GB∕ T 40175.2-2021 紡織品 生物化學分析方法 第2部分：擬除蟲菊酯類農藥（酶聯(lián)免疫法）（正式版）

ICS59.080.01CCSW04GB/T40175.2—2021紡織品生物化學分析方法國家市場監(jiān)督管理總局國家標準化管理委員會IGB/T40175.2—2021本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件是GB/T40175《紡織品生物化學分析方法》的第2部分。GB/T40175已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第2部分：擬除蟲菊酯類農藥(酶聯(lián)免疫法);——第3部分：有機磷類農藥(酶聯(lián)免疫法)。本文件由中國紡織工業(yè)聯(lián)合會提出。本文件由全國紡織品標準化技術委員會(SAC/TC209)歸口。1GB/T40175.2—2021紡織品生物化學分析方法第2部分：擬除蟲菊酯類農藥(酶聯(lián)免疫法)警示：使用本文件的人員應有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本文件并未指出所有可能的安全問題。使用者有責任采取適當?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關法規(guī)規(guī)定的條件。氰菊酯七種擬除蟲菊酯類農藥殘留量的酶聯(lián)免疫檢測方法。本文件適用于各種紡織品。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4原理試樣中的擬除蟲菊酯類農藥與試劑盒中已包被在微孔板上的擬除蟲菊酯類農藥抗原競爭性結合擬除蟲菊酯類農藥抗體，再加入酶標二抗，在微孔板上形成抗原-一抗-酶標二抗復合物。復合物與顯色劑發(fā)生反應，用酶標儀測定吸光度值。吸光度值與試樣中的農藥殘留量呈負相關。5試劑與材料所用試劑應均為分析純，水為符合GB/T6682規(guī)定的三級水。5.1擬除蟲菊酯類農藥測定酶聯(lián)免疫試劑盒：附錄A給出了一種擬除蟲菊酯類農藥測定酶聯(lián)免疫試a)酶標板。b)擬除蟲菊酯類抗體工作溶液。d)甲氰菊酯標準工作溶液：可使用試劑盒中提供的標準工作溶液，也可按如下方法配制。準確稱取50.0mg甲氰菊酯標準物質(CAS號：64257-84-7,純度≥99%)于100mL容量瓶中，加入少量甲醇(5.6)溶解后，用甲醇定容至刻度，濃度為500.0mg/L,然后根據(jù)需要的系列標準溶液工作濃度進行稀釋。過氧化氫(30%)的水溶液。2GB/T40175.2—2021吐溫——20的水溶液。按照體積比1:9加水稀釋(1份濃縮洗滌液+9份水)。5.3顯色液：將底物A液5.1)和底物B液5.1f)使用前按體積比1:1混合。7試驗步驟7.2.1測試前需要將所有試劑放置至室7.2.2取系列甲氰菊酯標準工作溶液5.1d)和待測樣品溶液(7.1)各50μL分別加入至相應的酶標板3GB/T40175.2—20218結果計算與表達8.1相對吸光度值的計算分別計算標準溶液和樣品溶液的平均吸光度值。按公式(1)計算標準溶液或樣品溶液的相對吸光度值。式中：A——相對吸光度值；…………B——系列標準工作溶液或樣品溶液的平均吸光度值；B?——0μg/L標準工作溶液的平均吸光度值。8.2繪制標準工作曲線以相對吸光度值為縱坐標(%),標準工作溶液濃度(μg/L)的對數(shù)值為橫坐標，繪制標準工作曲線。每次試驗均應繪制標準工作曲線。8.3結果計算從7.2繪制的標準曲線上讀取樣品溶液相對吸光度值所對應的擬除蟲菊酯類農藥濃度。按公式(2)計算試樣中的擬除蟲菊酯類農藥的含量。…………(2)式中：X——試樣中擬除蟲菊酯類農藥的含量，單位為微克每千克(pμg/kg);c——從標準工作曲線上得到的試樣中擬除蟲菊酯類農藥濃度，單位為微克每升(μg/L);V——復溶后樣品溶液體積，單位為毫升(mL);m——試樣質量，單位為克(g)。計算結果應扣除空白，精確至一位小數(shù)。如被測試樣中擬除蟲菊酯類農藥含量小于10μg/kg,則結果表示為未檢出；如含量超過或等于10μg/kg,則結果為實測值，宜使用GB/T18412.4中規(guī)定的方法或其他儀器分析方法再進行檢測。以甲氰菊酯計，檢出限為10μg/kg。10試驗報告試驗報告至少應給出下述內容：a)本文件的編號；b)樣品來源及描述；c)測試結果；d)試驗日期；e)任何偏離本文件的細節(jié)。4(資料性)A.1試劑盒組成試劑盒組成如下：——酶標板96孔40mLA.2試劑盒的保存本試劑盒在-2℃~8℃的溫度下儲存，有效期為1年。如果超過3個月不使用試劑盒，將一抗和A.3試劑盒交叉反應性見表A.1。農藥名稱交叉反應率/%甲氰菊酯64257-84-7溴氰菊酯52918-63-5氯氰菊酯52315-07-8高效氯氰菊酯65731-84-2