第13講生物技術(shù)與工程（講練）（原卷版）

第13講生物技術(shù)與工程易錯辨析發(fā)酵工程某同學在家用帶蓋玻璃瓶制作果酒和果醋時，將玻璃瓶用酒精消毒后，裝滿葡萄汁，待酒精發(fā)酵后去除瓶蓋，蓋一層紗布，再進行醋酸發(fā)酵。 ()利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵。()果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反。()利用發(fā)酵罐進行葡萄酒主發(fā)酵過程中可以通過檢測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵。()配置培養(yǎng)基時應根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pH。()可使用平板劃線法統(tǒng)計活細菌總數(shù)。()接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)基污染。()細胞工程動物細胞培養(yǎng)時剪碎動物組織的操作不需要在無菌環(huán)境中進行。 ()單克隆抗體制備過程中通常將分離出的漿細胞與骨髓瘤細胞融合。()從雄性奶牛中采集到的成熟精子遇到卵子即可進入卵子內(nèi)。()采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胎的數(shù)量是有限的。()胚胎移植時需使用免疫抑制劑以避免代孕牛對植入胚胎的排斥反應。()規(guī)范表述在培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加；在培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至；在培養(yǎng)細菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至；在培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供的條件。獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。采用和能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上。利用稀釋涂布平板法計數(shù)，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少，這是因為。單克隆抗體制備過程中涉及兩次篩選，第一次是利用特定的，篩選出雜交瘤細胞；第二次是進行，目的是篩選出足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。在實際胚胎工程操作中，常以觀察到或者作為受精的標志。胚胎移植實質(zhì)上是。構(gòu)建乳腺生物反應器時需要將藥用蛋白基因與等調(diào)控元件重組在一起?？键c1發(fā)酵工程理清“3”中傳統(tǒng)食品的制作技術(shù)果酒果醋泡菜菌種原理酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精醋酸菌有氧呼吸產(chǎn)生乙酸乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸控制條件前期，后期無氧，有氧，無氧，常溫實驗流程培養(yǎng)基制備與微生物純化技術(shù)制備固體培養(yǎng)基過程：配置培養(yǎng)基→滅菌→倒平板純化培養(yǎng)（只能純化，不能計數(shù)）通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面（既能純化，也能計數(shù)）將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物實驗一般會設置空白對照：隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物實驗一般會設置空白對照：隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成。觀察菌落需用固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基要添加凝固劑，如瓊脂。倒平板的溫度一般為50℃左右較為適宜，溫度過高會燙手，溫度過低培養(yǎng)基又會凝固。微生物分離與計數(shù)的實例——能分解尿素的細菌篩選以“”為唯一氮源的培養(yǎng)基鑒別上述培養(yǎng)基中加入，指示劑變紅則初步鑒定該細菌能分解尿素計數(shù)方法（不能直接區(qū)分死菌和活菌，所得數(shù)值可能“偏高”）間接計數(shù)法（）（活菌計數(shù)法，所得數(shù)值一般偏低）考法1傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用（2022?鹽城二模）下列關(guān)于泡菜、面包、酸奶等發(fā)酵食品的敘述，正確的是（）A．泡菜壇內(nèi)的白色菌膜與果酒表面的菌膜中所含菌種相同 B．制作面包和饅頭都用到酵母菌，酵母菌產(chǎn)生的酒精與食品松軟有關(guān) C．若出現(xiàn)泡菜發(fā)酸、面包長霉、酸奶脹袋等情況，則都不能再食用 D．若制作的泡菜咸而不酸，可能的原因是加入食鹽過多，抑制了乳酸菌發(fā)酵（2022?泰州模擬）米酒、酸奶、泡菜等都屬于傳統(tǒng)發(fā)酵制品，相關(guān)敘述正確的是（）A．制作米酒時添加“酵頭”的目的是接種釀酒酵母 B．米酒發(fā)酵液中冒出的“氣泡”都來源于酵母菌無氧呼吸 C．酸奶和泡菜制作中均需要及時通氧，保證乳酸菌的有氧呼吸 D．為降低雜菌污染，發(fā)酵前需要對器具、原料等進行滅菌考法2微生物的培養(yǎng)、分離與計數(shù)（2023?白山一模）如圖是研究人員從落葉地的土壤中篩選高效分解纖維素的細菌的過程示意圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．在配制步驟②③的培養(yǎng)基時，高壓蒸汽滅菌后將pH調(diào)至中性或弱堿性 B．步驟③篩選、純化的原理是將聚集的細菌分散，可以獲得單細胞菌落 C．步驟③采用稀釋涂布平板法進行接種，并需要加入纖維素作為唯一的碳源 D．步驟④加入的是剛果紅染液，可根據(jù)菌落與透明圈的直徑比來挑選優(yōu)質(zhì)菌落（2022?鹽城二模）為了解病原微生物對四種抗生素的敏感程度，某研究小組進行了相關(guān)藥敏實驗，圖1為部分實驗器材。將含有相同濃度的抗生素Ⅰ～Ⅳ四個大小相同的紙片分別貼在長滿測試菌的平板上，實驗結(jié)果如圖2。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．為獲得長滿測試菌的平板，需要使用圖1中器材①② B．圖2中Ⅱ形成的抑菌圈較小，可能是病原微生物對藥物較敏感 C．圖2抑菌圈中的菌落可能是在抗生素Ⅳ作用下產(chǎn)生了突變株 D．不同抗生素在平板上的擴散速度不同會影響實驗結(jié)果（多選）（2021?濱州二模）一次性口罩的主要成分為聚丙烯纖維（PP），某科研團隊準備從土壤中篩選出高效降解一次性口罩的細菌。圖甲表示PP分解菌分離與計數(shù)的過程，6號試管涂布的三個平板的菌落數(shù)為550、601、688；7號試管涂布的三個平板的菌落數(shù)為58、73、97；8號試管涂布的三個平板的菌落數(shù)為8、15、28。圖乙表示在培養(yǎng)基中加入能與PP結(jié)合而顯色的染色劑，目的菌落周圍出現(xiàn)透明圈的情況。下列說法正確的是（）A．圖甲、圖乙所用培養(yǎng)基分別為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，都以PP作為唯一碳源 B．圖甲、圖乙所用接種方法分別為稀釋涂布平板法和平板劃線法，都需在酒精燈火焰旁進行 C．1g土壤樣品中含有PP分解菌的估算數(shù)目是7.6×1010個，此數(shù)值一般偏小 D．可選擇圖乙培養(yǎng)基中比值大的PP分解菌作為目的菌種推廣使用考點2細胞工程和胚胎工程植物組織培養(yǎng)的過程原理：過程①植物組織培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是和②階段不需要光，階段需要光③生長素與細胞分裂素的比值時，促進根的分化、抑制芽的形成；比值時，促進芽的分化、抑制根的形成。④體內(nèi)細胞未表現(xiàn)全能性的原因：基因的表達具有。植物體細胞雜交技術(shù)（1）原理：、（2）過程①去除細胞壁的方法：，用和處理。②誘導融合的方法：物理法：、電融合法化學法：（PEG）融合法、融合法③融合完成的標志：④變異類型：；形成的雜種植株是異源多倍體。⑤意義：打破，實現(xiàn)遠緣雜交育種針對二類目標（試管苗、細胞產(chǎn)物）的培養(yǎng)流程動物細胞培養(yǎng)（1）原理：（2）動物細胞培養(yǎng)過程①動物細胞培養(yǎng)中兩次使用的作用不同：第1次——處理剪碎的組織，使其分散成單個細胞；第2次——使貼壁生長的細胞從瓶壁上脫落下來分散成單個細胞。②保障無菌、無毒的措施：對培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進行滅菌處理及在無菌條件下進行操作，。③區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵：是否分瓶培養(yǎng)。（3）干細胞比較項目胚胎干細胞（ES細胞）成體干細胞誘導多能干細胞（iPS細胞）來源.成體組織或器官內(nèi)誘導高度分化的組織細胞形成特點具有分化成為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能具有組織特異性，只能分化成特定的細胞或組織，不具有發(fā)育成完整個體的能力類似胚胎干細胞；誘導過程無須破壞胚胎，應用前景更廣泛單克隆抗體的制備（1）原理：細胞膜的流動性、細胞的增殖（2）過程①3種細胞特點不同B淋巴細胞：能產(chǎn)生抗體，不能大量增殖。骨髓瘤細胞：能迅速大量增殖，不能產(chǎn)生抗體。雜交瘤細胞：既能產(chǎn)生，又能迅速。②兩次篩選目的不同第1次：獲得第2次：獲得動物體細胞核移植技術(shù)（1）原理：（2）過程①核移植獲得的克隆動物與提供細胞核的親本性狀可能不同的三個原因a.克隆動物遺傳物質(zhì)來自兩個親本。b.發(fā)育過程中可能發(fā)生基因突變或染色體變異。c.外界環(huán)境可能引起不可遺傳的變異。②克隆動物的產(chǎn)生是，而試管動物則是在體外受精形成受精卵，由受精卵發(fā)育成的個體，因此屬于。準確記憶哺乳動物的早期胚胎發(fā)育過程受精過程中的兩個標志①受精的標志是觀察到或②受精完成的標志是。（2）桑葚胚是由受精卵分裂形成的，沒有分化；而囊胚期雖然已經(jīng)進行細胞分化，但囊胚的仍具有全能性。胚胎抑制的操作流程操作流程備注對供體、受體的選擇和處理↓選擇：遺傳性狀優(yōu)良、生產(chǎn)能力強的供體、有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體處理：處理和對供體母畜進行處理（注射）配種或人工授精↓對胚胎的收集、檢查及對供體的處理↓收集：收集胚胎檢查：對胚胎進行質(zhì)量檢查，這時胚胎應發(fā)育到或階段處理：供體母畜正常繁殖或兩三個月后進行另一次移植胚胎移植↓胚胎移植后的檢查↓檢查受體是否具有優(yōu)良性狀的后代（1）胚胎移植過程中的兩次檢查：第一次對進行檢查；第二次對是否妊娠進行檢查。（2）胚胎移植產(chǎn)生的后代是有性生殖還是無性生殖，取決于胚胎發(fā)育的起點。若后代是由受精卵形成的，則為；若后代是由核移植技術(shù)形成的重組細胞或胚胎分割形成的胚胎發(fā)育而成，則為。（3）用于移植的胚胎來源：體內(nèi)正常受精的胚胎、核移植的胚胎和體內(nèi)受精獲得的胚胎、轉(zhuǎn)基因獲得的胚胎、胚胎分割獲得的胚胎等。（4）胚胎存活的基礎(chǔ)：受體不會對來自供體的胚胎發(fā)生。胚胎分割材料發(fā)育良好、形態(tài)正常的或?qū)嵸|(zhì)胚胎分割可增加動物后代的數(shù)量，其實質(zhì)是動物的或成功關(guān)鍵點在分割囊胚階段的胚胎時，要注意將均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育。對未知性別的胚胎可以取樣，做DNA分析進行性別鑒定。考法1植物細胞工程下列有關(guān)細胞工程的敘述中，正確的是（）A．植物細胞工程中，融合葉肉細胞時，應先去掉細胞膜，制備原生質(zhì)體 B．植物體細胞雜交培育出的新品種一定不是單倍體 C．植物細胞工程中，葉肉細胞經(jīng)再分化過程可形成愈傷組織 D．單克隆抗體制備過程，采用不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合從而獲得雜交瘤細胞（2022春?雙鴨山期末）獼猴桃因貌似獼猴而得名，是一種品質(zhì)鮮嫩、營養(yǎng)豐富的美味水果。我國研究人員利用“中華獼猴桃”和“美味獼猴桃”兩個不同種培育出了更加優(yōu)良的品種，其過程如圖所示。請分析并回答下列問題：（1）用酶解法制備原生質(zhì)體時，需先用較（填“高”、“低”）滲透壓的溶液處理植物細胞，使細胞處于微弱的質(zhì)壁分離狀態(tài)，然后用酶消化去除細胞壁，獲得原生質(zhì)體。（2）過程③使用的化學法包括：聚乙二醇融合法和融合法等。（3）已知用X射線處理會使染色體受影響而導致細胞失去分裂能力；用碘乙酰胺處理會使細胞內(nèi)的酶失活而抑制生長。為了能篩選到雜種細胞F，若在①過程對“中華獼猴桃”用X射線處理，需對“美味獼猴桃”用處理，以便最終能獲得優(yōu)良雜種植株H。（4）若兩種獼猴桃都是二倍體，則雜種植株為倍體。考法2動物細胞工程（2017春?未央?yún)^(qū)校級期末）現(xiàn)在有一個嬰兒在出生后醫(yī)院為他保留了臍帶血，在以后他生長發(fā)育過程中如果出現(xiàn)了某種難治療的疾病，就可以通過血液中的干細胞來為其治病，關(guān)于這個實例說法正確的是（）A．用臍帶血中的干細胞能夠治療這個孩子所有的疾病 B．如果要移植用他的干細胞培育出的器官，需要用到細胞培養(yǎng)技術(shù) C．如果要移植用他的干細胞培育出的器官，應該長期給他使用免疫抑制藥物 D．用干細胞培育出人體需要的器官用來移植治病，需要激發(fā)細胞的所有全能性（多選）（2021秋?海門市校級期末）亨廷頓舞蹈病是一種由于亨廷頓蛋白（HTT）基因突變所導致的疾病。我國科學家利用基因編輯技術(shù)（CRISPR/Cas9），成功培育出世界首例亨廷頓舞蹈病的基因“敲入”豬模型，操作過程如圖所示。下列說法正確的是（）A．上述操作過程的原理有基因重組、動物細胞核全能性等 B．過程②為動物細胞融合技術(shù)，通常采用滅活病毒誘導 C．過程④為胚胎分割，該技術(shù)關(guān)鍵是將內(nèi)細胞團均等分割 D．基因“敲入”豬模型所攜帶的人突變HTT基因可遺傳給后代（2022?丹東一模）靶向治療是目前治療腫瘤的有效方法之一，其原理是利用抗體等特異性物質(zhì)作為載體，將藥物送到腫瘤部位，對腫瘤進行特異性殺傷，其作用原理如圖1所示。為了生產(chǎn)能同時與藥物和腫瘤細胞抗原結(jié)合的抗體，科學家創(chuàng)造了制備雙特異性抗體的方法，過程如圖2所示。請據(jù)圖分析回答下列問題：（1）由圖1可以看出，抗體是由條肽鏈構(gòu)成的蛋白質(zhì)，細胞內(nèi)合成抗體時，其空間結(jié)構(gòu)形成的場所主要是。（2）圖2中①過程是給小鼠注射，從而獲得B淋巴細胞。（3）為選出能產(chǎn)生專一抗體的細胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出雜交瘤細胞，然后稀釋滴入多孔培養(yǎng)板中，使多孔培養(yǎng)板每孔中有個細胞，然后篩選出抗體檢測呈（填“陽性”或“陰性”）的細胞進行克隆化培養(yǎng)；該克隆化培養(yǎng)細胞具有的特點為。（4）圖中⑤過程給小鼠注射抗腫瘤藥物的目的是獲取。圖2方框內(nèi)的主要操作是。（5）與直接使用抗腫瘤藥物相比，將抗腫瘤藥物與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對人體的副作用更小，原因是雙特異性單克隆抗體能?？挤?胚胎工程（2022春?工農(nóng)區(qū)校級月考）在體細胞克隆猴培育過程中，為調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達，提高胚胎的發(fā)育率和妊娠率，研究人員將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重構(gòu)胚，同時用組蛋白脫乙酰酶抑制劑（TSA）處理，具體培育流程如圖所示。下列說法不正確的是（）A．去核時使用的梯度離心、紫外光照射和化學物質(zhì)處理等方法都沒有刺破透明帶或卵母細胞質(zhì)膜 B．卵母細胞在去核環(huán)節(jié)實際操作中被去除的不是核膜包被的細胞核，而是紡錘體﹣染色體復合物 C．組蛋白甲基化和乙酰化的表觀遺傳修飾都不利于重構(gòu)胚的分裂和發(fā)育 D．為得到遺傳背景相同的克隆猴用于科研，可用機械方法將早期胚胎切割成2份或4份后再進行胚胎移植（2022?海門市校級開學）小鼠胚胎干細胞經(jīng)定向誘導可獲得多種具有不同功能的細胞，制備流程如圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．用胰蛋白酶處理a處的細胞后可獲得分散的胚胎干細胞 B．欲提高胚胎的利用率，可用胚胎分割技術(shù)將a處細胞團均等分割 C．為獲得更多的囊胚，采用促性腺激素注射促進雄鼠產(chǎn)生更多的精子 D．a(chǎn)處的細胞與b處的細胞的核基因相同，但mRNA有差異考點3基因工程及生物技術(shù)的安全性與倫理問題基因工程的理論基礎(chǔ)外源基因在受體細胞內(nèi)表達的理論基礎(chǔ)①是控制生物性狀的遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能單位②遺傳信息的傳遞都遵循③生物界共用一套（2）基因拼接的理論基礎(chǔ)①DNA的基本組成單位都是四種②DNA分子都遵循原則③雙鏈DNA分子的空間結(jié)構(gòu)都是結(jié)構(gòu)基因工程的3種基本工具限制性內(nèi)切核酸酶（限制酶）作用：識別DNA分子的特定，并使每一條鏈中特定部位的斷開使用方法：一般用同種限制酶切割載體和目的基因DNA連接酶E·coliDNA連接酶只能連接T4DNA連接酶能連接和載體能在細胞中進行，或整合到上，隨受體DNA同步復制有一至多個限制酶具有特殊的，便于重組DNA分子的篩選熟記基因工程的四個操作步驟目的基因的篩選與獲取篩選方法：從相關(guān)的已知和清晰的基因中進行篩選獲取方法：常用特異性快速擴增目的基因基因表達載體的構(gòu)建（核心步驟）將目的基因?qū)胧荏w細胞植物：、花粉管通道法動物：（導入受精卵）微生物：處理法目的基因的檢測與鑒定分子水平：PCR等技術(shù)、抗原-抗體雜交水平：抗性、耐性實驗圖解記憶蛋白質(zhì)工程操作手段：改造或合成結(jié)果：改造蛋白質(zhì)，或制造出蛋白質(zhì)設計流程從出發(fā)→設計→推測應有的→找到并改變相對應的（基因）或→獲得所需要的蛋白質(zhì)PCR技術(shù)原理與條件含義聚合酶鏈式反應的縮寫，是一種體外對目的基因的核苷酸序列進行大量復制的技術(shù)原理條件模板DNA、2種引物、4種脫氧核苷酸（dNTP）、耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）擴增方向DNA的合成方向總是從子鏈的延伸引物使DNA聚合酶能從引物的開始連接脫氧核苷酸，是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸目的短時間內(nèi)大量擴增目的基因PCR技術(shù)的過程DNA的粗提取與鑒定原理利用DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分DNA性質(zhì)DNA不溶于，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA能溶于2mol·L-1的鑒定在一定溫度下，DNA遇會呈現(xiàn)藍色步驟研磨→過濾（取上清液）→加入體積相等的、預冷的酒精（體積分數(shù)為95%），靜置2~3min→攪拌（或離心）→取白色絲狀物（或沉淀物）→溶解→鑒定DNADNA片段的電泳鑒定原理在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的、分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)鑒定凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為的紫外線下被檢測出來注意要避免外源DNA等因素的污染治療性克隆與生殖性克隆的關(guān)系治療性克隆生殖性克隆區(qū)別目的利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細胞、組織和器官，用于醫(yī)學研究和治療利用克隆技術(shù)產(chǎn)生獨立生存的新個體，獲得人的復制品水平細胞水平個體水平聯(lián)系都屬于生殖；產(chǎn)生的新細胞、組織、器官或新個體，遺傳信息相同區(qū)分試管嬰兒和設計試管嬰兒設計試管嬰兒比試管嬰兒多出的是。試管嬰兒主要解決不孕夫婦的生育問題，設計試管嬰兒用于白血病、貧血癥等疾病的治療。兩者都是體外受精，并進行體外早期胚胎培養(yǎng)，都要經(jīng)過胚胎移植，都是有性生殖?？挤?基因工程（2021秋?如皋市月考）如圖1中的三個DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性內(nèi)切酶的識別序列與切割位點，圖2為某種基因表達載體的示意圖（載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點是唯一的）。請回答下列問題：（1）經(jīng)BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以與上述表達載體被酶切后的產(chǎn)物連接，理由是。（2）圖2中啟動子的作用是，終止子的作用是，抗生素抗性基因的作用是。（3）構(gòu)建基因表達載體時，還需要用到DNA連接酶。常見的DNA連接酶有DNA連接酶和DNA連接酶，其中能連接平末端的是DNA連接酶。（4）若某人利用圖2所示的表達載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子（如圖3）。這三種重組子中，不能在宿主細胞中表達目的基因產(chǎn)物的有，原因是。（2022春?海安市校級期中）抗體分子含有兩條短肽和兩條長肽鏈，科研人員將小鼠編碼抗體（抗禽流感病毒HA抗原）可變區(qū)的基因片段與人編碼抗體恒定區(qū)的基因片段整合，構(gòu)建圖1所示表達載體（HindⅢ等表示不同限制酶的切割位點，EcoRⅤ識別序列和切割位點是GAT↓ATC），導入中國倉鼠卵巢細胞后，篩選能夠穩(wěn)定表達的細胞株，成功獲得大量嵌合抗體（圖2）。請根據(jù)資料回答下列問題：（1）為構(gòu)建人鼠嵌合抗體基因表達載體，需要對編碼抗體不同片段的基因進行重組，為此需從分泌鼠源單克隆抗體的雜交瘤細胞中提取，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄得到用于PCR擴增，并分別與人抗體的恒定區(qū)DNA序列拼接。（2）在PCR反應體系中需加入模板、、Taq酶、引物、緩沖液等，擴增過程中高溫處理的目的是。若利用PCR技術(shù)擴增某基因片段時消耗了126個引物分子，則該過程擴增了次。（3）圖1所示表達載體中除標注出的結(jié)構(gòu)外還必須有，圖中①是識別和結(jié)合的部位。構(gòu)建該基因表達載體時，先將人抗體的長鏈、短鏈基因部分序列分別與相應鼠抗體的可變區(qū)序列整合后插入到兩個啟動子的下游，這過程需要用到多種限制酶，如獲得鼠抗體長鏈可變區(qū)基因用酶切；圖中⑤和⑥用（填“T4DNA”或“E?coliDNA”）連接酶連接。（4）將重組質(zhì)粒導入中國倉鼠卵巢細胞后，可采用技術(shù)檢驗基因是否成功轉(zhuǎn)錄。通過基因工程技術(shù)成功表達并組裝出有生物學活性的嵌合抗體，該嵌合抗體的優(yōu)點是?？挤?DNA片段的擴增及電泳鑒定（2022?遼寧開學）染色質(zhì)是由一定長度的核小體為基本單位構(gòu)成的。將大鼠肝細胞中分離出的染色質(zhì)用非特異性核酸酶水解后去除染色質(zhì)蛋白，對得到的DNA片段進行凝膠電泳，結(jié)果如圖所示。若先將染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)去掉后用同樣的非特異性核酸酶處理，則得到隨機長度的DNA片段。據(jù)此分析，下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來 B．染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)可能對DNA具有保護作用 C．構(gòu)成核小體的基本單位是脫氧核糖核苷酸 D．在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)（2022春?尖山區(qū)校級月考）如圖是將目的基因?qū)氪竽c桿菌內(nèi)制備“工程菌”的示意圖，其中引物1—4在含有目的基因的DNA上的結(jié)合位置如甲圖所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindDI在質(zhì)粒上的識別位點如乙圖所示。以下說法中錯誤的是（）A．PCR過程完成4輪循環(huán)，理論上至少需加入引物30個 B．若已經(jīng)合成了甲圖所示4種引物，應選擇引物2和3擴增目的基因 C．過程①中應使用限制酶BamHI切割質(zhì)粒 D．對于轉(zhuǎn)化失敗的大腸桿菌及其培養(yǎng)基應進行滅菌處理，以防其污染環(huán)境考法3蛋白質(zhì)工程（2022??？谀M）利用木聚糖酶進行紙漿漂白，可以大幅度減少氯化物的用量，減輕造紙工業(yè)對環(huán)境的污染。紙漿漂白需要在高溫堿性條件下進行，因此需要耐熱耐堿的木聚糖酶。根據(jù)生產(chǎn)需要，科學家對已知氨基酸序列的木聚糖酶進行改造，獲得了耐高溫耐堿的新木聚糖酶，減少了紙漿漂白時木聚糖酶的用量，提高了生產(chǎn)效率?；卮鹣铝袉栴}：（1）蛋白質(zhì)工程的目標是根據(jù)人們對的特定需求，對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進行設計改造。與蛋白質(zhì)工程相比，基因工程原則上只能生產(chǎn)，它們的結(jié)構(gòu)和功能符合特定物種生存的需要。（2）在蛋白質(zhì)工程和基因工程中常用大腸桿菌作為受體細胞，原因是大腸桿菌（答出兩點）。分離純化大腸桿菌時，可使用接種環(huán)采用法將聚集的菌種逐步分離并培養(yǎng)成單菌落；實驗室中利用選擇培養(yǎng)基篩選微生物的原理是。（3）人工合成的新木聚糖酶的基因在導入受體細胞前要先構(gòu)建，以使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。若要將重組大腸桿菌分泌的耐熱耐堿木聚糖酶應用于造紙工業(yè)生產(chǎn)，除了需要研究木聚糖酶的產(chǎn)量外，還需要檢測木聚糖酶的。（4）有研究表明，在木聚糖酶中特定部位引入精氨酸可以增加木聚糖酶中的離子鍵數(shù)目，從而增加該酶在堿性環(huán)境中的穩(wěn)定性。利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)改造木聚糖酶，其基本思路是。根據(jù)新木聚糖酶的氨基酸序列設計新木聚糖酶的基因，會設計出多種脫氧核并酸序列，原因是?？挤?生物技術(shù)的安全性和倫理問題（2013?上海模擬）根據(jù)下列2份材料回答有關(guān)生物技術(shù)的問題．2012年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎獲獎者分別是來自日本的科學家山中伸彌和來自英國的科學家約翰?格登．約翰?格登（JohnB．Gurdon）去除一只爪蟾卵細胞的細胞核，代之以取自蝌蚪的一個特殊細胞的細胞核．經(jīng)處理的卵細胞發(fā)育成一只正常的蝌蚪．數(shù)十年后其他學者后續(xù)進行的核移植實驗成功克隆出哺乳動物，因而約翰?格登被尊為“克隆教父”．2001年11月25日，美國先進細胞技術(shù)公司利用成人細胞首次克隆出人類早期胚胎，消息公布后，引起全世界的軒然大波；11月29日，中國衛(wèi)生部明確表示：中國不贊成、不支持、不接受任何克隆人實驗，贊成以治療和預防疾病為目的人類胚胎干細胞研究，但研究必須是有序的，并要在有效監(jiān)控條件下進行．（1）動物的克隆方法一般是：供體（被克隆個體）的體細胞的核+去核卵細胞→重組細胞→早期胚胎→個體“多利”的誕生采用了上述技術(shù)路線，一般認為這種生殖（繁殖）方式是生殖．b過程在離體條件下進行，除了營養(yǎng)和適宜電脈沖刺激之外，至少還需要等條件；c過程中應用了技術(shù)．（2）克隆技術(shù)的突破說明了．（3）克隆人在全世界引起軒然大波，中國衛(wèi)生部反對克隆人，原因是（多選）．A．克隆立法相對滯后B．如果克隆人早期胚胎的試驗不加控制地進行下去，克隆人終將誕生C．克隆人一旦出生，整個人倫方面觀念化的東西都被推翻，同時會帶來人種優(yōu)化、宗教混亂等社會政治問題D．克隆技術(shù)并不絕對成熟，不能保證克隆出無缺陷的人E．大力推廣克隆技術(shù)對保持生物多樣性具有重要意義Ⅱ．2006年山中伸彌首次利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將四種轉(zhuǎn)錄因子“Oct4，Sox2，c﹣Myc，Klf4”導入已分化完全的小鼠纖維母細胞中，將其重新編排變成全能性的類胚胎細胞，這些重編排的細胞被命名為“誘導多能性干細胞”，即iPS細胞．（4）近些年的研究顯示，iPS細胞可以產(chǎn)生出機體內(nèi)所有種類的細胞，由iPS細胞產(chǎn)生其他種類細胞的過程稱為．（5）目前iPS細胞在實際應用中還存在許多問題．例如有研究發(fā)現(xiàn)iPS細胞的增殖難以控制，即iPS細胞具有細胞的特征．結(jié)合山中伸彌的研究過程分析，產(chǎn)生這種變化的最可能的原因：．（2022?重慶）植物體細胞通常被誘導為愈傷組織后才能表現(xiàn)全能性。研究發(fā)現(xiàn)，愈傷組織的中層細胞是根或芽再生的源頭干細胞，其在不同條件下，通過基因的特異性表達調(diào)控生長素、細胞分裂素的作用，表現(xiàn)出不同的效應（見如表）。已知生長素的生理作用大于細胞分裂素時有利于根的再生；反之，有利于芽的再生。下列推論不合理的是（）條件基因表達產(chǎn)物和相互作用效應①WOX5維持未分化狀態(tài)②WOX5+PLT誘導出根③WOX5+ARR2，抑制ARR5誘導出芽A．WOX5失活后，中層細胞會喪失干細胞特性 B．WOX5+PLT可能有利于愈傷組織中生長素的積累 C．ARR5促進細胞分裂素積累或提高細胞對細胞分裂素的敏感性 D．體細胞中生長素和細胞分裂素的作用可能相互抑制（2022?河北）《爾雅》《四民月令》和《齊民要術(shù)》中記載，麻為雌雄異株，黑、白種子萌發(fā)分別長成雌、雄植株，其莖稈經(jīng)剝皮、加工后生產(chǎn)的纖維可用于制作織物，雄麻纖維產(chǎn)量遠高于雌麻，故“凡種麻，用白麻子”。依據(jù)上述信息推斷，下列敘述錯誤的是（）A．可從雄麻植株上取部分組織，體外培養(yǎng)產(chǎn)生大量幼苗用于生產(chǎn) B．對雄麻噴灑赤霉素可促進細胞伸長，增加纖維產(chǎn)量 C．因為雌麻纖維產(chǎn)量低，所以在生產(chǎn)中無需播種黑色種子 D．與雌雄同花植物相比，麻更便于雜交選育新品種（2022?湖北）關(guān)于白酒、啤酒和果酒的生產(chǎn)，下列敘述錯誤的是（）A．在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣 B．白酒、啤酒和果酒釀制的過程也是微生物生長繁殖的過程 C．葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶既存在于細胞質(zhì)基質(zhì)，也存在于線粒體 D．生產(chǎn)白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但發(fā)酵過程中起主要作用的都是酵母菌（2022?湖北）某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢，其原因不可能的是（）A．實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織 B．為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封 C．血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基 D．所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性（2022?湖北）滅菌、消毒、無菌操作是生物學實驗中常見的操作。下列敘述正確的是（）A．動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行 B．微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌 D．用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌（2022?山東）青霉菌處在葡萄糖濃度不足的環(huán)境中時，會通過分泌青霉素殺死細菌，以保證自身生存所需的能量供應。目前已實現(xiàn)青霉素的工業(yè)化生產(chǎn)，關(guān)于該生產(chǎn)過程，下列說法錯誤的是（）A．發(fā)酵液中的碳源不宜使用葡萄糖 B．可用深層通氣液體發(fā)酵技術(shù)提高產(chǎn)量 C．選育出的高產(chǎn)菌株經(jīng)擴大培養(yǎng)后才可接種到發(fā)酵罐中 D．青霉素具有殺菌作用，因此發(fā)酵罐不需嚴格滅菌（2022?山東）關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗，下列說法錯誤的是（）A．過濾液沉淀過程在4℃冰箱中進行是為了防止DNA降解 B．離心研磨液是為了加速DNA的沉淀 C．在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍色 D．粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)（2022?山東）如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（）A．雙抗可同時與2種抗原結(jié)合 B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞 C．篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原 D．同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細胞（多選）（2022?山東）啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中，大麥經(jīng)發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒等工序后，最終過濾、調(diào)節(jié)、分裝。下列說法正確的是（）A．用赤霉素處理大麥，可使大麥種子無須發(fā)芽就能產(chǎn)生α﹣淀粉酶 B．焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子胚并進行滅菌 C．糖漿經(jīng)蒸煮、冷卻后需接種酵母菌進行發(fā)酵 D．通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)可減少啤酒酵母雙乙酰的生成，縮短啤酒的發(fā)酵周期（2022?重慶）改良水稻的株高和產(chǎn)量性狀是實現(xiàn)袁隆平先生“禾下乘涼夢”的一種可能途徑。研究人員克隆了可顯著增高和增產(chǎn)的eui基因，并開展了相關(guān)探索。（1）花藥培養(yǎng)能縮短育種年限，原因是。在步驟Ⅰ的花藥培養(yǎng)過程中，可產(chǎn)生單倍體愈傷組織，將其培養(yǎng)于含的培養(yǎng)基上，可促進產(chǎn)生二倍體愈傷組織。Ⅰ中能用于制造人工種子的材料是