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15I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件歸口單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAM/TC11奶綿羊胚胎冷凍解凍技術(shù)規(guī)程3.13.23.3又稱誘發(fā)結(jié)晶，是指在略低于溶液冰點(diǎn)的溫度下通過(guò)加3.4將處于冷凍狀態(tài)的胚胎進(jìn)行解凍處理，以恢復(fù)胚胎發(fā)育能力的過(guò)程。25.2胚胎冷凍所需溶液5.3胚胎操作室要求溫度在20℃~25℃之間，操作前使用紫外燈消毒20min～30min，胚胎操作區(qū)域用75%酒精擦拭張囊胚期（EXB）的A（1）、B（2）級(jí)胚胎（附錄A圖A.5.5胚胎的洗滌與平衡5.5.1方法一乙二醇冷凍液冷凍胚胎5.5.2方法二甘油冷凍液一步法胚胎冷凍胚胎冷凍前用保存液洗滌5次～6次；洗滌后的胚胎放入5.5.3方法三甘油冷凍液三步法胚胎冷凍5.6胚胎裝管5.7胚胎記錄3X表示數(shù)量，EM/CM/EB/BL/EXB表示發(fā)育期，下標(biāo)1/2表示A/B級(jí)胚胎級(jí)別。如2CM1代表2枚A級(jí)緊冰1s～3s，繼續(xù)平衡5min，然后以-0.3～-0.5℃/min的速率降溫至-35℃,平衡10min，取出胚胎冷凍細(xì)管，迅速投入液氮罐中保存。同時(shí)詳細(xì)記錄胚胎信息，胚胎冷凍信息登記表見(jiàn)附錄C表C.6.2胚胎解凍所需溶液6.3胚胎操作室要求6.4解凍程序解凍時(shí)，從液氮罐中取出細(xì)管在空氣中停留10s～15s后，浸入28℃~32℃水浴中20s，然后將胚胎冷凍細(xì)管用滅菌吸水紙擦干，用75%酒精棉球擦拭細(xì)管，晾干15s～20s，剪去封口端，把胚胎推解凍時(shí)，從液氮罐中取出細(xì)管在空氣中停留10s～15s后，浸入25℃~32℃水浴中20s，然后將胚胎冷凍細(xì)管用滅菌吸水紙擦干，用75%酒精棉球擦拭細(xì)管，晾干15s～20s，剪去封口端，把胚胎推在記錄本上詳細(xì)記錄胚胎信息，解凍胚胎信息登記表按照附錄C中的表C.4按NY/T1674執(zhí)行。解凍后胚胎形態(tài)等級(jí)信息登記表見(jiàn)附5A.1不同發(fā)育時(shí)期早期胚胎見(jiàn)圖A.1。d：囊胚（blastocyst，BL）；e：擴(kuò)注：a：桑椹胚（morula，M）；b：緊縮桑椹胚（compacted注：a：C
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