存在的微生物,或利用前一次發(fā)酵保存下來(lái)的面團(tuán)、鹵汁等發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)一般稱為傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主,通常是家庭式或作坊式的?!驹斘觥緼、由題意可知,該過(guò)程是天然發(fā)酵制作藍(lán)莓酒和藍(lán)莓醋的過(guò)程,所以發(fā)酵過(guò)程中的菌種不需要專門接種,先清洗后去梗是為了較少雜菌污染,A正確;B、過(guò)程③屬于果醋發(fā)酵,需要醋酸菌參與,醋酸菌在氧氣、糖源充足條件下可直接發(fā)酵為藍(lán)莓醋,B正確;CD、過(guò)程④藍(lán)莓酒制作的菌種是來(lái)源于藍(lán)莓上的野生酵母菌,為真核生物,最適溫度為18~30℃,需要無(wú)氧條件,過(guò)程⑤屬于藍(lán)莓醋發(fā)酵,所需菌種是醋酸菌,為原核生物,最適溫度為30~35℃,需要有氧條件,兩個(gè)發(fā)酵菌種的細(xì)胞結(jié)構(gòu)不同,且過(guò)程④所需的最適溫度低于過(guò)程⑤,⑤醋酸發(fā)酵產(chǎn)生的醋酸使pH下降,過(guò)程⑤中的主要發(fā)酵菌種酵母菌失去發(fā)酵能力,C正確,D錯(cuò)誤。故選D。2.聚羥基脂肪酸酯(PHA)是由嗜鹽細(xì)菌合成一種胞內(nèi)聚酯,它具有類似于合成塑料的理化特性,且廢棄后易被生物降解,可用于制造無(wú)污染的“綠色塑料”。某科研團(tuán)隊(duì)擬從含鹽量高的餐廚垃圾滲瀝液處理系統(tǒng)中篩選分離出PHA合成能力較強(qiáng)的耐鹽菌株,流程圖如下。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()(注:乙培養(yǎng)基中加入尼羅紅,尼羅紅是細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存的脂類物質(zhì)的熒光染色劑,在紫外光的照射下可顯示紅色。)A.配制甲培養(yǎng)基時(shí)可適當(dāng)提高培養(yǎng)基的鹽濃度,接種后應(yīng)置于搖床中振蕩培養(yǎng)B.接種前,為檢測(cè)培養(yǎng)基是否滅菌徹底,應(yīng)先將空白培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時(shí)間C.①過(guò)程是擴(kuò)大培養(yǎng),②過(guò)程中應(yīng)挑選有紅色熒光的菌落進(jìn)行培養(yǎng)D.可用誘變或基因工程方法選育PHA合成能力更強(qiáng)的耐鹽菌株〖答案〗C〖祥解〗1、培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì);根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上,培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。2、微生物常見的接種的方法:①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板,接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分,微生物往往連在一起生長(zhǎng),隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。【詳析】A、本實(shí)驗(yàn)的目的是從含鹽量高的餐廚垃圾滲瀝液處理系統(tǒng)中篩選分離出PHA合成能力較強(qiáng)的耐鹽菌株,故配制甲培養(yǎng)基時(shí)可適當(dāng)提高培養(yǎng)基的鹽濃度,接種后應(yīng)置于搖床中振蕩培養(yǎng),提高溶解氧含量,A正確;B、接種前,為檢測(cè)培養(yǎng)基是否滅菌徹底,應(yīng)先將空白培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時(shí)間,觀察是否有菌落產(chǎn)生,B正確;C、①過(guò)程是選擇培養(yǎng),②過(guò)程為擴(kuò)大培養(yǎng),擴(kuò)大培養(yǎng)之后,通過(guò)氣相色譜法挑選有紅色熒光的菌落進(jìn)行培養(yǎng),C錯(cuò)誤;D、誘變育種的原理是基因突變,可用誘變或基因工程方法選育PHA合成能力更強(qiáng)的耐鹽菌株,D正確。故選C。3.在微生物培養(yǎng)的過(guò)程中,需要通過(guò)選擇培養(yǎng)或鑒別培養(yǎng)的方法來(lái)篩選出目標(biāo)菌種,下列與之相關(guān)的敘述中不正確的是()A.纖維素分解菌能夠分解剛果紅染料,從而使菌落周圍出現(xiàn)透明圈B.尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘保瑥亩狗蛹t指示劑變紅C.在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株D.在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的乳酸菌菌落周圍會(huì)出現(xiàn)“溶鈣圈”〖答案〗A【詳析】纖維素分解菌能夠分解纖維素,在培養(yǎng)基中加入剛果紅,可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被分解后,紅色復(fù)合物不能形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,A錯(cuò)誤;尿素分解菌能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?,使培養(yǎng)基呈堿性,從而通使酚紅指示劑變紅,B正確;在培養(yǎng)基中加入抗生素能夠篩選出具有相應(yīng)抗性的菌株,C正確;在含有碳酸鈣的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的乳酸菌菌落周圍會(huì)出現(xiàn)“溶鈣圈”,D正確。4.下列關(guān)于發(fā)酵工程及其應(yīng)用的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是()A.發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié),要嚴(yán)格控制發(fā)酵條件B.啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中,酒精的產(chǎn)生和積累主要在主發(fā)酵階段完成C.微生物農(nóng)藥利用微生物或其代謝物來(lái)防治病蟲害,是生物防治的重要手段D.通過(guò)發(fā)酵獲得大量微生物菌體,從菌體中提取的單細(xì)胞蛋白可作為動(dòng)物飼料〖答案〗D〖祥解〗1、發(fā)酵工程一般包括菌種的選育,擴(kuò)大培養(yǎng),培養(yǎng)基的配制、滅菌,接種,發(fā)酵,產(chǎn)物的分離、提純等方面。2、微生物含有豐富的蛋白質(zhì)。以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料,通過(guò)發(fā)酵獲得了大量的微生物菌體,即單細(xì)胞蛋白,用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料,能使家畜、家禽增重快,產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋量顯著提高?!驹斘觥緼、發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。在發(fā)酵過(guò)程中,要隨時(shí)檢測(cè)培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等,以了解發(fā)酵進(jìn)程,A正確;B、啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中,發(fā)酵過(guò)程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段,酒精的產(chǎn)生和積累主要在主發(fā)酵階段完成,B正確;C、微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來(lái)防治病蟲害的,微生物農(nóng)藥作為生物防治的重要手段,將在農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展方面發(fā)揮越來(lái)越重要的作用,C正確;D、單細(xì)胞蛋白是指利用發(fā)酵工程獲得的大量微生物菌體,可作為食品添加劑,也可制成微生物飼料,D錯(cuò)誤。故選D。5.研究發(fā)現(xiàn),生長(zhǎng)素能夠維持?jǐn)M南芥bZIP59蛋白的穩(wěn)定性,并增強(qiáng)其與LBD形成復(fù)合物的能力,bZIP59-LBD復(fù)合體直接靶向FAD-BD基因,并促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄,這有助于愈傷組織的形成。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.生長(zhǎng)素通過(guò)調(diào)控植物細(xì)胞的基因表達(dá)而影響植物細(xì)胞全能性的表達(dá)B.植物是自養(yǎng)型生物,培養(yǎng)基中不需要添加有機(jī)碳源C.培養(yǎng)基中添加激素的種類和含量會(huì)影響植物細(xì)胞發(fā)育的方向D.脫分化期間一般不需要光照,再分化時(shí)需要適當(dāng)光照誘導(dǎo)葉綠素產(chǎn)生〖答案〗B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性,其過(guò)程為:離體的植物組織,器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織(高度液泡化,無(wú)定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞組成的排列疏松、無(wú)規(guī)則的組織),愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化過(guò)程形成胚狀體,進(jìn)一步發(fā)育成為植株。【詳析】A、生長(zhǎng)素通過(guò)促進(jìn)bZlP59-LBD復(fù)合體的形成促進(jìn)FAD-BD基因的轉(zhuǎn)錄,這有助于愈傷組織形成。愈傷組織是一團(tuán)未分化的細(xì)胞,全能性較強(qiáng),說(shuō)明生長(zhǎng)素通過(guò)調(diào)控植物細(xì)胞的基因表達(dá)而影響植物細(xì)胞全能性的表達(dá),A正確;B、植物組織培養(yǎng)過(guò)程中需要加入蔗糖作為有機(jī)碳源,這是因?yàn)槲葱纬扇~綠素的培養(yǎng)物(如愈傷組織)不能進(jìn)行光合作用,B錯(cuò)誤;C、生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例適中有助于愈傷組織的形成,再分化過(guò)程中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例較高時(shí)有利于生根,較低時(shí)有利于芽的發(fā)育,故培養(yǎng)基中添加激素的種類和含量會(huì)影響植物細(xì)胞發(fā)育的方向,C正確;D、脫分化期間一般不需要光照,再分化時(shí)需要適當(dāng)光照,以誘導(dǎo)葉綠素產(chǎn)生,D正確。故選B。6.三白草和魚腥草二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被中醫(yī)用作“藥對(duì)”。研究者欲利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍(兩種或兩種以上藥物配合使用)提前到雜種細(xì)胞,并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn),操作如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是()A.①過(guò)程可利用鹽酸和酒精混合液(1:1)配制的解離液來(lái)完成B.②過(guò)程通常在低滲溶液中采用PEG融合法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C.雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過(guò)程中,其特有功能喪失,但結(jié)構(gòu)不變D.圖中所示的生產(chǎn)流程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性,但未體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性〖答案〗D〖祥解〗圖示為三白草和魚腥草體細(xì)胞雜交過(guò)程,其中①為去除細(xì)胞壁,②為原生質(zhì)體融合,③脫分化形成愈傷組織,④提取代謝產(chǎn)物?!驹斘觥緼、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,因此過(guò)程①三白草和魚腥草體細(xì)胞雜交過(guò)程中要利用纖維素酶和果膠酶水解細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體,鹽酸和酒精混合液(1:1)配制的解離液會(huì)殺死細(xì)胞,A錯(cuò)誤;B、過(guò)程②通常在等滲或略高滲溶液中,不能用低滲溶液,不然原生質(zhì)體會(huì)吸水漲破;可以采用化學(xué)法(PEG融合法)或物理法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,B錯(cuò)誤;C、植物細(xì)胞的脫分化就是讓已分化的細(xì)胞,經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后,失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能,而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只募?xì)胞——愈傷組織的過(guò)程,因此雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過(guò)程中,其特有功能喪失,結(jié)構(gòu)也發(fā)生改變,C錯(cuò)誤;D、圖中過(guò)程②原生質(zhì)體融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性;將雜種細(xì)胞培育成一個(gè)完整的新的植物體的過(guò)程才體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性,故圖中所示的生產(chǎn)流程沒(méi)有體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性,D正確。故選D。7.草莓是無(wú)性繁殖的作物,它感染的病毒很容易傳播給后代。病毒在草莓體內(nèi)逐年積累,會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)量降低,品質(zhì)變差。下圖是育種工作者選育高品質(zhì)草莓的流程圖。下列說(shuō)法正確的是()A.需要用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%次氯酸鈉溶液對(duì)甲進(jìn)行滅菌B.需要用不同的方法對(duì)兩種選育方式的效果進(jìn)行鑒定C.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,更容易受到培養(yǎng)條件和誘變因素的影響而產(chǎn)生定向突變D.方法一中選擇甲作為組織培養(yǎng)材料的原因是該部位細(xì)胞的分生能力強(qiáng)〖答案〗B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術(shù)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等,在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。其具體流程為:接種外植體→誘導(dǎo)愈傷組織→誘導(dǎo)生芽→誘導(dǎo)生根→移栽成活。作物脫毒材料:分生區(qū)(如莖尖、芽尖)細(xì)胞;植物脫毒方法:進(jìn)行組織培養(yǎng);結(jié)果:形成脫毒苗。外植體用酒精消毒30s,然后立即用無(wú)菌水清洗2~3次;再用次氯酸鈉溶液處理30min后,立即用無(wú)菌水清洗2~3次。【詳析】A、方法一中甲經(jīng)A過(guò)程可產(chǎn)生無(wú)病毒苗,可推知,甲為莖尖、芽尖等分生組織,A為植物組織培養(yǎng)技術(shù),進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí),需要用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%次氯酸鈉溶液對(duì)外植體甲進(jìn)行消毒而非滅菌,A錯(cuò)誤;B、無(wú)病毒苗應(yīng)根據(jù)植株性狀檢測(cè),不需要接種病毒,抗病毒苗需要通過(guò)病毒接種的方式來(lái)判斷選育方法的效果,因此需要用不同的方法對(duì)兩種選育方式的效果進(jìn)行鑒定,B正確;C、突變是不定向的,C錯(cuò)誤;D、方法一中選擇甲作為組織培養(yǎng)材料的原因是該部位細(xì)胞的含毒量少,甚至不帶毒,誘導(dǎo)更容易獲得脫毒苗,D錯(cuò)誤。故選B。8.科學(xué)家將C-Myc(原癌基因)、KI4(抑癌基因)、Sox2和Oct4等四種關(guān)鍵基因利用病毒轉(zhuǎn)入高度分化的小鼠成纖維細(xì)胞內(nèi),獲得iPS細(xì)胞,iPS細(xì)胞在適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)條件下,可以定向分化成各種細(xì)胞。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.轉(zhuǎn)入c-MyC、KIf4、Sox2和Oct4等的作用是誘導(dǎo)已分化細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只?xì)胞B.iPS細(xì)胞的分化程度與胚胎干細(xì)胞最接近C.在培養(yǎng)過(guò)程中,iPS細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)需要進(jìn)行傳代培養(yǎng)D.由題干可知所運(yùn)用的病毒需要進(jìn)行滅活處理〖答案〗D〖祥解〗科學(xué)家已嘗試采用多種方法來(lái)制備iPS細(xì)胞,包括借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中,直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來(lái)誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)的,后來(lái)發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞?!驹斘觥緼、由題意可知,iPS細(xì)胞在適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)條件下,可以定向分化成各種細(xì)胞,轉(zhuǎn)入c-MyC、KIf4、Sox2和Oct4等的作用是獲得iPS細(xì)胞,所以轉(zhuǎn)入c-MyC、KIf4、Sox2和Oct4等的作用是誘導(dǎo)已分化細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只?xì)胞,A正確;B、iPS細(xì)胞是類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞,即iPS細(xì)胞的分化程度與胚胎干細(xì)胞最接近,B正確;C、動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng),在培養(yǎng)過(guò)程中,iPS細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)需要進(jìn)行傳代培養(yǎng),C正確;D、由題意可知,獲得iPS細(xì)胞過(guò)程中病毒的作用是將c-MyC、KIf4、Sox2和Oct4轉(zhuǎn)入高度分化的小鼠成纖維細(xì)胞內(nèi),若病毒滅活就使病毒失去感染能力,因此運(yùn)用的病毒不需要進(jìn)行滅活處理,D錯(cuò)誤。故選D。9.尼帕病毒是一種新型人獸共患病毒(RNA病毒),能引起廣泛的血管炎,感染者有發(fā)熱、嚴(yán)重頭痛、腦膜炎等癥狀,給人及動(dòng)物帶來(lái)嚴(yán)重危害??蒲腥藛T以獼猴為實(shí)驗(yàn)材料來(lái)生產(chǎn)抗尼帕病毒的單克隆抗體,實(shí)驗(yàn)流程如圖所示,已知B淋巴細(xì)胞的基因型為AA、骨髓瘤細(xì)胞的基因型為BB,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.可用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合B.兩兩融合后的融合細(xì)胞可能存在的基因型是AABB、AA、BBC.篩選1過(guò)程中未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞核融合的細(xì)胞會(huì)死亡D.篩選2為對(duì)篩選出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)〖答案〗B〖祥解〗1、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法。2、單克隆抗體制備過(guò)程中涉及兩次篩選:第一次篩選,用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選:在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng);第二次篩選,是對(duì)經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞?!驹斘觥緼、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法,A正確;B、細(xì)胞的融合具有隨機(jī)性,結(jié)合題干“已知B淋巴細(xì)胞的基因型為AA、骨髓瘤細(xì)胞的基因型為BB”可知,兩兩融合后的融合細(xì)胞可能存在的基因型是AABB、AAAA、BBBB,B錯(cuò)誤;C、篩選1為第一次篩選,用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選:在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng),C正確;D、篩選2為第二次篩選,是對(duì)經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞,D正確。故選B。10.研究發(fā)現(xiàn);細(xì)胞膜上的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)與轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)結(jié)合,可將鐵元素運(yùn)輸至胞內(nèi)。腫瘤細(xì)胞內(nèi)鐵元素濃度遠(yuǎn)高于正常細(xì)胞。科學(xué)家利用單克隆抗體技術(shù),研制出鼠源性抗TfR抗體,可用于治療小鼠腫瘤。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.腫瘤細(xì)胞表面TfR的表達(dá)量多于正常細(xì)胞B.抗TfR抗體通過(guò)阻止Tf與TfR的結(jié)合來(lái)抑制鐵元素的攝取,抑制腫瘤細(xì)胞增長(zhǎng)C.制備單克隆抗體時(shí)需給小鼠接種TfR,并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞D.經(jīng)特定選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞可直接注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖〖答案〗D〖祥解〗單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備,雜交瘤抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體,又能無(wú)限增殖。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對(duì)一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體?!驹斘觥緼、題意顯示,細(xì)胞膜上轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)與轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)結(jié)合,可將鐵元素運(yùn)輸至胞內(nèi),而腫瘤細(xì)胞內(nèi)鐵元素濃度遠(yuǎn)高于正常細(xì)胞,據(jù)此可推測(cè),腫瘤細(xì)胞表面TfR的表達(dá)量多于正常細(xì)胞,A正確;B、抗TfR抗體通過(guò)阻止Tf與TfR的結(jié)合來(lái)抑制鐵元素的攝取,進(jìn)而降低腫瘤細(xì)胞內(nèi)鐵元素的含量,抑制腫瘤細(xì)胞增長(zhǎng),B正確;C、制備單克隆抗體時(shí)需給小鼠接種TfR,TfR作為抗原能刺激小鼠發(fā)生特異性免疫反應(yīng),因而,可從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞,為單克隆抗體的制備作準(zhǔn)備,C正確;D、經(jīng)特定選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)一步篩選才能獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,而后才可注射到小鼠腹腔內(nèi)大量培養(yǎng),D錯(cuò)誤。故選D。11.一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇,一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體,由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi),可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗,也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說(shuō)法正確的是()A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大B.單抗制備過(guò)程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C.利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況〖答案〗D〖祥解〗根據(jù)題干信息“一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇,一個(gè)抗決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體”,非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72上有多個(gè)抗原決定簇,所以可以刺激機(jī)體產(chǎn)生多種抗體。每個(gè)抗原決定簇刺激產(chǎn)生的抗體是單抗。【詳析】A、單抗的制作需要篩選,而多抗不需要篩選,抗原純度越高,產(chǎn)生的多抗純度越高,因此原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響小,A錯(cuò)誤;B、單抗制備過(guò)程中通常將經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,B錯(cuò)誤;C、非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72上有多種抗原決定簇,一個(gè)抗決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體,所以向小鼠體內(nèi)注入p72后,可以刺激小鼠產(chǎn)生多種抗p72的單抗,C錯(cuò)誤;D、p72部分結(jié)構(gòu)改變只改變了部分抗原決定簇,因此由這部分抗原決定簇產(chǎn)生的抗體失效,但由于還存在由其他抗原決定簇刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體,所以多抗仍有效,D正確。故選D。12.科學(xué)家將大熊貓的體細(xì)胞和兔子的去核卵母細(xì)胞構(gòu)建成重組細(xì)胞,使重組細(xì)胞成功發(fā)育為囊胚,標(biāo)志著異種核質(zhì)相容問(wèn)題得到解決,異種克隆大熊貓邁過(guò)了第一道“坎”。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.獲取卵母細(xì)胞前,用含促性腺激素的飼料飼喂兔子可使其超數(shù)排卵B.可通過(guò)梯度離心法去除兔子卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核C.可將大熊貓的體細(xì)胞直接注入兔子的去核卵母細(xì)胞D.選用的去核卵母細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)已成熟,可支持重組細(xì)胞發(fā)育成胚胎〖答案〗A〖祥解〗動(dòng)物克隆技術(shù)即核移植技術(shù),利用處于MII期卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)使已分化的細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力?!驹斘觥緼、促性腺激素的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),用含促性腺激素的飼料飼喂兔子會(huì)使其失活,A錯(cuò)誤;B、可通過(guò)梯度離心、紫外線短時(shí)間照射等方法去除兔子卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核,B正確;C、可將大熊貓的體細(xì)胞直接注入兔子的去核卵母細(xì)胞,然后通過(guò)電融合法使兩細(xì)胞融合,C正確;D、選用的去核卵母細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)已成熟,含有使已分化的細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力的物質(zhì),可支持重組細(xì)胞發(fā)育成胚胎,D正確。故選A。13.“DNA粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)步驟是:研磨→去雜質(zhì)→析出→鑒定:某研究小組欲探究不同的去雜質(zhì)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()去雜質(zhì)方式沉淀質(zhì)量(g)DNA濃度(ng/μL)OD260/OD280二苯胺鑒定離心0.06881.51.53藍(lán)色4℃冰箱靜置0.1028336.41.41(注:OD260與OD280的比值可檢查DNA純度。純DNA的OD260/OD280為1.8,當(dāng)存在蛋白質(zhì)污染時(shí),這一比值會(huì)明顯降低)A.豬肝和菜花均可作為提取DNA的材料B.對(duì)研磨液進(jìn)行離心是為了加速DNA的沉淀C.離心法可以獲得更高純度的DNAD.析出時(shí)的離心轉(zhuǎn)速明顯高于去雜質(zhì)時(shí)〖答案〗B〖祥解〗DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是:①DNA的溶解性,DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同,利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出,從而達(dá)到分離的目的;②DNA不溶于酒精溶液,細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精,利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離;③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色?!驹斘觥緼、DNA粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)選擇富含DNA的材料,豬肝和菜花均可作為提取DNA的材料,A正確;BC、離心研磨液的目的是加速沉淀,離心能夠加速細(xì)胞膜、細(xì)胞器、一些較大雜質(zhì)的沉淀,離心法可以獲得更高純度的DNA,B錯(cuò)誤,C正確;D、據(jù)表可知,離心時(shí)DNA濃度是81.5,4℃冰箱靜置是336.4,說(shuō)明靜置時(shí)蛋白質(zhì)含量較多,沉淀質(zhì)量離心時(shí)是0.068,4℃冰箱靜置是0.1028,比較可知DNA的沉淀質(zhì)量小,故析出時(shí)的離心轉(zhuǎn)速明顯高于去雜質(zhì)時(shí),D正確。故選B。14.斑點(diǎn)印跡雜交是一種簡(jiǎn)單的DNA分子雜交技術(shù),其技術(shù)流程如圖。據(jù)此分析,下列說(shuō)法正確的是()A.放射性自顯影技術(shù)可顯示原培養(yǎng)皿中含目的基因的菌落位置B.p和q片段能夠雜交的主要原因是兩單鏈的堿基排列順序相同C.p和q片段的雜交雙鏈區(qū)域形成過(guò)程中有氫鍵和磷酸二酯鍵生成D.斑點(diǎn)印跡雜交技術(shù)可用于檢測(cè)目的基因是否在受體細(xì)胞中成功表達(dá)〖答案〗A〖祥解〗目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)?!驹斘觥緼、斑點(diǎn)印跡雜交技術(shù)是將目的基因片段用放射性同位素或熒光進(jìn)行標(biāo)記,與受體細(xì)胞的基因組DNA進(jìn)行雜交,如果目的基因整合到受體細(xì)胞上,那么標(biāo)記基因就會(huì)與其結(jié)合,通過(guò)放射性自顯影就可以檢測(cè)出整合有目的基因的受體細(xì)胞。所以該技術(shù)可以顯示原培養(yǎng)基中含目的基因的菌落位置,A正確;B、p和q雜交是因?yàn)閮蓡捂湹膲A基可以互補(bǔ)配對(duì),B錯(cuò)誤;C、在雜交過(guò)程中,雙鏈區(qū)域會(huì)有氫鍵形成,但不會(huì)形成磷酸二酯鍵,C錯(cuò)誤;D、斑點(diǎn)印跡雜交是一種簡(jiǎn)單的DNA分子雜交技術(shù),該技術(shù)可以檢測(cè)目的基因的導(dǎo)入和轉(zhuǎn)錄,但無(wú)法用于檢測(cè)目的基因是否在受體細(xì)胞中表達(dá),目的基因是否在受體細(xì)胞中表達(dá)常用抗原-抗體雜交法,D錯(cuò)誤。故選A。15.目的基因和載體如果用同一種限制酶處理,連接時(shí)會(huì)出現(xiàn)正反接的情況,為鑒定篩選出的表達(dá)載體中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR后,結(jié)合電泳技術(shù)鑒定,圖示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置,其中目的基因?yàn)殚L(zhǎng)度300bp的片斷。下列有關(guān)說(shuō)法不正確的是()A.PCR退火溫度不宜太低,避免引物錯(cuò)配和模板鏈形成雙鏈B.電泳條帶遷移的位置和速度與DNA分子的大小、帶電量和構(gòu)象有關(guān)C.選取引物甲丙,擴(kuò)增出450bp長(zhǎng)度片斷時(shí),可以說(shuō)明目的基因正接D.選取引物甲乙,擴(kuò)增出400bp長(zhǎng)度片斷時(shí),可以說(shuō)明目的基因反接〖答案〗C〖祥解〗PCR是利用 DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按 堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合,再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶 沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈?;诰酆厦钢圃斓腜CR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備,能在變性溫度,復(fù)性溫度,延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。【詳析】A、退火是在高溫解旋后降低溫度讓引物與模板鏈結(jié)合,退火溫度不宜太低,避免引物錯(cuò)配和模板鏈形成雙鏈,A正確;B、電泳條帶遷移的位置和速度與DNA分子的大小、帶電量和構(gòu)象有關(guān),如電泳一段時(shí)間后,較大的DNA分子遷移距離小,離加樣孔近,而較小的DNA分子遷移距離大,離加樣孔遠(yuǎn),B正確;C、由于使用的引物是甲和丙,沒(méi)有與基因相應(yīng)位置配對(duì),因此不管基因正接還是反接,均為450bp,C錯(cuò)誤;D、選取引物甲乙,擴(kuò)增出400bp長(zhǎng)度片斷時(shí),可以說(shuō)明目的基因反接,若正接的話,擴(kuò)增出來(lái)的長(zhǎng)度應(yīng)該是100bp,D正確。故選C。二、不定項(xiàng)項(xiàng)選擇題(共5小題,每題3分)16.廚余垃圾是指居民日常生活及食品加工、飲食服務(wù)、單位供餐等活動(dòng)中產(chǎn)生的垃圾。廢液中的淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì),易腐爛變質(zhì),滋生病原微生物等。若處理不當(dāng),可能造成嚴(yán)重的污染。圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌組合可以將有機(jī)廚余垃圾迅速分解成水和二氧化碳,減輕環(huán)境污染。為制備分解有機(jī)廚余垃圾的微生物菌劑,某科研小組對(duì)兩菌種進(jìn)行了最佳接種量比的探究實(shí)驗(yàn),并得出下圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面敘述錯(cuò)誤的是()A.巨大芽孢桿菌生長(zhǎng)過(guò)程中需要氮源,圓褐固氮菌生長(zhǎng)過(guò)程中不需要氮源B.要統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量可采用平板劃線法和稀釋涂布平板法C.將1mL菌液稀釋100倍,在3個(gè)平板上分別接0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36.據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為3.9×107D.處理該類廚余垃圾廢液,兩菌種的最佳接種量比為1:1〖答案〗ABD〖祥解〗微生物接種的方法很多,最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。若要對(duì)微生物進(jìn)行取樣計(jì)數(shù),接種方法只能是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)?!驹斘觥緼、微生物的生長(zhǎng)需要碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等物質(zhì),巨大芽孢桿菌生長(zhǎng)過(guò)程中需要氮源,圓褐固氮菌為自生固氮菌,其生長(zhǎng)過(guò)程中不需要在培養(yǎng)基中添加氮源,但其需要氮源,A錯(cuò)誤;B、平板劃線法不能用于計(jì)數(shù),統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量可采用稀釋涂布平板法,B錯(cuò)誤;C、將1mL菌液稀釋100倍,在3個(gè)平板上分別接0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為(42+39+36)÷3÷0.1×100×1000=3.9×107,C正確;D、根據(jù)圖示可知,兩菌種的接種量比為1∶1時(shí)比兩菌種的接種量比為2∶1時(shí)效果好,但由于該實(shí)驗(yàn)設(shè)置的兩菌種的接種量比例的組數(shù)過(guò)少,所以無(wú)法判斷處理該類廚余垃圾廢液的兩菌種的最佳接種量比,D錯(cuò)誤。故選ABD。17.某科研小組以感染菊花矮化類病毒(CSVd)的菊花品種“寒小白”為實(shí)驗(yàn)材料,研究不同培養(yǎng)方式對(duì)莖尖誘導(dǎo)分化成活率和脫毒效果的影響,結(jié)果如下表,下圖是對(duì)不同試管苗進(jìn)行RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄PCR)后的電泳示意圖(引物根據(jù)CSVd的基因序列設(shè)計(jì)),下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()處理方法樣本存活數(shù)CSVd脫毒率長(zhǎng)度<0.3mm的莖尖分生組織培養(yǎng)659.78長(zhǎng)度0.3-0.7mm的莖尖分生組織培養(yǎng)7522.6長(zhǎng)度0.7-1.0mm的莖尖分生組織培養(yǎng)906熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)7136.62病毒唑結(jié)合莖尖培養(yǎng)7146.48A.實(shí)驗(yàn)中所用莖尖大小與莖尖誘導(dǎo)成活率正相關(guān),與脫毒效果反相關(guān)B.試管苗2、5尚未脫毒成功,3、4已成功脫去CSVd病毒C.RT-PCR技術(shù)中用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA連接酶、熱穩(wěn)定DNA聚合酶D.熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)和病毒唑結(jié)合莖尖培養(yǎng)的脫毒率均優(yōu)于單獨(dú)的莖尖分生組織培養(yǎng)〖答案〗CD〖祥解〗由表格數(shù)據(jù)可知,長(zhǎng)度0.7-1.0mm的莖尖分生組織培養(yǎng)樣本存活數(shù)最大,長(zhǎng)度<0.3mm的莖尖分生組織培養(yǎng)樣本存活數(shù)最小。而CSVd脫毒率長(zhǎng)度0.7-1.0mm的莖尖分生組織培養(yǎng)最小,長(zhǎng)度<0.3mm的莖尖分生組織培養(yǎng)最大。綜合兩方面數(shù)據(jù),病毒唑結(jié)合莖尖培養(yǎng)樣本存活數(shù)、CSVd脫毒率都較大?!驹斘觥緼、由表格數(shù)據(jù)看出,莖尖大小與莖尖誘導(dǎo)成活率正相關(guān),與脫毒效果反相關(guān),A正確;B、2、5電泳結(jié)果顯示與陽(yáng)性對(duì)照相同的結(jié)果,3,4則沒(méi)有,說(shuō)明3、4成功脫毒,2、5未能脫毒,B正確;C、RT-PCR技術(shù)中需要先將RNA逆轉(zhuǎn)錄形成DNA,在進(jìn)行DNA擴(kuò)增,該過(guò)程用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、熱穩(wěn)定DNA聚合酶,不需要DNA連接酶,C錯(cuò)誤;D、由表格數(shù)據(jù)可知,熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)和病毒唑結(jié)合莖尖培養(yǎng)的脫毒率均低于長(zhǎng)度<0.3mm的莖尖分生組織培養(yǎng),D錯(cuò)誤。故選CD。18.抗生素I-IV均可治療黃色葡萄球菌(Sau)引起的肺炎,為選出最佳療效的抗生素,研究者將分別含等劑量抗生素的四張大小相同的濾紙片置于Sau均勻分布的平板培養(yǎng)基上,在適宜條件下培養(yǎng)48h,結(jié)果如圖。下列相關(guān)敘述正確的是()A.配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)基的pH調(diào)至微酸性B.測(cè)量菌落和抑菌圈直徑時(shí)應(yīng)直接在皿蓋上測(cè)量C.抗生素IV治療Sau感染引起的肺炎效果最好D.抑菌圈中出現(xiàn)的菌落可能是Sau發(fā)生了基因突變〖答案〗CD〖祥解〗培養(yǎng)基的概念及營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成(1)概念:人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出的供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì);(2)營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成:各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽,此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。【詳析】A、該培養(yǎng)基培養(yǎng)的是金黃色葡萄球菌,屬于細(xì)菌,因此,在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性,A錯(cuò)誤;B、測(cè)量菌落和抑菌圈直徑時(shí)應(yīng)直接在皿底上測(cè)量,這樣可以避免雜菌污染,B錯(cuò)誤;C、結(jié)合圖示可知,抗生素IV獲得的抑菌圈最大,因而治療Sau感染引起的肺炎效果最好,C正確;D、抑菌圈中出現(xiàn)的菌落可能是Sau發(fā)生了基因突變,因而具有了對(duì)抗生素的抗性,D正確。故選CD。19.從中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢組織分離、培養(yǎng)的CHO細(xì)胞是生物制品領(lǐng)域最主要的生產(chǎn)細(xì)胞,廣泛應(yīng)用于各種藥物蛋白的生產(chǎn)和基因工程。CHO細(xì)胞可以在培養(yǎng)基中高密度生長(zhǎng),能夠分泌胞外蛋白且自身的分泌蛋白比較少。重組新冠病毒疫苗是將新冠病毒S蛋白受體結(jié)合區(qū)(RBD)基因通過(guò)基因工程技術(shù),重組到中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞內(nèi),在體外培養(yǎng)并大量表達(dá)出RBD二聚體的方法。下列說(shuō)法正確的是()A.CHO細(xì)胞作為新冠病毒的宿主細(xì)胞,提供病毒所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.與培養(yǎng)普通動(dòng)物細(xì)胞相比,CHO細(xì)胞兩次分瓶之間的間隔時(shí)間較短C.與大腸桿菌相比,CHO細(xì)胞表達(dá)的外源蛋白與天然蛋白更加相似,后期蛋白質(zhì)的純化更容易D.CHO細(xì)胞能夠表達(dá)出RBD二聚體,說(shuō)明新冠病毒與倉(cāng)鼠的遺傳物質(zhì)相同〖答案〗AC〖祥解〗動(dòng)物培養(yǎng)條件:(1)無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境:無(wú)菌——對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理;在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素;無(wú)毒——定期更換培養(yǎng)液,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害。(2)營(yíng)養(yǎng)成分:所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,例如需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然成分。培養(yǎng)基類型:合成培養(yǎng)基(將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基)。(3)溫度和pH值:哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜,多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。(4)氣體環(huán)境:通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。【詳析】A、從中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢組織分離、培養(yǎng)的CHO細(xì)胞是生物制品領(lǐng)域最主要的生產(chǎn)細(xì)胞,據(jù)此可推測(cè)CHO細(xì)胞作為新冠病毒的宿主細(xì)胞,提供病毒所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),A正確;B、CHO細(xì)胞可以在培養(yǎng)基中高密度生長(zhǎng),因此,與培養(yǎng)普通動(dòng)物細(xì)胞相比,CHO細(xì)胞兩次分瓶之間的間隔時(shí)間較長(zhǎng),B錯(cuò)誤;C、大腸桿菌屬于原核細(xì)胞,CHO細(xì)胞為真核細(xì)胞,且能夠分泌胞外蛋白且自身的分泌蛋白比較少,與大腸桿菌相比,CHO細(xì)胞具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,可以對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行更完善加工,表達(dá)的外源蛋白與天然蛋白更加相似,后期蛋白質(zhì)的純化更容易,C正確;D、CHO細(xì)胞能夠表達(dá)出RBD二聚體,說(shuō)明新冠病毒與倉(cāng)鼠的遺傳物質(zhì)在進(jìn)行遺傳信息傳遞過(guò)程中遵循的規(guī)則是相同的,即新冠病毒和CHO細(xì)胞共用一套密碼子,D錯(cuò)誤。故選AC。20.OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四個(gè)基因分別編碼四種不同的酶,研究人員將這些基因分別與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽(引導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入葉綠體)基因連接,構(gòu)建多基因表達(dá)載體(載體中部分序列如圖所示),利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化棉花,在棉花葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新的代謝途徑,提高了棉花的產(chǎn)量。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.四個(gè)基因都在棉花葉綠體內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、翻譯B.OsGLO1、EcCAT基因轉(zhuǎn)錄時(shí)以DNA的不同單鏈為模板C.應(yīng)選用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的棉花細(xì)胞D.若轉(zhuǎn)基因棉花的產(chǎn)量提高則可確定四個(gè)基因在棉花中成功表達(dá)〖答案〗AC〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等,標(biāo)記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斘觥緼、四個(gè)基因在葉綠體外合成蛋白質(zhì),由葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽引導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入葉綠體,即這四個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程都在葉綠體外完成,A錯(cuò)誤;B、啟動(dòng)子位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,圖中OsGLO1、EcCAT基因啟動(dòng)子的位置不同,因而,轉(zhuǎn)錄時(shí)以DNA的不同單鏈為模板,B正確;C、卡那霉素抗性基因不在T-DNA上,沒(méi)有轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞的染色體DNA上,因此應(yīng)用潮霉素培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞,C錯(cuò)誤;D、通過(guò)導(dǎo)入四個(gè)基因,在棉花葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新的代謝途徑,提高了棉花的產(chǎn)量,據(jù)此推測(cè),若轉(zhuǎn)基因棉花的產(chǎn)量提高則可確定四個(gè)基因在棉花中成功表達(dá),D正確。故選AC。三、非選擇題(共5題)21.某生物活動(dòng)小組為探究當(dāng)?shù)剞r(nóng)田土壤中分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,進(jìn)行了隨機(jī)取樣、系列梯度稀釋、涂布平板、培養(yǎng)、計(jì)數(shù)等步驟,實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程如下:請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題:(1)該實(shí)驗(yàn)中含有瓊脂的培養(yǎng)基從物理性質(zhì)來(lái)說(shuō),屬于_______培養(yǎng)基,從功能上來(lái)說(shuō),屬于____培養(yǎng)基,瓊脂在培養(yǎng)基中的作用是_______。(2)該培養(yǎng)基中只選擇了_______作為唯一氮源。氮源在菌體內(nèi)可以參與合成_______(答出2種即可)等生物大分子。(3)瓊脂培養(yǎng)基滅菌后,倒入培養(yǎng)皿中,冷凝后倒置,從而獲得平板培養(yǎng)基,倒置的原因是_______。(4)分解尿素的細(xì)菌能產(chǎn)生________酶,將尿素分解為_______。(5)在稀釋涂布平板法可對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)的原理是________。(6)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:6號(hào)試管涂布的三個(gè)平板的菌落數(shù)為550、501、688,7號(hào)試管涂布的三個(gè)平板的菌落數(shù)為58、73、97,8號(hào)試管涂布的三個(gè)平板的菌落數(shù)為8、15、28.該10g土壤樣品中含有分解尿素的細(xì)菌的估算數(shù)目是_______個(gè)。該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目________?!即鸢浮剑?)①.固體②.選擇③.作為凝固劑(2)①.尿素②.蛋白質(zhì)、核酸(3)防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染(4)①.脲②.NH3和CO2(5)當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌(6)①.7.6×1011②.小〖祥解〗1、選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入(缺少)某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng),促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)。用以菌種的分離。2、稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外,也常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(1)由題意可知,該培養(yǎng)基中加入了凝固劑瓊脂,所以從物理性質(zhì)來(lái)說(shuō),屬于固體培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基是為了探究當(dāng)?shù)剞r(nóng)田土壤中分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,所以需要篩選出能分解尿素的微生物,所以從功能上來(lái)說(shuō),屬于選擇培養(yǎng)基。(2)該培養(yǎng)基中只選擇了以尿素作為唯一氮源。尿素中含有N元素,所以氮源在菌體內(nèi)可以參與合成蛋白質(zhì)、核酸等含氮生物大分子。(3)瓊脂培養(yǎng)基滅菌后,倒入培養(yǎng)皿中,冷凝后倒置,從而獲得平板培養(yǎng)基,倒置的原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。(4)分解尿素的細(xì)菌能產(chǎn)生脲酶,將尿素分解為NH3和CO2。(5)稀釋涂布平板法中當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。(6)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)為30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),所以選擇7號(hào)試管涂布的三個(gè)平板的菌落數(shù)為最終結(jié)果,其中三個(gè)平板的平均數(shù)為76個(gè),據(jù)圖可知,10g土壤樣品經(jīng)梯度稀釋至7號(hào)試管,稀釋度為108倍,所以該1g土壤樣品中含有分解尿素的細(xì)菌的估算數(shù)目是:
(76÷0.1)×108=7.6×1010個(gè),那么該10g土壤樣品中含有分解尿素的細(xì)菌的估算數(shù)目是個(gè)7.6×1011個(gè)。該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目偏小,因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。22.花椰菜(2n=18)易受黑腐病菌的危害,葉片表面出現(xiàn)黃色病斑,背部出現(xiàn)灰白色輪廓不分明的病斑,密生灰白色霉層,嚴(yán)重影響生長(zhǎng),野生黑芥具有黑腐病的抗性基因??蒲腥藛T用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株,流程如下圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程①所用的酶是_________。(2)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的______,從而維持原生質(zhì)體的形態(tài)和活性。細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是________的再生。(3)經(jīng)過(guò)②操作后,需篩選出融合的雜種細(xì)胞,顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉細(xì)胞的_________(填寫細(xì)胞器名稱)存在,可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(4)采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株1~4進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷,再生植株1~4中一定是雜種植株的有_______。(5)進(jìn)一步檢測(cè)獲得的雜種植株的染色體條數(shù),結(jié)果如表,除了紫外線處理使黑芥原生質(zhì)體染色體片段化導(dǎo)致染色體條數(shù)改變以外,雜種植株染色體條數(shù)在24-34范圍內(nèi)不等的原因可能是_________。雜種植株染色體數(shù)目材料染色體數(shù)花椰菜18黑芥16雜種植株28雜種植株26雜種植株30雜種植株24雜種植株34(6)最后需通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證雜交植株是否培育成功,依據(jù)危害特點(diǎn)簡(jiǎn)要寫出思路_____?!即鸢浮剑?)纖維素酶和果膠酶(2)①.滲透壓②.細(xì)胞壁(3)葉綠體(4)1、2、4(5)雜種細(xì)胞分裂過(guò)程中會(huì)丟失來(lái)自黑芥、花椰菜的部分染色體,有時(shí)會(huì)發(fā)生染色體易位(6)對(duì)正常植株及以上雜種植株分別接種黑腐病菌,觀察植株植株葉片病斑的大小〖祥解〗分析題圖:圖示為采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖,其中①表示采用酶解法(纖維素酶和果膠酶)去除細(xì)胞壁的過(guò)程;②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過(guò)程;之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)即可得到雜種植株。(1)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,根據(jù)酶的專一性原理,可采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。(2)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓以維持原生質(zhì)體的形態(tài)和活性。植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁。(3)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合后,需要篩選出融合的雜種細(xì)胞,可以通過(guò)觀察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉細(xì)胞的葉綠體存在可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(4)根據(jù)圖譜,花椰菜含有堿基對(duì)為300和600的DNA片段,黑芥含有堿基對(duì)為1000、1300和1500的片段,再生植株3只含有長(zhǎng)度為300和600的片段,與花椰菜一致,而1、2、4既含有花椰菜DNA片段,又含有黑芥DNA片段,為雜種植株。(5)雜種細(xì)胞分裂過(guò)程中會(huì)丟失來(lái)自黑芥、花椰菜的部分染色體,有時(shí)會(huì)發(fā)生染色體易位,這使雜種植株染色體組成呈現(xiàn)多樣性,因此雜種植株染色體條數(shù)在24-34范圍內(nèi)不等。(6)該實(shí)驗(yàn)的目的是獲得抗黑腐病雜種植株,為判斷雜交植株是否培育成功,可對(duì)正常植株及雜種植株分別接種黑腐病菌,觀察植株植株葉片病斑的大小,若雜交植株葉片病斑面積比正常植株小,甚至沒(méi)有病斑,這說(shuō)明雜交植株培育成功。23.我國(guó)研究人員在世界上率先利用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA,經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長(zhǎng)類動(dòng)物——食蟹猴,流程如圖所示,①~⑥表示過(guò)程,該動(dòng)物可作為研究癌癥等人類疾病的動(dòng)物模型。請(qǐng)據(jù)圖分析回答:(1)獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植,原因是_____。(2)進(jìn)行過(guò)程①時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分與植物組織培養(yǎng)基成分最主要的區(qū)別在于前者含有_____,且在進(jìn)行細(xì)胞原代培養(yǎng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)_____現(xiàn)象。(3)研究人員在確定去甲基化酶(Kd4d)的mRNA的作用時(shí),做了兩組實(shí)驗(yàn),其中A組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)融合細(xì)胞,B組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)注入了Kd4d的mRNA的融合細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖所示。分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知,Kd4d的mRNA的作用是_____。(4)科研人員發(fā)現(xiàn)對(duì)于靈長(zhǎng)類動(dòng)物的體細(xì)胞來(lái)說(shuō),單靠核移植本身并不足以使重構(gòu)胚順利發(fā)育成存活個(gè)體,還需要對(duì)供體細(xì)胞核進(jìn)行表觀遺傳修飾才能開啟細(xì)胞核的全能性。研究表明染色體組蛋白動(dòng)態(tài)可逆地被修飾酶所改變,控制著基因的表達(dá)(如圖所示)。①據(jù)圖分析,()組蛋白乙?;胶停ǎ┙M蛋白去甲基化水平有利于相關(guān)基因恢復(fù)表達(dá),開啟細(xì)胞核全能性,從而顯著提高重構(gòu)胚的發(fā)育率。括號(hào)內(nèi)應(yīng)填入的選項(xiàng)是_____。A.提高;提高
B.降低;降低
C.提高;降低
D.降低;提高②科研人員通過(guò)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證以上觀點(diǎn)。供選擇試劑為:組蛋白去甲基化酶mRNA、組蛋白甲基化酶的mRNA、組蛋白去乙酰化酶抑制劑、生理鹽水。實(shí)驗(yàn)思路:將重構(gòu)胚均分為甲、乙、丙、丁四組,分別注入等量的組蛋白去乙?;敢种苿?、_____、_____、等量生理鹽水。一段時(shí)間后分別檢測(cè)各組的胚胎發(fā)育率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:各組的胚胎發(fā)育率丙組>甲組=乙組>丁組?!即鸢浮剑?)體細(xì)胞分化程度高,不容易恢復(fù)其全能性(2)①.(動(dòng)物)血清②.細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)和細(xì)胞接觸抑制(3)提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率和囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率(4)①.A②.等量組蛋白去甲基化酶的mRNA③.等量組蛋白去乙?;敢种苿┖徒M蛋白去甲基化酶的mRNA〖祥解〗1、動(dòng)物細(xì)胞核移植是用體細(xì)胞作為供體細(xì)胞進(jìn)行的細(xì)胞核移植,將供核細(xì)胞注射到培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞中,用人工的方法將其培養(yǎng)成胚胎,再將胚胎移植到雌性動(dòng)物子宮內(nèi),就可以孕育出新的個(gè)體。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:(1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:①消毒、滅菌;②添加一定量的抗生素;③定期更換培養(yǎng)液,以清除代謝廢物。(2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。(3)溫度和PH:36.5℃±0.5℃;適宜的pH:7.2~7.4。(4)氣體環(huán)境:95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的pH)。3、胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎,或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。(1)與胚胎細(xì)胞相比,動(dòng)物體細(xì)胞分化程度更高,不容易恢復(fù)其全能性,故獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。(2)圖中①是培養(yǎng)成纖維細(xì)胞的過(guò)程,該過(guò)程采用的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),培養(yǎng)液成分與植物組織培養(yǎng)基成分最主要的區(qū)別在于前者含有動(dòng)物血清。體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞往往具有貼附生長(zhǎng)和接觸抑制等特點(diǎn),故細(xì)胞原代培養(yǎng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)和細(xì)胞接觸抑制的現(xiàn)象。(3)分析圖中數(shù)據(jù),將正常培養(yǎng)的A組與向融合細(xì)胞中注入去甲基化酶(Kd4d)的mRNA的融合細(xì)胞B組數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)照分析,后者的融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率、囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率都高于前者,說(shuō)明Kd4d的mRNA既能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率,又能提高囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率。(4)①由圖可知,組蛋白乙?;杉せ钷D(zhuǎn)錄,有利于基因表達(dá),甲基化會(huì)抑制轉(zhuǎn)錄,因此提高組蛋白乙?;?,提高組蛋白去甲基化水平都有利于相關(guān)基因恢復(fù)表達(dá),故選A。②提高組蛋白乙酰化水平,提高組蛋白去甲基化水平都有利于相關(guān)基因恢復(fù)表達(dá)。根據(jù)各組結(jié)果,胚胎發(fā)育率:丙組>甲組=乙組>丁組,因此乙組應(yīng)該加的是等量組蛋白去甲基化酶的mRNA,與甲組相同;而丙組胚胎發(fā)育最好,應(yīng)該是加的是等量組蛋白去乙?;敢种苿┖徒M蛋白去甲基化酶的mRNA,最有利于基因表達(dá)。24.牛支原體是嚴(yán)重危害牛養(yǎng)殖業(yè)的一種病原菌,它能引起肺炎、關(guān)節(jié)炎等多種疾病。VspX蛋白是牛支原體表面的一種脂蛋白,在牛支原體感染宿主細(xì)胞時(shí)起黏附作用??蒲腥藛T制備抗VspX單克隆抗體,并進(jìn)行相關(guān)研究。(1)將等量的純化VspX蛋白作為_________分別注射到5只小鼠體內(nèi),經(jīng)過(guò)二次免疫后測(cè)定小鼠抗VspX抗體的免疫效果,取其中免疫效果最好的1號(hào)小鼠用于后面的融合實(shí)驗(yàn)。(2)在融合前三天,對(duì)1號(hào)小鼠加強(qiáng)免疫一次,目的是_________。然后取小鼠的脾臟細(xì)胞用_________試劑誘導(dǎo)與骨髓瘤細(xì)胞融合,用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選得到_________。該細(xì)胞具有_________的特點(diǎn)。(3)一段時(shí)間后,將(2)所得細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè),檢測(cè)原理如下圖。①在檢測(cè)時(shí)需要將VspX蛋白固定于固相載體表面制成固相抗原,并加入多孔板培養(yǎng)槽中_________(細(xì)胞、上清液),即待測(cè)樣本。②加入酶標(biāo)抗體后一段時(shí)間,需要用洗滌劑將________洗去。③加入相應(yīng)酶促反應(yīng)底物顯色后,顏色的深淺可代表_______。(4)將上述細(xì)胞經(jīng)胰蛋白酶處理,制成細(xì)胞懸液,置于二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),提取抗VspX單克隆抗體與不同抗原進(jìn)行雜交檢測(cè),結(jié)果如下圖依據(jù)圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明抗VspX單克隆抗體不能與________結(jié)合(圖中數(shù)字),具有很強(qiáng)的特異性,可用于后續(xù)關(guān)于牛支原體所引發(fā)相關(guān)疾病的________等方面的研究。〖答案〗(1)抗原(2)①.刺激機(jī)體產(chǎn)生更多漿細(xì)胞②.PEG③.雜交瘤細(xì)胞④.既能迅速大量增殖又能產(chǎn)生抗體(3)①.上清液②.未與抗VspX抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗體③.抗VspX抗體的量(4)①.3、4②.診斷、治療〖祥解〗單克隆抗體的制備過(guò)程:首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi),使其發(fā)生免疫,小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選:第一次篩選:利用特定選擇培養(yǎng)基篩選,獲得雜交瘤細(xì)胞,即AB型細(xì)胞(A為B淋巴細(xì)胞,B為骨髓瘤細(xì)胞),不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞;第二次篩選:利用多孔板法和抗原—抗體雜交法篩選,獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。間接法測(cè)抗體,其基本原理:將特異性抗
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