醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌 生物指示物 第5部分：蒸汽甲醛滅菌用生物指示物

ICS11.080.01

CCSC47

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

代替GB/T18281.5-2015

`

醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第5部分：

低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物

Sterilizationofhealthcareproducts—Biologicalindicators—Part5:Biological

indicatorsforlow-temperaturesteamandformaldehydesterilizationprocesses

(ISO11138-5:2017,IDT)

（征求意見稿）

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

引言

GB/T18281《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物》是有關(guān)生物指示物的通用性和專用性標(biāo)準(zhǔn)。GB/T18281

旨在提供生物指示物的要求、選擇和使用指南以及縮短培養(yǎng)時間的方法，擬由八個部分構(gòu)成：

——第1部分：通則。目的在于提供生物指示物的通用要求。

——第2部分：環(huán)氧乙烷滅菌用生物指示物。目的在于提供環(huán)氧乙烷滅菌用生物指示物的專用要

求。

——第3部分：濕熱滅菌用生物指示物。目的在于提供濕熱滅菌用生物指示物的專用要求。

——第4部分：干熱滅菌用生物指示物。目的在于提供干熱滅菌用生物指示物的專用要求。

——第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物。目的在于提供低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物

的專用要求。

——第6部分：過氧化氫滅菌過程用生物指示物。目的在于提供過氧化氫滅菌用生物指示物的專

用要求。

——第7部分：選擇、使用和結(jié)果判斷指南。目的在于提供生物指示物的正確選擇和使用的指南。

——第8部分：縮短生物指示物培養(yǎng)時間的確認(rèn)方法。目的在于提供縮短生物指示物培養(yǎng)時間的

確認(rèn)方法。

GB18281.1規(guī)定了生物指標(biāo)物在生產(chǎn)、標(biāo)簽、測試方法和性能方面的通用要求，這些指示物包含

擬用于滅菌過程確認(rèn)和常規(guī)監(jiān)測的染菌載體和菌懸液。本文件規(guī)定了用于低溫蒸汽甲醛滅菌過程中的生

物指示物的專用要求。

附錄B給出了低溫蒸汽甲醛用生物指示物的液相測試方法原理。

GB18281標(biāo)準(zhǔn)系列由來自生產(chǎn)商、用戶和監(jiān)管機(jī)構(gòu)的專家們共同參與制定，代表了目前的“最先

進(jìn)的技術(shù)。該系列標(biāo)準(zhǔn)并非是提倡在不建議使用的情況下使用生物指示物，而是為生物指示物的生產(chǎn)與

使用提供規(guī)范化要求。

ISO25424提供了用于低溫蒸汽甲醛滅菌過程的確認(rèn)與常規(guī)監(jiān)測的通用要求。

注：我國已公布了涵蓋滅菌或生物指示物要求的標(biāo)準(zhǔn)。

對生物指示物的選擇、使用和結(jié)果判讀指南見ISO14161。

II

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生

物指示物

1范圍

本文件規(guī)定了用于使用低溫蒸汽甲醛作為滅菌劑的滅菌過程效果評價的試驗(yàn)微生物、菌懸液、染菌

載體、生物指示物和測試方法的要求。

注1：低溫蒸汽甲醛滅菌過程的確認(rèn)和常規(guī)控制的要求見ISO14937。

注2：工作場所的安全要求見我國國家或地方法規(guī)。

本文件適用于低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物。

本文件不適用于其他滅菌用生物指示物。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

ISO11138-1:2017醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第1部分：通則（Sterilizationofhealthcare

products-Biologicalindicators-Part1:Generalrequirements）

注：GB/T18281.1-20××醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第1部分：通則（ISO11138-1:2017，IDT）。

3術(shù)語和定義

ISO11138-1界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

低溫蒸汽甲醛滅菌low-temperaturesteamandformaldehydesterilization

通過動力排氣，使預(yù)先包裝的物品處在負(fù)壓狀態(tài)下暴露于蒸汽，在低于100℃溫度下，注入甲醛

氣體使滅菌劑在維持時間內(nèi)保持穩(wěn)定狀態(tài)的過程。

4通用要求

ISO11138-1的要求適用。

5試驗(yàn)微生物

5.1試驗(yàn)微生物應(yīng)是嗜熱脂肪地芽孢桿菌或其它證明符合本文件要求的等效性能的微生物菌株。

注1：嗜熱脂肪芽孢桿菌已重新分類為嗜熱脂肪地芽孢桿菌。

注2：目前被認(rèn)為適用的嗜熱脂肪地芽孢桿菌，如NCIB8224，DSM6790，ATCC7593，ATCC10149和ATCC12980。

5.2如使用嗜熱脂肪地芽孢桿菌以外的試驗(yàn)微生物，應(yīng)確定試驗(yàn)微生物的抗力適用性。

1

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

6菌懸液

ISO11138-1的要求適用。

7載體和初級包裝

7.1用于低溫蒸汽甲醛滅菌過程生物指示物的載體與初級包裝的材料適用性應(yīng)證明符合ISO11138-1：

2017中5.2和附錄B的要求。

注：由于纖維素表面對甲醛的化學(xué)吸附作用，濾紙類不宜作載體。

7.2確定符合性的暴露條件應(yīng)如下：

a)最低暴露溫度：制造商標(biāo)稱的最高暴露溫度的5℃以上；

b)最高暴露溫度：由制造商標(biāo)稱；如果制造商未標(biāo)稱，最高暴露溫度應(yīng)≥100℃；

c)暴露時間：≥160min。

注：盡管在低溫蒸汽甲醛滅菌過程的實(shí)際限制范圍內(nèi)，暴露條件還需代表對載體的現(xiàn)實(shí)挑戰(zhàn)。

8染菌載體和生物指示物

ISO11138-1的要求適用。

9菌數(shù)和抗力

9.1抗力特性應(yīng)按ISO11138-1：2017的6.4要求標(biāo)稱。

9.2生物指示物上每單位活菌數(shù)的增量應(yīng)以≤0.1×10n的整數(shù)倍標(biāo)稱（如：每毫升菌懸液、每個染

菌載體或每個生物指示物）。

9.3染菌載體和生物指示物的活菌數(shù)應(yīng)≥1.0×105。

9.4抗力應(yīng)用60℃時的D值表示，單位為分鐘。每一批次的生物指示物或者染菌載體的D值應(yīng)

以60℃下分鐘數(shù)進(jìn)行標(biāo)稱，保留一位小數(shù)。

9.5按照附錄A進(jìn)行測試時，以嗜熱脂肪地芽孢桿菌芽孢制成的菌懸液、染菌載體或生物指示物的

D60值應(yīng)≥6.0min。采用其它微生物時，應(yīng)滿足該D值要求。

9.6本文件和ISO11138標(biāo)準(zhǔn)系列中其它部分中規(guī)定的抗力特性應(yīng)使用與參考滅菌過程相關(guān)的特定

關(guān)鍵變量來測定。

9.7D值按ISO11138-1:2017中附錄C和附錄D的方法確定。

9.8D值的確定和存活—?dú)绶磻?yīng)特性依據(jù)附錄A中的過程參數(shù)。

9.9存活—?dú)鐓^(qū)間宜用ISO11138-1:2017中附錄E的公式來計(jì)算。

注：此信息對使用者在比較同一制造商不同批次產(chǎn)品時是有價值的。

示例：使用ISO11138-1:2017附錄E的公式結(jié)合本文件規(guī)定的最少菌數(shù)與最小D值，存活-殺滅反應(yīng)特性為

-在60℃時：存活時間≥18min，殺滅時間≤54min。

2

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

附錄A

（規(guī)范性）

測定低溫蒸汽甲醛滅菌過程中抗力的方法

A.1通則

本方法是一種基于染菌載體浸沒到甲醛水溶液的定性測試。本方法的測試結(jié)果比使用氣相腔式方法

的結(jié)果有更好的重現(xiàn)性。

A.2染菌載體的暴露條件

A.2.1測試系統(tǒng)中包含裝有10mL甲醛水溶液的試管，并使試管放在一個自動控溫的水浴裝置中。測

試系統(tǒng)應(yīng)能在1min至150min時間段內(nèi)（精確至±10s）保持特定的暴露條件。

A.2.2甲醛水溶液的濃度應(yīng)用化學(xué)分析方法確定。

A.2.3方法應(yīng)進(jìn)行確認(rèn)。

A.3步驟

A.3.1測試時采用無菌操作以避免偶發(fā)污染。

A.3.2將染菌載體完全浸沒于裝有預(yù)熱至60℃±0.5℃、濃度為1mol/L±0.01mol/L的甲醛水溶

液測試試管中。

A.3.3確認(rèn)染菌載體完全浸沒于甲醛水溶液中而不是漂浮于表面。

A.3.4在設(shè)定的暴露時間結(jié)束時，取出甲醛溶液中的染菌載體。

A.3.5去除載體上的多余液體，將其在室溫下浸入裝有已過濾后的2%Na2SO3溶液的試管中至少1

0min，以中和載體上殘留的甲醛。蓋上試管。應(yīng)注意盡量不要攪動甲醛與中和劑溶液，以防止微生物

被沖下。

注：組氨酸和半胱氨酸是有效的中和劑。

A.3.6應(yīng)規(guī)定生長培養(yǎng)基，確保該培養(yǎng)基可回收測試微生物。

注：本測試中大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基適用。

A.3.7將載體轉(zhuǎn)移至裝有10mL生長培養(yǎng)基（A.3.6）的試管中。蓋上試管。

A.3.8將試管在90℃下放置60min用于孢子的熱激活。

A.3.9最后對載體進(jìn)行培養(yǎng)（見ISO11138-1:2017，第7章）。

A.4抗力確定

抗力特性應(yīng)按ISO11138-1:2017中附錄C、D和E的方法進(jìn)行確定。

3

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

附錄B

（資料性）

低溫蒸汽甲醛用生物指示物的液相測試方法原理

B.1通則

為了能夠以可重復(fù)的方法檢測指示物，應(yīng)使用特定的測試設(shè)備（抗力儀）和測試方法。在低溫蒸汽

甲醛滅菌過程中，抗力儀中的甲醛氣體濃度極難達(dá)到穩(wěn)定，因?yàn)楫?dāng)一定量的甲醛注入容器中后，部分甲

醛會溶于出現(xiàn)的少量的水珠（冷凝物）中。依照溫度的不同，甲醛在水中的濃度高于其在氣體狀態(tài)下濃

度的1000倍至10000倍。

因此，本文件采用甲醛溶液浸泡的測試方法，該方法下甲醛濃度清晰界定，方法重現(xiàn)性較好。

B.2低溫蒸汽甲醛滅菌過程

即使在連續(xù)的蒸汽條件下和穩(wěn)定的甲醛氣體濃度中，滅菌過程仍高度依賴于滅菌腔體的設(shè)計(jì)和裝載

物的特性。甲醛滅菌過程可以簡單地劃分為兩個步驟：

a)與蒸汽滅菌過程類似，裝載物表面會產(chǎn)生水珠冷凝物膜；

注：冷凝過程會極快發(fā)生。

b)由于甲醛在氣液平衡狀態(tài)下的濃度變化極大（1:1000到1:10000），因此達(dá)到平衡所需要的

時間相對較長。

注：在實(shí)際情況下，需要的時間可能在10min至2h之間。

滅菌過程中對微生物殺滅的能力高度取決于甲醛在液態(tài)中的濃度，如表面冷凝水。確認(rèn)達(dá)到這種平

衡條件的準(zhǔn)確時間非常困難。

4

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

參考文獻(xiàn)

[1]ISO14161,Sterilizationofhealthcareproducts-Biologicalindicators-Guidancefortheselection,use

andinterpretationofresults

[2]ISO14937,Sterilizationofhealthcareproducts-Generalrequirementsforcharacterizationofa

sterilizingagentandthedevelopment,validationandroutinecontrolofasterilizationprocessformedical

devices

[3]ISO25424,Sterilizaitonofmedicaldevices-Lowtemperaturesteamandformaldehyde-Requirements

fordevelopment,validationandroutinecontrolofasterilizationprocessformedicaldevices

[4]EN14180,Sterilizersformedicalpurposes-Lowtemperaturesteamandformaldehyde

sterilizer-Requirementsandtesting

[5]GoMANNJ.,KAISERU.,MENZELR.Reactionkineticsofthelow-temperature-steam-formaldehyde

(LTST).SterilizationProcess.ZentrSteril.2000.8(5)pp.290-296

5

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件是GB/T18281《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物》的第5部分。GB/T18281已經(jīng)發(fā)布了以下

部分：

——第1部分：通則；

——第2部分：環(huán)氧乙烷滅菌用生物指示物；

——第3部分：濕熱滅菌用生物指示物；

——第4部分：干熱滅菌用生物指示物；

——第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物；

——第7部分：選擇、使用和結(jié)果判斷指南；

——第8部分：縮短生物指示物培養(yǎng)時間的確認(rèn)方法。

本文件代替GB18281.5-2015《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生

物指示物》，與GB18281.5-2015相比，主要技術(shù)變化如下：

——更改了規(guī)范性引用文件（見第2章）；

——更改了載體和初級包裝的暴露時間（見7.2）；

——刪除了指示物抗力用FBIO值表示的規(guī)定（見2015年版的9.6）。

本文件等同采用國際標(biāo)準(zhǔn)ISO11138-5:2017《醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽

甲醛滅菌用生物指示物》。

本文件做了下列編輯性修改：

——刪除了國際標(biāo)準(zhǔn)的前言，以適應(yīng)我國的國情；

——更改了引言中的注，以適應(yīng)我國的國情；

——更改了范圍中的注2，以適應(yīng)我國的國情。

本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。

本文件由全國消毒技術(shù)與設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（SAC/TC200）歸口。

本文件起草單位：

本文件主要起草人：

本文件所替代文件的歷次版本發(fā)布情況為：

——2015年首次發(fā)布為GB/T18281.5-2015；

——本次為第一次修訂。

I

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第5部分：低溫蒸汽甲醛滅菌用生

物指示物

1范圍

本文件規(guī)定了用于使用低溫蒸汽甲醛作為滅菌劑的滅菌過程效果評價的試驗(yàn)微生物、菌懸液、染菌

載體、生物指示物和測試方法的要求。

注1：低溫蒸汽甲醛滅菌過程的確認(rèn)和常規(guī)控制的要求見ISO14937。

注2：工作場所的安全要求見我國國家或地方法規(guī)。

本文件適用于低溫蒸汽甲醛滅菌用生物指示物。

本文件不適用于其他滅菌用生物指示物。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

ISO11138-1:2017醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第1部分：通則（Sterilizationofhealthcare

products-Biologicalindicators-Part1:Generalrequirements）

注：GB/T18281.1-20××醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第1部分：通則（ISO11138-1:2017，IDT）。

3術(shù)語和定義

ISO11138-1界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

低溫蒸汽甲醛滅菌low-temperaturesteamandformaldehydesterilization

通過動力排氣，使預(yù)先包裝的物品處在負(fù)壓狀態(tài)下暴露于蒸汽，在低于100℃溫度下，注入甲醛

氣體使滅菌劑在維持時間內(nèi)保持穩(wěn)定狀態(tài)的過程。

4通用要求

ISO11138-1的要求適用。

5試驗(yàn)微生物

5.1試驗(yàn)微生物應(yīng)是嗜熱脂肪地芽孢桿菌或其它證明符合本文件要求的等效性能的微生物菌株。

注1：嗜熱脂肪芽孢桿菌已重新分類為嗜熱脂肪地芽孢桿菌。

注2：目前被認(rèn)為適用的嗜熱脂肪地芽孢桿菌，如NCIB8224，DSM6790，ATCC7593，ATCC10149和ATCC12980。

5.2如使用嗜熱脂肪地芽孢桿菌以外的試驗(yàn)微生物，應(yīng)確定試驗(yàn)微生物的抗力適用性。

1

GB/T18281.5—20XX/ISO11138-5:2017

6菌懸液

ISO11138-1的要求適用。

7載體和初級包裝

7.1用于低溫蒸汽甲醛滅菌過程生物指示物的載體與初級包裝的材料適用性應(yīng)證明符合ISO11138-1：

2017中5.2和附錄B的要求。

注：由于纖維素表面對甲醛的化學(xué)吸附作用，濾紙類不宜作載體。

7.2確定符合性的暴露條件應(yīng)如下：

a)最低暴露溫度：制造商標(biāo)稱的最高暴露溫度的5℃以上；

b)最高暴露溫度：由制造商標(biāo)稱；如果制造商未標(biāo)稱，最高暴露溫度應(yīng)≥100℃；

c)暴露時間：≥160min。

注：盡管在低溫蒸汽甲醛滅菌過程的實(shí)際限制范圍內(nèi)，暴露條件還需代表對載體的現(xiàn)實(shí)挑戰(zhàn)。

8染菌載體和生物指示物

ISO11138-1的要求適用。

9菌數(shù)和抗力

9.1抗力特性應(yīng)按ISO11138-1：2017的6.4要求標(biāo)稱。

9.2生物指示物上每單位活菌數(shù)的增量應(yīng)以≤0.1×10n的整數(shù)倍標(biāo)稱（如：每毫升菌懸液、每個染

菌載體或每個生物指示物）。

9.3染菌載體和生物指示物的活菌數(shù)應(yīng)≥1.0×105。

9.4抗力應(yīng)用60℃時的D值表示，單位為分鐘。每一批次的生物指示物或者染菌載體的D值應(yīng)

以60℃下分鐘數(shù)進(jìn)行標(biāo)稱，保留一位小數(shù)。

9.5按照附錄A進(jìn)行測試時，以嗜熱脂肪地芽孢桿菌芽孢制成的菌懸液、染菌載體或生物指示物的

D60值應(yīng)≥6.0min。采用其它微生物時，應(yīng)滿足該D值要求。

9.6本文件和ISO11138標(biāo)準(zhǔn)系列中其它部分中規(guī)定的抗力特性應(yīng)使用與參考滅菌過程相關(guān)的特定

關(guān)鍵變量來測定。

9.7D值按ISO11138-1:2017中附錄C和附錄D的方法確定。

9.8D值的確定和存活—?dú)绶磻?yīng)特性依據(jù)附錄A中的過程參數(shù)。

9.9存活—?dú)鐓^(qū)間宜用ISO11138-1:2017中附錄E的公式來計(jì)算。

注：此信息對使用者在比較同一制造商不同批次產(chǎn)品時是有價值的。

示例：使用ISO11138-1:2017附錄E的公式結(jié)合本文件規(guī)定的最少菌數(shù)與最小D值，存活-殺滅反應(yīng)特性為

-