馬鈴薯鐮刀屬真菌病害檢測技術(shù)規(guī)程_第1頁
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1馬鈴薯鐮刀屬真菌病害檢測技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了馬鈴薯鐮刀屬真菌病害檢測的原理、儀器設(shè)備和用具、形態(tài)檢驗、致病性測定、PCR鐮刀屬真菌(Fusariumspp.)是一種重要的植物病原菌，屬無性真菌類，有性時期為子囊菌門學特征，回接致病性測定及PCR反應(yīng)結(jié)果為鑒定依據(jù)，將上述各項措施綜合形成一套超凈工作臺、顯微鏡、高壓滅菌鍋、光照培養(yǎng)箱、PCR儀、離心機、凝膠電泳儀、漩渦震蕩儀、水接種針、手術(shù)刀、鑷子、挑針、載玻片、蓋玻片、滴管、離心管、培養(yǎng)皿、三角瓶、酒精燈。切，或切取表皮凹陷病斑處進行觀察，觀察是26.2病原菌分離培養(yǎng)和純化PDA培養(yǎng)基上，在25℃恒溫下光照、黑暗交替各12h培養(yǎng)5d。待組織長出菌絲后，挑取菌絲體轉(zhuǎn)移到新的PDA培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。待菌落長至培養(yǎng)皿2/3時6.3病原菌形態(tài)學鑒定月牙形，2～5個分隔，多為3個分隔，大小3μm～8μm×11μm～70μm；厚垣孢子球形，表面不光滑，發(fā)病情況。如出現(xiàn)與病樣一致的癥狀則判定病原菌能夠引起8.2對照設(shè)置以菌株DNA為模板，利用鐮刀菌屬真菌的特異性引物8.4結(jié)果判定擴增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測擴增出長度介于700bp～750bp之間的清晰單一34A.1

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