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任務(wù)4.3.6細菌總數(shù)的測定空氣和廢氣監(jiān)測技術(shù)任務(wù)4.3.6細菌總數(shù)的測定學(xué)習(xí)目標:1.了解室內(nèi)空氣中細菌總數(shù)的來源及危害;2.掌握撞擊法測定室內(nèi)空氣中細菌總數(shù)的方法及原理;3.學(xué)會撞擊式空氣微生物采樣器的使用方法;4.能正準確定室內(nèi)空氣中細菌總數(shù)的含量,并能規(guī)范測定操作要點;5.能判斷測定結(jié)果的異常現(xiàn)象并能解決;6.具有環(huán)保意識和節(jié)約意識,不浪費藥品試劑,不造成環(huán)境污染;7.保持實驗環(huán)境及實驗臺面和儀器的干凈整潔有序,符合規(guī)范要求。(一)室內(nèi)空氣中細菌的來源及危害
室內(nèi)微生物細菌有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、芽細胞、綠膿桿菌和螨蟲等。
細菌的傳播是引起各種疾病的根源,如感冒、過敏性肺炎、鼻炎、骨髓炎、哮喘、敗血癥、菌血癥以及各式化膿性感染等。特別是塵螨,是人體支氣管哮喘病的一種過敏源。一、基本知識(二)室內(nèi)空氣中細菌的限量與測定方法《室內(nèi)空氣質(zhì)量標準》(GB/T18883-2022)規(guī)定,室內(nèi)空氣中細菌菌落總數(shù)的限值為1500cfu/m3。測定方法有兩種,一種是撞擊法,另一種是自然沉降法。撞擊法因能采集懸浮在空氣中的微生物顆粒,并不受環(huán)境氣流影響,采樣量準確,靈敏度高,其采集空氣樣品更合理、穩(wěn)定、科學(xué),國內(nèi)推廣用此法監(jiān)測空氣中的菌落總數(shù)。二、實訓(xùn)操作(一)測定原理
采用撞擊式空氣微生物采樣器采樣,通過抽氣動力作用,使空氣通過狹縫或小孔而產(chǎn)生高速氣流,懸浮在空氣中的帶菌粒子撞擊到營養(yǎng)瓊脂平板上,經(jīng)37℃、48h培養(yǎng)后,計算出每立方米空氣中所含的細菌菌落數(shù)。(二)儀器與用品(1)高壓蒸汽滅菌器。(2)干熱滅菌器。(3)恒溫培養(yǎng)箱。(4)冰箱。(5)平皿(直徑9cm)。(6)制備培養(yǎng)基用一般設(shè)備:量筒,三角燒瓶,pH計或精密pH試紙等。(7)撞擊式空氣微生物采樣器。
要求:細菌捕獲率達95%;操作簡單,攜帶方便,性能穩(wěn)定,便于消毒。(三)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1.成分:營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的成分如表4-11所示。2.制法:將上述成分混合,加熱溶解,校正pH至7.4,過濾分裝,121℃,20min高壓滅菌。營養(yǎng)瓊脂平板的制備參照采樣器使用說明。(四)測定分析過程1.采樣選擇有代表性的房間和位置設(shè)置采樣點。將采樣器消毒,以28.3L/min流量采集5~15min。采樣器使用按儀器使用說明進行。2.分析樣品采完后,將帶菌營養(yǎng)瓊脂平板置(36±1)℃恒溫箱中,培養(yǎng)48h,計數(shù)菌落數(shù),并根據(jù)采樣器的流量和采樣時間,換算成每立方米空氣中的菌落數(shù)。以cfu/m3報告結(jié)果。(五)計算結(jié)果與表示
空氣中菌落總數(shù)為:(六)注意事項
制作營養(yǎng)瓊脂平板要無菌操作,培養(yǎng)基要嚴格按規(guī)定要求。采樣器要按規(guī)定做好消毒處理,并按儀器使用說明
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