香菇-征求意見(jiàn)稿

1T/SDAHAXX—2024本文件規(guī)定了獸用藥材香菇的術(shù)語(yǔ)和定義、技術(shù)指標(biāo)、抽樣、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、包裝、運(yùn)輸、貯存、保質(zhì)期。本文件適用于香菇藥材的質(zhì)量控制研究。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法《中華人民共和國(guó)獸藥典》二部NY/T1676-2008食用菌中粗多糖含量測(cè)定GH/T1013-1998中華全國(guó)供銷合作總社行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)——香菇3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件香菇LENTINUS指按照《中華人民共和國(guó)獸藥典》二部凡例及附錄“藥材和飲片檢定通則”相關(guān)要求制備香菇藥材，為側(cè)耳科香菇屬真菌香菇Lentinulaedodes(Berk.)pegler的干燥子實(shí)體。全年采收，除去雜質(zhì)，剪除附有朽木、泥沙或培養(yǎng)基質(zhì)的下端菌柄，烘干或烘曬結(jié)合干燥。4技術(shù)要求4.1性狀本品子實(shí)體菌蓋直徑在3～12cm之間，半球形或扁平球形至稍平展。表面菱色、淺褐色、深褐色至深肉桂色，有深色鱗片，有的有天然裂紋，菌肉白色，細(xì)密。菌褶白色，密、彎生、不等長(zhǎng)。干品菌柄中生至偏生，白色，常彎曲，長(zhǎng)0.8～3cm，直徑0.5～1cm，內(nèi)實(shí)，纖維質(zhì)。有香菇特有香味，微甘。2T/SDAHAXX—20244.2技術(shù)指標(biāo)技術(shù)指標(biāo)應(yīng)符合表1的要求表1技術(shù)指標(biāo)技術(shù)指標(biāo)指標(biāo)要求菌絲、孢子鑒別孢子橢圓形，有時(shí)一端稍尖，無(wú)色，壁表面光滑，長(zhǎng)5~7μm，寬3～4μm。木糖、半乳糖、葡萄糖鑒別供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)水分≤13.0%總灰分≤7.0%特征圖譜供試品圖譜中應(yīng)有4個(gè)特征峰，計(jì)算各特征峰相對(duì)于參照物的保留時(shí)間，其相對(duì)保留時(shí)間應(yīng)在規(guī)定值的±5%之內(nèi)，0.988（峰4）。含量測(cè)定按干燥品計(jì)算，粗多糖含量以D-無(wú)水葡萄糖(C6H12O6)計(jì)≥7.8%5樣品5.1組批同原料、同工藝、同班次生產(chǎn)，質(zhì)量均一、規(guī)格相同的產(chǎn)品為一批。5.2抽樣具體抽取樣數(shù)量規(guī)則如下：設(shè)每批的總包裝數(shù)量為N，當(dāng)N≤3時(shí)，每件取樣；當(dāng)N為3<N≤300時(shí)，按抽樣量·N+1隨機(jī)抽樣；當(dāng)N>300時(shí)，按照抽樣量N/2+1隨機(jī)抽樣，混合。6試驗(yàn)方法6.1性狀取本品適量，在自然光下觀察。3T/SDAHAXX—20246.2菌絲、孢子顯微鑒定取本品適量，置載玻片上，加適量水合氯醛，加熱透化，蓋上蓋玻片，置顯微鏡下觀察：本品粉末灰黃色，菌絲眾多，無(wú)色透明，具有分支和橫隔。孢子橢圓形，有時(shí)一端稍尖，無(wú)色，壁表面光滑，長(zhǎng)5~7μm，寬3～4μm。6.3半乳糖、葡萄糖、木糖鑒別取本品粗粉20g，加水400mL，煎煮60分鐘，過(guò)濾，濾渣再加水300mL，煎煮60分鐘，過(guò)濾，合并濾液，濃縮至40mL左右（室溫），加入乙醇使含醇量達(dá)60%，邊加邊攪，靜置，過(guò)濾，取沉淀，先加60%乙醇50mL洗滌，再加適量95%乙醇洗滌，60℃真空干燥，得多糖樣品。取多糖樣品0.1g，加1mol/L硫酸溶液6.5mL，密封，置水浴中水解4小時(shí)，取出，放冷，加碳酸鋇（固體）中和至中性，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。另取木糖對(duì)照品、半乳糖對(duì)照品、葡萄糖對(duì)照品，分別加水制成每1mL含5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（《中國(guó)獸藥典》二部附錄32頁(yè)）試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液、對(duì)照品溶液展開劑，展開，取出，晾干，噴以苯胺-二苯胺-丙酮溶液（將2g二苯胺、2mL苯胺溶于100mL丙酮中，再加入10mL85％磷酸），于85℃加熱10分鐘。供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。6.4水分按照《中華人民共和國(guó)獸藥典》二部附錄0832第一法（烘干法）執(zhí)行。6.5總灰分按照《中華人民共和國(guó)獸藥典》二部附錄2302灰分測(cè)定法執(zhí)行。6.6特征圖譜按照附錄A執(zhí)行。6.7含量測(cè)定（香菇粗多糖）按照附錄B執(zhí)行。7檢驗(yàn)規(guī)則7.1檢驗(yàn)7.1.1檢驗(yàn)項(xiàng)目：技術(shù)指標(biāo)規(guī)定的全部項(xiàng)目。7.1.2檢驗(yàn)由生產(chǎn)企業(yè)的質(zhì)檢部門負(fù)責(zé)。7.1.3檢驗(yàn)合格的，簽發(fā)“產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)合格證”。7.2判定規(guī)則抽取樣品經(jīng)檢驗(yàn)，所檢項(xiàng)目全部合格，判定該批產(chǎn)品為合格。檢驗(yàn)結(jié)果如有1項(xiàng)指標(biāo)不合格，應(yīng)重新自同批產(chǎn)品中抽取兩倍量的樣品進(jìn)行復(fù)檢，以復(fù)檢結(jié)果為準(zhǔn)，若仍有不合格項(xiàng)，判定該批產(chǎn)品為不合格。4T/SDAHAXX—20248包裝、運(yùn)輸、貯存、保質(zhì)期8.1包裝包裝材料應(yīng)符合《中華人民共和國(guó)獸藥典》二部附錄9032藥包材通用要求指導(dǎo)原則及農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的規(guī)定，均應(yīng)無(wú)毒、潔凈，與內(nèi)容物不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，并不得影響內(nèi)容物的質(zhì)量。整潔、衛(wèi)生、無(wú)破損。8.2運(yùn)輸運(yùn)輸設(shè)備應(yīng)清潔衛(wèi)生、不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品混裝，應(yīng)避免受潮、暴曬。8.3貯存密封貯存在陰涼、通風(fēng)、干燥、清潔的倉(cāng)庫(kù)內(nèi)，置干燥處，防霉，防蛀。不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品放在一起。8.4保質(zhì)期在符合運(yùn)輸、貯存條件的情況下，原包裝產(chǎn)品的保質(zhì)期與標(biāo)簽中標(biāo)明的保質(zhì)期一致。5T/SDAHAXX—2024（規(guī)范性）香菇特征圖譜測(cè)定方法A.1原理試料中的多糖組分，采用高效分子排阻色譜法進(jìn)行分離，不同分子量的多糖相對(duì)保留時(shí)間不同，建立香菇多糖組分的特征圖譜。A.2試劑和材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純?cè)噭?。水為符合GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。A.2.1磷酸二氫鉀：分析純。A.2.2無(wú)水乙醇：分析純。A.2.30.02mol/L磷酸二氫鉀溶液：取2.72g磷酸二氫鉀（A.2.1），用水稀釋至100mL。A.2.460%乙醇：取乙醇（A.2.2）60mL，用水稀釋至100mL。A.2.595%乙醇：取乙醇（A.2.2）95mL，用水稀釋至100mL。A.2.6D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品：含量測(cè)定用。A.2.7參照物溶液的制備：取經(jīng)105℃干燥至恒重的D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品50mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液（A.2.3）使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。A.2.8無(wú)機(jī)系過(guò)濾頭（孔徑為0.45μm）A.3儀器和設(shè)備A.3.1高效液相色譜儀（配示差折光檢測(cè)器）；A.3.2分析天平：感量0.0001g。A.3.3電熱真空干燥箱:控溫范圍5-220℃A.3.3色譜柱：以TSK凝膠色譜柱G4000PWxl（7.8mm×300mm，10μm）；或性能相當(dāng)者。A.4分析步驟A.4.1試液制備取本品粗粉20g，加水400mL，煎煮60分鐘，過(guò)濾，濾渣再加水300mL，煎煮60分鐘，過(guò)濾，合并50mL洗滌，再加適量95%乙醇（A.2.5）洗滌，60℃真空干燥，得多糖樣品。取多糖樣品30mg，精密加入流動(dòng)相10mL，密封，水浴溶解，0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。A.4.2測(cè)定法6T/SDAHAXX—2024分別精密吸取供試品溶液（A.4.1）及參照物溶液（A.2.6）各20μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，記錄色譜圖，即得。香菇多糖特征圖譜見(jiàn)圖1。A.4.3液相色譜參考條件流動(dòng)相：0.02moL/L磷酸二氫鉀溶液。流速：0.6mL/min。柱溫：30℃。A.5數(shù)據(jù)處理供試品色譜中應(yīng)有4個(gè)特征峰，計(jì)算各特征峰相對(duì)于參照物的保留時(shí)間。A.5.1相對(duì)保留時(shí)間供試品中4個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間，按式（A.1）計(jì)算：r=r樣………………（A.1）參照物相對(duì)保留時(shí)間r參照物式中：T相對(duì)保留時(shí)間-----------特征峰的相對(duì)保留時(shí)間；T樣----------------樣品特征峰的保留時(shí)間，單位為分鐘（min）T參照物--------------參照物的保留時(shí)間，單位為分鐘（min）；測(cè)定結(jié)果保留至小數(shù)點(diǎn)后三位。A.6結(jié)果判定供試品色譜中4個(gè)特征峰的相對(duì)保留時(shí)間應(yīng)在規(guī)定值的±5%之內(nèi)，規(guī)定值為：0.508（峰1）、0.618（峰2）、0.866（峰3）、0.988（峰4）。A.7附圖 圖1供試品特征圖譜7T/SDAHAXX—2024（規(guī)范性）香菇中粗多糖含量測(cè)定方法A.1原理試料中的多糖在硫酸作用下脫水生成糠醛衍生物，與苯酚生成橙紅色物質(zhì)，在490nm有最大吸收，用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定，外標(biāo)法定量。A.2試劑和材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純?cè)噭?。水為符合GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。A.2.1無(wú)水乙醇：分析純。A.2.2硫酸：分析純。A.2.380%乙醇：取乙醇（A.2.1）80mL，用水稀釋至100mL。A.2.450%硫酸：取硫酸50mL，用水稀釋至100mL。A.2.5苯酚：分析純。A.2.6苯酚蒸餾：將苯酚置于80℃的水浴中溶解，然后將一定量的苯酚移至蒸餾瓶中。放入玻璃珠數(shù)粒，于182℃蒸餾，棄去最初2～3min蒸餾液，收集隨后的蒸餾液，待冷卻后備用。A.2.75%苯酚：取苯酚（A.2.5）5mL，用水稀釋至100mL?，F(xiàn)用現(xiàn)配。A.2.8D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品：含量測(cè)定用。A.2.9對(duì)照品溶液的制備：取經(jīng)105℃干燥至恒重的D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品10mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加50%硫酸（A.2.4）使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。A.3儀器和設(shè)備A.3.1紫外-可見(jiàn)分光光度檢測(cè)器；1cm比色皿。A.3.2分析天平：感量0.0001g。A.3.3離心機(jī)，轉(zhuǎn)速在5000rpm以上，離心管容量≥50mL。A.3.4超聲波提取器：功率300W，頻率40kHz。A.3.5真空干燥箱，10℃~250℃。A.4分析步驟A.4.1試液制備取本品粉末（過(guò)三號(hào)篩）約0.5g，精密稱定，置50mL三角燒瓶中，用5mL水浸潤(rùn)，緩慢加入20mL無(wú)水乙醇（A.2.1），混勻，置超聲提取器中提取30分鐘（功率300W，頻率40kHz）。4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，棄去上清液。沉淀用80%乙醇（A.2.3）溶液10mL洗滌，同法離心。用50mL水將沉淀轉(zhuǎn)入圓底燒瓶中，8T/SDAHAXX—2024置水浴中回流提取2小時(shí)。放冷，過(guò)濾，殘?jiān)盟礈?～3次，合并濾液轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。A.4.2定量測(cè)定精密量取試液（A.4.1）及對(duì)照品溶液（A.2.7）各1mL，分別置20mL具塞試管中，精密加5%苯酚（A.2.6）1.0mL，搖勻，再迅速精密加5ml硫酸，立即混勻，放置10分鐘。置30℃水浴中反應(yīng)20分鐘，取出，放置至室溫，以相應(yīng)試劑作空白參比，在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，即得。A.5數(shù)據(jù)處理樣品中粗多糖的含量Xi以D-無(wú)水葡萄糖(C6H12O6)計(jì)，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）表示，按式（A.1）計(jì)算：×100%………………式中：AS-----------樣品的吸光度；AR-----------D-無(wú)水葡萄糖對(duì)照品的吸光度；MS--------