DB50-T 1573-2024 草莓脫毒種苗快速繁育技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSB30/39DB50重慶市市場監(jiān)督管理局發(fā)布IDB50/T1573—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會提出、歸口并組織實施。本文件起草單位：重慶市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站。本文件主要起草人：胡黎華、黃振霖、楊燦芳、趙雨佳、歐建龍、曾卓華、熊偉、寇琳羚。1DB50/T1573—2024草莓脫毒種苗快速繁育技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了草莓脫毒試管苗培育、脫毒原原種苗生產(chǎn)、脫毒原種苗繁殖、脫毒種苗繁殖、病毒檢測等要求。本文件適用于草莓脫毒種苗快速繁育。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T8321農(nóng)藥合理使用準則GB/T29375馬鈴薯脫毒試管苗繁育技術(shù)規(guī)程NY/T406脫毒草莓種苗病毒檢測技術(shù)規(guī)程NY/T3032草莓脫毒種苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4脫毒試管苗培育4.1消毒處理按GB/T29375的規(guī)定執(zhí)行。4.2培養(yǎng)基制備4.2.1培養(yǎng)基配方：莖尖分化培養(yǎng)基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖3%+瓊脂0.7%；增殖培養(yǎng)基MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖3%+0.7%瓊脂；生根培養(yǎng)基1/2MS+IB0.05mg/L+蔗糖1.5%+瓊脂0.7%。4.2.2將配置好的培養(yǎng)基溶液分裝入培養(yǎng)容器中，培養(yǎng)基深度約2cm，密封瓶口，在0.12mpa/cm2壓力下滅菌15min，冷卻備用。4.3接種材料4.3.1母株選擇田間選擇生長健壯、無病蟲害、能充分表現(xiàn)本品種優(yōu)良性狀的植株為母株。4.3.2接種材料2DB50/T1573—2024選擇充實飽滿、無機械損傷的新生匍匐莖，截取2cm～3cm頂端部位為接種材料。4.3.3清洗將接種材料放入紗布袋，流水沖洗去除表面沙塵和雜質(zhì)，滅菌濾紙吸干水分備用。4.4莖尖剝離及接種4.4.1在超凈工作臺上，將接種材料置于滅菌容器中，加入75%酒精浸泡30s。倒出酒精，無菌水沖洗3次。加0.1%升汞溶液浸泡7min～8min，期間適當晃動容器，倒出升汞溶液，無菌水沖洗5次，用滅菌濾紙吸干水分后備用。4.4.2在體視解剖鏡下用解剖針逐層剝?nèi)デo尖組織頂端的葉原基，直至露出頂端生長點，期間每剝離1層應(yīng)將解剖針浸入75%的酒精中消毒1s。切取0.2mm～0.3mm大小的生長點組織，按1～3個/瓶接種于分化培養(yǎng)基上，密封瓶口，注明品種、編號和接種日期。4.5培養(yǎng)4.5.1培養(yǎng)條件溫度23℃±2℃,相對濕度70%，光照強度2400Lx，每天光照時間14h～16h，生根階段可適當增加光照強度至5000Lx。4.5.2莖尖分化成苗將接種莖尖的培養(yǎng)瓶置于無菌室內(nèi)培養(yǎng)，直至莖尖分化成帶葉原基的小芽叢，將小芽叢編號后轉(zhuǎn)移至增殖培養(yǎng)基，每瓶接種1個，成苗后剪取葉片檢測病毒，保留無病毒苗叢。4.5.3脫毒苗擴繁將無病毒苗叢切分成2～4塊小苗叢，接種于增殖培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)，每20d～30d增殖1代。4.5.4生根培養(yǎng)從繼代苗叢剪取2cm以上的小苗接種于生根培養(yǎng)基，間距1cm～2cm，培養(yǎng)20d～30d，獲得脫毒試管苗。5脫毒原原種苗生產(chǎn)5.1生產(chǎn)條件在無病蟲的網(wǎng)室或溫室中生產(chǎn)，紗網(wǎng)規(guī)格100目。工作人員進入前應(yīng)對手部、鞋底消毒，穿戴專用工作服。室內(nèi)工具專用。5.2基質(zhì)配置將草炭、蛭石、細土、有機肥按體積5:2:2:1比例混合，按1㎏/m3加入氮磷鉀（N-P2O5-K2O，15-15-15）復(fù)合肥，混勻、過篩，高溫日曬或按4g/㎏拌入50%多菌靈可濕性粉劑消毒后備用。5.3煉苗移栽生根試管苗在室溫弱光環(huán)境下煉苗1d，揭去瓶蓋后再煉苗1d。取苗洗去培養(yǎng)基，移栽入溫、網(wǎng)室內(nèi)的基質(zhì)苗床（穴盤），澆透水后噴施1次多粘類芽孢桿菌生物菌肥，間隔7d再噴施1～2次。3DB50/T1573—20245.4管理苗床（穴盤）上方搭建小拱棚,覆蓋塑料薄膜、遮陽網(wǎng)，7d后逐漸通風(fēng)和增加光照。棚內(nèi)溫度15℃~25℃,相對濕度85%～90%。14d后撤除薄膜，移栽60d后生長成可定植的脫毒原原種苗。5.5品種真實性觀察將脫毒原原種苗定植后觀察植物學(xué)性狀和生物學(xué)性狀，淘汰變異植株。6脫毒原種苗繁殖將脫毒原原種苗帶土定植于基質(zhì)苗床，株行距1m×1m。將匍匐莖節(jié)壓入基質(zhì)，子苗長至4片葉以上，得到脫毒原種苗，可作為擴繁脫毒種苗的母株。7脫毒種苗繁殖7.1育苗地選擇海拔1000m～1200m，地勢平坦、排灌方便、光照充足，無土壤線蟲及草莓病源，土質(zhì)疏松肥沃、微酸性或中性、3年內(nèi)未種植過草莓和茄科作物的沙壤土地塊,建立脫毒種苗繁育苗圃。7.2整地施肥每667㎡施入腐熟的有機肥1000㎏，深翻、平整土地，耕勻耙細開廂，廂寬1m～1.2m。7.3定植在春季氣溫達到10℃以上時，將脫毒原種苗按株距50cm～60cm單行定植于廂面中部，栽植深度“上不埋心，下不露根”。栽后澆透定根水，保持土壤濕潤。7.4田間管理7.4.1水肥管理7.4.1.1宜配套安裝噴灌設(shè)施，夏季澆水選擇早晚地溫較低時進行，雨季應(yīng)開溝排水。7.4.1.2匍匐莖發(fā)生期，結(jié)合澆水每次用3kg/畝氮磷鉀復(fù)合肥（N-P2O5-K2O，20-20-20）追肥1～2次，生長后期，宜葉面噴施0.1%～0.3%磷酸二氫鉀水溶肥。7.4.2花、葉管理及時摘除母株上的花蕾花序、干枯老葉、病葉。7.4.3匍匐莖整理匍匐莖發(fā)生期及時將交叉重疊的匍匐莖拉開，將匍匐莖上發(fā)生的不定根莖節(jié)段壓入土中。7.5病蟲害防治7.5.1防治原則堅持“預(yù)防為主，綜合防治”的植保方針，以農(nóng)業(yè)防治和物理防治為基礎(chǔ)，優(yōu)先采用生物防治技術(shù)，輔以化學(xué)防治應(yīng)急控害措施。4DB50/T1573—20247.5.2主要防治對象主要蟲害有蚜蟲、螨類、斜紋夜蛾、蠐螬等，主要病害有蛇眼病、炭疽病、白粉病、紅心根腐病等。7.5.3用藥安全農(nóng)藥使用應(yīng)符合GB/T8321的規(guī)定。7.6出圃標