標(biāo)本采集醫(yī)學(xué)課件

臨床微生物檢查

標(biāo)本的采集與送檢規(guī)范

桐鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院主要內(nèi)容

一、臨床微生物檢查標(biāo)本送檢的意義二、微生物檢驗(yàn)?zāi)壳按嬖诘睦Щ笕⒊Ｒ?jiàn)標(biāo)本的采集與運(yùn)送規(guī)范一、臨床微生物檢查標(biāo)本送檢的意義

正確采集、轉(zhuǎn)運(yùn)與保存微生物標(biāo)本直接關(guān)系到致病微生物培養(yǎng)的正確性與陽(yáng)性率,是從臨床微生物檢驗(yàn)獲得正確結(jié)果的最關(guān)鍵一步。

近年來(lái)由各種不同細(xì)菌引起的感染性疾病越來(lái)越多,導(dǎo)致抗生素的過(guò)度使用,其結(jié)果是耐藥菌株的增加。

臨床微生物室應(yīng)如何幫助臨床醫(yī)生合理治療感染性疾病成為我們共同目標(biāo)。檢驗(yàn)誤差發(fā)生率哪個(gè)階段最高

？微生物結(jié)果的影響因素

1.針對(duì)性的檢驗(yàn)申請(qǐng)2.病人準(zhǔn)備3.標(biāo)本的采取4.標(biāo)本的運(yùn)輸5.標(biāo)本的保存和處理46~68.2%標(biāo)本檢驗(yàn)4~15%結(jié)果審核和批準(zhǔn)危急值報(bào)告18.5-27%分析前過(guò)程

按照時(shí)間的順序,從臨床醫(yī)生開(kāi)出醫(yī)囑開(kāi)始,到實(shí)驗(yàn)室分析檢驗(yàn)程序啟動(dòng)時(shí)終止。包括檢驗(yàn)申請(qǐng)、患者準(zhǔn)備、原始樣品的采集、標(biāo)本運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室并在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行傳輸?shù)娜窟^(guò)程。二、微生物檢驗(yàn)?zāi)壳按嬖诘睦Щ竽壳按嬖诘睦Щ?/p>

醫(yī)生根據(jù)藥敏報(bào)告進(jìn)行臨床治療常常無(wú)效;實(shí)驗(yàn)室是否分離到真正的致病菌;標(biāo)本采集不合格;標(biāo)本延遲送檢血標(biāo)本采集時(shí)存在的問(wèn)題

1血培養(yǎng)瓶存放于冰箱,取出后立即采血進(jìn)行培養(yǎng),過(guò)低的溫度抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。2血液標(biāo)本采集后放置于冰箱,低溫抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。3血液標(biāo)本采集后,放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),細(xì)菌生長(zhǎng)已達(dá)衰老期。4標(biāo)本采集量少,會(huì)明顯降低陽(yáng)性率。5標(biāo)本采集時(shí)機(jī)不合適,未抓住菌血癥時(shí)期,或在剛使用抗生素不久。采血最好在:體溫升高前半小時(shí),使用抗生素前,或停用抗生素24小時(shí)。標(biāo)本消毒時(shí)消毒酒精未完全揮發(fā)。

痰液標(biāo)本采集存在的問(wèn)題隨機(jī)標(biāo)本采集多而非晨痰針對(duì)如此嚴(yán)重的分析前誤差

我們能做什么?

提供準(zhǔn)確的“標(biāo)本采集輸送的標(biāo)準(zhǔn)操作程序”持續(xù)的臨床教育和交流三、常見(jiàn)標(biāo)本的采集與運(yùn)送規(guī)范做好病原學(xué)檢查

要特別重視標(biāo)本質(zhì)量

基本原則

早期采集無(wú)菌采集

根據(jù)目的菌的特性用不同的方法采集。

采取適量的標(biāo)本

安全運(yùn)送我國(guó)血培養(yǎng)現(xiàn)狀—陽(yáng)性檢出率低<10%(國(guó)外約為15%)

血流中含菌量低血培養(yǎng)的臨床實(shí)踐欠規(guī)范!!血液中抗菌物質(zhì)培養(yǎng)條件限制抗生素的應(yīng)用血培養(yǎng)問(wèn)題

2008年制定血培養(yǎng)指導(dǎo)原則要求:懷疑血流感染時(shí),應(yīng)在不同部位采血做血培養(yǎng),至少2套。提高血培養(yǎng)陽(yáng)性率關(guān)鍵點(diǎn)消毒程序

靜脈穿刺點(diǎn)皮膚消毒程序

取無(wú)菌棉簽或棉球沾取安爾碘II型皮膚消毒劑原液由內(nèi)向外劃圈,均勻涂擦消毒區(qū)域二遍,消毒面積不小于5cm×5cm.,自然干燥后再行穿刺采血。如沒(méi)有佩戴無(wú)菌手套,不允許按壓消毒后的靜脈。(<2月的嬰兒不建議采用該消毒劑)、

培養(yǎng)瓶消毒程序用75%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞(不能用含碘消毒劑),自然待干。運(yùn)送程序

血培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)按要求盡快送往實(shí)驗(yàn)室,不得超過(guò)2h。如無(wú)法及時(shí)送檢,血培養(yǎng)標(biāo)本需室溫(20-25度)保存。切勿冷藏！

血培養(yǎng)標(biāo)本

采集與運(yùn)送

血培養(yǎng)的指征是什么?

血培養(yǎng)的指征是什么?

當(dāng)懷疑血流感染或膿毒癥時(shí),應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng)懷疑患者有血流感染的癥狀有:

–

不明原因的發(fā)燒(>38°C)或體溫過(guò)低(<36°C)

–

白細(xì)胞增多(

>10,000/ul),粒細(xì)胞減少(

<1,000ul)

–

休克,寒顫

–

嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎,心內(nèi)膜炎,肺炎,腎盂腎炎，腹部術(shù)后感染,...)

–

心率異常加快

–

低血壓或高血壓

–

呼吸頻率加快懷疑血流感染,何時(shí)采血最佳?

采集血培養(yǎng)樣本的最佳時(shí)間?

答案

盡可能在患者寒戰(zhàn)或開(kāi)始發(fā)熱時(shí)采血在患者接受抗生素治療前采血

如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進(jìn)行治療,應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)應(yīng)該采幾份血液標(biāo)本?基本概念

成人“一套”血培養(yǎng)應(yīng)該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個(gè),也叫“一份”注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套應(yīng)從另一個(gè)穿刺點(diǎn)獲得。

兒童一般只做需氧培養(yǎng),特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)

應(yīng)該采幾份血液標(biāo)本?

每位患者采血最少2套,3套更好初發(fā)患者,絕不能只采1套標(biāo)本應(yīng)該采集多少血液?要采集多少血液?

采血量是影響靈敏度最關(guān)鍵因素成人一份標(biāo)本2個(gè)培養(yǎng)瓶(需氧+厭氧),每瓶8-10ml,共20ml;要求至少采兩份標(biāo)本,即40ml。

兒童一般只需采集需氧瓶,在保證采集血量<1%總血量下,一般為1-5ml采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶,因臨床90%以上的感染為需氧菌或兼性需氧菌感染

痰培養(yǎng)標(biāo)本

采集與運(yùn)送

咳痰途經(jīng)口咽部

不可避免地受到污染?唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)108-109/ml。?研究顯示,國(guó)內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。痰標(biāo)本的采集方法

自然咳痰:要求患者在清晨用藥前留取，因?yàn)槌刻盗慷?，且含菌量也多。留取前刷牙，用清水漱?次，以除去口腔內(nèi)大部分雜菌，之后用力咳痰。咳痰較困難者可用3%～5%氯化鈉溶液霧化吸入進(jìn)行導(dǎo)痰；對(duì)咳嗽乏力或昏迷患者，可用普通吸痰管經(jīng)鼻腔或口腔吸引下呼吸道分泌物；痰液必須盛于無(wú)菌容器內(nèi)送檢。。痰標(biāo)本的采集方法

咽拭子采樣：上呼吸道感染，可通過(guò)咽拭子獲取標(biāo)本。標(biāo)本采集前數(shù)小時(shí)內(nèi)不得用消毒藥物漱口或涂抹病灶局部。用咽拭子采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)小心、認(rèn)真、準(zhǔn)確，避免觸及舌、口腔黏膜和唾液，以防污染。如咽拭子標(biāo)本發(fā)現(xiàn)致病菌，如肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等，且數(shù)量較多時(shí)，提示有該菌所致感染存在。痰標(biāo)本的采集方法

纖維支氣管鏡抽吸采樣：插入纖支鏡，達(dá)到肺炎病灶引流支氣管內(nèi)，纖支鏡吸引口依次連接標(biāo)本采集瓶，用負(fù)壓將下呼吸道分泌物吸入標(biāo)本采集瓶?jī)?nèi)送檢。氣管切開(kāi)或氣管插管患者也可用痰液收集器吸入標(biāo)本采集瓶?jī)?nèi)。痰標(biāo)本的采集方法

纖支鏡直視下可準(zhǔn)確采集病灶部位的分泌物，但插入時(shí)纖支鏡頂端和內(nèi)孔常受咽喉部正常菌群污染，所以纖支鏡吸引物常規(guī)培養(yǎng)結(jié)果不能完全代表肺部感染的病原體。但檢查過(guò)程中如注意規(guī)范化操作，插入纖支鏡時(shí)盡量不做上呼吸道分泌物吸引，纖支鏡吸痰遭口咽部細(xì)菌污染機(jī)會(huì)較咳痰明顯減少。一般認(rèn)為纖支鏡吸引物定量培養(yǎng)可更有效地區(qū)分污染菌與感染菌。痰標(biāo)本的采集方法人工氣道是肺部感染的常見(jiàn)易感因素。經(jīng)人工氣道吸引下呼吸道分泌物是目前臨床較常用的標(biāo)本采集方法。但由于這些患者的氣管纖毛黏液防御機(jī)制受到損害，常有致病菌或條件致病菌定植而不再保持無(wú)菌狀態(tài)，故建立人工氣道患者肺部感染病原學(xué)診斷有時(shí)更為困難。通常認(rèn)為吸引物定量培養(yǎng)可能區(qū)分污染菌抑或感染菌。根據(jù)國(guó)內(nèi)診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)人工氣道吸痰細(xì)菌濃度≥1×105cfu/ml可認(rèn)為是感染病原菌，而濃度≤1×104cfu/ml則認(rèn)為是污染菌。痰標(biāo)本的采集方法支氣管肺泡灌洗術(shù)采樣：采用塑料導(dǎo)管，在近頂端處設(shè)置一氣囊，纖支鏡插入病灶引流支氣管后，引入導(dǎo)管，然后用等滲氯化鈉液20～50ml分次注入，并立即用低負(fù)壓吸引回收，棄去首次灌洗液，以減少污染，收集以后回收的支氣管肺泡灌洗液（10-100ml）送檢。

痰標(biāo)本運(yùn)送

盡快(<2h)送至實(shí)驗(yàn)室。如不能及時(shí)送達(dá),應(yīng)將標(biāo)本暫存于4°C,但放置時(shí)間不可超過(guò)24h。痰液室溫下延擱2～5h會(huì)降低肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌和葡萄球菌的檢出率，而定植于上呼吸道的非致病菌和革蘭陰性桿菌會(huì)過(guò)度生長(zhǎng)。

尿培養(yǎng)標(biāo)本

采集與運(yùn)送

采集指征:

有典型的尿道刺激癥狀肉眼膿尿或血尿尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細(xì)胞陽(yáng)性(幾個(gè)+號(hào))不明原因的發(fā)熱,無(wú)其他局部癥狀留置導(dǎo)尿管時(shí)間超過(guò)48h的患者出現(xiàn)發(fā)熱膀胱排空功能受損泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。采集方法:

盡量取早晨第一次尿液棄去開(kāi)始流出的尿液,以沖刷尿道口的細(xì)菌,取能代表膀胱部位病原菌的中段尿詳細(xì)告知病人以下操作步驟女性病人收集標(biāo)本前用清洗液沖洗干凈,從前向后仔細(xì)擦洗尿道區(qū)域分開(kāi)陰唇,開(kāi)始排尿排出幾毫升后,不停止尿流,采集中段尿?男性病人回縮包皮并清洗龜頭

排出幾毫升后,不停止尿流,采集中段尿?qū)蚬苣蛞?/p>

集尿袋內(nèi)的尿液不能用作培養(yǎng);導(dǎo)尿管末端的尿液也不能用于培養(yǎng),因?yàn)楹茈y避免沒(méi)有尿道菌群污染。不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開(kāi)后收集尿液。采樣端口用酒精消毒;必要時(shí),可先夾住導(dǎo)尿管但不能超過(guò)30分鐘;將注射器針頭插入采樣端口,抽吸出尿液;注入無(wú)菌杯或試管中標(biāo)本運(yùn)送

收集中段尿液5-10ml,及時(shí)送檢。室溫保存下不得超過(guò)2小時(shí),否則應(yīng)置于4°C冰箱保存,保存時(shí)間不得超過(guò)18h。

糞便培養(yǎng)標(biāo)本

采集與運(yùn)送

采集指征:

糞便標(biāo)本的采集方法

自然排便采集標(biāo)本時(shí),取有膿血、粘液、組織碎片部份的糞便1~3g(花生米大小)。液體糞便則取絮狀物,一般取1~3ml,直接裝入糞便容器或運(yùn)送培養(yǎng)基中送檢。肛拭子采集糞便標(biāo)本:先將