制備色譜技術(shù)原理及其在天然產(chǎn)物提取分離中的應(yīng)用

摘

要：制備色譜技術(shù)是用于分離提取天然產(chǎn)物有效成分的一種重要技術(shù)?，F(xiàn)簡要綜述了各類制備色譜技術(shù)的原理，介紹了各類制備色譜技術(shù)在天然產(chǎn)物提取分離中的應(yīng)用情況。關(guān)鍵詞：制備色譜技術(shù)；應(yīng)用；天然產(chǎn)物；原理

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引言制備色譜技術(shù)發(fā)展至今已有100多年歷史，其目的在于分離制備一種或者多種純組分。從最早的常壓柱色譜技術(shù)、薄層色譜技術(shù)，到后來發(fā)展起來的加壓液相色譜技術(shù)、高速逆流色譜技術(shù)、模擬流動(dòng)床色譜技術(shù)等，制備色譜技術(shù)已經(jīng)成為現(xiàn)代科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中分離多組分化合物的一個(gè)重要技術(shù)手段，尤其在自然界中天然產(chǎn)物活性成分的提取和純化中起著重要作用。本文主要介紹幾種重要的制備色譜技術(shù)的原理及其在天然產(chǎn)物分離純化中的應(yīng)用情況。

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制備色譜技術(shù)的原理1.1

薄層色譜薄層色譜技術(shù)屬于液相色譜技術(shù)的范疇，經(jīng)典的制備型薄層色譜設(shè)備簡單，投資較少，但處理量較小，通常用來分離毫克級(jí)的樣品，且被分離的化合物需要從薄層板上刮下，并將其從吸附劑中提取出來。薄層色譜中常用的是硅膠吸附色譜，其次是氧化鋁吸附薄層色譜。1.2

常壓柱色譜常壓柱色譜應(yīng)用較為廣泛，技術(shù)也相對(duì)成熟，主要包括吸附柱色譜、分配柱色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜、干柱色譜等。其中，吸附柱色譜中的硅膠吸附柱色譜是目前應(yīng)用最為廣泛的一種常壓柱色譜。吸附柱色譜的技術(shù)原理是不同化合物由于分子結(jié)構(gòu)不同，與吸附劑表面作用力的大小也不同，同一種沖洗溶劑對(duì)不同分子結(jié)構(gòu)的化合物溶解度不同，致使沖洗溶劑在沖洗時(shí)，不同化合物組分在色譜柱中的流動(dòng)速度不同，從而將復(fù)雜混合物分離。1.3

加壓制備色譜加壓制備色譜技術(shù)是一種使用較為廣泛的色譜分離純化技術(shù)，它是將分離填料填裝在色譜柱內(nèi)，用液體流動(dòng)相進(jìn)行洗脫，利用藥物中不同活性成分與填料相互作用力的差異來分離混合物。一般將壓力0.2MPa左右的稱為快速色譜；壓力低于0.5MPa的稱為低壓制備色譜；壓力在0.5～2MPa的稱為中壓制備色譜；壓力大于2MPa的稱為高壓制備色譜，也叫高效液相色譜。制備型加壓液相色譜分離的關(guān)鍵部位是色譜柱，色譜柱的大小取決于待分離樣品量的多少。快速色譜技術(shù)操作非常簡便，常用于簡單的物質(zhì)分離。它與柱色譜類似，但比柱色譜多了一個(gè)加壓裝置，可縮短分離操作時(shí)間，填料顆粒較大，因此分辨率較低?？焖偕V中使用最廣泛的固定相是硅膠。低壓液相色譜（LPLC）比快速色譜稍微復(fù)雜點(diǎn)，填料顆粒較小一些，分辨率也稍高。低壓制備色譜的加壓手段一般有空氣泵加壓、雙鏈球加壓、氮?dú)怃撈考訅?、蠕?dòng)泵加壓等。中壓制備色譜（MPLC）可承載更大的樣品量，色譜柱也較長較大，需要的壓力比低壓液相色譜更大，同時(shí)它的分辨率也更高，分離時(shí)間更短。其工作原理是由恒流泵輸送移動(dòng)相，通過進(jìn)樣閥上樣，在色譜柱對(duì)樣品進(jìn)行分離后，利用檢測器檢測，計(jì)算機(jī)記錄、處理、打印數(shù)據(jù)，同時(shí)收集各個(gè)餾分。高壓液相色譜（HPLC）一般色譜柱較短，內(nèi)徑較大，填料顆粒更細(xì)，具有高柱效、高流速、高分離速度的特點(diǎn)，可制備純化難分離的物質(zhì)，通常作為分離純化操作的最后一步。高效液相色譜的壓力較大，普通玻璃柱易破裂，一般選用不銹鋼材料做色譜柱。1.4

高速逆流色譜高速逆流色譜（HSCCC）是逆流色譜中最具實(shí)用意義的一類，高速逆流色譜分離柱的固定相無載體，消除了載體對(duì)分離過程的影響，適合分離極性物質(zhì)和具有生物活性的物質(zhì)，且高速逆流色譜超載能力強(qiáng)，進(jìn)樣量大，尤其適用于制備性分離，同時(shí)具有高回收率。高速逆流色譜儀主要由恒流泵、進(jìn)樣閥、主機(jī)、檢測器、色譜工作站和餾分收集器組成。高速逆流色譜工作時(shí)，需要不互溶的兩相液體，一種作為固定相，另一種作為流動(dòng)相。它是根據(jù)單向性流體動(dòng)力平衡原理分離不同物質(zhì)的，在主機(jī)的線圈一端注入固定相，進(jìn)樣后，恒流泵壓入流動(dòng)相載著樣品進(jìn)入線圈，線圈高速轉(zhuǎn)動(dòng)，兩相就有相對(duì)運(yùn)動(dòng)之勢，恒流泵的單向閥使得固定相無法逆向流出，流動(dòng)相卻不斷流入穿過固定相，樣品就會(huì)在兩相中無限次分配，最終由于樣品組分分配系數(shù)不同而被分離。高速逆流色譜儀轉(zhuǎn)速越快，固定相保留越多，分離效果就越好。1.5

模擬移動(dòng)床色譜模擬移動(dòng)床色譜（SMB）技術(shù)首先應(yīng)用于石油化學(xué)工業(yè)。通常的色譜分離技術(shù)存在間歇性生產(chǎn)、操作費(fèi)用高等缺點(diǎn)，而模擬移動(dòng)床色譜技術(shù)具有操作連續(xù)化、流動(dòng)相耗量少等優(yōu)點(diǎn)，因此該技術(shù)逐漸受到重視。與普通色譜技術(shù)相比，模擬移動(dòng)床色譜技術(shù)具有操作自動(dòng)化、制備效率高、制備量大等優(yōu)點(diǎn)，常用來分離手性物質(zhì)，但其設(shè)備復(fù)雜，使用和維護(hù)困難，優(yōu)化提純的條件也較為復(fù)雜，所得到的產(chǎn)品液的濃度低于進(jìn)料液的濃度，且模擬移動(dòng)床色譜儀是一種二元分離器，應(yīng)用范圍較窄。模擬移動(dòng)床色譜儀的固定相不隨床層移動(dòng)，而是通過物料進(jìn)出口隨流動(dòng)相流動(dòng)方向移動(dòng)，實(shí)現(xiàn)固定相與流動(dòng)相的逆流。根據(jù)液流流速和所起作用的不同，把整個(gè)床層分為4個(gè)區(qū)域，Ⅰ區(qū)：吸附劑的再生區(qū)，Ⅱ區(qū)：B的解吸和A的吸附，Ⅲ區(qū)：A的吸附和B的解吸，Ⅳ區(qū)：洗脫液的再生區(qū)。1.6

超臨界流體色譜超臨界流體色譜（SFC）是對(duì)氣相色譜和高效液相色譜的補(bǔ)充，比高效液相色譜速度更快，溶劑更易除去，它以超臨界流體為流動(dòng)相，常用的超臨界流體有CO2，其臨界點(diǎn)性質(zhì)溫和，成本低，安全，且純度高。超臨界流體具有氣體黏度低、擴(kuò)散系數(shù)大和液體溶解能力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。超臨界流體色譜技術(shù)的主要原理是根據(jù)待測物在固定相和流動(dòng)相兩相中的分配系數(shù)不同，繼而實(shí)現(xiàn)對(duì)待測物的先后洗脫。

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制備色譜技術(shù)在天然產(chǎn)物提取分離中的應(yīng)用2.1

在黃酮類成分提取中的應(yīng)用2.1.1

分離淡豆豉中的大豆異黃酮大豆異黃酮是黃酮類化合物，與雌激素結(jié)構(gòu)相似，是由大豆成熟的種子和青蒿、桑葉等中藥發(fā)酵而成的制品淡豆豉的主要活性成分之一。利用反相制備高效液相色譜技術(shù)（RP-HPLC），以乙腈-水-冰醋酸（35:65:1）為流動(dòng)相，流速為3.0

mL/min，進(jìn)樣量為750

μL，從淡豆豉中分離得到大豆異黃酮、大豆黃素和染料木素純品，產(chǎn)物純度均達(dá)到99%以上。2.1.2

分離高良姜黃酮中的高良姜素和山奈素高良姜提取物提取自姜科山姜屬植物高良姜，其主要活性成分為黃酮類化合物，主要包括高良姜素和山奈素，具有抗腫瘤、抗病毒、鎮(zhèn)痛消炎等作用。采用大孔吸附樹脂和制備型高效液相色譜技術(shù)，從高良姜提取物中分離出高良姜素和山奈素，分離效果好，產(chǎn)品純度高。制備型高效液相色譜的流動(dòng)相為甲醇-0.6%乙酸水溶液（58:42），流速為7

mL/min，最終分離出的高良姜素純度為99.55%，山奈素純度為99.7%。2.1.3

分離竹葉黃酮中的異葒草苷和葒草苷葒草苷和異葒草苷是竹葉黃酮中黃酮類化合物的兩種主要單體，具有抗氧化、抗炎等作用，其單體價(jià)格昂貴。建立了用制備型高效液相色譜技術(shù)分離竹葉黃酮中葒草苷和異葒草苷的方法，色譜流動(dòng)相為甲醇-0.3%乙酸水溶液（32:68），流速為5

mL/min，所得異葒草苷純度可達(dá)99%以上，葒草苷純度在93%以上。2.1.4

從甘草中提取黃酮類化合物甘草是蝶形花亞科甘草屬植物甘草的根或根莖，具有清熱解毒等功能，黃酮類化合物是植物甘草的重要有效成分之一。使用離線制備型二維正相液相色譜/反相液相色譜技術(shù)，從甘草中分離純化黃酮類化合物，總共得到24種高純度（純度均在90%以上）黃酮類化合物。用模擬移動(dòng)床色譜技術(shù)對(duì)甘草黃酮中的甘草苷和甘草素進(jìn)行分離，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，乙醇-水（30:70）為流動(dòng)相，在萃余液出口得到甘草苷，在萃取液出口得到甘草素，濃縮、重結(jié)晶后兩種產(chǎn)品純度均達(dá)到96%。2.1.5

從黃芪中分離黃酮苷黃芪是豆科黃芪屬植物黃芪的根，黃芪中含有許多具有抗氧化作用的黃酮類化合物。利用高速逆流色譜技術(shù)對(duì)黃芪中的黃酮苷進(jìn)行分離純化，得到毛蕊-7-0-β-D葡糖苷、芒柄花苷等5種高純度黃酮苷。2.1.6

分離橘皮中的多甲基黃酮橘皮中的黃酮類化合物具有抗癌、抗氧化等生理作用。利用高速逆流色譜技術(shù)，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水（1:0.8:1:1.2）為溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，從橘皮粗提物中分離出4種黃酮類化合物：5,6,7,8,3′,4′-六甲氧基黃酮、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黃酮、5,6,7,8,4′-五甲氧基黃酮、5-羥基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黃酮，其純度分別為98.9%、97.8%、99.2%、99.8%。2.2

在苷類成分提取中的應(yīng)用2.2.1

從玄參中分離哈帕苷和桃葉珊瑚苷哈帕苷和桃葉珊瑚苷是玄參中的主要活性成分環(huán)烯醚萜苷類化合物的主要成分。從鮮玄參根提取物中制得哈帕苷和桃葉珊瑚苷的混合物，利用高效液相色譜技術(shù)，以甲醇-水（4:96）為流動(dòng)相，得到哈帕苷和桃葉珊瑚苷的單體，兩者純度均大于99%。2.2.2

從朱砂根中分離朱砂根皂苷朱砂根皂苷屬于三萜皂苷，是朱砂根中的活性成分之一，具有抗癌活性和抗HIV活性。采用C18色譜柱分離朱砂根皂苷，并用反相高效液相色譜技術(shù)，色譜流動(dòng)相選擇了甲醇-水，經(jīng)過一次分離得到朱砂根皂苷單體，純度為96.4%。2.2.3

從人參花蕾和三七葉苷中分離人參皂苷人參皂苷屬于固醇類化合物。人參皂苷是人參花蕾中的主要活性成分，具有改善細(xì)胞代謝水平、增強(qiáng)機(jī)體功能的作用。人參花蕾中有兩種主要的人參皂苷：原人參二醇型皂苷和原人參三醇型皂苷。采用正相低壓制備色譜技術(shù)，以正丁醇-乙酸乙酯-水（4:1:5）為流動(dòng)相，流速為8

mL/min，將原人參二醇與原人參三醇分離，再采用制備型高效液相色譜技術(shù)純化人參皂苷Re，純度可高達(dá)98.5%。三七是五加科植物三七的干燥根，具有鎮(zhèn)痛、止血、抗心血管疾病等作用，人參皂苷Rb3是三七葉中的人參皂苷之一，具有鎮(zhèn)靜催眠的作用。用大孔吸附樹脂精制三七葉苷提取物，再以正丁醇-乙酸乙酯-水（2:1:1）為流動(dòng)相，流速為40

mL/min，從三七葉苷精制物中分離出人參皂苷Rb3單體，純度在95%以上。2.2.4

從甜菊糖中分離萊鮑迪苷A和甜葉菊苷甜菊糖提取自菊科草本植物甜葉菊，由甜菊苷、萊鮑迪苷A等許多不同的成分組成，是一種天然的甜味劑。采用中低壓制備色譜技術(shù)，從甜菊糖結(jié)晶母液中分離出萊鮑迪苷A，以乙腈-水（80:20）為流動(dòng)相，流速為4

mL/min，最終得到萊鮑迪苷A單體的純度為90.22%。以甜葉菊苷提取液為原料，利用模擬移動(dòng)床色譜技術(shù)分離甜葉菊苷，工藝參數(shù)為：切換時(shí)間12min，進(jìn)樣質(zhì)量濃度40mg/mL，進(jìn)料流速7.5mL/min，此條件下得到的產(chǎn)品甜葉菊苷純度為80.69%，收率為93.48%。2.2.5

純化何首烏活性成分二苯乙烯苷二苯乙烯苷是何首烏的主要成分之一，是一種多羥基酚類化合物，具有心血管活性、免疫調(diào)節(jié)等作用，同時(shí)具有降血脂、抗衰老作用。利用反相高壓液相制備色譜技術(shù)對(duì)何首烏提取液的精制液進(jìn)行分離，以甲醇-水（40:60）作為流動(dòng)相，分離出的二苯乙烯苷含量達(dá)到97%以上。2.3

在酯類成分提取中的應(yīng)用2.3.1

從當(dāng)歸揮發(fā)油中分離純化Z-藁本內(nèi)酯Z-藁本內(nèi)酯是當(dāng)歸、川芎和藁本等藥材中的主要活性成分。采用固相萃取預(yù)處理和高效液相色譜技術(shù)，以甲醇-水（70:30）為流動(dòng)相，流速為8mL/min，從當(dāng)歸的揮發(fā)油中分離出Z-藁本內(nèi)酯，經(jīng)質(zhì)譜、核磁共振光譜、紅外光譜、紫外光譜共同檢測，確定其最高純度可達(dá)到99.6%。2.3.2

分離獨(dú)活中的香豆素類成分蛇床子素是中藥獨(dú)活中的主要活性成分香豆素類含量最多的一種，有抗腫瘤的作用。利用高速逆流色譜技術(shù)從獨(dú)活提取物中分離制備高純度的蛇床子素，選用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（1.5:2.5:2:1.5）為溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，流速為3mL/min，得到的蛇床子素純度達(dá)到97.1%。利用高速逆流色譜技術(shù)，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（1.5:2.5:2:1.5）為溶劑體系，從裂葉獨(dú)活根中分離出二氫歐山芹醇乙酸酯、蛇床子素、二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯，純度均在96%以上。2.3.3

兒茶素的純化利用高壓制備液相色譜技術(shù)純化表沒食子兒茶素沒食子酸酯粗品中的沒食子兒茶素沒食子酸酯，純度可以達(dá)到99.51%。利用反相中壓制備液相色譜技術(shù)從茶多酚中分離出沒食子兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯4種單體，純度分別為91.8%、97.6%、97.7%、99.3%。2.4

在蒽醌類成分提取中的應(yīng)用2.4.1

在茜草中分離茜草蒽醌茜草蒽醌是植物茜草的主要有效成分之一，具有抗腫瘤活性作用。以茜草為原料，采用中低壓制備色譜技術(shù)純化茜草中的茜草蒽醌單體，一共得到4種單體，經(jīng)鑒定分別為：大葉茜草素、1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌、1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-（3′,6′-O-二乙?；?α-鼠李糖（1→2）-β-D葡萄糖苷和1,3,6-三羥基-2-甲基蒽醌-3-O-新橙皮糖苷，純度分別為99.87%、99.56%、99.42%、98.21%。2.4.2

分離大黃中的大黃酚和大黃素甲醚大黃酚和大黃素甲醚是蒽醌類化合物，是廖科植物大黃的兩種有效成分，大黃酚有抗菌、止血、降血糖等作用，大黃素甲醚有抑菌作用。利用制備型高效液相色譜技術(shù)純化大黃提取物中的大黃酚、大黃素甲醚，以甲醇-0.1%磷酸溶液（85:15）為流動(dòng)相，流速為20mL/min，得到產(chǎn)物大黃酚純度為98.8%，大黃素甲醚純度為98.7%。2.5

在生物堿類成分提取中的應(yīng)用2.5.1

從巖黃連中分離巖黃連堿巖黃連是罌粟科紫堇屬植物石生黃堇的全草，其有效成分是總生物堿，巖黃連堿是巖黃連總生物堿中的一種，有殺菌、止痛等作用。采用制備色譜技術(shù)從巖黃連提取液粗品中分離出巖黃連堿單體，產(chǎn)品質(zhì)量分?jǐn)?shù)在99%以上。2.5.2

從吳茱萸中分離生物堿吳茱萸是蕓香科吳茱萸屬植物，有止痛、抑菌等效果。用高速逆流色譜技術(shù)從吳茱萸中分離出5種生物堿：吳茱萸堿、蕓香萜、吳茱萸新堿、1-甲基-2-[（6Z,9Z）]-6,9-十五碳二烯基-4-（1H）-喹諾酮、1-甲基-2-十二烷基-4-（1H）-喹諾酮，純度分別為98.7%、98.4%、96.9%、98.0%、97.2%。2.5.3

從辣椒中分離辣椒堿單體辣椒是一年生草本茄科植物，其中辣椒堿類化合物有辛辣味。研究表明辣椒堿具有鎮(zhèn)痛、殺菌、消炎的作用。利用反相制備液相色譜技術(shù)從辣椒堿類化合物（其中辣椒堿含量60.46%、二氫辣椒堿含量33.35%、降二氫辣椒堿含量4.1%）中分離得到辣椒堿單體，以甲醇-水（75:25）為流動(dòng)相，流速為4.0mL/min，得到的辣椒堿單體純度為95.23%，回收率為93.27%。2.5.4

在益母草中分離益母草堿益母草堿是唇形科益母草屬植物益母草的生物堿類有效成分，益母草堿具有抗心血管疾病的作用。利用高速逆流色譜技術(shù)，以乙酸乙酯-正丁醇-水（3:2:5）為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，流速為2.2

mL/min，從益母草粗提物中分離益母草堿，純度達(dá)到96.2%。2.5.5

從馬比木中分離喜樹堿喜樹堿是植物喜樹、馬比木的一類活性物質(zhì)，具有抗腫瘤的生理活性作用。利用高速逆流色譜技術(shù)，從馬比木粗提物中分離制備出3種喜樹堿類化合物，分別為10-羥基脫氧喜樹堿、10-甲氧基喜樹堿、喜樹堿，純度分別為98.3%、99.3%、99.0%。2.6

在萜類產(chǎn)物提取中的應(yīng)用2.6.1

從冬凌草中分離冬凌草甲素冬凌草甲素是唇形科植物碎米椏的主要活性成分，具有清熱、消炎等功效，有較強(qiáng)的抗腫瘤活性作用。冬凌草是一種對(duì)映貝殼杉烯二萜類化合物。采用反相制備色譜技術(shù)，從冬凌草粗品中分離純化冬凌草甲素，以甲醇-水（55:45）為流動(dòng)相，流速為35

mL/min，最終得到的產(chǎn)品冬凌草甲素的純度可達(dá)99%。2.6.2

純化銀杏葉中的白果內(nèi)酯和銀杏內(nèi)酯A、B、C銀杏內(nèi)酯為銀杏葉提取物中主要的藥效成分之一，屬于萜類化合物，主要包括銀杏內(nèi)酯A、B、C和白果內(nèi)酯。將萃取吸附純化的銀杏提取物經(jīng)兩次高速逆流色譜分離，得到4種內(nèi)脂單體：白果內(nèi)酯和銀杏內(nèi)酯A、B、C，純度分別為98.3%、98.9%、98.8%、98.4%。2.6.3

分離杭白菊中的小白菊內(nèi)酯小白菊內(nèi)酯是一種倍半萜烯內(nèi)酯化合物，具有抗氧化、抗炎等多種藥理作用。利用高速逆流色譜技術(shù)，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（5:5:6:4）為溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，流速為2.0mL/min，從杭白菊超聲提取物中分離杭白菊內(nèi)酯，純度在92.8%左右。2.6.4

從油橄欖葉中分離橄欖苦苷橄欖苦苷是木犀科木犀屬喬木油橄欖中的一類裂環(huán)烯醚萜類化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化等作用。利用高速逆流色譜技術(shù)，以正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-水-氯仿（1:19:1:19:0.4）為溶劑體系，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，從油橄欖葉中成功分離得到橄欖苦苷，純度在90%以上。利用反相中壓制備液相色譜技術(shù)，從油橄欖葉中分離出5種多酚類化合物：脫咖啡?；锾擒?、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、6″-O-β-D-吡喃葡萄糖-橄欖苦苷、裂環(huán)馬錢子苷、橄欖苦苷，純度均在90%以上。2.7

在有機(jī)酸類成分提取中的應(yīng)用2.7.1

在金銀花中提取新綠原酸新綠原酸是忍冬科植物忍冬的花蕾金銀花的有效成分之一，具有抗菌解熱、抗血栓、抗氧化、抗炎等藥理作用。利用中低壓制備色譜技術(shù)從金銀花提取液中分離純化出新綠原酸單體，以乙腈-0.5%甲酸溶液（10:90）為流動(dòng)相，流速為20mL/min，分離制備的新綠原酸純度達(dá)98.86%。2.7.2

在杜仲和車前子中分離京尼平苷酸京尼平苷酸是杜仲科杜仲屬植物杜仲、車前科植物車前、茜草科植物龍船花的活性成分之一。利用快速制備液相色譜技術(shù)，從杜仲皮和車前子的純化提取液中分離出京尼平苷酸，以甲醇-水-乙酸（40:60:0.5）為流動(dòng)相，流速為2.5

mL/min，分離出的京尼平苷酸單體純度可以達(dá)到98.69%。2.8

在其他類產(chǎn)物提取中的應(yīng)用2.8.1

生物制品的分離以對(duì)氯苯基氨基甲酸酯化β-環(huán)糊鍵合氨化硅膠作為手性固定相，用半制備高效液相色譜技術(shù)成功拆分了含手性半胱氨酸的三螯合型釕苯配合物的非對(duì)映異構(gòu)體，得到了對(duì)應(yīng)度較高的兩對(duì)非