吉林省吉林市“三校”2025屆高三最后一模生物試題含解析

吉林省吉林市“三校”2025屆高三最后一模生物試題注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．小葉錦雞兒是一種典型旱生豆科灌木，根部具有根瘤菌，對水分和養(yǎng)分需求大，使周圍淺根系禾草及一二年生草本植物不能適應(yīng)而退出群落。以下敘述不正確的是（）A．小葉錦雞兒與根瘤菌是互利共生關(guān)系B．小葉錦雞兒灌木具有垂直和水平結(jié)構(gòu)C．小葉錦雞兒在與禾草競爭中占優(yōu)勢D．小葉錦雞兒導致抵抗力穩(wěn)定性減弱2．如圖表示一個生物群落中甲、乙兩個種群的增長速率隨時間變化的曲線，下列敘述錯誤的是（）A．甲、乙兩個種群的增長曲線均為“S”型曲線B．t3時，甲種群的年齡組成為衰退型C．甲、乙兩個種群的數(shù)量達到最大的時刻分別為t4和t6D．甲、乙兩個種群可能為競爭關(guān)系，競爭強度為弱→強→弱3．胸腺激素是胸腺分泌的一種多肽類激素，可以增強免疫細胞的功能，其分泌受多種激素控制，部分調(diào)節(jié)過程如圖所示。下列說法正確的是（）A．人垂體細胞表面只含有促甲狀腺激素釋放激素受體和甲狀腺激素受體B．圖示過程中既有正反饋調(diào)節(jié)又有負反饋調(diào)節(jié)，二者共同調(diào)節(jié)胸腺的發(fā)育C．神經(jīng)—體液—免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)能夠維持機體內(nèi)環(huán)境理化性質(zhì)穩(wěn)定不變D．胸腺激素可誘導來自骨髓的造血干細胞分化成T細胞4．下列關(guān)于細胞的結(jié)構(gòu)與功能的相關(guān)敘述中，正確的是（）A．人成熟紅細胞無線粒體，其有氧呼吸場所是細胞質(zhì)基質(zhì)B．植物細胞葉綠體產(chǎn)生的ATP能用于生長、物質(zhì)運輸?shù)壬磉^程C．核糖體是蛋白質(zhì)的“裝配機器”，由蛋白質(zhì)和RNA組成D．根尖分生區(qū)細胞中高爾基體與分裂后期細胞壁的形成有關(guān)5．降鈣素是甲狀腺濾泡旁細胞分泌的由32個氨基酸脫水縮合生成的鏈狀多肽類激素，主要作用是降低血鈣和血磷含量。下列有關(guān)分析正確的是（）A．甲狀腺濾泡旁細胞特有的基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯合成降鈣素B．降鈣素由高爾基體合成，至少含有一個氨基和一個羧基C．氨基酸分子形成降鈣素時，氨基酸的相對分子質(zhì)量至少減少558D．高血磷患者宜口服降鈣素，以維持機體血磷含量相對穩(wěn)定6．下列關(guān)于艾滋病的敘述正確的是（）A．噬菌體和HIV入侵宿主細胞的方式相同，遺傳物質(zhì)進入，外殼留在外面B．HIV主要攻擊人體的輔助性T細胞，進而導致特異性免疫癱瘓，因此患者體內(nèi)無法產(chǎn)生抗體C．艾滋病可以通過母嬰進行遺傳，所以要實施剖腹產(chǎn)和人工哺乳D．HIV外層脂類膜上的蛋白質(zhì)由HIV的遺傳物質(zhì)控制的7．已知某品系油菜種子的顏色由一對等位基因A/a控制，并受另一對基因R/r影響。下表是用產(chǎn)黑色種子植株（甲）、產(chǎn)黃色種子植株（乙和丙）進行實驗的結(jié)果，不能得出的結(jié)論是組別親代F1表現(xiàn)型F1自交所得F2的表現(xiàn)型及比例實驗一甲×乙全為產(chǎn)黑色種子植株產(chǎn)黑色種子植株：產(chǎn)黃色種子植株=3：1實驗二乙×丙全為產(chǎn)黃色種子植株產(chǎn)黑色種子植株：產(chǎn)黃色種子植棟=3：13A．由實驗一可知，種子顏色性狀中黃色對黑色為隱性B．當R基因存在時會抑制A基因的表達C．乙的基因型為aarr或AARRD．實驗二中F2代產(chǎn)黃色種子植株中雜合子的比例為10/138．（10分）細胞是生物體的基本功能單位。下列關(guān)于細胞的敘述正確的是（）A．高等動物體內(nèi)，細胞的分化程度越高生物膜系統(tǒng)就越復(fù)雜B．某些單細胞生物的細胞質(zhì)基質(zhì)中含有有氧呼吸第二階段的酶C．某些動物細胞失去核糖體后，自我更新能力增強D．將離體的葉綠體置于生理鹽水中，也可維持正常生理活動二、非選擇題9．（10分）熒光原位雜交可用熒光標記的特異DNA片段為探針，與染色體上對應(yīng)的DNA片段結(jié)合，從而將特定的基因在染色體上定位。請回答下列問題:(1)DNA熒光探針的制備過程如圖1所示，DNA酶Ⅰ隨機切開了核苷酸之間的_________鍵從而產(chǎn)生切口，隨后在DNA聚合酶Ⅰ作用下，以熒光標記的_________________為原料，合成熒光標記的DNA探針。(2)圖2表示探針與待測基因結(jié)合的原理。先將探針與染色體共同煮沸，使DNA雙鏈中___鍵斷裂，形成單鏈。隨后在降溫復(fù)性過程中，探針的堿基按照____________原則，與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子。圖中兩條姐妹染色單體中最多可有_____條熒光標記的DNA片段。(3)A、B、C分別代表不同來源的一個染色體組，已知AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標記。若植物甲(AABB)與植物乙(AACC)雜交，則其F1有絲分裂中期的細胞中可觀察到________個熒光點；在減數(shù)第一次分裂形成的兩個子細胞中分別可觀察到______個熒光點。10．（14分）甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌，研究人員將人的膠原蛋白基因?qū)爰状冀湍妇胁⒊晒Ρ磉_。回答下列問題。（1）獲取目的基因是實施基因工程的第一步，獲取目的基因的方法有_____、__________(答出兩種)。（2）要使膠原蛋白基因在甲醇酵母菌中表達，需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞，原因是_________________和_________________。（3）甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外，但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少，這一特點的優(yōu)點在于_____________，甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同，從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析，其原因可能是_______。（4）在構(gòu)建基因表達載體時，用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒，使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端，其目的是______________。11．（14分）豬感染豬博卡病毒會導致嚴重腹瀉。豬博卡病毒DNA是單鏈，長度僅為1．2kb，但能編碼4種蛋白質(zhì)（NSl、NPl、VP2、VP1），該病毒DNA與編碼的蛋白質(zhì)對應(yīng)關(guān)系如下圖。（1）豬博卡病毒DNA雖短，但可以編碼4種蛋白質(zhì)，據(jù)圖分析原因是___________。（2）基因工程制備疫苗，獲取NS1基因片段采用PCR技術(shù)的目的是___________，以便于與載體DNA連接。（3）基因工程的核心步驟是___________，可用___________將目的基因?qū)雱游锛毎?。若在分子水平上檢測基因是否表達，可采用___________方法。（4）該基因工程制備的疫苗是否有效，個體生物學水平上的鑒定過程是：___________。12．為了研究手機屏幕上的細菌數(shù)量和種類，有人做了下圖所示的實驗。回答下列問題：（1）在培養(yǎng)基的制備過程中，培養(yǎng)基中必須含有滿足微生物生長、繁殖所需的水、無機鹽、碳源和________等成分；在倒平板時，需待培養(yǎng)基冷卻至51℃左右時，在__________附近倒平板，待平板冷卻后需倒置，其原因是_______________________________________。（2）圖中采取的接種方法是________________，實驗結(jié)束后，所用的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后才能倒掉的原因是_______________。（3）若按圖中方法取樣，測定某手機屏幕上的細菌數(shù)量，制成11mL菌懸液中，在3個平板上分別接入1．1mL稀釋液，經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為38、41和42，則該手機屏幕的細菌數(shù)為__________個/cm2。該方法計數(shù)的結(jié)果往往比實際結(jié)果偏__________（填“高”或“低”），原因是_____________________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

1、生物之間的關(guān)系包括：種內(nèi)關(guān)系和種間關(guān)系。種內(nèi)關(guān)系又分為種內(nèi)互助和種內(nèi)競爭；種間關(guān)系又有①互利共生、②寄生、③捕食、④種間競爭幾種方式。

2、生物群落的結(jié)構(gòu)包括空間結(jié)構(gòu)--垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)?！驹斀狻緼、小葉錦雞兒與根瘤菌是互利共生關(guān)系，A正確；

B、小葉錦雞兒灌木構(gòu)成一個種群，而垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)屬于群落特征，B錯誤；C、通過題干信息可知，小葉錦雞兒在與禾草競爭中占優(yōu)勢，C正確；D、小葉錦雞兒的出現(xiàn)，導致物種多樣性下降，生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性減弱，D正確。故選B。2、B【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：坐標的縱軸為“種群增長速率”，趨勢是先增加后減少，如果坐標的縱軸改為“種群中個體的數(shù)量”，則類似于課本中講的“S"型增長曲線；t2和t5相當于“S”型曲線中的值，t4和t6相當于“S”型曲線中的K值，此時對應(yīng)的甲乙種群密度達到最大值?！驹斀狻緼、甲、乙兩種群的增長速率先增加后減少，表示為S型曲線，A正確；B、t3時，

甲種群增長速率大于0，出生率大于死亡率，為增長型，B錯誤；C、t4和t6相當于“S”型曲線中的K值，t4和t6分別為甲、乙兩個種群的數(shù)量達到最大的時刻，C正確；D、據(jù)圖分析，t3時刻之前甲種群的種群增長速率大于乙種群，t2時刻差值最大；t3時刻之后，甲種群的種群增大率小于乙種群，說明甲乙兩個種群可能為競爭關(guān)系，競爭強度為弱→強→弱，D正確；故選B?！军c睛】結(jié)合種群增長曲線分析題圖。3、D【解析】

下丘腦分泌的促激素釋放激素能促進垂體分泌促激素，垂體分泌促激素能促進相關(guān)腺體分泌相關(guān)激素；而相關(guān)激素分泌過多時會對下丘腦和垂體有負反饋作用，會抑制促激素釋放激素和促激素的分泌，進而減少相關(guān)激素的分泌。【詳解】A、人垂體細胞表面不止含有促甲狀腺激素釋放激素受體和甲狀腺激素受體，還有促性腺激素釋放激素的受體等，A錯誤；B、圖示過程中體現(xiàn)負反饋調(diào)節(jié)，B錯誤；C、內(nèi)環(huán)境處于穩(wěn)態(tài)時，其內(nèi)環(huán)境理化性質(zhì)不是穩(wěn)定不變，而是動態(tài)平衡的，C錯誤；D、通過圖示分析可知，胸腺激素可誘導來自骨髓的造血干細胞分化成T細胞，D正確。故選D。4、C【解析】

各種細胞器的結(jié)構(gòu)、功能細胞器分布形態(tài)結(jié)構(gòu)功能線粒體動植物細胞雙層膜結(jié)構(gòu)有氧呼吸的主要場所細胞的“動力車間”葉綠體植物葉肉細胞雙層膜結(jié)構(gòu)植物細胞進行光合作用的場所；植物細胞的“養(yǎng)料制造車間”和“能量轉(zhuǎn)換站”。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)動植物細胞單層膜形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和加工，以及脂質(zhì)合成的“車間”高爾基體動植物細胞單層膜構(gòu)成的囊狀結(jié)構(gòu)對來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)進行加工、分類和包裝的“車間”及“發(fā)送站”（動物細胞高爾基體與分泌有關(guān)；植物則參與細胞壁形成）核糖體動植物細胞無膜結(jié)構(gòu)，有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，有的游離在細胞質(zhì)中合成蛋白質(zhì)的場所“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機器”溶酶體動植物細胞單層膜形成的泡狀結(jié)構(gòu)“消化車間”，內(nèi)含多種水解酶，能分解衰老、損傷的細胞器，吞噬并且殺死侵入細胞的病毒和細菌。液泡成熟植物細胞單層膜形成的泡狀結(jié)構(gòu)；內(nèi)含細胞液（有機酸、糖類、無機鹽、色素和蛋白質(zhì)等）調(diào)節(jié)植物細胞內(nèi)的環(huán)境，充盈的液泡使植物細胞保持堅挺中心體動物或某些低等植物細胞無膜結(jié)構(gòu)；由兩個互相垂直的中心粒及其周圍物質(zhì)組成與細胞的有絲分裂有關(guān)【詳解】A、人體成熟的紅細胞無線粒體，不能進行有氧呼吸，其無氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)，A錯誤；B、植物細胞葉綠體產(chǎn)生的ATP只能用于暗反應(yīng)，不能用于生長、物質(zhì)運輸?shù)壬磉^程，B錯誤；C、核糖體是蛋白質(zhì)的“裝配機器”，由蛋白質(zhì)和RNA組成，C正確；D、根尖分生區(qū)細胞中高爾基體與分裂末期細胞壁的形成有關(guān)，D錯誤。故選C。5、C【解析】

分析題意可知：降鈣素是由32個氨基酸脫水縮合生成的鏈狀多肽類激素，其化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)類，據(jù)此分析作答。【詳解】A、由同一個細胞發(fā)育而來的個體所有細胞的基因都一樣，甲狀腺濾泡旁細胞無特有基因，能分泌降鈣素是基因選擇性表達的結(jié)果，A錯誤；BD、降鈣素的化學本質(zhì)為多肽類（蛋白質(zhì)類），其合成部位是核糖體，因蛋白質(zhì)類激素口服會被分解為氨基酸，失去效應(yīng)，故高血磷患者不宜口服降鈣素，B、D錯誤；C、32個氨基酸分子形成降鈣素時，共形成一條肽鏈，脫去31個水分子，故氨基酸的相對分子質(zhì)量至少減少31×18=558，C正確。故選C。【點睛】解答此題需要充分把握題干中降鈣素屬于多肽這一信息，結(jié)合題意分析作答；此外需要明確數(shù)量關(guān)系：脫去的水分子數(shù)=氨基酸數(shù)-肽鏈數(shù)。6、D【解析】

關(guān)于“艾滋病”，考生可以從以下幾方面把握：

（1）艾滋病的中文名稱是獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS），其病原體是人類免疫缺陷病毒（HIV）。

（2）艾滋病的致病原理：HIV病毒進入人體后，與人體的T淋巴細胞結(jié)合，破壞T淋巴細胞，使免疫調(diào)節(jié)受到抑制，使人的免疫系統(tǒng)癱瘓，最后使人無法抵抗其他細菌、病毒的入侵，讓人死亡。

（3）艾滋病的傳播途徑包括：血液傳播、性傳播、母嬰傳播?！驹斀狻緼、噬菌體和HIV入侵宿主細胞的方式不相同，噬菌體只有遺傳物質(zhì)進入，HIV注入的有RNA和逆轉(zhuǎn)錄酶，外殼均留在外面，A錯誤；B.HIV主要攻擊人體的輔助性T細胞，進而導致特異性免疫癱瘓，但有少部分抗原可以直接刺激B細胞增殖分化，患者體內(nèi)仍可以產(chǎn)生少量抗體，B錯誤；C、艾滋病是一種傳染病，可以通過母嬰進行傳播，所以要實施剖腹產(chǎn)和人工哺乳，C錯誤；D、HIV外層脂類膜中的蛋白質(zhì)是HIV的RNA逆轉(zhuǎn)錄形成的DNA控制合成的，D正確。故選D。【點睛】本題考查艾滋病的流行和預(yù)防，要求考生識記艾滋病及其病毒的中文名稱，掌握艾滋病的繁殖途徑、致病原理及其傳播途徑，能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項。7、C【解析】

根據(jù)題意和圖表分析可知：油菜新品系種子顏色由一對基因A/a控制，并受另一對基因R/r影響，F(xiàn)1自交所得F2的表現(xiàn)型及比例為產(chǎn)黑色種子植株：產(chǎn)黃色種子植株=3：13，是9：3：3：1的變式，所以其遺傳遵循基因的自由組合定律。【詳解】A、由實驗一可判斷種子顏色性狀中黃色對黑色為隱性，A正確；B、由實驗二的F1自交所得F2的表現(xiàn)型及比例為產(chǎn)黑色種子植株：產(chǎn)黃色種子植株=3：13，可判斷F1黃色種子植株的基因型為AaRr；子代黑色種子植株基因型為A_rr，黃色種子植株基因型為A_R_、aaR_、aarr，可判斷當R基因存在時，抑制A基因的表達，B正確；C、實驗一中，由于F1全為產(chǎn)黑色種子植株，則乙黃色種子植株的基因型為aarr，C錯誤；D、實驗二中，由于F1全為產(chǎn)黃色種子植株（AaRr），則丙黃色種子植株的基因型為AARR；F2中產(chǎn)黃色種子植株中純合子的基因型為AARR、aaRR、aarr，占3/13，所以F2代產(chǎn)黃色種子植株中雜合子的比例為1?3/13＝10/13，D正確。故選C。【點睛】本題考查基因自由組合定律的相關(guān)知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力。8、B【解析】

本題主要考查細胞的結(jié)構(gòu)和功能的相關(guān)知識，了解細胞分化、生物膜系統(tǒng)、細胞呼吸的過程、核糖體的功能以及細胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位等相關(guān)知識，依據(jù)選項具體作答即可。【詳解】A、動物細胞的分化程度和生物膜系統(tǒng)的復(fù)雜程度不成正相關(guān)，如哺乳動物成熟的紅細胞，A錯誤；B、需氧型原核生物無線粒體，其有氧呼吸第二階段的酶位于細胞質(zhì)基質(zhì)，B正確；C、失去核糖體的細胞無法合成蛋白質(zhì)，不能進行自我更新，C錯誤；D、離體的葉綠體離開了細胞的環(huán)境不能維持正常生理活動，D錯誤。故選B。二、非選擇題9、磷酸二酯脫氧核苷酸氫堿基互補配對462和4【解析】

基因探針是用放射性同位素、熒光分子等標記的DNA分子作為探針，原理是DNA分子雜交。DNA分子是一個獨特的雙螺旋結(jié)構(gòu)，是由兩條平行的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成，外側(cè)由脫氧核糖和磷酸交替連接構(gòu)成基本骨架，內(nèi)側(cè)是堿基對（A-T；C-G）通過氫鍵連接。【詳解】（1）根據(jù)題意和圖示分析可知：DNA酶Ⅰ隨機切開了核苷酸之間的磷酸二酯鍵從而產(chǎn)生切口，形成一段一段的DNA分子片段。在DNA聚合酶Ⅰ作用下，以熒光標記的四種脫氧核苷酸為原料，合成熒光標記的DNA探針。（2）DNA分子是雙鏈結(jié)構(gòu)，通過氫鍵連接．將探針與染色體共同煮沸，使DNA雙鏈中氫鍵斷裂，形成單鏈，隨后在降溫復(fù)性過程中，探針的堿基按照A-T、C-G的堿基互補配對原則，與染色體上的特定基因序列形成較穩(wěn)定的雜交分子，圖中兩條姐妹染色單體中含有2個DNA分子共有4條鏈，所以最多可有4條熒光標記的DNA片段。（3）由于AA和BB中各有一對同源染色體可被熒光探針標記，若植物甲（AABB）與植物乙（AACC）雜交，則其F1，有絲分裂中期的細胞（AABC）中可觀察到6個熒光點，在減數(shù)第一次分裂形成的兩個子細胞中分別可觀察到含A和含AB的2和4個熒光點?！军c睛】對F1進行熒光探針標記結(jié)果的分析是本題的難點，正確答題的關(guān)鍵在于能根據(jù)F1染色體組成（AABC），推斷F1有絲分裂中期細胞的染色體組成、減數(shù)第一次分裂形成的兩個子細胞的染色體組成，根據(jù)其中含A和B的組數(shù)，做出正確判斷。10、從基因文庫中獲取人工合成目的基因無表達所需的啟動子目的基因無復(fù)制原點（目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在）便于目的蛋白的分離和純化甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接【解析】

基因工程是狹義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細胞中穩(wěn)定高效地表達。為了實現(xiàn)基因工程的目標，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素，并按照一定的程序進行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導入受體細胞也稱（宿主）細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面。基因表達載體的構(gòu)建（即目的基因與運載體結(jié)合）是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其構(gòu)建目的是使目的基因能在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用?！驹斀狻浚?）獲取目的基因是實施基因工程的第一步，獲取目的基因的方法有從基因文庫中獲取（目的基因序列未知）、人工合成（目的基因序列已知）。（2）單獨的目的基因容易丟失，且目的基因的表達需要啟動子和終止子，目的基因的復(fù)制需要復(fù)制原點，因此要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達，需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞。（3）甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外，但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少，這樣分泌到細胞外的蛋白主要是我們需要的目的蛋白，這一特點的優(yōu)點在于便于目的蛋白的分離和純化。甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同，從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析，其原因可能是甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可以對表達出的蛋白質(zhì)進行進一步的加工、運輸。（4）用一種酶切質(zhì)粒和目的基因，可能會引起質(zhì)?；蚰康幕蜃陨憝h(huán)化。在構(gòu)建基因表達載體時，用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒，使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端，其目的是防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接?！军c睛】本題重點在基因工程的步驟及原理，須在理解的基礎(chǔ)上加強識記。11、翻譯蛋白質(zhì)的基因片段存在重疊，保證了翻譯蛋白質(zhì)所需的對應(yīng)基因長度獲取限制性核酸內(nèi)切酶位點基因表達載體的構(gòu)建顯微注射法抗原-抗體雜交讓豬博卡病毒感染豬，觀察其是否出現(xiàn)嚴重腹瀉【解析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞；④目的基因的檢測與表達。從分子水平上檢測目的基因的方法：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)?！驹斀狻浚?）據(jù)圖分析，編碼VP1和VP2蛋白質(zhì)的基因存在重疊片段，因此雖然豬博卡病毒DNA比較短，但是基因片段存在重疊，保證了翻譯蛋白質(zhì)所需的對應(yīng)基因長度。（2）PCR技術(shù)擴增目的基因時需要設(shè)計引物，往往在引物設(shè)計上含有限制性核酸內(nèi)切酶的位點，這樣便于目的基因和載體DNA連接。（3）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建，需要的酶是限制酶和DNA連接酶。通常用顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)雱游锛毎；虮磉_的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，因此要在分子水平上檢測目的基因在受體細胞中是否成功表達，