實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 繁育與遺傳監(jiān)測

ICS65.020.30CCSB44DB11代替DB/T1804-2020Laboratoryanimal—Breedingandgeneti北京市市場監(jiān)督管理局發(fā)布IDB11/T1804—202x前言 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14縮略語 25遺傳分類及命名原則 26繁殖方法 47遺傳監(jiān)測 5附錄A（規(guī)范性）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微衛(wèi)星DNA標(biāo)記遺傳檢測方法 8附錄B（規(guī)范性）實(shí)驗(yàn)斑馬魚SNP遺傳標(biāo)記的檢測方法 26附錄C（規(guī)范性）MHC單倍型實(shí)驗(yàn)雞和實(shí)驗(yàn)鴨直接測序檢測方法 參考文獻(xiàn) DB11/T1804—202x本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起本文件替代DB11/T1804-2020，主要技術(shù)變化如下：增加了“實(shí)驗(yàn)樹鼩繁育與遺傳監(jiān)測”相關(guān)內(nèi)容（見5、6、7、附錄A、附錄C）。本文件由北京市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)、中關(guān)村科技園區(qū)管理委員會(huì)提出并歸口。本文件由北京市科學(xué)技術(shù)委員會(huì)、中關(guān)村科技園區(qū)管理委員會(huì)組織實(shí)施。本文件起草單位：首都醫(yī)科大學(xué)、中國食品藥品檢定研究院、北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理辦公室、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所、中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)研究院、國家衛(wèi)生健康委員會(huì)科學(xué)技術(shù)研究所、杭州醫(yī)學(xué)院、吉林大學(xué)、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所、北京市標(biāo)準(zhǔn)化研究院、北京華阜康生物科技股份有限公司、北京康藍(lán)生物技術(shù)有限公司、中國科學(xué)院水生生物研究所、北京大學(xué)、清華大學(xué)、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所、中國科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所。本文件主要起草人：陳振文、李根平、賀爭鳴、李長龍、劉云波、孫德明、岳秉飛、李奎、楊述林、馮書堂、杜小燕、向志光、王洪、董罡、任文陟、陳洪巖、陳繼蘭、鞏薇、馮育芳、郭紅剛、王熙、李吏、王錫樂、劉文菊、謝佳琪、樊子風(fēng)、薩曉嬰、劉先菊、叢日旭、騰永康、肖沖、魏杰、于鵬麗、牟玉蓮、公維華、張寧波、徐玲玲、崔宗斌、張博、孫榮澤、韓凌霞、常在、劉苗苗、唐倩倩、代解杰、呂龍寶、王文廣、王蕓、馬玉華。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：——首次發(fā)布分別為DB11/T828.3—2011、DB11/T1053.3—2013、DB11/T1461.1—2017、DB11/T1461.2—2017、DB11/T1461.3—2017、DB11/T1461.4—2018、DB11/T1461.5—2018；——2020年發(fā)布為DB11/T1804-2020；——本次為第二次修訂。1DB11/T1804—202x實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育與遺傳監(jiān)測本文件規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳分類及命名原則、繁殖方法和遺傳檢測。本文件適用于實(shí)驗(yàn)小型豬、實(shí)驗(yàn)豬、實(shí)驗(yàn)牛、實(shí)驗(yàn)羊、實(shí)驗(yàn)狨猴、實(shí)驗(yàn)長爪沙鼠、實(shí)驗(yàn)貓、實(shí)驗(yàn)雪貂、實(shí)驗(yàn)雞、實(shí)驗(yàn)鴨、實(shí)驗(yàn)鵝、實(shí)驗(yàn)鴿、實(shí)驗(yàn)魚（斑馬魚和劍尾魚）、實(shí)驗(yàn)樹鼩的繁育和遺傳監(jiān)測。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T2416東北細(xì)毛羊GB/T3157中國荷斯坦牛GB14923實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳質(zhì)量控制GB/T19166中國西門塔爾牛GB/T19376波爾山羊種羊GB/T22283長白豬種豬GB/T22284大約克夏豬種豬GB/T22285杜洛克豬種豬GB/T22909小尾寒羊GB/Z34792實(shí)驗(yàn)動(dòng)物引種技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T14高產(chǎn)奶牛飼養(yǎng)管理規(guī)范NY625迪卡配套系豬種豬NY/T1339肉牛育肥良好管理規(guī)范NY/T1446種公牛飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1673畜禽微衛(wèi)星DNA遺傳多樣性檢測技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1901雞遺傳資源保種場保種技術(shù)規(guī)范NY/T2662標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖場奶牛NY/T2665標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖場肉羊3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物laboratoryanimal經(jīng)人工飼育，對其攜帶的微生物和寄生蟲實(shí)行控制，遺傳背景明確或者來源清楚，用于科學(xué)研究、2DB11/T1804—202x教學(xué)、生產(chǎn)和檢定以及其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物。3.2實(shí)驗(yàn)種群experimentalpopulation以遠(yuǎn)交方式進(jìn)行繁殖生產(chǎn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體。3.3封閉群closedcolony不引進(jìn)外部動(dòng)物、在群體內(nèi)隨機(jī)選擇種動(dòng)物進(jìn)行繁殖，以維持有限雜合度的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種群。3.4近交系inbredstrain一個(gè)動(dòng)物群體中,任何個(gè)體基因組中98.6%以上的座位為純合的品系。注:經(jīng)典近交系經(jīng)至少連續(xù)20代的全同胞兄妹交配培育而成。品系內(nèi)所有個(gè)體都可追湖到起源于第20代或以后代數(shù)的一對共同祖先。經(jīng)連續(xù)20代以上親子交配與全同胞兄妹交配有等同效果。近交系的近交系數(shù)(inbreedingcoefficient)大于98.6%。3.5單倍型群體haplotypepopulation通過近親交配繁殖方式培育出的單倍體基因型一致的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體。3.6雜交群hybrids由兩個(gè)不同近交系雜交產(chǎn)生的后代群體。4縮略語下列縮略語適用于本文件。PCR：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseChainReaction）SNP:單核苷酸多態(tài)性(SingleNucleotidePolymorphism)STR:短串聯(lián)重復(fù)序列（ShortTandemRepeat）5遺傳分類及命名原則5.1遺傳分類根據(jù)不同品種品系動(dòng)物及個(gè)體間遺傳差異將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為實(shí)驗(yàn)種群、封閉群、近交系、單倍型群體和雜交群，具體符合表1的要求。表1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳分類表3DB11/T1804—202x5.2命名原則5.2.1實(shí)驗(yàn)種群在原有的品種品系名稱前面加上實(shí)驗(yàn)，如實(shí)驗(yàn)長白豬。5.2.2封閉群由2～4個(gè)大寫英文字母命名。種群名稱前標(biāo)明保持者的英文縮寫名稱，第一個(gè)字母大寫，后面的字母小寫，宜不超過4個(gè)字母。保持者與種群名稱之間用冒號分開。5.2.3近交系以大寫英文字母或大寫英文字母加阿拉伯?dāng)?shù)字命名，符號應(yīng)簡短。5.2.4單倍型群體以單倍體基因型英文名稱（或縮寫）加英文字母和阿拉伯?dāng)?shù)字命名，符號應(yīng)簡短。5.2.5雜交群4DB11/T1804—202x以雌性親代名稱在前，雄性親代名稱在后，二者之間以符號“”相連。將以上部分用括號括起，在其后表明雜交代數(shù)，以F1……Fn表示。6繁殖方法6.1實(shí)驗(yàn)種群6.1.1引種選擇雙親健康、無遺傳疾病、繁殖性能好、體貌符合品種特征的動(dòng)物作為種用動(dòng)物。6.1.2繁育方法實(shí)驗(yàn)豬按照NY625的規(guī)定進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)西門塔爾牛按照NY/T1339和NY/T1446規(guī)定執(zhí)行，實(shí)驗(yàn)中國荷斯坦牛按照NY/T14和NY/T2662的規(guī)定進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)羊應(yīng)按照GB14923和NY/T2665的規(guī)定進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)狨猴和雪貂應(yīng)按GB14923的規(guī)定進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)貓按照雌雄5:1以上比例進(jìn)行繁殖。6.2封閉群6.2.1引種作為繁殖用種子的封閉群動(dòng)物應(yīng)三代以內(nèi)無共同親代并符合GB/Z34792對封閉群種用動(dòng)物的要求。封閉群實(shí)驗(yàn)長爪沙鼠、實(shí)驗(yàn)鴿和實(shí)驗(yàn)樹鼩引種數(shù)量不少于25對。封閉群實(shí)驗(yàn)小型豬引種數(shù)量不少于13對（循環(huán)交配方式繁殖）或25對（隨機(jī)交配方式繁殖）。封閉群實(shí)驗(yàn)魚（斑馬魚和劍尾魚）引種數(shù)目不少于100尾。實(shí)驗(yàn)雞、實(shí)驗(yàn)鴨和實(shí)驗(yàn)鵝引種規(guī)模按照NY/T1901執(zhí)行。其他封閉群實(shí)驗(yàn)動(dòng)物引種規(guī)模按照GB14923規(guī)定執(zhí)行。6.2.2繁育方法封閉群實(shí)驗(yàn)小型豬、實(shí)驗(yàn)長爪沙鼠、實(shí)驗(yàn)鴿和實(shí)驗(yàn)樹鼩繁殖方法按照GB14923的規(guī)定執(zhí)行。實(shí)驗(yàn)雞、實(shí)驗(yàn)鴨、實(shí)驗(yàn)鵝應(yīng)按照NY/T1901的規(guī)定進(jìn)行。6.3近交系6.3.1引種作為繁殖用種子的近交系動(dòng)物應(yīng)符合GB/Z34792對近交系種用動(dòng)物的要求。6.3.2繁育方法近交系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可分為基礎(chǔ)群（foundationstock）、血緣擴(kuò)大群（pedigreeexpansionstock）和生產(chǎn)群（productionstock），當(dāng)近交系動(dòng)物生產(chǎn)供應(yīng)數(shù)量不是很大時(shí)，可不設(shè)血緣擴(kuò)大群，僅設(shè)基礎(chǔ)群和生產(chǎn)群。各基礎(chǔ)群、血緣擴(kuò)大群和生產(chǎn)群的繁育方式按照GB14923執(zhí)行。6.4單倍型群體6.4.1引種5DB11/T1804—202x作為繁殖用種子的單倍型群體動(dòng)物按照GB/Z34792的規(guī)定執(zhí)行。6.4.2繁育方法以全同胞或半同胞兄妹交配方式進(jìn)行。6.5雜交群將不同品系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的親代雌性與親代雄性雜交，即可得到F1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。7遺傳監(jiān)測7.1遺傳要求遺傳滿足以下要求：——體貌符合品種特征；——譜系記錄清楚；——繁殖方法科學(xué)；——群體遺傳符合品種特征；——遺傳質(zhì)量檢測合格。7.2遺傳檢測7.2.1檢測頻率每12個(gè)月至少進(jìn)行一次檢測。7.2.2抽樣7.2.2.1實(shí)驗(yàn)種群和封閉群抽樣數(shù)量從每個(gè)種群中隨機(jī)抽取非同窩成年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血液或其他組織，雌雄各半。抽樣數(shù)量按照表2規(guī)定執(zhí)行。表2實(shí)驗(yàn)種群和封閉群遺傳檢測抽樣數(shù)量7.2.2.2近交系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抽樣數(shù)量基礎(chǔ)群留種動(dòng)物的雙親均應(yīng)進(jìn)行遺傳檢測；各生產(chǎn)群體采取隨機(jī)抽取非同窩成年動(dòng)物雌雄各半，抽樣數(shù)量按照表3規(guī)定執(zhí)行。表3近交系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳檢測抽樣數(shù)量6DB11/T1804—202x7.2.3遺傳檢測方法采用群體遺傳結(jié)構(gòu)評估、微衛(wèi)星DNA標(biāo)記、SNP分子標(biāo)記和直接測序等檢測方法，在有檢測能力的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，具體按照表4規(guī)定執(zhí)行。表4遺傳檢測方法適用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體7.2.4結(jié)果判定7.2.4.1實(shí)驗(yàn)種群檢測結(jié)果判定7.2.4.1.1群體遺傳結(jié)構(gòu)評估當(dāng)實(shí)驗(yàn)豬、實(shí)驗(yàn)牛、實(shí)驗(yàn)羊體貌特征與品種品系特征相符合時(shí)，判定合格，否則判定不合格。7.2.4.1.2微衛(wèi)星DNA標(biāo)記檢測法實(shí)驗(yàn)狨猴、實(shí)驗(yàn)貓和實(shí)驗(yàn)雪貂適用于微衛(wèi)星DNA標(biāo)記檢測法。7DB11/T1804—202x實(shí)驗(yàn)狨猴和實(shí)驗(yàn)貓采用群體平衡狀態(tài)方法進(jìn)行評價(jià)。按照哈代-溫伯格（Hardy-Weiberg）定律，根據(jù)各位點(diǎn)的等位基因數(shù)計(jì)算封閉群的基因頻率，進(jìn)行卡方（chi-squaretest）檢驗(yàn)。當(dāng)群體達(dá)到平衡狀態(tài)，該群體判為合格，否則判為不合格。實(shí)驗(yàn)雪貂采用群體平均雜合度進(jìn)行評價(jià)，當(dāng)群體平均雜合度在0.5～0.7時(shí)，該群體判為合格，否則判為不合格。7.2.4.2封閉群實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果判定封閉群實(shí)驗(yàn)長爪沙鼠、實(shí)驗(yàn)雞、實(shí)驗(yàn)鴨、實(shí)驗(yàn)鵝、實(shí)驗(yàn)鵝、實(shí)驗(yàn)小型豬、實(shí)驗(yàn)魚（斑馬魚和劍尾魚）和實(shí)驗(yàn)樹鼩采用微衛(wèi)星DNA標(biāo)記檢測法。封閉群采用平均雜合度進(jìn)行評價(jià)，當(dāng)群體平均雜合度在0.5～0.7時(shí)，該群體判為合格，否則判為不合格。7.2.4.3單倍型群體檢測結(jié)果判定單倍型實(shí)驗(yàn)雞和實(shí)驗(yàn)鴨采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）產(chǎn)物直接測序法。單倍型采用單倍基因型序列進(jìn)行評價(jià)，當(dāng)測定序列與參考序列一致率為100%時(shí)，該群體判為合格，否則判為不合格。7.2.4.4近交系檢測結(jié)果判定7.2.4.4.1微衛(wèi)星DNA標(biāo)記檢測法近交系實(shí)驗(yàn)小型豬采用微衛(wèi)星DNA標(biāo)記檢測法。近交系實(shí)驗(yàn)小型豬采用微衛(wèi)星DNA品系特征進(jìn)行評價(jià)，當(dāng)檢測位點(diǎn)符合品系的特征時(shí)，該群體判為合格，否則判為不合格。7.2.4.4.2SNP分子標(biāo)記檢測法近交系實(shí)驗(yàn)魚采用SNP分子標(biāo)記檢測法。近交系實(shí)驗(yàn)魚采用SNP分子標(biāo)記位點(diǎn)特征進(jìn)行評價(jià)，當(dāng)檢測位點(diǎn)符合品系的特征時(shí)，該群體判為合格；當(dāng)一個(gè)位點(diǎn)與參考位點(diǎn)不一致時(shí)，判為可疑，增加檢測位點(diǎn)數(shù)量和增加檢測方法重新檢測；當(dāng)有兩個(gè)及以上位點(diǎn)與參考位點(diǎn)不一致時(shí)，判為不合格。8DB11/T1804—202x（規(guī)范性）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微衛(wèi)星DNA標(biāo)記遺傳檢測方法A.1基因組DNA的提取基因組DNA提取方法按照NY/T1673的規(guī)定執(zhí)行。A.2微衛(wèi)星位點(diǎn)A.2.1用于檢測封閉群和近交系實(shí)驗(yàn)小型豬遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)分別為25個(gè)和10個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、染色體位置、引物序列、等位基因數(shù)、等位基因范圍和退火溫度按照表A.1的規(guī)定執(zhí)行。表A.1實(shí)驗(yàn)小型豬微衛(wèi)星位點(diǎn)的引物序列、退火溫度、等位基因數(shù)及等位基因分布范圍引物序列(5′~3′)體Mg濃度1TCTACTCCAGGAGATAAGC2AGAAATTAGTGCCTCAAATTAAACCATTAAGTCCCTAGCA23456798AGGGTGGCTAAAAAAGAAAAATCAAATCCTTACCTCTGCA8999DB11/T1804—202xAGTGGTCTCTCTCCCTCTTG8AAGATCATTTAGTCAAGGTCACTCTGATAGGGAACATAGGAXATAGACATTATGTAAGTTGCTGGAACTTTCACATCCCTAAGAGAAATTAGTGCCTCAAATTAAACCATTAAGTCCCTAGCA88GCTATCAAGTATTGTACCA476TCTGGCTCCTACACTCCTTCTGTTTGGGTGGGTGCTGAAAAA8DB11/T1804—202xX8A.2.2用于檢測實(shí)驗(yàn)狨猴遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為20個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、引物序列、等位基因數(shù)、等位基因范圍和退火溫度按照表A.2的規(guī)定執(zhí)行。表A.2實(shí)驗(yàn)狨猴微衛(wèi)星位點(diǎn)的引物序列、退火溫度、等位基因數(shù)及等位基因分布范圍引物序列（5′~3′)96656686687786DB11/T1804—202x788A.2.3用于檢測實(shí)驗(yàn)長爪沙鼠遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為28個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、引物序列、等位基因數(shù)、等位基因范圍和退火溫度按照表A.3的規(guī)定執(zhí)行。表A.3實(shí)驗(yàn)長爪沙鼠微衛(wèi)星位點(diǎn)的引物序列、退火溫度、等位基因數(shù)及等位基因分布范圍引物序列（5′~3′)9GTTTTTCTCAGAAGAATGCA9DB11/T1804—202x9TAAGATCCAAGAGATGGGTAATCCTTGTTCACTCTATCAAG9ACACTCAGAGACCATGAGTACA9GACATTCCTTAAGAGAGACA.2.4用于檢測封閉群實(shí)驗(yàn)雪貂遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為21個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、引物序列、重復(fù)等位基因數(shù)按照表A.4的規(guī)定執(zhí)行。表A.4實(shí)驗(yàn)雪貂微衛(wèi)星位點(diǎn)的引物序列、等位基因數(shù)及等位基因分布范圍引物序列（5′~3′)A4wA10wA121wACTGCCATCAGGTCATCTAGGGGGTAGACACCTGGCTCAA129wAAGTACAGAATGGAAGGATCA212wDB11/T1804—202xA223wA229wA231wAGTCGACAGATGAGTCCACGAAGTGTCACACATGGCAGGATGGGTGGATGGGTGAGTAGGTACCTTCCCACATTCCAGAACAGCAAGTAGTCCAACA.2.5用于檢測實(shí)驗(yàn)貓遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為37個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、染色體位置、引物序列、退火溫度按照表A.5的規(guī)定執(zhí)行。表A.5實(shí)驗(yàn)貓微衛(wèi)星位點(diǎn)的擴(kuò)增條件和染色體分布引物序列(5′~3′)Mg濃度（mM）DB11/T1804—202xGTTTGAAATTATGGCTTCCAGAAAAATGACTACCGACATGGAGGGTGTGCTAGAACTAGCTDB11/T1804—202xAACTGAAGACCAAATTGATGAATTCTGAGAACAAGCTGAGATCCTCTATGGCAGGACTTA.2.6用于檢測實(shí)驗(yàn)雞遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為29個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、引物序列、等位基因數(shù)和等位基因范圍按照表A.6的規(guī)定執(zhí)行。表A.6實(shí)驗(yàn)雞微衛(wèi)星位點(diǎn)的引物序列、退火溫度、等位基因數(shù)及等位基因分布范圍引物序列（5′~3′)GTGGACACCCATTTGTACC868DB11/T1804—202x676577AATGTTCTCATAGAGTTCCT6AAGGCAAACTCAGCTGGAA5939713GGCTCCAAAAGCTTGTTCT8956262DB11/T1804—202x6AAAATATTGGCTCTAGGAACTGACCGGAAATGAAGGTAAGACTA952A.2.7用于檢測實(shí)驗(yàn)鴨遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為29個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、引物序列、等位基因數(shù)和等位基因范圍按照表A.7的規(guī)定執(zhí)行。表A.7實(shí)驗(yàn)鴨微衛(wèi)星位點(diǎn)的引物序列、退火溫度、等位基因數(shù)及等位基因分布范圍引物序列（5′~3′)4ATTAGAGCAGGAGTTAGGAG7823ACAATAGATTCCAGATGCTG9324338DB11/T1804—202x6969395899773A.2.8用于檢測實(shí)驗(yàn)鵝遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為14個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、引物序列、等位基因數(shù)和等位基因范圍按照表A.8的規(guī)定執(zhí)行。表A.8實(shí)驗(yàn)鵝微衛(wèi)星位點(diǎn)的引物序列、退火溫度、等位基因數(shù)及等位基因分布范圍引物序列（5′~3′)7DB11/T1804—202xACAAAGACTACTACTGCCA67ACAAAGACTACTACTGCCA6ACAAATAACTGGTTCTAAGCAGAGGACTTCTATTCATAAA4AACAGAATTTGCTTGAAACT3AACTTCTGCACCTAAAAACTGT64GAGGCTTTAGGAGAGATTGAGTGTTTCTTTCATCTCCACAAAGACCACAATCGGACCACATAT4ATGAAAGAAGAGTTAAACGTGTGC73466A.2.9用于檢測實(shí)驗(yàn)鴿遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為16個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、引物序列、等位基因數(shù)和等位基因范圍按照表A.9的規(guī)定執(zhí)行。表A.9實(shí)驗(yàn)鴿微衛(wèi)星位點(diǎn)的引物序列、退火溫度、等位基因數(shù)及等位基因分布范圍DB11/T1804—202x44AGTTACGAAATGATTGCCAG24535476495GTTTGCAGGAGCGTGTAGA644A.2.10用于檢測實(shí)驗(yàn)斑馬魚和實(shí)驗(yàn)劍尾魚遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為5個(gè)以上，常用實(shí)驗(yàn)斑馬魚品系微衛(wèi)星分子標(biāo)記的遺傳特征按照表A.10的規(guī)定執(zhí)行。表A.10常用實(shí)驗(yàn)斑馬魚微衛(wèi)星分子標(biāo)記的遺傳特征DB11/T1804—202xATATGTGCTGCTCATGATGAACTAAATCGCACTTCAGCAG262，256，AATTCTGGGGGGTAATTCTGAAGGGGGCTAAACCTTCAAC370，260，AGCACAGCGGAGGAAATAAAA.2.11用于檢測封閉群實(shí)驗(yàn)樹鼩遺傳質(zhì)量的微衛(wèi)星位點(diǎn)為10個(gè)，各微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、引物序列、PCR反應(yīng)的退火溫度、鎂離子濃度按照表A.11的規(guī)定執(zhí)行。表A.11實(shí)驗(yàn)樹鼩微衛(wèi)星位點(diǎn)的名稱、引物序列、PCR反應(yīng)的退火溫度、鎂離子濃度引物序列(5′~3′)Mg2+濃度7686DB11/T1804—202x34475A.3PCR擴(kuò)增A.3.1PCR擴(kuò)增的體系PCR總反應(yīng)體積為15μL,其中含10×PCRbuffer:1.5μL，上下游引物(100pmol/μL)各1μL，PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性，4min；94℃變性，30s；退火溫度（各位點(diǎn)序列、PCR反應(yīng)條件見表A.1～A.10），30s；72℃延伸，30s；35個(gè)循環(huán)；72℃繼續(xù)延伸7min；擴(kuò)增產(chǎn)物4℃保存。A.3.2PCR產(chǎn)物的凝膠檢測PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%的瓊脂糖凝膠電泳以及凝膠成像系統(tǒng)拍照。A.3.3擴(kuò)增產(chǎn)物的STR掃描擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過瓊脂糖凝膠電泳檢測確保擴(kuò)增出目的片斷后，選擇分別以FAM、HEX、TAMRA標(biāo)記的三個(gè)位點(diǎn)的擴(kuò)增產(chǎn)物，以1：3：5體積比混合，取1μL上樣進(jìn)行STR掃描。A.4STR掃描結(jié)果的判讀與統(tǒng)計(jì)分析掃描結(jié)果可出現(xiàn)兩種波形：一種為純合基因型，只有一個(gè)主波；另一種為雜合基因型，有兩個(gè)主波。由群體遺傳分析軟件讀出每個(gè)樣本在每個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)的擴(kuò)增片斷大小。每個(gè)位點(diǎn)的等位基因根據(jù)擴(kuò)增片斷從小到大順序排列記錄為a,b,c,d等。A.4.1數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析將所有樣本的每個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)的基因型以ab,bb等形式運(yùn)用軟件的數(shù)據(jù)文件，計(jì)算樣品在各微衛(wèi)星位點(diǎn)上的基因頻率、平均觀察等位基因數(shù)、平均有效等位基因數(shù)（Ne）、香隆指數(shù)、平均雜合度（H）等。A.5實(shí)驗(yàn)結(jié)果DB11/T1804—202xA.5.1實(shí)驗(yàn)種群A.5.1.1實(shí)驗(yàn)貓和實(shí)驗(yàn)狨猴實(shí)驗(yàn)狨猴和實(shí)驗(yàn)貓采用群體平衡狀態(tài)方法進(jìn)行評價(jià)。按照哈代-溫伯格（Hardy-Weiberg）定律，根據(jù)各位點(diǎn)的等位基因數(shù)計(jì)算封閉群的基因頻率，進(jìn)行卡方（chi-squaretest）檢驗(yàn)。當(dāng)群體達(dá)到平衡狀態(tài)，該群體判為合格，否則判為不合格。A.5.1.2實(shí)驗(yàn)雪貂實(shí)驗(yàn)雪貂采用群體平均雜合度進(jìn)行評價(jià)，當(dāng)群體平均雜合度在0.5～0.7時(shí)，該群體判為合格，否則判為不合格。A.5.2封閉群封閉群實(shí)驗(yàn)長爪沙鼠、實(shí)驗(yàn)雞、實(shí)驗(yàn)鴨、實(shí)驗(yàn)鵝、實(shí)驗(yàn)鵝、實(shí)驗(yàn)小型豬、實(shí)驗(yàn)魚（斑馬魚和劍尾魚）和實(shí)驗(yàn)樹鼩采用平均雜合度進(jìn)行評價(jià)，當(dāng)群體平均雜合度在0.5～0.7時(shí)，該群體判為合格，否則判為不合格。A.5.3近交系A(chǔ).5.3.1實(shí)驗(yàn)小型豬所有樣品檢測位點(diǎn)的等位基因都符合品系的特征,按照表A.11～A.13的規(guī)定執(zhí)行，沒有新的等位基因出現(xiàn)為合格實(shí)驗(yàn)小型豬近交系,否則判為不合格。表A.12近交系五指山小型豬近交系培育過程中遺傳質(zhì)量控制的微衛(wèi)星座位及優(yōu)勢等位基因1表A.13近交系廣西巴馬小型豬和培育過程中遺傳質(zhì)量控制的微衛(wèi)星座位及優(yōu)勢等位基因DB11/T1804—202x11表A.14近交系貴州小型豬培育過程中遺傳質(zhì)量控制的微衛(wèi)星座位及優(yōu)勢等位基因DB11/T1804—202xA.5.3.2實(shí)驗(yàn)魚近交系實(shí)驗(yàn)魚（斑馬魚和劍尾魚）檢測結(jié)果判定按照表A.14的規(guī)定執(zhí)行。表A.15近交系實(shí)驗(yàn)魚檢測結(jié)果判定A.6結(jié)果報(bào)告根據(jù)判定結(jié)果對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體出具遺傳質(zhì)量檢測報(bào)告。DB11/T1804—202x（規(guī)范性）實(shí)驗(yàn)斑馬魚SNP遺傳標(biāo)記的檢測方法B.1基因組DNA的提取基因組DNA提取方法按照NY/T1673的規(guī)定執(zhí)行。B.2PCR擴(kuò)增按照附錄A中A.3.1的方法進(jìn)行。B.3SNP標(biāo)記的檢測取10μLPCR產(chǎn)物用25μL的水稀釋，并用槍頭吹打混勻。然后取1μL為模板，用表B.1中的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物測序，最后使用PolyPhred程序軟件分析SNP標(biāo)記的測定結(jié)果。B.4SNP分子標(biāo)記的選擇及特征選擇位于近交系斑馬魚25對染色體、劍尾魚24對染色體上的10個(gè)以上位點(diǎn)，作為遺傳檢測的SNP標(biāo)記。SNP分子標(biāo)記的名稱及常用近交系斑馬魚的SNP分子標(biāo)記的特征符合表B.1的要求。表B.1常用實(shí)驗(yàn)斑馬魚品系SNP分子標(biāo)記位點(diǎn)引物（5′~3′)TCGCAGTGATGATGGADB11/T1804—202xTCTCTGTTCACTAGGTAAGACTCTTCTCTCTGAATGATGCATTTAATAAAGGAATCACTAGTCAGTTTACTAACCTTGCTTCCATTTAATAAAGGAATCACTAGTCAGTTTACTAACCTTGCTAGCTGAGACAGTATTCATAGDB11/T1804—202xAGAGB.5實(shí)驗(yàn)結(jié)果B.5.1實(shí)驗(yàn)魚檢測結(jié)果判定按照表A.14的規(guī)定執(zhí)行。B.6結(jié)果報(bào)告根據(jù)判定結(jié)果對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物群體出具遺傳質(zhì)量檢測報(bào)告。DB11/T1804—202x（規(guī)范性）MHC單倍型實(shí)驗(yàn)雞和實(shí)驗(yàn)鴨直接測序檢測方法C.1基因組DNA的提取基因組DNA提取方法按照NY/T1673的規(guī)定執(zhí)行。C.2PCR擴(kuò)增引物PCR擴(kuò)增引物序列、片段長度及退火溫度按表C.1和表C.2的規(guī)定執(zhí)行。表C.1單倍型實(shí)驗(yàn)雞PCR遺傳檢測引物序列表表C.2單倍型實(shí)驗(yàn)鴨PCR遺傳檢測引物序列表C.3PCR擴(kuò)增C.3.1PCR擴(kuò)增體系PCR總反應(yīng)體積為15μL,其中含10×PCRbuffer:1.5μL，上下游引物(100pmol/μL)各1(ddH2O):8.5μL。PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性，4min；94℃變性，30s；退火溫度（各位點(diǎn)序列、PCR反應(yīng)條件參見表C.130s；72℃延伸，30s；35個(gè)循環(huán)；72℃繼續(xù)延伸7min；擴(kuò)增產(chǎn)物4℃保存。C.3.2PCR產(chǎn)物的檢測PCR反應(yīng)結(jié)束后，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測，檢測合格的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序。測序結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行比對分析，計(jì)算一致率。C.4單倍型MHC實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果判定所有樣本序列與參考標(biāo)準(zhǔn)序列比對，一致率達(dá)100%，判為合格。DB11/T1804—202xC.5單倍型MHC實(shí)驗(yàn)雞標(biāo)準(zhǔn)序列C.5.1B2單倍型實(shí)驗(yàn)雞標(biāo)準(zhǔn)序列片段（1）CGTGGGATCCTCAGACCCACACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGTCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCTCTACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTACGTGGACGGGGAACTCTTCACGCACTACAACAGCACCGCTCGGAGGGCTGTGCCCCGCACCGAGTGGATAGCGGCCAACACGGACCAGCAGTACTGGGACAGAGAGACGCAGATCGCACAGGGCAATGAGCAGATTGACCGCGAGAACCTGGACATACGGCAGCAGCGCCACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGACTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGCGCAGTGGATGTACGGCTGTGACATCCTCGAGGACGGCACCATCCGGGGGTATCATCAGATGGCCTGCGATGGGAGAGACTTCATTGCCCTCGCTGAAGACATGAAGACGTTCACTGCAGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTTATGCTGAGAGGAAGAAGCAGTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGGGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGCAGGGT--------GGGGGGGGGGC------CGCAGTGTGGGGCTGGACGTGGGCCGGGGGCTCAGTGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCCGCCT-GCAGAGCGGCCTGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.2B5單倍型實(shí)驗(yàn)雞標(biāo)準(zhǔn)序列片段（1）CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGAACAGACGCAGATCGCACAGGGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGCGCAGTGGATGTACGGCTGTGACATCCTCGAGGACGGCACCATCCGGGGGTATCATCAGGAGGCCTACGATGGGAGAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGGCACGATGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGCGGAAGCAGTACCTGGAGGAAACCTGTGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATATGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGTGGAGGGGGGGCCACGGTGTGGGGCTGGACATGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGATCTCAGCCCGGCCCTCACTGCCACCCGCCCGCAGAGCGGCCCGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.3B13單倍型實(shí)驗(yàn)雞標(biāo)準(zhǔn)序列片段（1）CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGCGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGTGGATGTTCGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCGTCAGGTGGCCTACGATGGGAAAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGACATGAAGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAADB11/T1804—202xATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGTGGAAGAGTTACCTGGAGGAAACCTGCGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGTGGGGGGGGGGCCGCGGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCTGCCTGCAGAGCGGCCTGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.4B15單倍型實(shí)驗(yàn)雞標(biāo)準(zhǔn)序列片段（1）CGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGCGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGTGGATGTTCGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCGTCAGGTGGCCTACGATGGGAAAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGACATGAAGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGTGGAAGAGTTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGT--------GGGGGGGGGGC------CGCGGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCTGCCT-GCAGAGCGGCCCGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.5B19單倍型實(shí)驗(yàn)雞標(biāo)準(zhǔn)序列片段（1）CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATTCCCTGCGGTACGTCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCTGCCGTGGTTCGTGGACGTGGGGTACGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAACACGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGGGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCTTGAACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）CTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGCTGATGTACGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCATCAGACAGCCTACGATGGGAGAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGGCACGATGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGAGGTGGAAGAGTTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGGGGCTGCGGAGATATGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGCGGGGTCGGGGTGGGGGGGGGGGGG--CGGACGCAGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCATCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCACTGCCGCCCACCC-ACAGAGCGGCCTGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCTGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.5.6B21單倍型實(shí)驗(yàn)雞標(biāo)準(zhǔn)序列片段（1）CCGTGGGATCCTCAGACCCCCACCCGCGGCTCACGGCCCCGCTGCGCTCCGCCCCCGCAGAGCTCCATACCCTGCGGTACATCCATACGGCGATGACGGATCCCGGCCCCGGGCAGCCGTGGTACGTGGACGTGGGGTATGTGGACGGGGAACTCTTCGTGCACTACAACAGCACCGCGCGGAGGTACGTGCCCCGCACCGAGTGGATGGCGGCCAAGGCGGACCAGCAGTACTGGGATGGACAGACGCAGATCGGACAGCGCAATGAGCGGAGTGTGAAAGTGAGCCTGGACACACTGCAGGAACGATACAACCAGACCGGCGGTGAGCACGGCCGGGGCCGCGGCTCCGTGGGTGTGGGATGGGCTCCATGGCGCAGTGCCG片段（2）DB11/T1804—202xCTGTGTTTCAGGGTCTCACACGGTGCAGTGGATGTTCGGCTGTGACATCCTCGAGGATGGCACCATCCGGGGGTATCGTCAGGTGGCCTACGATGGGAAAGACTTCATTGCCTTCGACAAAGACATGAAGACGTTCACTGCGGCAGTTCCAGAGGCAGTTCCCACCAAGAGGAAATGGGAGGAAGGAGGTGTTGCTGAGGGGTGGAAGAGTTACC-TGGAGGAAACCTGCGTGGAGTGGCTGCGGAGATACGTGGAATACGGGAAGGCTGAGCTGGGCAGGAGAGGTGAGTGGGGTGGGGGGGGGGCCGCGGTGTGGGGCTGGACGTGGGGCGGGGGCTCAGCGTGGGGAGCTCAGCCCGGCCCTCATTGCCACCTGCCT-GCAGAGCGGCCCGAGGTGCGAGTGTGGGGGAAGGAGGCCGACGGGATCCTGACCTTGTCCTGCC.6單倍型MHC實(shí)驗(yàn)鴨參考序列C.6.1B1單倍型MHC實(shí)驗(yàn)鴨參考序列ATGGAGTTGCTGCCCACCTTGTGCCTGGCCTGTGTCCTGCTCCTGGCTGACCTGGTCGTGCTGGCAGCACTGGCCCGGTTGGCCCCGGCACTGGCCCAGCTGGGTCTAGTGGCCACATGGCTGGAGGCTGGGCTGCGGCTACCAGTGCTGGTGGGAGCTGGGAGGCTGTTGGCCCCCGGAGGACCCCGGGGAGCCCCGGCCCTGGTGAGCCTGGCCCCTGCCACCTTCCTTACCCTGCGGGGCTGCCTGGAGCTGCCTGGGGCTCCACCAGTGCTGCTGGCCATGGCCACACCGTCCTGGCTGGCATTGGCCTATGGGGCAGTCTTGCTGGCCCTGCTCACCTGGACCTCCCTGGCACCTGGGGTGGCCCTGGGGACCAAGGAGGTCAAGTACCAGGCGGCCCTGCACCGGCAGCTGGCCCTGGCCTGGCCTGAGTGGCCCTTCCTCAGCGGAGCCTTCTTCTTCCTCATGCTGGCTGCATTGGGTGAGACCTCCGTGCCCTACTGCACTGGGAAGGCCTTGGATGTCCTCCGTCATGGGGATGGCCCCACTGCCTTTGCTACTGCCATCGGCTTTGTGTGCCTCGCCTCTGCCAGCAGGTAGGGACCCCCAGTTCCTCTCCCAGACCCTGTCCACACCTGGGATGGTGCCTGATGGGTTTCAC.6.2B2單倍型MHC實(shí)驗(yàn)鴨參考序列ATGGAGTTGCTGCCCACCTTGCGCCTGGCCTGTGTCCTGCTCCTGGCTGACCTGGTCGTGCTGGCAGCACTGGCCCGGTTGGCCCCGGCACTGGCACAGCTGGGTCTGGTGGCCACATGGCTGGAGGCTGGGCTGCGGCTACCAGTGCTGGTGGGAGCTGGGAGGCTGTTGGCCCCCGGAGGACCCCAGGGAGCCGCAGCCCTGGTGAGCCTGGCCCCTGCCACCTTCCTTACCCTGCGGGGCTGCCTGGAGCTGCCTGGGGCTCCACCAGTGCTGCTGGCCATGGCCACACCGTCCTGGCTGGCATTGGCCTATGGGGCAGTCTTGCTGGCCCTGCTCACCTGGACCTCCCTGGCACCTGGGGTGGCCCTGGGGACCAAGGAGGTCAAGTACCAGGCGGCCCTGCGCCGGCAGCTGGCCCTGGCCTGGCCTGAGTGGCCCTTCCTCAGCGGAGCCTTCTTCTGCCTCGTGCTGGCTGCATTGGGTGAGACCTCCGTGCCCTACTGCACTGGGAAGGCCTTAGATGTCCTCCGCCATGGGGACGGCCCCACTGCCTTTGCCACTGCCATCGGCTTTGTGTGCCTCGCCTCTGCCAGCAGGTAGGGACCCCCAGTTCCTCTCCCAGAGCCTGTCCACACCTGGGATGGTGCCTGATGGGTTTCAC.6.3B3單倍型MHC實(shí)驗(yàn)鴨參考序列ATGGAGTTGCTGCCCACCTTGCGCCTGGCCTGTGTCCTGCTCCTGGCTGACCTGGTGGTGCTCGCAGCACTGGCCCGGTTGGCCCCGGCACTGGCCCAGCTGGGTCTAGTGGCCACATGGTTGGAGGCTGGGCTGCGGCTACCAGTGCTGGTGGGAGC