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文檔簡介
疑似毒品中甲基苯丙胺檢驗2023-08-06發(fā)布國家市場監(jiān)督管理總局國家標準化管理委員會I本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分:標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替GB/T29636—2013《疑似毒品中甲基苯丙胺的氣相色譜、高效液相色譜和氣相色譜-質(zhì)譜檢驗方法》,與GB/T29636—2013相比,除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外,主要技術(shù)變化如下:——更改了“范圍”(見第1章,2013年版的第1章);——增加了液相色譜-質(zhì)譜方法原理(見第4章);——更改了氣相色譜及氣相色譜-質(zhì)譜使用試劑(見5.1.1,2013年版的5.1.1);——增加了液相色譜-質(zhì)譜分析用試劑、儀器及材料(見第5章);——更改了氣相色譜-質(zhì)譜及氣相色譜的樣品制備(見6.1、6.2,2013年版的6.1、7.1、7.2);——增加了液相色譜-質(zhì)譜分析方法(見7.1);——更改了液相色譜分析方法(見7.2,2013年版的7.3);——更改了“結(jié)果評價”(見第8章,2013年版的第8章)。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由全國刑事技術(shù)標準化技術(shù)委員會(SAC/TC179)歸口。本文件起草單位:公安部鑒定中心、上海市公安局、山東省公安廳物證鑒定研究中心。王蔚昕。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為:——2013年首次發(fā)布為GB/T29636—2013;——本次為第一次修訂。1疑似毒品中甲基苯丙胺檢驗本文件規(guī)定了甲基苯丙胺的氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)、液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)定性檢驗方法和氣相色譜(GC)、液相色譜(LC)定量檢驗方法的原理、試劑、儀器和材料、檢驗分析步驟及結(jié)果評價。本文件適用于疑似毒品中甲基苯丙胺的定性分析和定量分析。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T27418測量不確定度評定與表示GA/T122毒物分析名詞術(shù)語3術(shù)語和定義GA/T122界定的術(shù)語和定義適用于本文件。4原理對疑似毒品中的甲基苯丙胺進行提取。采用氣相色譜-質(zhì)譜法檢測,以保留時間、質(zhì)譜特征離子和離子豐度比作為定性判斷依據(jù);采用液相色譜-質(zhì)譜法檢測,以保留時間、質(zhì)譜特征離子對和離子對豐度比作為定性判斷依據(jù);采用氣相色譜法檢測,以色譜峰面積(或峰面積比值)作為定量依據(jù),用外標單點法或內(nèi)標標準曲線法進行定量分析;采用液相色譜法檢測,以色譜峰面積作為定量依據(jù),用外標單點法或外標標準曲線法進行定量分析。5試劑、儀器和材料5.1試劑除非另有說明,在分析中使用的試劑均為分析純。5.1.1.3提取溶劑:乙腈十水=15+1(體積比)。2a)標準物質(zhì)儲備液:甲基苯丙胺標準物質(zhì)儲備液、正癸烷標準物質(zhì)儲備液。b)標準工作溶液按實驗需求分為以下五類?!ㄐ杂脴藴使ぷ魅芤海阂迫〖谆奖窐藴饰镔|(zhì)儲備液適量,用甲醇稀釋,配制成0.1mg/mL的甲基苯丙胺標準工作溶液。0℃~4℃冷藏保存,有效期6個月。也可根據(jù)實際情況配制實驗中所用其他濃度的定性用標準工作溶液?!ㄐ再|(zhì)控標準工作溶液:移取甲基苯丙胺標準物質(zhì)儲備液適量,用甲醇稀釋,配制成0.005mg/mL的甲基苯丙胺標準工作溶液。0℃~4℃冷藏保存,有效期1個月。 外標單點法定量用標準工作溶液:移取甲基苯丙胺標準物質(zhì)儲備液適量,用甲醇稀釋,配制成0.1mg/mL的甲基苯丙胺標準工作溶液。0℃~4℃冷藏保存,有效期6個月?!獌?nèi)標標準曲線法定量用內(nèi)標儲備液:移取正癸烷標準物質(zhì)儲備液適量,放入容量瓶中,加入甲醇,振搖至正癸烷溶解,超聲5min,用甲醇定容至刻度,配制成10.0mg/mL內(nèi)標標準曲線法定量用內(nèi)標儲備液。0℃~4℃冷藏保存,有效期12個月。——內(nèi)標標準曲線法定量用標準工作溶液:配制方法參見附錄A,移取相應(yīng)體積的甲基苯丙胺標準物質(zhì)儲備液、10.0mg/mL內(nèi)標標準曲線法定量用內(nèi)標儲備液、甲醇至進樣瓶中,配制成甲基苯丙胺濃度為0.01mg/mL~0.5mg/mL的標準工作溶液,至少配制5個濃度。除非另有說明,在分析中使用的試劑均為色譜純。5.1.2.7提取溶劑:乙腈+水=15+1(體積比)。5.1.2.90.1%(體積分數(shù))甲酸水溶液。5.1.2.10緩沖溶液:以配制1000mL為例:量取1.9mL濃磷酸及2.5mL三乙胺,用去離子水定容至a)標準物質(zhì)儲備液:甲基苯丙胺標準物質(zhì)儲備液。b)標準工作溶液按實驗需求分為以下四類。——定性用標準工作溶液:移取甲基苯丙胺標準物質(zhì)儲備液適量,用甲醇稀釋,配制成10ng/mL的甲基苯丙胺標準工作溶液。0℃~4℃冷藏保存,有效期1個月。也可根據(jù)實際情況配制實驗中所用其他濃度的定性用標準工作溶液?!ㄐ再|(zhì)控標準工作溶液:移取甲基苯丙胺標準物質(zhì)儲備液適量,用甲醇稀釋,配制成1ng/mL的甲基苯丙胺標準工作溶液。0℃~4℃冷藏保存,隨用隨配?!鈽藛吸c法定量用標準工作溶液:移取甲基苯丙胺標準物質(zhì)儲備液適量,用甲醇稀釋,配制成0.1mg/mL的甲基苯丙胺標準工作溶液。0℃~4℃冷藏保存,有效期6個月。 外標標準曲線法定量用標準工作溶液;移取甲基苯丙胺標準物質(zhì)儲備液適量,用甲醇配制成甲基苯丙胺濃度為0.002mg/mL~0.2mg/mL的標準工作溶液,至少配制5個濃度。35.2儀器和材料5.2.1GC、GC-MS分析用儀器和材料GC、GC-MS分析用儀器和材料包括:a)氣相色譜儀:配有火焰離子化檢測器(FID);b)氣相色譜-質(zhì)譜儀:配有電子轟擊源(EI);c)離心機;d)電子天平:定性檢驗實際分度值d小于或等于0.1mg,定量檢驗實際分度值d小于或等于e)渦旋振蕩器;f)移液器或移液管;h)具蓋離心管;5.2.2LC、LC-MS分析用儀器和材料LC、LC-MS分析用儀器和材料包括:a)液相色譜儀:配有二極管陣列(DAD)或紫外檢測器(UV);b)液相色譜-質(zhì)譜儀:配有電噴霧離子源,具備MRM檢測模式;c)離心機;d)超聲波清洗器;e)渦旋振蕩器;f)電子天平:定性檢驗實際分度值d小于或等于0.1mg,定量檢驗實際分度值d小于或等于g)移液器或移液管;h)容量瓶;i)具蓋離心管;6.1GC-MS定性分析固體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,稱取10mg~100mg于具蓋離心管中,加入10mL甲醇,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,取上清液作為樣品溶液,供GC-MS分析。當樣品溶液需要稀釋時,加入甲醇進行稀釋,稀釋液作為樣品溶液,供GC-MS分析。液體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,稱取10mg~100mg于具蓋離心管中,加入5mL提取溶劑和5mL乙腈,再加入25μLPSA、150mg無水硫酸鈉,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,上清液過濾膜后作為樣品溶液,供GC-MS分析。當樣品溶液需要稀釋時,加入乙腈進行稀4GB/T29636—20236.1.2儀器檢測6.1.2.1GC-MS參考條件以下為參考條件(可根據(jù)不同品牌儀器和不同樣品等實際情況進行調(diào)整):石英玻璃毛細柱(5%苯基+95%聚二甲基硅氧烷,30m×0.25mm×b)色譜柱溫程:初始溫度60℃,以15℃/min升溫至300℃,保持15min;c)進樣口溫度:280℃;d)傳輸線溫度:250℃;e)離子源溫度:230℃;f)分流比:20:1;g)載氣:高純氦氣(He);h)柱流速(恒流):1.0mL/min;k)倍增器電壓:參考調(diào)諧狀況;分別吸取樣品空白(甲醇)、樣品溶液、標準溶液空白(甲醇)和定性用標準工作溶液,按6.1.2.1條件進樣分析。根據(jù)實際需求,再分別吸取標準溶液空白(甲醇)和定性質(zhì)控標準工作溶液,按6.1.2.1條件進行分析。6.2GC定量分析6.2.1GC外標單點法6.2.1.1含量預(yù)分析采用外標單點法定量用標準工作溶液作為定量參照。按照公式(1)計算樣品中目標組分的預(yù)分析含量。 (1)式中:o——樣品中甲基苯丙胺的含量(質(zhì)量分數(shù));C?——外標單點法定量用標準工作溶液中甲基苯丙胺的質(zhì)量濃度,單位為毫克每毫升(mg/mL);A——樣品溶液中甲基苯丙胺的色譜峰面積;V?——樣品溶液初次定容體積,單位為毫升(mL);V?——從初次定容樣品溶液V?中移取的體積,單位為毫升(mL);V?——將V?稀釋時加入甲醇或乙腈的體積,單位為毫升(mL);A?——外標單點法定量用標準工作溶液中甲基苯丙胺的色譜峰面積;m——樣品的稱量質(zhì)量,單位為毫克(mg)。5GB/T29636—20236.2.1.2準確定量6.2.1.2.1稱量質(zhì)量的計算根據(jù)預(yù)分析中甲基苯丙胺含量測定結(jié)果,選擇合適的初次定容體積、稀釋倍數(shù)(樣品提取操作參數(shù)選擇參見附錄A),并按照公式(2)計算出樣品稱量質(zhì)量(m),使樣品溶液中目標物的濃度在所用標準工作溶液濃度的(100±30)%范圍內(nèi)。式中:m——準確定量時樣品的稱量質(zhì)量,單位為毫克(mg);…C?——外標單點法定量用標準工作溶液中甲基苯丙胺的質(zhì)量濃度,單位為毫克每毫升(mg/mL);V——初次定容體積,單位為毫升(mL);D——稀釋倍數(shù);o——樣品中甲基苯丙胺的預(yù)分析含量(質(zhì)量分數(shù))。固體樣品,根據(jù)6.2.1.2.1計算結(jié)果,平行稱取樣品2份于具蓋離心管中(當需要對定量結(jié)果進行不確定度評定時,至少平行稱取6份)。根據(jù)預(yù)分析含量范圍,加入相應(yīng)初次定容體積的甲醇,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,取上清液作為樣品溶液,供GC分析。當樣品溶液需要稀釋時,按照稀釋倍數(shù)加入甲醇進行稀釋定容,稀釋液作為樣品溶液,供GC分析。液體樣品,根據(jù)6.2.1.2.1計算結(jié)果,平行稱取樣品2份于具蓋離心管中(當需要對定量結(jié)果進行不確定度評定時,至少平行稱取6份)。根據(jù)預(yù)分析含量范圍,分別加入相同體積的提取溶劑和乙腈(總體積與附錄A的初次定容體積相當),按照25μL/100mg液體樣品的比例加入PSA,150mg/100mg液體樣品的比例加入無水硫酸鈉,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,上清液過濾膜后作為樣品溶液,供GC分析。當樣品溶液需要稀釋時,按照稀釋倍數(shù)加入乙腈進行稀釋定容,稀釋液作為樣品溶液,供GC分析。6.2.1.2.3儀器檢測以下為參考條件(可根據(jù)不同品牌儀器和不同樣品等實際情況進行調(diào)整):a)色譜柱:DB-5石英玻璃毛細柱(5%苯基+95%聚二甲基硅氧烷,30m×或其他等效柱;b)色譜柱溫程:初始溫度80℃,以10℃/min升溫至200℃,以40℃/min升溫至280℃保持c)進樣口溫度:280℃;d)檢測器溫度:300℃;e)載氣:高純氮氣(N?);f)分流比:20:1;g)柱流速(恒流):1.0mL/min;i)燃燒氣流速:按儀器默認值;6k)助燃氣流速:按儀器默認值。分別吸取樣品空白(甲醇)、樣品溶液、標準溶液空白(甲醇)和外標單點法定量用標準工作溶液,按6.2.1.2.3.1條件進樣分析。當稱取2份樣品時,每份樣品進樣2針~3針。按照公式(1)計算樣品中甲基苯丙胺的含量。6.2.2.1內(nèi)標標準工作曲線繪制采用5.1.1中配制的內(nèi)標標準曲線法定量用標準工作溶液及標準溶液空白(甲醇溶液)繪制成線性范圍為0.01mg/mL~0.5mg/mL的甲基苯丙胺標準工作曲線。固體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,平行稱取樣品2份于具蓋離心管中,分別加入10mL甲醇,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,取上清液500μL于自動進樣瓶中,向同一自動進樣瓶中加入10mg/mL正癸烷內(nèi)標儲備液100μL、甲醇400μL,振蕩溶解均勻后作為樣品溶液,供液體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,平行稱取樣品2份于具蓋離心管中,分別加入5mL提取溶劑和5mL乙腈,密封并振蕩5min,超聲5min。按照25μL/100mg液體樣品的比例加入PSA,150mg/100mg液體樣品的比例加入無水硫酸鈉,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,上清液過濾膜后,取500μL于自動進樣瓶中,向同一自動進樣瓶中加入10mg/mL正癸烷內(nèi)標根據(jù)內(nèi)標標準工作曲線計算樣品中甲基苯丙胺的含量。7LC-MS及LC分析7.1LC-MS定性分析固體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,稱取約10mg于具蓋離心管中,加入10mL甲醇,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,取上清液以初始流動相稀釋10萬倍,稀釋液過濾膜后作7液體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,稱取約10mg于具蓋離心管中,加入5mL提取溶劑和5mL乙腈,再加入2.5μLPSA,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,取上清液以初始流動相稀釋10萬倍,稀釋液過濾膜后作為樣品溶液,供LC-MS分析。若樣本中甲基苯丙胺的含量過低,可降低稀釋倍數(shù)或不進行稀釋。以下為參考條件(可根據(jù)不同品牌儀器和不同樣品等實際情況進行調(diào)整):b)流動相:A為甲醇,B為0.1%甲酸水溶液;d)梯度洗脫程序:見表1;表1梯度洗脫程序時間/min037f)離子源:電噴霧離子源;g)掃描方式:正離子模式;h)離子源溫度:150℃;i)毛細管電壓:3000V;j)脫溶劑氣流速:800L/h;k)脫溶劑溫度:500℃;m)質(zhì)譜定性特征離子對和去簇電壓、碰撞能量條件見表2。表2質(zhì)譜定性特征離子對和去簇電壓、碰撞能量條件目標物定性特征離子對去簇電壓/V碰撞能量/eV甲基苯丙胺150.1>91.1150.1>119.18分別吸取樣品空白(定性提取溶劑)、樣品溶液、標準溶液空白(定性提取溶劑)和定性用標準工作溶液,按7.1.2.1條件進樣分析?;蚋鶕?jù)實際需求,再分別吸取標準溶液空白(定性提取溶劑)和定性質(zhì)控標準工作溶液,按7.1.2.1條件進行分析。7.2LC定量分析固體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,稱取10mg~100mg于具蓋離心管中,加入10mL初始流動相,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,上清液過濾膜后作為樣品溶液,供LC分析。液體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,稱取約10mg~100mg于具蓋離心管中,加入5mL提取溶劑和5mL初始流動相,再加入25μLPSA,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,上清液過濾膜后作為樣品溶液,供LC分析。采用外標單點法定量用標準工作溶液作為定量參照。按照公式(1)計算樣品中目標組分的預(yù)分析含量。根據(jù)預(yù)分析中甲基苯丙胺含量測定結(jié)果,選擇合適的初次定容體積、稀釋倍數(shù),并按照公式(2)計算出樣品稱量質(zhì)量(m),使樣品溶液中目標物的濃度在所用標準工作溶液濃度的(100±30)%范圍內(nèi)。固體樣品,根據(jù)7.2.1.2.1計算結(jié)果,平行稱取樣品2份于具蓋離心管中(當需要對定量結(jié)果進行不確定度評定時,至少平行稱取6份)。根據(jù)預(yù)分析含量范圍,分別加入相應(yīng)初次定容體積的初始流動相,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,上清液過濾膜后作為樣品溶液,供LC分析。當樣品溶液需要稀釋時,按照稀釋倍數(shù)加入初始流動相稀釋定容,稀釋液作為樣品溶液,供LC分析。液體樣品,根據(jù)7.2.1.2.1計算結(jié)果,平行稱取樣品2份于具蓋離心管中(當需要對定量結(jié)果進行不確定度評定時,至少平行稱取6份)。根據(jù)預(yù)分析含量范圍,分別加入相同體積的提取溶劑和初始流動相(總體積與附錄A的初次定容體積相當),按照25μL/100mg液體樣品的比例加入PSA,密封振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,上清液過濾膜后作為樣品溶液,供LC分析。當樣品溶液需要稀釋時,按照稀釋倍數(shù)加入初始流動相稀釋定容,稀釋液作為樣品溶液,供LC分析。以下為參考條件(可根據(jù)不同品牌儀器和不同樣品等實際情況進行調(diào)整):a)色譜柱:Cg色譜柱(150mm×4.6mm,5μm)或其他等效柱;d)梯度洗脫程序:見表3;9表3梯度洗脫程序時間/min020.00g)檢測波長:210nm,帶寬4nm。分別吸取樣品空白、樣品溶液、標準溶液空白和外標單點法定量用標準工作溶液,按7.2.1.2.3.1條件進樣分析。當稱取2份樣品時,每份樣品進樣2針~3針。按照公式(1)計算樣品中甲基苯丙胺的含量。7.2.2LC外標標準曲線法7.2.2.1外標標準工作曲線繪制采用5.1.2中配制的LC外標標準曲線法定量用標準工作溶液及標準溶液空白(甲醇溶液)繪制成線性范圍為0.002mg/mL~0.2mg/mL的甲基苯丙胺標準工作曲線。固體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,平行稱取樣品2份于具蓋離心管中,分別加入10mL初始流動相,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,上清液過濾膜后作為樣品溶液,供LC分析。液體樣品經(jīng)均質(zhì)化后,根據(jù)實際需求,平行稱取樣品2份于具蓋離心管中,分別加入5mL提取溶和5mL初始流動相,按照25μL/100mg液體樣品的比例加入PSA,密封并振蕩10min,以不低于4000r/min離心5min,上清液過濾膜后作為樣品溶液,供LC分析。根據(jù)外標標準工作曲線計算樣品中甲基苯丙胺的含量。8結(jié)果評價8.1定性結(jié)果評價8.1.1GC-MS定性結(jié)果評價陽性結(jié)果評價:在相同條件下進行測定時,樣品溶液中目標物與濃度接近的定性用標準工作溶液中的目標物相比,色譜峰保留時間一致(相對誤差在±1%之內(nèi))、質(zhì)譜特征離子(不少于3個)一致,且各離子豐度比的最大允許相對偏差范圍不超過表4的規(guī)定,樣品空白無干擾,則可判斷樣品中檢出目標物。甲基苯丙胺的基本信息及氣相色譜-質(zhì)譜圖、特征離子參見附錄B。表4離子豐度比的最大允許相對偏差范圍離子豐度比>20%~50%>10%~20%最大允許相對偏差陰性結(jié)果評價:扣除背景后,GC-MS定性質(zhì)控標準工作溶液中檢出目標物特征離子,標準溶液空白無干擾,10.0mg/mL樣品溶液中未出現(xiàn)與GC-MS定性質(zhì)控標準工作溶液中目標物一致的特征離子,則可判斷樣品中未檢出目標物。8.1.2LC-MS定性結(jié)果評價陽性結(jié)果評價:在相同條件下進行樣品測定時,樣品溶液中目標物與濃度接近的定性用標準工作溶液中的目標物相比,色譜峰保留時間一致(相對誤差在±2.5%以內(nèi))、定性離子對(至少兩對)一致,且離子對豐度比的最大允許相對偏差范圍不超過表5的規(guī)定,樣品空白無干擾,則可判斷樣品中檢出目標物。甲基苯丙胺的液相色譜-質(zhì)譜圖參見附錄B。表5離子對豐度比的最大允許相對偏差范圍離子對豐度比>20%~50%>10%~20%最大允許相對偏差陰性結(jié)果評價:扣除背景后,LC-MS定性質(zhì)控標準工作溶液中檢出目標物特征離子對,標準溶液空白無干擾,1.0mg/mL樣品溶液中未出現(xiàn)與LC-MS定性質(zhì)控標準工作溶液中目標物一致的特征離子對,則可判斷樣品中未檢出目標物。8.2定量結(jié)果評價8.2.1相對相差檢驗平行稱取2份樣品時,測定數(shù)據(jù)按照公式(3)計算相對相差(RD)。式中:RD——
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