廣東省肇慶聯(lián)盟校2025屆高三沖刺模擬生物試卷含解析

廣東省肇慶聯(lián)盟校2025屆高三沖刺模擬生物試卷注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫考場(chǎng)號(hào)和座位序號(hào)。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列關(guān)于變異的敘述，正確的是（）A．基因中堿基序列的改變一定會(huì)導(dǎo)致生物性狀的改變B．“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”中R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌的原理是基因重組C．同源染色體的非姐妹染色單體之間發(fā)生染色體片段交換屬于染色體變異D．基因突變就是DNA分子中堿基對(duì)的替換、增添、缺失和重組2．下列有關(guān)果蠅體內(nèi)有絲分裂和減數(shù)分裂的敘述，正確的是（）A．含有姐妹染色單體的細(xì)胞也同時(shí)含有同源染色體B．含有兩條X染色體的細(xì)胞只有初級(jí)卵母細(xì)胞和次級(jí)精母細(xì)胞C．有絲分裂后期與減數(shù)第二次分裂后期的細(xì)胞染色體數(shù)量相同D．與減數(shù)分裂相比，有絲分裂過程不會(huì)發(fā)生基因重組3．某實(shí)驗(yàn)小組用一定濃度的萘乙酸（NAA）溶液和激動(dòng)素（KT）溶液探究二者對(duì)棉花主根長(zhǎng)度及側(cè)根數(shù)的影響，結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的是（）A．單獨(dú)施用NAA或KT均能使棉花主根長(zhǎng)度及側(cè)根數(shù)增加B．NAA能一定程度地消除根的頂端優(yōu)勢(shì)，而KT能增強(qiáng)根的頂端優(yōu)勢(shì)C．NAA能抑制主根生長(zhǎng)，KT能促進(jìn)主根生長(zhǎng)，且濃度越高效果越明顯D．一定濃度的NAA對(duì)KT促進(jìn)側(cè)根數(shù)增加的效應(yīng)具有增強(qiáng)作用4．真核生物的內(nèi)共生起源假說認(rèn)為：大約在15億年以前，一些大型的具有吞噬能力的原始真核細(xì)胞，先后吞并了幾種原核生物（例如細(xì)菌和藍(lán)藻），由于后者沒有被分解消化，它們從寄生逐漸過渡到共生，成為宿主細(xì)胞里面的細(xì)胞器。例如被吞噬的好氧性細(xì)菌成為了線粒體，而被吞噬的藍(lán)藻成為了葉綠體。根據(jù)所給信息，下列哪個(gè)選項(xiàng)最有可能是錯(cuò)誤的（）A．線粒體和葉綠體中的DNA是環(huán)狀的B．線粒體和葉綠體中有核糖體C．線粒體和葉綠體中有DNA聚合酶和RNA聚合酶D．線粒體和葉綠體中的DNA被類似核膜的生物膜包裹著5．細(xì)胞膜上協(xié)助離子跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞接校和ㄟ^離子通道運(yùn)輸?shù)谋粍?dòng)運(yùn)輸和通過離子泵運(yùn)輸?shù)闹鲃?dòng)運(yùn)輸?shù)?，下列敘述不正確的是（）A．神經(jīng)元處于靜息狀態(tài)時(shí)，鉀離子通過離子通道外流B．缺氧會(huì)影響神經(jīng)元興奮是因?yàn)殁c離子通過離子泵內(nèi)流C．離子通過離子泵的跨膜運(yùn)輸是逆濃度梯度進(jìn)行的D．葡萄糖進(jìn)入紅細(xì)胞的方式與離子泵運(yùn)輸離子的方式不相同6．下列關(guān)于細(xì)胞結(jié)構(gòu)與其功能相適應(yīng)特征的敘述中，不正確的是（）A．蛋白質(zhì)合成旺盛的細(xì)胞中核糖體較多B．代謝強(qiáng)度不同的細(xì)胞中線粒體數(shù)目有差異C．合成胰蛋白酶的胰島細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)D．?dāng)y帶氧氣的哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）截止2020年3月，新冠病毒（COVID-19）在全世界范圍內(nèi)迅速傳播，中國在抗擊疫情的過程中做出了巨大的犧牲和努力，為世界樹立了狙擊流行病的旗幟和標(biāo)桿；某科研隊(duì)伍提出了利用基因工程技術(shù)手段研制兩種新冠病毒疫苗的思路，主要研制流程如下圖，請(qǐng)回答以下問題：（1）圖中①的名稱是______________。（2）進(jìn)行PCR技術(shù)需要的條件有______________。（3）兩種疫苗的研制過程中均涉及了基因工程的相關(guān)操作，其核心步驟是______________。進(jìn)行②過程需要用到的工具酶有______________。（4）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞可采用______________法。（5）疫苗最重要的目的是對(duì)新冠病毒引起的肺炎進(jìn)行免疫_(dá)_____________（“治療”或“預(yù)防”）；對(duì)該疑似患者確診時(shí)，可以對(duì)疑似患者進(jìn)行核酸檢測(cè)，即采集其咽拭子，與已知病毒進(jìn)行______________比較。（6）接種基因工程疫苗比接種滅活獲減毒的病毒疫苗更安全，試從疫苗的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)解釋原因：__________________________________________。8．（10分）膠原蛋白廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、化妝品、化工原料等領(lǐng)域，科研人員開展利用家蠶生產(chǎn)人膠原蛋白的研究。請(qǐng)回答下列問題：（1）家蠶核型多角體病毒(BmNPV)專性寄生于鱗翅目昆蟲，將人膠原蛋白基因與___重組后，構(gòu)建___。體外克隆目的基因的方法是____。（2）BmNPV的pl0基因是極強(qiáng)的啟動(dòng)子，將目的基因連接在pl0基因的下游，目的是____。目的基因與pl0基因連接時(shí)，斷裂與連接的化學(xué)鍵都是____。（3）重組BmNPV感染家蠶幼蟲后，在幼蟲淋巴液中提取蛋白質(zhì)，用____的方法檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)。相比于大腸桿菌，選擇家蠶作為人膠原蛋白的生物反應(yīng)器，其優(yōu)點(diǎn)是_______。9．（10分）下圖1表示研究人員為篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)流程，其中透明圈是微生物在固體培養(yǎng)基上消耗特定營養(yǎng)物質(zhì)形成的。圖2、圖3是研究纖維素酶的最適溫度和熱穩(wěn)定性的結(jié)果。請(qǐng)回答下列問題：（1）本實(shí)驗(yàn)中，選擇蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源，這是因?yàn)開_____。（2）篩選用的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素作為______，并在配制培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂作為______。篩選時(shí)應(yīng)選擇D/d較大的菌株，因?yàn)檫@一指標(biāo)值越大說明_________越強(qiáng)。（3）研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時(shí)，首先將纖維素酶液置于35～65℃的不同溫度條件下保溫2h，再取上述溫度處理的和未經(jīng)保溫處理的纖維素酶液，在______℃條件下測(cè)定纖維素酶的催化速率，計(jì)算______。（4）生產(chǎn)中使用該纖維素酶時(shí)，最好將溫度控制在40℃左右，原因是______。10．（10分）根據(jù)微生物分離和培養(yǎng)的知識(shí)，回答下列問題：（1）實(shí)驗(yàn)室中常用的凝固劑是____________（2）在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是____________，因此需要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行___________處理。（3）在純化微生物的過程中，進(jìn)行平板劃線時(shí)，劃線結(jié)束后仍然要灼燒接種環(huán)，目的是___________。若用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液的量一般不超過1．1mL，其原因是____________。（4）甲、乙兩同學(xué)在接種完成后，先將平板倒置，然后再放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，倒置培養(yǎng)的目的是___________。（5）若要從土壤中分離纖維素分解菌，常用剛果紅（CR）染色法進(jìn)行篩選。培養(yǎng)基中纖維素分解菌菌落周圍出現(xiàn)透明圈的原因是____________。11．（15分）圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。（l）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一_____________________；鑒別培養(yǎng)基還需添加_________________作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成_________________色。（2）在4個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為115的土壤樣品溶液1．lmL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)的數(shù)值分別為13、156、178和191。該過程采取的接種方法是_________________，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為_________________個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較少，其原因是____。（3）現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了11個(gè)核苷酸，使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼（終止密碼有UAG、UGA和UAA）。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中，終止密碼為_________________，突變基因表達(dá)的蛋白質(zhì)含_____個(gè)氨基酸。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解析】

1.基因突變是指基因中堿基對(duì)的增添、缺失或替換，這會(huì)導(dǎo)致基因結(jié)構(gòu)的改變，進(jìn)而產(chǎn)生新基因；2.基因重組是指在生物體進(jìn)行有性生殖的過程中，控制不同性狀的非等位基因重新組合，包括兩種類型：①自由組合型：減數(shù)第一次分裂后期，隨著非同源染色體自由組合，非同源染色體上的非等位基因也自由組合．②交叉互換型：減數(shù)第一次分裂前期（四分體），基因隨著同源染色體的非等位基因的交叉互換而發(fā)生重組。此外，某些細(xì)菌（如肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)）和在人為作用（基因工程）下也能產(chǎn)生基因重組?！驹斀狻緼、由于密碼子的簡(jiǎn)并性，基因中堿基序列的改變不一定會(huì)導(dǎo)致生物性狀的改變，A錯(cuò)誤；B、“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”中R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌的原理是基因重組的結(jié)果，B正確；C、同源染色體的非姐妹染色單體之間發(fā)生染色體片段交換屬于基因重組，C錯(cuò)誤；D、基因突變是指基因結(jié)構(gòu)中堿基對(duì)的替換、增添、缺失，D錯(cuò)誤。故選B。2、D【解析】

該題主要考查了有絲分裂和減數(shù)分裂中染色體的行為變化和數(shù)量變化，同時(shí)對(duì)比了有絲分裂和減數(shù)分裂的區(qū)別?；蛑亟M在自然情況下主要發(fā)生于減數(shù)分裂過程，識(shí)記有絲分裂和減數(shù)分裂過程是本題的解題關(guān)鍵?！驹斀狻緼、處于減數(shù)第二次分裂前期、中期的細(xì)胞都含有姐妹染色單體，但細(xì)胞中不含同源染色體，A錯(cuò)誤；B、含有兩條X染色體的細(xì)胞包括初級(jí)卵母細(xì)胞、處于有絲分裂后期的雄性體細(xì)胞或原始生殖細(xì)胞、減數(shù)第二次分裂后期的次級(jí)卵母細(xì)胞/第一極體，B錯(cuò)誤；C、果蠅有絲分裂后期與減數(shù)第二次分裂后期都發(fā)生著絲點(diǎn)分離、姐妹染色單體分離等行為，但有絲分裂后期細(xì)胞中含有16條染色體，減數(shù)第二次分裂后期的細(xì)胞中含有8條染色體，C錯(cuò)誤；D、正常情況有絲分裂過程不會(huì)發(fā)生基因重組，D正確；故選D。3、B【解析】

分析柱形圖：該實(shí)驗(yàn)的自變量是施加試劑的種類，因變量是主根長(zhǎng)度和側(cè)根數(shù)，甲乙組對(duì)比來看，NAA能抑制主根生長(zhǎng)，甲丙組對(duì)比來看，KT能促進(jìn)主根生長(zhǎng)；乙、丁組對(duì)比可知，一定濃度的KT對(duì)NAA促進(jìn)側(cè)根生長(zhǎng)的效應(yīng)具有增強(qiáng)作用?！驹斀狻緼、對(duì)比甲、乙、丙柱形圖可知，NAA和KT對(duì)主根和側(cè)根的生長(zhǎng)效應(yīng)不同，其中NAA促進(jìn)側(cè)根的生長(zhǎng)，抑制主根的生長(zhǎng)，而KT則相反，A錯(cuò)誤；B、對(duì)比甲和乙柱形圖可知，NAA促進(jìn)側(cè)根的生長(zhǎng)，能一定程度地消除根的頂端憂勢(shì)，對(duì)比甲和丙柱形圖可知，KT促進(jìn)主根的生長(zhǎng)，抑制側(cè)根生長(zhǎng)，說明KT能增強(qiáng)根的頂端優(yōu)勢(shì)，B正確；C、本實(shí)驗(yàn)沒有不同濃度的KT和NAA作對(duì)比，不能證明KT和NAA濃度變化對(duì)主根生長(zhǎng)的影響，C錯(cuò)誤；D、乙、丁組對(duì)比可知，一定濃度的KT對(duì)NAA促進(jìn)側(cè)根生長(zhǎng)的效應(yīng)具有增強(qiáng)作用，D錯(cuò)誤。故選B。【點(diǎn)睛】本題考查了α-萘乙酸（NAA）溶液和激動(dòng)素（KT）對(duì)棉花主根長(zhǎng)度及側(cè)根數(shù)的影響，意在考查考生分析柱形圖，獲取有效信息的能力，難度適中。4、D【解析】

提煉題干信息可知“線粒體體來源于被原始的前真核生物吞噬的好氧性細(xì)菌，葉綠體的起源是被原始的前真核生物吞噬的藍(lán)藻”，據(jù)此分析作答?！驹斀狻緼、由于線粒體和葉綠體起源于原核生物，故其DNA是環(huán)狀的，A正確；BC、兩種細(xì)胞器起源于兩種原核生物，原核生物能進(jìn)行蛋白質(zhì)的合成及DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄等過程，故其含有核糖體、DNA聚合酶和RNA聚合酶，BC正確；D、線粒體和葉綠體起源于原核生物，原核生物無核膜，線粒體和葉綠體中的DNA應(yīng)是裸露的，D錯(cuò)誤。故選D?！军c(diǎn)睛】把握題干關(guān)鍵信息，能結(jié)合原核生物和真核生物的異同點(diǎn)分析作答是解題關(guān)鍵。5、B【解析】

本題考查物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸方式，要求考生識(shí)離子通道和離子泵的結(jié)構(gòu)和功能；識(shí)記物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞郊捌涮攸c(diǎn)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)?！驹斀狻緼、神經(jīng)元恢復(fù)靜息電位時(shí)，K＋通過離子通道外流，不消耗能量，形成外正內(nèi)負(fù)的靜息電位，A正確；

B、神經(jīng)元興奮時(shí)Na＋通道打開，Na＋通過離子通道內(nèi)流，不消耗能量，所以缺氧不會(huì)影響神經(jīng)元興奮時(shí)Na＋通過通道內(nèi)流，B錯(cuò)誤；

C、離子通過離子泵的跨膜運(yùn)輸是逆濃度梯度進(jìn)行的，C正確；

D、葡萄糖進(jìn)入紅細(xì)胞的方式為協(xié)助擴(kuò)散，需要載體協(xié)助，所以與離子泵運(yùn)輸離子的方式不相同，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】6、C【解析】

細(xì)胞的大小、結(jié)構(gòu)、功能各不相同，主要與細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的種類和數(shù)量多少有關(guān)，正確理解各細(xì)胞器的功能，在此基礎(chǔ)上解答此題?！驹斀狻亢颂求w是合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所，因此蛋白質(zhì)合成旺盛的細(xì)胞中核糖體較多，A正確；線粒體是有氧呼吸的主要場(chǎng)所，細(xì)胞代謝需要的能量主要由線粒體提供，因此代謝強(qiáng)度不同的細(xì)胞中線粒體數(shù)目有差異，B正確；胰蛋白酶是由胰腺細(xì)胞合成的，而不是由胰島細(xì)胞合成的，胰島細(xì)胞合成并分泌胰島素或胰高血糖素，C錯(cuò)誤；哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器，D正確；因此選C?！军c(diǎn)睛】準(zhǔn)確識(shí)記各類細(xì)胞的功能及各種細(xì)胞器的功能是解題的關(guān)鍵。二、綜合題：本大題共4小題7、cDNA目的基因片段、游離的四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、Taq酶構(gòu)建表達(dá)載體限制酶、DNA連接酶顯微注射預(yù)防核酸序列（或RNA．序列或核糖核苷酸序列）該疫苗不具有遺傳物質(zhì)，不會(huì)出現(xiàn)病毒增殖和感染【解析】

1．基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2．基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒?！驹斀狻浚?）圖中①是新冠病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物，因此為cDNA。（2）圖中進(jìn)行PCR技術(shù)必備的條件有目的基因片段、游離的四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、Taq酶等。（3）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟。圖中②過程就是基因表達(dá)載體構(gòu)建的過程，該步驟中需要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶，限制酶能識(shí)別雙鏈DNA中特定的核苷酸序列，并在該部位把單鏈中的磷酸二酯鍵切開，DNA連接酶能夠?qū)NA片段連接起來。（4）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法很多，具體用哪一種要看受體細(xì)胞的種類，這里的受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，因此這里用顯微注射法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞。（5）疫苗能夠激起人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體和記憶細(xì)胞，據(jù)此可知疫苗的最重要的目的是對(duì)新冠病毒引起的肺炎進(jìn)行免疫預(yù)防，對(duì)疑似患者確診時(shí)，可以對(duì)疑似患者進(jìn)行核酸檢測(cè)，即采集其咽拭子，與已知病毒進(jìn)行核酸序列（或RNA．序列或核糖核苷酸序列）比較，以此來確定病原體的種類。（6）由圖示可知基因工程疫苗是蛋白質(zhì)疫苗，而滅活獲減毒的病毒疫苗依然含有核酸成分，也就是說基因工程疫苗不具有遺傳物質(zhì)，不會(huì)出現(xiàn)病毒增殖和感染，因此該疫苗更安全。【點(diǎn)睛】熟知基因工程的原理以及操作步驟是解答本題的關(guān)鍵，認(rèn)真讀題是解答本題的首要條件，辨別基因工程疫苗和減毒疫苗的不同是本題的易錯(cuò)點(diǎn)。8、BmNPV基因基因表達(dá)載體PCR技術(shù)使目的基因在pl0基因的驅(qū)動(dòng)下高效表達(dá)磷酸二酯鍵抗原抗體雜交家蠶細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會(huì)對(duì)人膠原蛋白進(jìn)行加工使表達(dá)的膠原蛋白與人的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)和功能相似【解析】

基因工程的基本步驟：1、提取目的基因；2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建（即目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，是實(shí)施基因工程的第二步，也是基因工程的核心）；3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；4、目的基因的檢測(cè)和表達(dá)?！驹斀狻浚?）因?yàn)锽mNPV專性寄生于鱗翅目昆蟲，故將目的基因與BmNPV基因重組，構(gòu)建基因表達(dá)載體，更有利于將目的基因?qū)爰倚Q細(xì)胞。PCR是指在體外復(fù)制特定DNA片段，可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。（2）啟動(dòng)子位于基因的首端，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。將目的基因與運(yùn)載體連接時(shí)，限制酶和DNA連接酶作用的都是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二脂鍵。（3）檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，可用抗原抗體雜交的方法。大腸桿菌為原核細(xì)胞，家蠶為真核生物，家蠶細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會(huì)對(duì)人膠原蛋白進(jìn)行加工，與人體內(nèi)表達(dá)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能更相似?！军c(diǎn)睛】本題在掌握基因工程基本步驟的基礎(chǔ)上，結(jié)合具體實(shí)例解題。9、蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)中富含纖維素，會(huì)聚集較多的纖維素分解菌唯一碳源凝固劑單體菌體產(chǎn)生的纖維素酶活性50酶活性殘留率該溫度下，纖維素酶的熱穩(wěn)定性高，作用時(shí)間持久，且酶活性相對(duì)較高【解析】

分解纖維素的微生物的分離：

（1）實(shí)驗(yàn)原理：

①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)。

②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

（2）實(shí)驗(yàn)過程：

土壤取樣：采集土樣時(shí)，應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境；

梯度稀釋：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度；

涂布平板：將樣品涂布于含剛果紅的鑒別纖維素分解菌的固體培養(yǎng)基上；

挑選產(chǎn)生中心透明圈的菌落：產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍出現(xiàn)透明圈，從產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落上挑取部分細(xì)菌，并接種到纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基上，在30～37℃條件下培養(yǎng)，可獲得較純的菌種?！驹斀狻浚?）由于蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)中富含纖維素，會(huì)聚集較多的纖維素分解菌，故選擇蘑菇培養(yǎng)基質(zhì)作為纖維素酶高產(chǎn)菌株的來源。

（2）篩選用的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素作為唯一碳源；并在配制培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂作為凝固劑；應(yīng)篩選時(shí)應(yīng)選擇透明圈較大的菌株，因?yàn)檫@一指標(biāo)值越大說明單個(gè)菌體產(chǎn)生的纖維素酶的活性越強(qiáng)。

（3）研究纖維素酶的熱穩(wěn)定性時(shí)，首先將纖維素酶液置于35～65℃的不同溫度條件下保溫2h，再取上述不同溫度處理的纖維素酶液和未經(jīng)保溫處理的纖維素酶液，并在50℃下測(cè)定纖維素酶的催化速率；計(jì)算酶活性殘留率。

（4）由圖可知：由于40℃時(shí)，纖維素酶的熱穩(wěn)定性高，作用時(shí)間持久，且酶活性相對(duì)較高，故生產(chǎn)中使用該纖維素酶時(shí)，最好將溫度控制在40℃左右?！军c(diǎn)睛】本題結(jié)合曲線圖主要考查微生物分離及培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力。10、瓊脂防止外來雜菌的入侵滅菌及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染環(huán)境和感染實(shí)驗(yàn)操作者避免培養(yǎng)基表面的菌液出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果避免培養(yǎng)基被污染和防止培養(yǎng)基水分過快揮發(fā)剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素紅色復(fù)合物就無法形成，因而會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌菌落為中心的透明圈【解析】

1.篩選纖維素分解菌需要使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。剛果紅和纖維素結(jié)合能形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌可以產(chǎn)生纖維素酶而分解纖維素使菌落周圍出現(xiàn)透明圈，所以可以用剛果紅培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌。2.微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。【詳解】（1）實(shí)驗(yàn)室中常用的凝固劑是瓊脂。（2）在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵，因此需要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌處理。（3）進(jìn)行平板劃線時(shí)，在劃線結(jié)束后，由于接種環(huán)上殘留部分菌種，所以要灼燒接種環(huán)，及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，以避免污染環(huán)境和感染實(shí)驗(yàn)操作者。若用稀釋涂布平板進(jìn)行接種，為避免養(yǎng)基表面的菌液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果，應(yīng)注意在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多，