HPV-E6E7mRNA-bDNA技術(shù)原理簡介

SampleTitle

關(guān)于bDNA技術(shù)的相關(guān)問題解答SampleTitlebDNA技術(shù)平臺

branch-DNA(bDNA)技術(shù)原理是“三明治”核酸雜交，該技術(shù)的擴(kuò)增特點(diǎn)是不經(jīng)過呈指數(shù)增長的擴(kuò)增過程，放大倍數(shù)確定，重復(fù)性，穩(wěn)定性高?？梢詫RNA做精確的定量檢測及動(dòng)態(tài)水平研究。它克服了傳統(tǒng)的real-timePCR技術(shù)中的種種缺陷與不確定因素，無需抽提純化RNA，無需反轉(zhuǎn)錄，無需PCR擴(kuò)增，只要將樣本用特定裂解液裂解后，經(jīng)探針雜交與信號放大即可迅速得到更加精確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。除各種普通樣本外，該技術(shù)對qPCR很難分析的血液樣本與保存多年后mRNA高度降解的FFPE樣本同樣具有極高的準(zhǔn)確度與重現(xiàn)性。SampleTitlebDNA技術(shù)的根本的生物學(xué)反響流程Amplificationcalculation:amplifierno.(6,20)xlabelprobeno.(4;20)xtreeno.(3;6-8)SampleTitleQuantiVirusTMassaycomponent(BasedonbDNAplatform)

Component1:

Coated96wellCapturePlate

CapturePlate(96-wellplate)UniversalCaptureProbe

Component2:

TargetSpecificProbeSetProbeSetCE’sLE’sBP’sSubstrateGlowLuminescenceAmplifierlabelAlkalinephosphataseconjugatedoligosBranchedDNA(Amplifier)

Component3:

bDNASignalAmplificationReagentsSampleTitleComponent1:Coated96wellcaptureplate(96孔捕獲包被板〕該96孔板底包被有幾百萬支的單鏈DNA捕獲探針,其序列為通用序列〔universalsequence),以3’端結(jié)合組分2〔探針組〕中的檢測探針CE(CaptureExtender).Component2:TargetSpecificProbset(特制檢測目標(biāo)探針〕檢測目標(biāo)探針主要是由CE,LE,BL三個(gè)探針組成。CE主要連接被檢測物和延長探針〔LE〕，LE和bDNA放大探針組結(jié)合，BL用于降低非特異性結(jié)合。Component3:bDNA信號放大局部bDNA信號放大探針為單鏈DNA，分兩步逐級放大信號，共400倍信號放大，最終以化學(xué)發(fā)光，光信號表達(dá)。見以下圖bDNA技術(shù)各組分解析SampleTitle具體的常規(guī)操作流程SampleTitle通過測得的光子數(shù)轉(zhuǎn)換成的COPY數(shù)，為何代表的是真正病毒的活動(dòng)度？

1，軟件內(nèi)設(shè)了標(biāo)準(zhǔn)曲線2，陽性質(zhì)控明確知道m(xù)RNA拷貝數(shù)值，我們的公式可準(zhǔn)確轉(zhuǎn)換光子數(shù)到拷貝數(shù)。3，結(jié)合bDNA的工作原理圖，HPVE6/E7