T-YNZYC 0107-2023 綠色藥材 烏天麻種植用萌發(fā)菌生產技術規(guī)程

CCS65.020B00/09T/YNZYC云南省中藥材種植養(yǎng)殖行業(yè)協(xié)會團體標準GreenMedicinalMaterialsTechniqueRegulationsofGerminatingArmillariellaProductiononGastrodiaT/YNZYC0107-2023本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由云南省中藥材種植養(yǎng)殖行業(yè)協(xié)會提出并歸口。本文件起草單位：昭通學院、昆明理工大學、云南省中藥材種植養(yǎng)殖行業(yè)協(xié)會、云南森浩菌業(yè)有限責任公司、昭通市天麻研究院。本文件主要起草人：楊順強、程立君、申開澤、崔秀明、楊野、唐鵬、何海艷、楊成翠、韓多、張永至、段明政、李世波、繆家云、蘇豹、陳曉虹。1T/YNZYC0107-2023綠色藥材烏天麻種植用萌發(fā)菌生產技術規(guī)程本文件規(guī)定了昭通烏天麻種植用萌發(fā)菌的技術要求、生產規(guī)范、標簽、包裝、運輸和貯存。本文件適用于昭通烏天麻種植用萌發(fā)菌的綠色規(guī)范化生產。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4789.28食品安全國家標準食品微生物學檢驗栽培基質和試劑的質量要求GB4806.1食品安全國家標準食品接觸材料及制品通用安全要求GB5749生活飲用水衛(wèi)生標準GB/T191包裝儲運圖示標志GB/T6543運輸包裝用單瓦楞紙箱和雙瓦楞紙箱GB/T12728食用菌術語GB/T30642食品抽樣檢驗通用導則GB/T41220食品包裝用復合塑料蓋膜NY/T1935食用菌栽培基質質量安全要求NY/T2375食用菌生產技術規(guī)范3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1萌發(fā)菌指能夠促進天麻種子萌發(fā)的真菌，包含小菇科小菇屬的紫萁小菇（Mycena.osmundicola）、蘭小菇（M.prchicola）、石斛小菇（M.dendrobii）、開唇蘭小菇（M.anoectochila生產上以石斛小菇為主。3.2烏天麻蘭科天麻屬植物GastrodiaelataBl.f.glaucaS.Chow，其花葶、鱗片、花均呈灰烏色；塊莖多呈寬卵形、卵形、橢圓形。3.3鎖狀聯(lián)合為雙核細胞形成分裂產生雙核菌絲體的一種特有形式，常發(fā)生在菌絲頂端，開始時在細胞上產生突起，并向下彎曲，與下部細胞連接，形如鎖狀。鎖狀聯(lián)合是雙核菌絲的鑒定標準，凡是產生鎖狀聯(lián)合的2T/YNZYC0107-2023菌絲均可斷定為雙核菌絲。形成鎖狀聯(lián)合的過程保證了雙核菌絲在進行細胞分裂時，每節(jié)（每個細胞）都能含有兩個異質（遺傳型不同）的核，為進行有性生殖、通過核配形成擔子打下基礎。4技術要求4.1菌種質量要求4.1.1母種母種應符合表1的規(guī)定。表1萌發(fā)菌母種感官要求及微生物學要求棉塞或硅膠塞，干燥、潔凈，松緊適度，能無無無無4.1.2原種原種應符合表2的規(guī)定。表2萌發(fā)菌原種感官要求及微生物學要求3T/YNZYC0107-2023表2萌發(fā)菌原種感官要求及微生物學要求（續(xù)）無無無無4.1.3栽培種栽培種應符合表3的規(guī)定。表3萌發(fā)菌栽培種感官要求及微生物學要求無無4T/YNZYC0107-2023表3萌發(fā)菌栽培種感官要求及微生物學要求（續(xù)）無無4.2培育場地布局與設施設備4.2.1廠房布局與建造應根據場地特點和生產要求合理布局，生產區(qū)與原料庫、成品庫、生活區(qū)應嚴格分開。生產區(qū)具有獨立隔離的攤曬場、配料分裝室、滅菌室、冷卻室、接種室、培養(yǎng)室、貯存室、菌種檢驗室等，并合理安排布局，滿足萌發(fā)菌不同生長階段對環(huán)境條件的需求。做到人流與物流分開、有菌區(qū)與無菌區(qū)隔離，防止污染與交叉混淆。攤曬場應地面平整，無遮擋物，遠離火源。配料分裝室應空間充足，確保水電方便。配料分裝室應保持水電方便，防雨防曬，常溫干澡，并配備防蟲、防鼠、防雜菌污染相應設施。滅菌室應配置水電，保證通風良好，進出物料方便，熱源配套，并配置安全監(jiān)測設置。冷卻室采用潔凈、防塵、易散熱設計。接種室應設置緩沖間，內壁采用圓角設計，光滑潔凈，保持室內正壓，經常清洗消毒，保證空氣潔凈度。培養(yǎng)室和貯存室應保證內壁和屋頂光滑，便于清洗和消毒；墻壁厚度適當，利于控溫、控濕，便于通風；配制防蟲防鼠措施。菌種檢驗室應保證水電方便，便于安裝相應的檢驗儀器和設備。4.2.2設施設備生產各環(huán)節(jié)的設施規(guī)模要配套。冷卻室、接種室、培養(yǎng)室和貯存室都要有調溫設施。應配備攪拌機、裝瓶（袋）機、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、磅秤、天平、調溫設備、除濕機、培養(yǎng)架、恒溫箱、冰箱、顯微鏡等及常規(guī)用具。高壓滅菌及計量設備應每年通過經有關部門安全檢驗。4.2.3技術人員要求生產應配有與菌種生產所需的技術人員，包括操作人員，檢驗人員。4.3生產工藝4.3.1栽培基質人工配制用于為各級萌發(fā)菌種提供營養(yǎng)要素的的培養(yǎng)原料。栽培基質所用原輔料應符合NY/T1935的規(guī)定。用水應符合GB5749的規(guī)定?；瘜W添加劑如硫酸鎂、磷酸二氫鉀等應至少為化學純。各級萌發(fā)菌菌種培養(yǎng)推薦的栽培基質配方見表4：表4萌發(fā)菌菌種栽培基質推薦配方5T/YNZYC0107-2023表4萌發(fā)菌菌種栽培基質推薦配方（續(xù)）4.3.2基本生產工藝流程栽培基質制備（配制、分裝、滅菌、冷卻）→接種→培養(yǎng)（檢查）→成品。4.3.3母種生產時間：每年8月至10月生產。一般在原種生產前的1個月～2個月。栽培基質制備：按表1所列栽培基質適當增減原料配制母種栽培基質，并分裝入玻璃試管至試管長度的1/4至1/3，塞上容器蓋。高壓蒸汽滅菌30min（0.12MPa~0.15MPa，121℃~122℃),趁熱傾斜放置，斜面長度為試管長度的1/3至1/2，冷卻備用。接種：采用無菌操作法，在超凈工作臺上或接種箱內用接菌鏟挑取0.5cm大小的純菌種，轉接于試管斜面上。培養(yǎng)（檢查）：萌發(fā)菌接種后，放置在18℃~20℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12d~20d。培養(yǎng)過程中及時去除不達標菌種。母種轉管次數(shù)控制在5次內。4.3.4原種生產時間：每年的10月至次年2月。一般在栽培種生產前3個月～4個月。栽培基質制備：按表1所列栽培基質適當增減原料配制原種栽培基質，并分裝入菌種瓶內至瓶肩處，塞上棉塞。高壓蒸汽滅菌90min（0.12MPa~0.15MPa，121℃~125℃),冷卻備用。接種：采用無菌操作法，在超凈工作臺上或接種箱內挑取直徑1.5cm~3cm的優(yōu)質母種塊（連同栽培基質），移植接種于原種栽培基質上端中央，隨即蓋塞。培養(yǎng)（檢查）：萌發(fā)菌接種后，將接種好的菌種瓶放置在18℃~20℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)45d~60d。培養(yǎng)過程及時去除不達標菌種。菌種培養(yǎng)期間，恒溫培養(yǎng)室的濕度控制在40%~60%，每天進行通風換氣。4.3.5栽培種生產時間：每年的2月至次年3月。一般在天麻種子播種前2個月～3個月。栽培基質制備：按表1所列栽培栽培基質適當增減原料配制栽培基質，并分裝入14cm×28cm塑料袋至袋口距離為5cm左右，中間打一通氣孔，蓋塞。高壓蒸汽滅菌120min（0.12MPa~0.15MPa，接種：采用無菌操作法，在超凈工作臺上或接種箱內挑取直徑1.5cm~3cm的優(yōu)質原種塊（連同栽培基質），移植接種于原種栽培基質上端中央，隨即蓋塞或扎口。6T/YNZYC0107-2023培養(yǎng)（檢查）：萌發(fā)菌接種后放置在18℃~20℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)45d~60d。培養(yǎng)過程中及時去除不達標菌種。菌種培養(yǎng)期間，恒溫培養(yǎng)室的濕度控制在40%~60%。5質量檢驗5.1組批同一栽培基質配方、同--天接種、同一培養(yǎng)條件和質量基本一致的符合規(guī)定數(shù)量的菌種為一批。每批次數(shù)量母種≥50支、原種≥200瓶（袋）,栽培種≥2000瓶（袋）。5.2抽樣方法從每一批中隨機抽取樣品，母種、原種、栽培種的抽樣量分別為該批菌種量的10%、5%、1%。但每批抽樣數(shù)量不得少于10支（瓶、袋）；超過100支（瓶、袋）的，可進行二級抽樣，具體方法為：先按照該批菌種量的10%、5%、1%分成一級抽樣單位，再把抽中的一級抽樣單位按照菌種量的10%、5%、1%分成若干更小的二級抽樣單位進行檢驗。5.3感官檢驗按表5相應項目依次進行感官檢驗。表5感官要求檢驗方法種栽培基質上表面離栽培基質灌菌絲體長滿栽培基質，潔白、濃密、生長旺健，均勻，無分化，無老化，無頂端距管塞40~50外觀肉眼觀察有香味，無酸、臭、霉等5.4微生物學檢驗5.4.1形貌觀察原種菌絲生長狀態(tài)用放大倍數(shù)不低于10×40倍的光學顯微鏡對培養(yǎng)物的水封片進行觀察，每一檢樣應觀察不少于50個視野。T/YNZYC0107-20235.4.2細菌檢驗取少量疑有細菌污染的培養(yǎng)物，按無菌操作接入GB4789.28規(guī)定的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液中，25℃~28℃振蕩培養(yǎng)1~2天，觀察培養(yǎng)液是否混濁。培養(yǎng)液混濁，為有細菌污染；培養(yǎng)液澄清，為無細菌污染。5.4.3霉菌檢驗取少量疑有霉菌污染的培養(yǎng)物，按無菌操作接種于表1母種推薦栽培基質（2）上，25℃~28℃培養(yǎng)3~5天，出現(xiàn)非萌發(fā)菌菌絲形態(tài)菌落的，或有異味者為霉菌污染物，必要時進行水封片鏡檢。5.4.4檢驗結果與判定微生物學檢驗要求無雜菌。5.5留樣要求各級菌種要留樣備查，留樣的數(shù)量應每個批號母種3~5支，原種和栽培種5~7瓶，于4~6℃下貯存，母種150天，原種120天，栽培種180天。6入庫、記錄、標簽、包裝、運輸和貯存6.1入庫與記錄完成培養(yǎng)的菌種及時登記入庫。菌種生產各環(huán)節(jié)應進行詳細記錄。6.2標簽6.2.1每支(瓶、袋)菌種應有清晰注明以下要素的標簽：a)產品名稱；b)品種名稱；c)生產單位；d)接種日期；e)執(zhí)行標準。6.2.2每箱菌種應有清晰注明以下要素的包裝標簽：a)產品名稱；b)品種名稱；c)廠名、廠址、聯(lián)系電話；d)出廠日期；e)保質期、貯存條件；f)數(shù)量；g)執(zhí)行標準。6.2.3包裝儲運圖示標志還應包括：a)小心輕放標志；b)防水、防潮、防凍標志；c)防曬、防高溫標志；d)防止倒置標志；8T/YNZYC0107-2023e)防止重壓標志等。6.3包裝6.3.1母種外包裝采用木盒或有足夠強度的紙材制做的紙箱，內部用棉花、碎紙、報紙等具有緩沖作用的輕質材料填滿。原種、栽培種外包裝采用有足夠強度的紙材制做的紙箱，菌種間用碎紙、報紙等具有緩沖作用的輕質材料填滿。包裝箱內應附上使用說明。包裝應嚴密、整齊、無破損。6.3.2產品內包裝材料的衛(wèi)生標準應符合GB4806.1的要求。產品運輸用外包裝用瓦楞紙箱應符合GB/T6543的規(guī)定，外包裝箱內不應使用過度的隔板；包裝應封口牢固，確保箱內產品不受損傷。產品外包裝箱圖示標志應符合GB/