2025屆高考生物一輪復(fù)習第9單元生物技術(shù)與工程作業(yè)56核移植及細胞融合技術(shù)(新高考新教材)

作業(yè)56核移植及細胞融合技術(shù)A組基礎(chǔ)達標1.下列有關(guān)“多莉”克隆過程的敘述,正確的是()A.核移植操作前需對受體細胞進行營養(yǎng)限制性培養(yǎng)B.可用紫外線破壞未受精卵細胞的細胞核,從而獲得去核卵細胞C.重組卵細胞在培養(yǎng)過程中需定期用胰酶處理成細胞懸液進行傳代培養(yǎng)D.需使用免疫抑制劑處理代孕的母羊,以避免對植入胚胎的免疫排斥反應(yīng)2.為提高克隆羊的成功率,不宜采用的措施是()A.核供體采用分裂能力強的細胞B.培養(yǎng)體細胞同步到G1期,再進行核移植C.對卵細胞供體母羊注射激素進行超數(shù)排卵D.將培養(yǎng)到囊胚期的胚胎移植到代孕母體的輸卵管中3.(2024浙江稽陽聯(lián)誼學校聯(lián)考)下列有關(guān)生物技術(shù)與工程中所用技術(shù)操作與原理的敘述,錯誤的是()A.動物細胞培養(yǎng)——應(yīng)用酶的專一性原理可對所需材料用胰蛋白酶進行處理B.制備單克隆抗體——應(yīng)用細胞膜流動性原理對B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合C.PCR技術(shù)的退火(復(fù)性)——應(yīng)用堿基互補配對原理使引物結(jié)合在DNA模板鏈的5'端D.細胞核移植——細胞質(zhì)可調(diào)控細胞核基因表達,選用卵細胞的細胞質(zhì)使重組細胞表現(xiàn)出全能性4.(2023浙江金麗衢十二校第二次聯(lián)考)β-hcg(人絨毛膜促性腺激素)是由滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白。利用細胞工程方法以β-hcg為抗原制備單克隆抗體。下列敘述錯誤的是()A.制備抗β-hcg單克隆抗體可以應(yīng)用于醫(yī)學診斷B.聚乙二醇可以誘導(dǎo)B淋巴細胞和B淋巴細胞融合C.小鼠注射β-hcg后,產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體D.制備抗β-hcg單克隆抗體,可以將雜交瘤細胞注射到動物體內(nèi)5.(2024浙江湖州教學質(zhì)量檢測)某研究小組欲制備單克隆抗體A,進行了如下實驗:抗原A刺激小鼠后分離B淋巴細胞,誘導(dǎo)B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,篩選獲得雜交瘤細胞后進行體外培養(yǎng),獲得單克隆抗體A。下列敘述正確的是()A.從免疫小鼠的肝臟中分離得到B淋巴細胞B.可用仙臺病毒或70%乙醇誘導(dǎo)細胞融合C.雜交瘤細胞的克隆培養(yǎng)不能在動物體內(nèi)進行D.篩選得到的雜交瘤細胞在傳代培養(yǎng)中可能發(fā)生染色體丟失現(xiàn)象6.(2023浙江溫州三模)下圖為克隆羊“多莉”的培育過程示意圖,甲~丁表示不同的綿羊,a、b表示操作過程。下列敘述錯誤的是()A.甲需超數(shù)排卵處理,乙的乳腺細胞核移植前需進行營養(yǎng)限制性培養(yǎng)B.過程a采用電脈沖融合技術(shù),既能誘導(dǎo)細胞融合又能激活胚C.過程b也可以將8細胞胚在飼養(yǎng)層上培養(yǎng)到囊胚再移植到丙子宮內(nèi)D.丁克隆成功證明了細胞質(zhì)具有調(diào)控細胞核發(fā)育的作用7.細胞融合技術(shù)有著廣泛應(yīng)用,下圖為細胞融合的簡略過程。據(jù)圖分析,下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.甲形成過程中,a和b需要通過細胞膜接觸完成識別和結(jié)合B.乙形成過程中培養(yǎng)液滲透壓略大于細胞質(zhì),有助于植物細胞酶解法去壁C.借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用能將藥物定向帶到癌細胞所在位置D.若a和b分別為基因型AaBB、aaBb植株的花粉細胞,則去壁后兩兩融合可得到4種基因型細胞B組素能培優(yōu)8.(2023浙江名校新高考研究聯(lián)盟第三次聯(lián)考)從經(jīng)多次同種抗原免疫的小鼠脾臟中分離出脾細胞,稀釋后與骨髓瘤細胞等比例混合,加入聚乙二醇促融,再將分離出的細胞在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng),可篩選出雜交瘤細胞。下列相關(guān)敘述正確的是()A.選擇不能在HAT培養(yǎng)基上生長的骨髓瘤細胞用于細胞融合B.將分離出的脾細胞用涂布平板法進行計數(shù)后再與瘤細胞混合C.促融后可加入大量無菌水以終止融合,再用離心法分離細胞D.篩選出的雜交瘤細胞均能產(chǎn)生并分泌與上述抗原相對應(yīng)的抗體9.如圖表示抗胃腺癌單克隆抗體(單抗)制備的基本過程,其中①②為操作過程。一般細胞的DNA合成有兩條途徑,而只具有一條途徑的骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無法生長。下列敘述錯誤的是()A.獲取的B淋巴細胞具有多樣性致使篩選得到的雜交瘤細胞種類多樣B.兩兩融合的細胞具有DNA合成的兩條途徑,故都能在HAT培養(yǎng)液中生長C.上述單克隆抗體制備技術(shù)的最大優(yōu)點取決于過程②的操作D.部分雜交瘤細胞不能合成抗體,可能原因是細胞融合導(dǎo)致相關(guān)的染色體丟失10.下圖為單克隆抗體的制備過程(圖中的抗原表位指抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學基團)。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.小鼠經(jīng)抗原多次免疫后取其脾臟獲取B淋巴細胞,1號試管內(nèi)可能含有多種B淋巴細胞B.骨髓瘤細胞培養(yǎng)時會出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制,因此細胞融合前需用胰蛋白酶處理C.3號試管的雜交瘤細胞既能迅速大量增殖又能合成和分泌特異性抗體D.雜交瘤細胞經(jīng)篩選并克隆化培養(yǎng)獲得的4種抗體都能與抗原特異性結(jié)合11.(2023浙江金華十校模擬)下圖為雜交瘤細胞的制備及初步篩選示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-),在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無法生長。免疫B細胞(HGPRT+)能在HAT篩選培養(yǎng)液中正常生長。下列敘述正確的是()A.從HAT培養(yǎng)液中獲得的抗體即為單克隆抗體B.仙臺病毒處理可使細胞膜發(fā)生一定程度的損傷,進而促進細胞融合C.在HAT培養(yǎng)液中能長期存活的細胞具有特異性強、靈敏度高的特點D.多個B細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養(yǎng)液中死亡的原因是不能合成DNA12.為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程。回答下列問題。(1)分析上圖,研制抗病毒A的單克隆抗體涉及的生物技術(shù)主要有。(2)上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是。

(3)以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟:取小鼠甲脾臟剪碎,用酶處理使其分散成單個細胞,加入培養(yǎng)液制成單細胞懸液。

(4)誘導(dǎo)B淋巴細胞和骨髓瘤細胞形成融合細胞常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、電激以及等。

(5)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞,需要進行篩選。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是。

(6)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖,可采用的方法。

13.格列寧是一種治療癌癥的靶向藥物,此類靶向藥物可稱為“生物導(dǎo)彈”。利用單克隆抗體來診斷和治療癌癥可能會成為攻克癌癥的重要手段,以下為單克隆抗體制備流程圖:(1)若該圖中的單克隆抗體與藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”治療腸癌,則圖中特定抗原通常是。靶向藥物比普通的化療藥物療效高、毒副作用小是因為

。

(2)圖中誘導(dǎo)細胞融合時需要采用滅活病毒誘導(dǎo)法、聚乙二醇融合法或物理法等方法誘導(dǎo),雜交瘤細胞的特點是

。

(3)用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出融合的雜交瘤細胞進行和,經(jīng)多次篩選,就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。

(4)近年來,科學家發(fā)現(xiàn)丁酸鈉對雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體有一定的影響,某科研小組進行了相關(guān)實驗,結(jié)果如表所示:丁酸鈉對雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體的影響丁酸鈉的濃度時間/h489614401∶3201∶6401∶12000.251∶3201∶12801∶25000.51∶1601∶25001∶25000.751∶3201∶3201∶640注:表中比值表示抗體效價,比值越高表明越有利于抗體的產(chǎn)生。該實驗過程中培養(yǎng)雜交瘤細胞的培養(yǎng)瓶放在了含5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH,該實驗的自變量為。

14.惡性腫瘤中一些癌細胞會從原發(fā)性腫瘤上脫落,形成循環(huán)腫瘤細胞(CTCs)。它們可單獨移動或組成小團抵達其他器官(如骨髓、肝臟、肺和大腦等),形成轉(zhuǎn)移瘤。傳統(tǒng)影像學診斷方式在發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移瘤形成時往往已延誤最佳治療時機,目前可通過液體活檢來檢查血液中的CTCs及早診斷是否存在癌癥轉(zhuǎn)移(方法如下):(1)單克隆抗體的制備,研究人員比較了上皮組織細胞來源的CTCs與正常白細胞表面蛋白質(zhì)的一些差異(如表)。細胞表面抗原標志物表達差異細胞類型CD45EpCAM白細胞+++-CTCs-+++單克隆抗體制備流程示意圖a.首先用CD45蛋白免疫小鼠,然后經(jīng)過圖中的①②③④等步驟,獲得大量單克隆抗體A,再用免疫小鼠,經(jīng)過相同步驟獲得單克隆抗體B。步驟①常常用與植物原生質(zhì)體融合不同的方法如,從而使細胞相互凝聚。

b.步驟②通常使用選擇培養(yǎng)基,主要目的是篩選出。

c.步驟③主要需要經(jīng)過的兩項操作,并經(jīng)多次篩選,最終獲得。

d.步驟④是大規(guī)模培養(yǎng),主要有兩種方式:。

(2)免疫磁珠分離:取待測人員少量血液(一般7.5mL即可)于采集管內(nèi),將與相連的磁珠加入采集管,外加磁場使磁珠定向移動到指定區(qū)域并取出,排除非腫瘤細胞干擾(負性篩選);再將與相連的磁珠加入采集管,外加磁場使磁珠定向移動到指定區(qū)域取出,收集CTCs(陽性富集)。

(3)對收集到的細胞進行計數(shù)并做出診斷,若超出正常范圍,即可診斷發(fā)生癌細胞轉(zhuǎn)移。

答案：1.B核移植前應(yīng)對核供體進行營養(yǎng)限制性培養(yǎng),A項錯誤;利用紫外線照射可以破壞細胞核,B項正確;重組卵細胞不需要進行傳代,C項錯誤;胚胎移植進入子宮,不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),D項錯誤。2.D核供體采用傳代10代以內(nèi)的細胞,此時能保證細胞是二倍體核型,細胞的分裂能力強,有利于提高克隆羊的成功率,A項不符合題意;體細胞進行細胞周期同步化培養(yǎng),將細胞培養(yǎng)至G1期(此時還沒進行DNA復(fù)制),然后進行核移植,有利于提高克隆羊的成功率,B項不符合題意;對卵細胞供體母羊注射促性腺激素進行超數(shù)排卵處理,可獲得更多的卵細胞,有利于提高克隆羊的成功率,C項不符合題意;將培養(yǎng)到囊胚期的胚胎移植到代孕母體的子宮中,D項符合題意。3.C動物細胞培養(yǎng)用胰蛋白酶處理細胞間的膠原蛋白使之分散開,應(yīng)用了酶的專一性,A項正確;制備單克隆抗體過程中需要進行B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合,應(yīng)用了細胞膜的流動性,B項正確;PCR技術(shù)的退火(復(fù)性)過程,應(yīng)用堿基互補配對原理使引物結(jié)合在DNA模板鏈的3'端,子鏈的延伸方向為5'→3',C項錯誤;細胞核移植一般選用去核卵細胞提供細胞質(zhì),因為卵細胞的細胞質(zhì)可調(diào)控重組細胞的核基因表達,D項正確。4.C制備抗β-hcg單克隆抗體可以應(yīng)用于醫(yī)學診斷,廣泛運用于早孕的診斷,快速方便,A項正確;誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有物理法、化學法(常用聚乙二醇)和滅活的病毒誘導(dǎo),B項正確;單克隆抗體是指由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體,C項錯誤;制備抗β-hcg單克隆抗體,可以將雜交瘤細胞注射到動物體內(nèi),屬于體內(nèi)培養(yǎng),成本低,D項正確。5.D制備單克隆抗體所用的B淋巴細胞是從免疫小鼠的脾臟中分離得到的,A項錯誤;雜交瘤細胞的獲得可利用聚乙二醇或滅活的病毒誘導(dǎo)B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合實現(xiàn),B項錯誤;雜交瘤細胞的克隆培養(yǎng)可在體內(nèi)或體外進行,即將最終獲得的雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注入小鼠腹腔中均可以獲得單克隆抗體,C項錯誤;由于雜交瘤細胞是不同細胞融合獲得的,因此,篩選得到的雜交瘤細胞在傳代培養(yǎng)中可能會發(fā)生染色體丟失現(xiàn)象,進而可能會影響單克隆抗體的生產(chǎn),D項正確。6.C甲提供去核卵母細胞,所以需要進行超數(shù)排卵處理,核移植前需要對核供體細胞進行營養(yǎng)限制性培養(yǎng),以利于細胞核的一系列變化和細胞融合后基因表達的分子開關(guān)的啟動,A項正確;過程a為核移植的過程,可以采用電脈沖融合技術(shù),既能誘導(dǎo)細胞融合又能激活胚,B項正確;8細胞胚在飼養(yǎng)層上培養(yǎng),保持不分化狀態(tài),C項錯誤;丁克隆成功證明了細胞質(zhì)具有調(diào)控細胞核發(fā)育的作用,D項正確。7.D甲是有性雜交產(chǎn)生的后代,其形成過程中a和b需要通過細胞膜接觸完成識別和結(jié)合,A項正確;乙是植物體細胞雜交產(chǎn)生的后代,該過程培養(yǎng)液滲透壓略大于細胞質(zhì),有助于植物細胞酶解法去壁,防止原生質(zhì)體在低滲溶液中吸水漲破,B項正確;將單克隆抗體與藥物結(jié)合,借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用能將藥物定向帶到癌細胞所在位置,C項正確;若a和b分別為基因型AaBB、aaBb植株的花粉細胞,AaBB能產(chǎn)生AB、aB兩種花粉,aaBb能產(chǎn)生aB、ab兩種花粉,去壁兩兩融合可以得到AABB、aaBB、aabb、AaBB、AaBb、aaBb共6種基因型的細胞,D項錯誤。8.A在HAT培養(yǎng)基上未融合的細胞(包括骨髓瘤細胞和B細胞)和同種融合的細胞都會死亡,只有融合后的雜交瘤細胞能存活,故選擇不能在HAT培養(yǎng)基上生長的骨髓瘤細胞用于后續(xù)的細胞融合,A項正確;稀釋涂布平板法用于微生物計數(shù),不能用于動物細胞的計數(shù),因為不能形成菌落,B項錯誤;動物細胞無細胞壁,若加入無菌水會使其吸水破裂,導(dǎo)致制備過程失敗,C項錯誤;篩選出的雜交瘤細胞既能無限增殖,也能產(chǎn)生特異性抗體,但不一定都能產(chǎn)生并分泌與上述抗原相對應(yīng)的抗體,還需要對篩選出的雜交瘤細胞進行鑒定,D項錯誤。9.BB淋巴細胞具有多樣性,導(dǎo)致B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合形成的雜交瘤細胞種類多樣,A項正確;兩兩融合的細胞包括B淋巴細胞與B淋巴細胞融合的具有同種核的細胞、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合的具有同種核的細胞、B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞,骨髓瘤細胞雖然能無限增殖,但缺乏次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,B淋巴細胞雖然有次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但不能無限增殖,所以在HAT篩選培養(yǎng)液中,兩兩融合的具有同種核的細胞都無法生長,只有雜交瘤細胞才能生長,且骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合的具有同種核的細胞也只有DNA合成的一條途徑,B項錯誤;過程②的操作是篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞,因此上述單克隆抗體制備技術(shù)的最大優(yōu)點取決于過程②的操作,C項正確;雜交瘤細胞染色體丟失可能導(dǎo)致細胞發(fā)生變異,從而導(dǎo)致部分雜交瘤細胞不能合成抗體,D項正確。10.B由于抗原上有多種抗原表位,不同的抗原表位可以結(jié)合不同的B淋巴細胞,因此1號試管內(nèi)可能含有多種B淋巴細胞,A項正確;普通的體細胞培養(yǎng)時會出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象,而骨髓瘤細胞能無限增殖,不會出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制現(xiàn)象,B項錯誤;3號試管的雜交瘤細胞是特定的抗原表位刺激產(chǎn)生的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合形成的,既能迅速大量增殖又能合成和分泌特異性抗體,C項正確;雜交瘤細胞經(jīng)篩選并克隆化培養(yǎng)獲得的4種抗體,在抗原上都存在相應(yīng)的抗原表位,因此4種抗體都能與抗原特異性結(jié)合,D項正確。11.B在HAT培養(yǎng)液中篩選出來的是雜交瘤細胞,可能有多種類型,因此后續(xù)還需要對這些雜交瘤細胞進行專一抗體檢測,進而篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞,可見從HAT培養(yǎng)液中獲得的抗體不是單克隆抗體,A項錯誤;仙臺病毒處理可使細胞膜發(fā)生一定程度的損傷,進而促進細胞融合,B項正確;在HAT培養(yǎng)液中能長期存活的細胞為雜交瘤細胞,這些細胞可能產(chǎn)生多種類型的抗體,因而不具有特異性強、靈敏度高的特點,C項錯誤;多個B細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養(yǎng)液中死亡的原因是不能無限增殖,D項錯誤。12.答案(1)動物細胞融合技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)(2)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞(3)胰蛋白(4)滅活的病毒(5)抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性(或抗原與抗體的特異性結(jié)合)(6)將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖(或?qū)㈦s交瘤細胞在體外培養(yǎng))解析(1)分析圖示可知,制備單克隆抗體涉及的生物技術(shù)主要有動物細胞融合技術(shù)、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。(2)實驗前必須給小鼠甲注射病毒A,讓小鼠甲產(chǎn)生特異性免疫,誘導(dǎo)小鼠甲體內(nèi)產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞。(3)以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟:取小鼠甲脾臟剪碎,要想分散動物細胞,根據(jù)酶的專一性,需要用胰蛋白酶處理,破壞細胞之間的聯(lián)系,使其分散成單個細胞。(4)誘導(dǎo)動物細胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、電激以及滅活的病毒等。(5)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞,需要進行篩選。圖中篩選2含多次篩選,該過程用到抗原-抗體雜交,篩選原理是抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性。(6)要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖,可采用小鼠體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)液中培養(yǎng)兩種方法,即將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖或?qū)㈦s交瘤細胞在體外培養(yǎng)。13.答案(1)腸癌細胞膜表面的蛋白質(zhì)既不損傷正常細胞,又減少了用藥劑量(2)既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生抗體(3)克隆化培養(yǎng)抗體檢測(4)丁酸鈉的