托盤根中總多酚提取工藝及抗氧化活性研究

背景介紹托盤為懸鉤子屬植物山楂葉懸鉤子，也稱牛疊肚，在我國境內(nèi)分布廣泛。其果實和根可作藥用，托盤果實酸甜，可生食，是制備果醬和果酒的常用原料。托盤根富含三萜、多酚、黃酮、多糖等多種活性成分，現(xiàn)代藥理研究表明，托盤根具有保肝、抗腫瘤、抗氧化等生物活性。目前，關(guān)于托盤根有效成分的研究多集中于皂苷和多糖的提取及提取液的生物活性，如文獻(xiàn)報道托盤根的粗提物能有效抑制人乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）株增殖，托盤根水煎劑能通過抑制α-葡萄糖苷酶發(fā)揮降糖作用，其乙醇提取物可對D-半乳糖所致的小鼠衰老模型的衰老指標(biāo)有很好的改善作用。本文以托盤根為研究對象，通過1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）清除能力實驗、羥自由基清除實驗對托盤根總多酚的抗氧化能力進(jìn)行評價，為托盤根活性成分的挖掘及其資源的綜合開發(fā)利用提供參考。文章亮點(diǎn)1.托盤活性成分的最佳提取工藝為乙醇濃度60%、超聲溫度80

℃、超聲時間50min、料液比1:40g/mL，在此條件下托盤根總多酚提取率為26.16%。2.

托盤根提取物對DPPH自由基和羥基自由基清除的IC50值分別為0.0069、0.346mg/mL，超聲輔助乙醇提取得到的托盤根總多酚具有較強(qiáng)的體外抗氧化活性。內(nèi)容簡介1

實驗部分1.1

主要儀器和試劑1.2

實驗方法1.2.1

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備1.2.2

托盤根總多酚的制備及含量測定1.2.3

單因素實驗1.2.4

正交試驗設(shè)計在單因素實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，以總多酚的提取率為評價指標(biāo)，以乙醇濃度、提取溫度、提取時間、料液比為考察因素進(jìn)行4因素3水平的正交試驗，確定托盤根中總多酚的最佳提取工藝條件。因素水平設(shè)計見表1。1.2.5

抗氧化實驗2

結(jié)果和討論2.1

單因素實驗結(jié)果2.1.1

乙醇濃度對托盤根總多酚提取率的影響不同濃度的乙醇溶液對托盤中總多酚提取率的影響如圖1所示。2.1.2

提取溫度對托盤根總多酚提取率的影響不同提取溫度對托盤根中總多酚提取率的影響如圖2所示。2.1.3

提取時間對托盤提取效果的影響不同提取時間對托盤根中總多酚提取率的影響如圖3所示。2.1.4

料液比對托盤根總多酚提取率的影響不同料液比對托盤根中總多酚提取率的影響如圖4所示。2.2

正交試驗結(jié)果在單因素試驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，按照表1的因素水平進(jìn)行L9(34)正交試驗，正交設(shè)計及結(jié)果見表2。2.3

最佳提取工藝驗證結(jié)果根據(jù)正交試驗優(yōu)化的最優(yōu)工藝參數(shù)，進(jìn)行3組平行試驗，得到的托盤根總多酚含量分別為25.79%、26.41%和26.28%，其平均值為26.16%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.25%，證明該優(yōu)化后的工藝條件穩(wěn)定且穩(wěn)定性較好。2.4

抗氧化實驗結(jié)果分析2.4.1

托盤根總多酚對DPPH自由基清除能力的測定托盤根總多酚和抗壞血酸對DPPH自由基的清除能力見圖5。2.4.2

托盤根總多酚對羥基自由基清除能力的測定托盤根總多酚和抗壞血酸對羥基自由基的清除能力見圖6。3

結(jié)論本文以懸鉤子屬植物托盤的根為研究對象，采用超聲輔助乙醇提取法，以乙醇濃度、超聲時間、超聲溫度及料液比為考察因素，通過單因素實驗結(jié)合正交設(shè)計，確定了托盤根中總多酚的最佳提取工藝參數(shù)，分別為乙醇濃度60%，提取溫度80

℃，提取時間50min，料液比1:40g/mL。在此最佳條件下，托盤根總多酚提取率為26.16%。楊秀東等[8]等通過溶劑萃取法對托盤根中的活性成分含量進(jìn)行了研究，其中正丁醇萃取物總酚酸含量為6.18%。唐紅梅等[19]等通過回流法提取托盤葉片中的黃酮成分，其得率為9.51%。白子凡等[20]等通過加熱回流法對托盤果進(jìn)行提取，其中總黃酮含量為13.61%、總酚酸含量為8.98%。Kim等[21]等對韓國12個地區(qū)的托盤果中活性成分進(jìn)行含量測定，其中總多酚含量最高為38.5%，總黃酮含量最高為19.7%。通過與文獻(xiàn)對比分析，托盤根和果實中總多酚含量高于葉片的含量，其產(chǎn)地對活性成分含量具有一定的影響，且超聲輔助乙醇提取法能夠有效地提高托盤根中多酚的提起率。托盤根提取物對DPPH自由基和羥基自由基清除的IC50值分別為0.0069和0.346mg/mL，超聲輔助乙醇提取得到的托盤根總多酚具有較強(qiáng)的體