【基因測(cè)序技術(shù)在新生兒遺傳病篩查中的應(yīng)用研究5900字（論文）】

基因測(cè)序技術(shù)在新生兒遺傳病篩查中的應(yīng)用研究目錄TOC\o"1-2"\h\u2891基因測(cè)序技術(shù)在新生兒遺傳病篩查中的應(yīng)用研究 115129前言 186091.二代及三代測(cè)序技術(shù)的原理和分類 228491.1二代測(cè)序的原理和分類 2149861.2三代測(cè)序的原理和分類 3243212.二代測(cè)序在新生兒遺傳病篩查中的應(yīng)用 4138862.1NGS在無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查中的應(yīng)用 432172.2NGS在產(chǎn)后單基因病篩查中的應(yīng)用 5142463.三代測(cè)序在新生兒遺傳病中的應(yīng)用 696413.1三代測(cè)序在單基因病中的應(yīng)用 6249724.總結(jié)與展望 724846參考文獻(xiàn) 9摘要：新生兒遺傳病是社會(huì)公共衛(wèi)生中一項(xiàng)重要的問(wèn)題，為防治新生兒遺傳性疾病、提高出生人口素質(zhì)和群體健康水平，新生兒的產(chǎn)前診斷和產(chǎn)后病因鑒定為重中之重。至今，二代測(cè)序憑借其高通量、低成本的特點(diǎn)，在臨床診斷中的廣泛應(yīng)用成為有力工具，同時(shí)三代測(cè)序憑借其長(zhǎng)讀長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)在臨床鑒別診斷中嶄露頭角，兩者各有其優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)，相互補(bǔ)充在更有深度的分子層面發(fā)揮作用。本文基于此，針對(duì)二代和三代測(cè)序技術(shù)的原理、優(yōu)缺性，以及兩者在新生兒遺傳病篩查中的應(yīng)用做一綜述，為今后測(cè)序領(lǐng)域的研究提供總結(jié)，為臨床應(yīng)用提供指導(dǎo)和建議。關(guān)鍵詞：二代測(cè)序；三代測(cè)序；新生兒；遺傳病篩查前言隨著社會(huì)的發(fā)展要求，基于我國(guó)出生率下滑而老齡人口不斷增加的現(xiàn)狀，為了更好的實(shí)現(xiàn)人口結(jié)構(gòu)的優(yōu)化，我國(guó)從2016年起全面開(kāi)放二胎政策，從而引來(lái)了新一輪的生育高峰，進(jìn)一步增加了高齡產(chǎn)婦的數(shù)量，據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年出生后存在缺陷疾病的新生兒高達(dá)90萬(wàn)[2]，出生缺陷會(huì)對(duì)患病的兒童、他們的家庭、衛(wèi)生保健系統(tǒng)和社會(huì)產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響，因此新生兒遺傳性疾病篩查尤為被重視，它是降低出生缺陷、提高人口素質(zhì)的重要手段之一，目前臨床中主要通過(guò)生化檢查、細(xì)胞遺傳學(xué)和基因診斷等方法為診斷遺傳病提供依據(jù)[3]?；驕y(cè)序技術(shù)也稱為DNA測(cè)序技術(shù)，即獲得目的DNA片段堿基排列順序的技術(shù)，是分子生物學(xué)領(lǐng)域迅速發(fā)展的一項(xiàng)分析技術(shù)，在遺傳學(xué)診斷中發(fā)揮重要作用。1977年第一代Singer測(cè)序的發(fā)明，讓生命科學(xué)的研究進(jìn)入了基因組學(xué)的時(shí)代，經(jīng)過(guò)四十幾年的發(fā)展，測(cè)序技術(shù)從一代測(cè)序發(fā)展到三代測(cè)序，經(jīng)歷了革命性的變革。1975年由Sanger和Coulson開(kāi)創(chuàng)的“雙脫氧鏈終止法”基因測(cè)序技術(shù)提供了人類探索遺傳本質(zhì)的方向，以此為開(kāi)端讓人類步入基因組時(shí)代，但由于一代測(cè)序檢測(cè)成本高，通量較低，同時(shí)也無(wú)法滿足日趨增長(zhǎng)的對(duì)各類生物基因序列信息的迫切需求，在此背景下，分子檢測(cè)技術(shù)引來(lái)了技術(shù)革新的二代測(cè)序，二代測(cè)序技術(shù)大幅度提高了測(cè)序速度，其準(zhǔn)確性在Sanger法的基礎(chǔ)上也有所提升，通量高的同時(shí)檢測(cè)成本的也有所降低，使得分子遺傳學(xué)檢測(cè)技術(shù)逐步被納入臨床實(shí)踐中，然而二代測(cè)序技術(shù)還達(dá)不到滿足臨床的快速診斷需求以及對(duì)復(fù)雜基因序列檢測(cè)的需求，自此，測(cè)序技術(shù)引來(lái)了新的里程碑，以長(zhǎng)讀長(zhǎng)和快速檢測(cè)為優(yōu)勢(shì)的三代測(cè)序應(yīng)運(yùn)而生，實(shí)現(xiàn)了真正意義上的實(shí)時(shí)測(cè)序。以二代測(cè)序技術(shù)和三代測(cè)序?yàn)榇淼腄NA測(cè)序技術(shù)迅速發(fā)展，成為篩查新生兒遺傳性疾病的主要技術(shù)手段，實(shí)現(xiàn)在分子水平層面對(duì)新生兒遺傳性疾病的精準(zhǔn)檢測(cè)。本文將查閱關(guān)于二代、三代測(cè)序技術(shù)的相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)二代測(cè)序和三代測(cè)序技術(shù)在新生兒遺傳病篩查的應(yīng)用做一綜述。1.二代及三代測(cè)序技術(shù)的原理和分類1.1二代測(cè)序的原理和分類二代測(cè)序技術(shù)又稱為下一代測(cè)序技術(shù)(NextGenerationSequencing，NGS)，NGS可以對(duì)數(shù)百萬(wàn)個(gè)DNA進(jìn)行并行測(cè)序，延續(xù)了Sanger測(cè)序的部分技術(shù)思路[4]。目前，羅氏（Roche）公司的454測(cè)序儀、Illumina公司的Solexa分析儀以及ABI公司的SOLiD測(cè)序儀是主要測(cè)幾個(gè)測(cè)序平臺(tái)。不同平臺(tái)測(cè)序技術(shù)的核心步驟基本一致，主要包括（1）模板制備，如核酸的提?。唬?）文庫(kù)制備，包括克隆擴(kuò)增；（3）測(cè)序、數(shù)據(jù)分析比對(duì)[5]。2005年，羅氏推出了它的454測(cè)序技術(shù)，它主要采用了焦磷酸測(cè)序技術(shù)，即檢測(cè)核苷酸結(jié)合的副產(chǎn)物焦磷酸鹽，以識(shí)別特定堿基是否被納入DNA鏈中[6]。主要步驟是將待測(cè)DNA樣品打斷成長(zhǎng)度為400-700bp的單個(gè)DNA片段后，使得片段連接至銜接子構(gòu)成DNA文庫(kù)，然后通過(guò)乳液PCR（EmulsionPCR）進(jìn)行片段擴(kuò)增，測(cè)序時(shí)在特質(zhì)的PTP平板上將磁珠固定住，啟動(dòng)后每次向PTP平板中加入一種dNTP，而后對(duì)DNA合成反應(yīng)進(jìn)行化學(xué)檢測(cè)，當(dāng)待測(cè)核苷酸摻入合成鏈時(shí)，利用光反應(yīng)檢測(cè)焦磷酸鹽的釋放，最后通過(guò)計(jì)算機(jī)處理光信號(hào)從而檢測(cè)出樣品的核酸序列。Illumina是二代測(cè)序技術(shù)中運(yùn)用較為廣泛的一個(gè)平臺(tái)，主導(dǎo)著整個(gè)測(cè)序市場(chǎng)，其下的Solexa測(cè)序儀主要采用可逆終止化學(xué)反應(yīng)的原理，是基于一種稱為“橋式擴(kuò)增”的技術(shù)[7]。它將片段化的DNA碎片末端連接至兩個(gè)固定的接頭，構(gòu)成單鏈DNA測(cè)序文庫(kù)，然后進(jìn)行橋式PCR擴(kuò)增以形成包含克隆DNA片段的簇。每個(gè)可逆終止子核苷酸（ddATP，ddGTP，ddCTP，ddTTP）在3'-OH基團(tuán)處受到保護(hù)，并包含可裂解的熒光染料。在合成過(guò)程中，在脫氧核糖核苷酸被添加到合成鏈上后，洗脫掉游離的dNTP和DNA聚合酶，并釋放出熒光信號(hào)，最后使用CCD相機(jī)進(jìn)行成像捕獲和記錄，每一個(gè)循環(huán)按順序測(cè)定序列中的一個(gè)堿基。1.2三代測(cè)序的原理和分類與第二代測(cè)序方法相比，第三代測(cè)序技術(shù)旨在對(duì)長(zhǎng)DNA和RNA分子進(jìn)行測(cè)序，并且測(cè)序也無(wú)需進(jìn)行PCR擴(kuò)增環(huán)節(jié)，在檢測(cè)時(shí)間方面有巨大提升。目前在該領(lǐng)域商業(yè)化的技術(shù)領(lǐng)先者包括PacBio公司的單分子實(shí)時(shí)測(cè)序（singlemoleculereal-time，SMRT）技術(shù)和OxfordNanoporeTechnologies（ONT）公司的納米孔單分子技術(shù)[8]。SMRT技術(shù)的單分子測(cè)序和長(zhǎng)讀長(zhǎng)主要是通過(guò)零模波導(dǎo)孔和熒光標(biāo)記脫氧核苷酸實(shí)現(xiàn)的，納米級(jí)的零模波導(dǎo)孔能夠包含一個(gè)DNA聚合酶和一條樣本DNA鏈，當(dāng)在DNA鏈上探測(cè)到被熒光標(biāo)記的脫氧核苷酸時(shí)，顯微鏡就實(shí)時(shí)記錄其熒光強(qiáng)度，根據(jù)不同熒光信號(hào)標(biāo)記從而鑒定DNA鏈上的核苷酸分子類別，從而計(jì)算出待測(cè)樣品的序列[9]。PacBioSMRT測(cè)序技術(shù)之下有RSⅡ和Sequel兩種測(cè)序平臺(tái)，在不同的范疇內(nèi)發(fā)揮效用。2.二代測(cè)序在新生兒遺傳病篩查中的應(yīng)用2.1NGS在無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查中的應(yīng)用2.1.1胎兒染色體非整倍異常在胎兒染色體非整倍異常中最常見(jiàn)的是由配子發(fā)生過(guò)程中的不相交引起的21、18和13號(hào)染色體的三體性引起的。目前，國(guó)內(nèi)主流的三大NIPT平臺(tái)為：達(dá)安DA8600、貝瑞和康NextSeqCN500以及華大基因的BGlSEQ500。大量數(shù)據(jù)研究證明NIPT對(duì)于13、18、21號(hào)染色體拷貝數(shù)異常的檢測(cè)特異性均大于99.9%；T21在檢測(cè)敏感性方面最高可達(dá)到99.5%，T18為93.1%，T13為92.7%，敏感性略低[11]。而侯偉、周紅輝[12]等人通過(guò)選取2018年1月16日-2020年6月30日在解放軍總醫(yī)院第一醫(yī)學(xué)中心的孕婦，結(jié)果分析后顯示NIPT整體的特異度為97.61%，陰性預(yù)測(cè)值97.20%，診斷符合率95.16%。結(jié)果存在一定的不確定性，例如存在一部分NIPT顯示低風(fēng)險(xiǎn)但侵入性產(chǎn)前篩查顯示異常的人群，其中主要包括胎兒微缺失重復(fù)、嵌合體、雜合性缺失、單親二倍體的染色體異常。該專家組認(rèn)為NIPT對(duì)染色體非整倍異常的檢測(cè)具有高敏感性，不推薦將檢測(cè)范圍擴(kuò)展至微缺失重復(fù)以及其它染色體異常。2.1.2胎兒染色體微缺失和微重復(fù)染色體微缺失微重復(fù)一般會(huì)導(dǎo)致胎兒智力和身體上的異常，張春花、賀權(quán)澤[13]等專家檢測(cè)了NIPT的主流三大平臺(tái)DA8600、CN500和BGlSEQ500對(duì)23170例孕婦外周血樣本進(jìn)行胎兒染色體微缺失和微復(fù)制的篩查，結(jié)果表明三大平臺(tái)間的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值無(wú)差異，而篩查陽(yáng)性率存在差異，BGlSEQ500平臺(tái)的陽(yáng)性篩查率為0.58%，高于0.38%的DA8600和0.26%的CN500。該研究表明，用于唐氏綜合癥篩查的NIPT對(duì)于染色體微缺失和重復(fù)具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，同時(shí)檢測(cè)人員和臨床醫(yī)生也要充分意識(shí)到NIPT在微缺失微重復(fù)的檢測(cè)中可能存在假陰性或假陽(yáng)性的情況，對(duì)于NIPT結(jié)果陽(yáng)性的孕婦，臨床醫(yī)生還需要參考額外產(chǎn)前診斷項(xiàng)目才能進(jìn)行確診，因此也有研究認(rèn)為對(duì)于染色體微缺失微重復(fù)的妊娠結(jié)局通過(guò)NIPT無(wú)法在產(chǎn)前可靠地預(yù)測(cè)[14]。2.1.3單基因病檢測(cè)單基因疾病即是由一對(duì)等位基因控制的遺傳疾病，因組成基因的堿基發(fā)生改變，導(dǎo)致基因序列異?；蛘弑磉_(dá)異常。軟骨發(fā)育不全是第一種通過(guò)NIPT檢測(cè)并被引入臨床實(shí)踐的單基因疾病[15]，盡管NIPT已廣泛用于染色體非整倍性疾病的檢測(cè)當(dāng)中，但將其用于診斷單基因疾病的臨床應(yīng)用相對(duì)較少，這是由于當(dāng)前技術(shù)下很難區(qū)分母體血樣中胎兒和母體等位基因，尤其是在多個(gè)遺傳基因座上，因此這些技術(shù)障礙限制了使用cfDNA篩選胎兒?jiǎn)位蚣膊〉膹V泛實(shí)施[16]，隨著基因組測(cè)序技術(shù)的不斷發(fā)展，可能需要克服諸如精確鑒定胎兒等位基因之類的挑戰(zhàn)。2.2NGS在產(chǎn)后單基因病篩查中的應(yīng)用2.2.1SNV、InDel的檢測(cè)單核苷酸變異和插入缺失（<50bp）構(gòu)成了人類基因組中的絕大多數(shù)基因變異的情況。WES和WGS可以準(zhǔn)確識(shí)別單核苷酸變體（SNV）和InDel[17]，當(dāng)SNV和Indel發(fā)生于基因組外顯子區(qū)域或者明確的靶區(qū)時(shí)，可以選擇全外顯子測(cè)序或者靶向測(cè)序，而當(dāng)SNV和InDel發(fā)生在全基因組時(shí)，全基因組測(cè)序更為合適[18]。對(duì)于臨床診斷較為明確、致病基因有限或突變機(jī)制復(fù)雜的單基因病，應(yīng)用TGS能夠保證足夠的測(cè)序深度，不僅能夠反映SNV、InDel，還能一定程度上檢出CNV等復(fù)雜致病變異，使臨床檢測(cè)具有更高的針對(duì)性;對(duì)于臨床癥狀不典型、難以確診的遺傳病，WES較TGS有更大的覆蓋范圍，能從全外顯子組的水平對(duì)基因功能區(qū)進(jìn)行評(píng)估，有利于快速地診斷。例如段麗芬[19]等人使用全外顯子組測(cè)序篩選腓骨肌萎縮綜合征的先證者中的致病基因，并進(jìn)行生物學(xué)分析，根據(jù)人類外顯子數(shù)據(jù)庫(kù)的數(shù)據(jù)，東亞人群中并未發(fā)現(xiàn)MFN2基因c.1090C>T突變，但經(jīng)WES技術(shù)的檢測(cè)以及計(jì)算機(jī)輔助預(yù)測(cè)，認(rèn)為在該位點(diǎn)上存在潛在功能影響，該位點(diǎn)存在有害的致病性。2.2.2CNV的檢測(cè)拷貝數(shù)變異其實(shí)也是作為結(jié)構(gòu)變異中的一部分，異常的DNA拷貝數(shù)變化是許多人類疾病的重要分子機(jī)制。Pfundt等[20]對(duì)2603例遺傳性疾病患者的WES數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，最終確定123個(gè)致病性CNV，說(shuō)明WES和WGS確實(shí)可以從基因組全局水平去提示基因組大片段CNV，提高致病位點(diǎn)檢出率，但是在CNV中還存在著由許多人類疾病基礎(chǔ)的非等位基因同源重組形成的復(fù)雜性CNV，NGS并不是最佳的檢測(cè)手段，對(duì)于此類CNV聯(lián)合性檢測(cè)更具有效用，可以選擇染色體微陣列分析(CMA)或CNV-Seq來(lái)確定發(fā)生拷貝數(shù)變異的染色體，進(jìn)一步的斷點(diǎn)分析可以聯(lián)合WGS或者三代測(cè)序的技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。DarrelWaggoner[21]等人使用CMA技術(shù)評(píng)估神經(jīng)發(fā)育障礙和先天缺陷，結(jié)果顯示對(duì)于患有神經(jīng)發(fā)育障礙和先天缺陷的患者，在進(jìn)行CMA檢測(cè)后存在遺漏的細(xì)胞基因組異常，例如平衡重排、部分或整個(gè)染色體非整倍性的鑲嵌等，因此針對(duì)此類拷貝數(shù)異常遺傳性疾病，在分析技術(shù)的選擇上十分重要。3.三代測(cè)序在新生兒遺傳病中的應(yīng)用由于NGS短讀法的技術(shù)特性，難以通過(guò)NGS檢測(cè)結(jié)構(gòu)變異、重復(fù)元件、鳥(niǎo)嘌呤-胞嘧啶（GC）含量高的序列[22]?；贜GS的這些缺點(diǎn)，極大地推動(dòng)了研發(fā)新技術(shù)提高準(zhǔn)確性和減少遺傳疾病診斷時(shí)間的進(jìn)程，由PacBio和ONT引入的三代測(cè)序的功能允許實(shí)時(shí)長(zhǎng)讀實(shí)時(shí)測(cè)序，并且在構(gòu)建文庫(kù)時(shí)具有較低的比對(duì)和定位錯(cuò)誤[23]，因此對(duì)于特殊致病機(jī)制的單基因病，例如SV、動(dòng)態(tài)突變的檢測(cè)，可以采用三代測(cè)序以彌補(bǔ)NGS的缺陷。當(dāng)然三代測(cè)序本身也能在一些非整倍體異常的情況下使用，并且達(dá)到快速檢測(cè)的效果，但就檢測(cè)成本而言適用性不是很大[24]。3.1三代測(cè)序在單基因病中的應(yīng)用3.1.1動(dòng)態(tài)突變的檢測(cè)動(dòng)態(tài)突變是由DNA中重復(fù)單位拷貝數(shù)發(fā)生擴(kuò)增而導(dǎo)致的突變，第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)由動(dòng)態(tài)突變引起的單基因遺傳性疾病是脆性X綜合征（fragileXsyndrome，F(xiàn)XS），其發(fā)病機(jī)制是由于X染色體上FMR1基因5'端非翻譯區(qū)三核苷酸重復(fù)序列（CGG）n動(dòng)態(tài)變異引起[25]，F(xiàn)MR1基因5'端非翻譯區(qū)存在大量的GC堿基片段的重復(fù)，二代測(cè)序技術(shù)的短讀長(zhǎng)特性難以在該區(qū)域發(fā)揮作用，而Loomis[26]等專家采用SMRT技術(shù)對(duì)FXS患者FMR1基因5'端非翻譯區(qū)進(jìn)行檢測(cè)，完成了對(duì)(CGG)n重復(fù)片段鑒定，該重復(fù)片段長(zhǎng)達(dá)2kb，由此可見(jiàn)三代測(cè)序技術(shù)在重復(fù)堿基區(qū)檢測(cè)序列的優(yōu)勢(shì)。3.1.2結(jié)構(gòu)變異（SV）的檢測(cè)結(jié)構(gòu)變異在遺傳病中起到重要作用，SV包括刪除，插入，倒位，移動(dòng)元件易位，易位，串聯(lián)重復(fù)和拷貝數(shù)變異等形式。SV可以通過(guò)改變基因劑量，破壞基因功能或重新排列調(diào)節(jié)元件或基因來(lái)改變基因組背景來(lái)發(fā)揮功能作用[27]。SV被認(rèn)為是最難以從短讀數(shù)據(jù)中可靠檢測(cè)出的變異形式，因此單分子和實(shí)時(shí)測(cè)序在SV中顯示出了更好的發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)變異事件的能力。Merker等[28]在初次嘗試使用IlluminaHiSeq測(cè)序技術(shù)對(duì)Carney綜合征進(jìn)行研究，但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)與該綜合征致病相關(guān)的基因突變，隨后改用了PacBio的SMRT測(cè)序技術(shù)，SMRT技術(shù)檢測(cè)出了6971個(gè)缺失和6821個(gè)插入，通過(guò)篩選獲得了1個(gè)雜合子缺失與Carney綜合征中相關(guān)基因PRKAR1A的第1個(gè)編碼外顯子重疊的情況，該結(jié)果表明此雜合子的缺失與Carney綜合征的致病有關(guān)，證實(shí)了SMRT技術(shù)在較為復(fù)雜的結(jié)構(gòu)變異中的適用性。4.總結(jié)與展望隨著基因組測(cè)序技術(shù)和基因組數(shù)據(jù)分析的不斷發(fā)展，新生兒遺傳學(xué)篩查的領(lǐng)域正在迅速擴(kuò)大，對(duì)篩查胎兒遺傳性疾病的選擇方案也愈加豐富。目前二代測(cè)序方法在分子檢測(cè)領(lǐng)域的發(fā)展中已經(jīng)趨于成熟，三代測(cè)序技術(shù)發(fā)展迅速但仍處于研究開(kāi)發(fā)的狀態(tài)中，他們存在各自的有優(yōu)缺性。二代測(cè)序技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于它的高通量性，對(duì)于檢測(cè)低頻變異的片段具有較高的靈敏度，同時(shí)在較多樣品量的情況下，具有更快的周轉(zhuǎn)時(shí)間以及較低的成本去完成檢測(cè)工作，但二代測(cè)序也面臨著較大的限制，其短讀長(zhǎng)特性限制了NGS在基因的重復(fù)區(qū)域或復(fù)雜變異中的檢測(cè)效果。三代測(cè)序技術(shù)更長(zhǎng)的序列讀取長(zhǎng)度且無(wú)需進(jìn)行PCR擴(kuò)增是其最主要的優(yōu)勢(shì)，同時(shí)三代測(cè)序的樣品制備時(shí)間及測(cè)序運(yùn)行時(shí)間較NGS相比來(lái)得更短，部分平臺(tái)例如ONT公司的MinION測(cè)序儀還有較高的便攜性和實(shí)時(shí)測(cè)序能力，但是三代測(cè)序的成本昂貴，限制了其大規(guī)模的應(yīng)用于臨床檢測(cè)，測(cè)序錯(cuò)誤率也相對(duì)較高，只有通過(guò)對(duì)同一樣本進(jìn)行反復(fù)測(cè)序來(lái)糾正測(cè)序結(jié)果，也會(huì)因此而增加耗費(fèi)。另外生物學(xué)信息分析軟件的發(fā)展也尤為重要，三代測(cè)序不及二代測(cè)序發(fā)展全面，信息分析技術(shù)還在研究開(kāi)發(fā)的狀態(tài)，積累的數(shù)據(jù)也較少?？偠灾?，新生兒遺傳性疾病的篩查對(duì)社會(huì)人口結(jié)構(gòu)的優(yōu)化、對(duì)公共衛(wèi)生的發(fā)展以及個(gè)人的身體素質(zhì)都具有重要意義，希望通過(guò)本文能夠優(yōu)化臨床診斷和遺傳咨詢時(shí)技術(shù)方法的抉擇。同時(shí)，也為后續(xù)的研究者提供研究方向的思考，期望未來(lái)更多新生兒遺傳性疾病的篩查從產(chǎn)后診斷向產(chǎn)前篩查發(fā)展，擴(kuò)大無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查的檢測(cè)范圍，提高無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前DNA篩查的社會(huì)普及程度，2018年我國(guó)新生人口是1500萬(wàn)左右，而全年NIPT的樣本量約為400萬(wàn)，NIPT檢測(cè)只覆蓋我國(guó)27%的人口[30]，希望在未來(lái)該數(shù)據(jù)能有明顯增長(zhǎng)。針對(duì)二、三代測(cè)序的發(fā)展而言，三代測(cè)序技術(shù)的檢測(cè)范圍目前基本囊括二代測(cè)序的適用范圍，甚至解決了二代測(cè)序無(wú)法準(zhǔn)確檢測(cè)的復(fù)雜序列，因而期望未來(lái)二、三代測(cè)序技術(shù)能夠相輔相成結(jié)合并行，以此來(lái)降低三代檢測(cè)成本的同時(shí)，也能利用三代測(cè)序提高診斷準(zhǔn)確率，逐步向更大規(guī)模的臨床早期篩查進(jìn)發(fā)，為出生缺陷的防控盡一份力，推動(dòng)發(fā)展精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)，優(yōu)化人口結(jié)構(gòu)。參考文獻(xiàn)[1]歐陽(yáng)健為.淺談基因測(cè)序的重大意義及應(yīng)用前景[J].神州，2019(5)：239-239.[2]張偉然，趙正言.新生兒疾病基因篩查研究進(jìn)展[J].中華兒科雜志，2020，58(12)：1033-1037.[3]馬潞林，宋一萌，葛力源.基因測(cè)序技術(shù)的發(fā)展與臨床應(yīng)用概述[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，43(4)：7-9.[4]吳爽，強(qiáng)榮，張瑞雪.高通量測(cè)序技術(shù)在新生兒疾病篩查中的應(yīng)用進(jìn)展[J].中國(guó)婦幼健康研究雜