
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文檔簡介
目錄
刖目.................Z
實習一法醫(yī)病理學鑒定書的書寫..........................3
實習二法醫(yī)病理學尸體解剖術(shù)式..........................8
實習三法醫(yī)病理學組織切片制作及染色..................11
實習四尸體現(xiàn)象......................................27
實習五機械性損傷1...................................................................29
實習六機械性損傷2...................................................................31
實習七顱腦損傷......................................34
實習八損傷案例(一)................................36
實習九損傷案例(二)................................44
實習十機械性窒息....................................54
實習十一溺死實驗和硅藻檢查..........................56
實習十二高低溫損傷、電流損傷........................58
實習十三電擊傷......................................62
實習十四猝死(一)....................................63
實習十五猝死(二)....................................68
實習十六猝死(三)..................................70
實習十七醫(yī)療糾紛與醫(yī)療事故..........................88
4—
刖百
法醫(yī)病理學是運用病理學等相關(guān)醫(yī)學學科的理論和技術(shù),研究涉及法律
上有關(guān)的傷、殘、病、死的變化及發(fā)展的一門科學,以期為暴力性案件的偵
查或?qū)徟刑峁┽t(yī)學科學證據(jù)。其中心任務(wù)是鑒定死亡原因、死亡方式、死亡
時間、損傷時間、推斷致傷物、個人識別、損傷與疾病的關(guān)系等等。因此它
是法醫(yī)學的重要學科。
本實習手冊旨在為法醫(yī)學專業(yè)學生和從事法醫(yī)病理學專業(yè)的法醫(yī)工作
者,更好地學習和掌握法醫(yī)病理學而編寫。使他們加深理解和掌握法醫(yī)病理
學的理論內(nèi)容,提高實踐能力,從而提高我們法醫(yī)病理學的教學質(zhì)量。因此
要求他們較熟練地掌握各種解剖術(shù)式,進行法醫(yī)尸體剖驗,掌握H.E染色切
片制作過程及對一般的病理組織切片進行觀察、診斷、正確的分析并得出科
學結(jié)論。為將來的法醫(yī)工作打下良好的基礎(chǔ)。
實習手冊包括法醫(yī)病理學理論教學中的主要內(nèi)容,以補充和增加同學們
的實踐能力,提高觀察法醫(yī)病理組織切片的水平,解決理論上不能解決的問
題。
該實習手冊是在理論知識結(jié)合檢案積累,同時借鑒其他院校的教學經(jīng)驗
的基礎(chǔ)上由法醫(yī)學專業(yè)教師為實驗教學而編寫,內(nèi)容有不足之處,請予以指
教。
2
實習一法醫(yī)病理學鑒定書的書寫
一、目的要求
1.了解鑒定書內(nèi)容,記錄方法和正規(guī)格式。
2.掌握鑒定書書寫規(guī)則。
二、實習內(nèi)容
一、鑒定書內(nèi)容和格式
1.鑒定書內(nèi)容
根據(jù)《刑事訴訟法》第八十九條之規(guī)定:“鑒定人進行鑒定后,應(yīng)當寫出
鑒定結(jié)論,并簽名",法醫(yī)學鑒定人將政法或衛(wèi)生機關(guān)交驗的案件或病志等書
面材料、活體或尸體及其他人體物證檢材進行科學地檢查、鑒定后,根據(jù)檢
查鑒定的經(jīng)過和結(jié)果所撰寫成的書面報告稱為法醫(yī)學鑒定書。隨著法醫(yī)學的
不斷發(fā)展,已逐漸形成了不同的分支學科,如法醫(yī)病理學、法醫(yī)血清學、法
醫(yī)臨床學、法醫(yī)人類學、法醫(yī)毒理學、法醫(yī)化學、法醫(yī)精神病學等。雖然鑒
定書格式無明確規(guī)定,但不同的法醫(yī)學分支學科的鑒定書書寫都具有各自的
某些特點。一般法醫(yī)學鑒定書的內(nèi)容大致包括引言、鑒定事項、案情、檢驗、
說明、鑒定結(jié)論及結(jié)尾六部分。其中各部分所要求的內(nèi)容已在《法醫(yī)學概論》
中論述,這里不再贅述。
法醫(yī)病理學鑒定書的書寫除按照上述基本規(guī)則外,尚有其本身的特殊內(nèi)
容,通常采取下列具體的書寫形式及內(nèi)容:
引言
主要包括委托機關(guān)名稱、委托者姓名、委托時間、被檢者的姓名、性別、
年齡、職業(yè)、住址以及鑒定事項、解剖地點、時間、臨場者姓名、參加者姓
3
名等等。
X年X月X日,XX單位XX同志就XXX(性別、年齡、工作單位)
死亡一事,委托我室對下列事項進行法醫(yī)病理學鑒定。
鑒定事項
1.外傷的部位、數(shù)量、程度。
2.死亡原因、外傷與死因的關(guān)系。
3.致傷物的性質(zhì)、種類。
4.死亡性質(zhì)及死亡方式。
5.死后經(jīng)過時間、損傷時間。
6.其它需要鑒定的問題。
為此,我等于X年X月X日X時,在委托單位代表XXX同志及家屬代
表XXX同志臨場下,在XX法醫(yī)解剖室(或其它地點)對XXX尸體進行
了系統(tǒng)法醫(yī)學尸體剖驗,并經(jīng)詳細病理組織學撿查(或/和其它檢查)制成此
鑒定書。
案情摘要
摘錄主要的發(fā)案經(jīng)過和有關(guān)的調(diào)查材料(如病志、訊問筆錄等)。
尸體剖驗
(一)體表檢查
1.一般所見性別,身長,體重,發(fā)育,營養(yǎng)狀態(tài),尸斑分布、顏色及
期別,尸僵分布及程度,尸體溫度等。
2.頭面部發(fā)長、顏色、數(shù)量,頭發(fā)上有無附著物。頭皮有無損傷,觸
及顱骨有無骨折。面部有無腫脹、發(fā)納、出血及損傷。眼瞼有無水腫及皮下
出血,結(jié)膜是否充血及出血,鞏膜有無黃染,角膜混濁程度及瞳孔大小,是
否等圓。鼻根是否偏位、塌陷,鼻腔及外耳道有無分泌物或血液,鼻孔周圍
4
有無泡沫及壓痕,口唇有無紫緝、損傷、干燥,口角及下頜皮膚有無流注及
腐蝕痕,齒齦有無破損。牙齒是否完整,有無松動,舌是否有咬痕及舌的位
置。
3.頸項部氣管是否居中,甲狀腺有無腫大,頸部有無損傷、扼痕、索
溝、壓痕。
4.胸部胸廓前后徑及左右徑,胸廓外形有無病理性改變、有無注射針
眼、損傷;肋骨觸摸有無骨折。女性乳房有無腫塊及咬傷。
5.腹部是否平坦,腹壁有無靜脈怒張、損傷及疤痕。
6.會陰及肛門陰囊、睪丸有否損傷,陰囊干燥情況。女性外生殖器有
無血痕、精液等附著,前庭有無損傷。陰道內(nèi)有無異物,分泌物涂片有否精
子,懷疑強奸案時,處女膜檢查情況。肛門內(nèi)有無異物。
7.驅(qū)干及四肢軀干有無壓迫印痕、皮下出血。脊柱有無骨折或畸形。
腰舐部有無褥瘡、臀部有無注射針眼。上、下肢的姿態(tài),有無骨折、關(guān)節(jié)脫
位。肢體有無損傷,是否有注射針痕。手指甲內(nèi)有無異物。手中是否抓有物
體或附著有異物。女尸大腿內(nèi)側(cè)有無損傷及精斑附著。
(-)內(nèi)部檢查
I.小腦扁桃體疝檢查環(huán)椎后弓切除后,硬腦膜緊張程度;蛛網(wǎng)膜是否
透明、腦脊液性狀,小腦扁桃體是否疝下枕骨大孔后緣。如疝下,疝出的程
度。是否有疝下小腦扁桃體組織碎片墜入脊髓腔、分布情況等。
2.頭皮內(nèi)、雙側(cè)潁肌、顱骨、顱底、硬腦膜等的狀況。
3.腦及脊髓腦重量,有無腫脹,表面有無出血,沖擊傷及對沖傷等,
大腦各切面所見情況,有無出血,中間性腦挫傷等。脊髓有無出血損傷、軟
化壞死等。
4.胸腹腔所見各臟器位置、有無粘連、有無積血或積液,積液或積血
的量,腹膜是否光滑等。
5
5.胸腺重量,實質(zhì)殘存情況,切面所見。
6.心包腔及心臟心包膜完整性、心包腔內(nèi)是否有積液或積血.、量多少。
心臟重量、形狀,心臟有無貫通傷,心外膜性狀,外膜下有無出血點,冠狀
動脈各主要分支情況,心臟各室壁厚度、各瓣膜周長,有無發(fā)育異?;虿±?/p>
改變,室壁及室間隔切面有無梗死或挫傷所見,內(nèi)膜透視度,有無增厚,內(nèi)
膜下有無出血。左右冠狀竇口是否通暢,阻塞程度,主動脈及冠狀動脈是否
有粥樣硬化,程度如何。
7.肺臟及氣管氣管內(nèi)有無異物、出血及分泌物或胃內(nèi)容,粘膜充血程
度或出血等。肺臟左右各自重量、大小、是否有充血、水腫,支氣管內(nèi)情況、
切面有無出血、梗死灶及切面顏色。
8.頸部甲狀腺、各層肌肉有無受壓、出血,淋巴結(jié)大小,頸靜脈,動
脈檢查所見,甲狀軟骨及舌骨檢查情況。甲狀腺重量、大小,是否有結(jié)節(jié)、
被膜情況、切面所見。
9.脾臟重量、大小、顏色、被膜是否光滑,有無皺縮、切面顏色,紅
白髓界線是否清楚,被膜下有無梗死灶。
10.腎臟左右腎臟各自重量、大小,腎表面性狀、顏色、被膜是否易
剝離,切面性狀、顏色、皮髓質(zhì)界線是否清楚、是否充血、水腫、皮質(zhì)厚度,
腎盂粘膜是否充血.、水腫及炎性物。
11.腎上腺雙側(cè)腎上腺重量、大小、被膜及表面性狀、切面皮質(zhì)及髓質(zhì)
有無增生、萎縮或出血等。
12.胃表面檢查所見,胃內(nèi)容物性狀及量,胃粘膜改變情況。
13.腸包括十二指腸、空腸、回腸及結(jié)腸、各段腸管表面性狀,內(nèi)容
物性狀及粘膜的檢查所見。
14.肝臟重量、大小,邊緣是否銳利還是圓鈍,被膜色澤,是否有挫
傷、出血、破裂,肝質(zhì)地硬度,切面顏色,肝小葉是否清晰,是否有出血、
6
硬化性改變。膽囊及膽管內(nèi)是否有結(jié)石、炎癥等改變。
15.胰腺重量及長度,胰腺被膜是否光滑,有否出血,頭、體、尾各
段切面是否有出血及范圍。
16.子宮及附件(或睪丸)根據(jù)不同的情況進行相應(yīng)的描述。
(三)組織學檢查
通過常規(guī)取材,制片染色(H.E染色)后,進行顯微鏡觀察,對鏡下所見
加以客觀、詳細地描述。必要時可補充進行特殊染色、酶組織化學染色、兔
疫組織化學染色,并進行相應(yīng)的觀察和描述。
四、主要所見和診斷
根據(jù)尸體剖驗的體表檢查、內(nèi)部檢查及顯微鏡觀察所見,重點將有意義
的發(fā)現(xiàn)分條目加以概括總結(jié)。
在某些案例的鑒定中還需要進行毒物檢測及血清學檢查,這些檢查的結(jié)
果及所用檢查方法也需在鑒定書中敘述。
說明分析討論
根據(jù)檢驗的結(jié)果,結(jié)合案情材料和現(xiàn)場檢驗,對案件性質(zhì)、死亡原因、
死亡方式、死亡時間、損傷特征及成傷原因等詳細分析說明,以解答所委托
的鑒定事項,或鑒定人認為有必要說明的事項。此部分相當于科研論文的討
論部分,表明鑒定人的意見、思維方法和總結(jié)能力,一般不能省略。
鑒定結(jié)論
根據(jù)檢驗的結(jié)果和說明理由,對所委托的鑒定事項作出嚴格并有科學根
據(jù)的結(jié)論,結(jié)論應(yīng)簡明扼要。
鑒定人單位名稱、職稱、學位
鑒定人簽名、印章鑒定日期
7
實習二法醫(yī)病理學尸體解剖術(shù)式
一、目的要求
1.掌握尸體解剖術(shù)式、臟器取出及剖開方法。
2.了解正確的描述和記錄方法。
3.熟悉解剖室的設(shè)備、常用器械及其使用方法。
4.了解寰椎后弓切除術(shù)操作方法。
二、實習內(nèi)容
1.學習法醫(yī)學尸體檢驗技術(shù)
尸體檢查及剖驗是法醫(yī)病理學工作中一項重要的內(nèi)容,法醫(yī)學尸體剖驗
與殷病理學尸體剖驗有相似之處,但其本身還具有特殊性,法醫(yī)學尸體剖
驗的目的除確定死亡原因外,很多情況下還需要確定死亡方式、死亡時間,
推斷致傷物乃至進行個人識別,這是一般病理學尸體剖驗所不涉及的問題。
由于兩者需要解決的問題差異,決定了法醫(yī)學尸體剖驗技術(shù)也具有相應(yīng)的特
點。具體的法醫(yī)學尸體剖驗技術(shù)詳見《法醫(yī)病理學》中相應(yīng)章節(jié)法醫(yī)學尸體
檢驗內(nèi)容。在學習掌握本章內(nèi)容的基礎(chǔ)上進步通過解剖例示教及參加尸體
剖驗工作熟練操作技能。
檢驗尸體時應(yīng)注意以下事項:
(1)了解案情尸體解剖前首先應(yīng)向有關(guān)公檢法人員了解案情,如果因
醫(yī)療糾紛進行尸檢,應(yīng)分別向死者家屬、醫(yī)院的主管醫(yī)生及護士等詳細了解
死者的病情及診治過程。
(2)全面收集有關(guān)資料從接受任務(wù)到尸檢結(jié)束,應(yīng)收集案件的卷宗,
調(diào)查材料,或病志、各種臨床檢查材料,并進行登記、筆錄、繪制簡圖、攝
影等工作。登記內(nèi)容包括編號、死者姓名、年齡、性別、籍貫、職業(yè)、工作
單位、發(fā)現(xiàn)尸體的地點和時間、案情經(jīng)過,要求鑒定及檢驗的事項,委托單
8
位及人員姓名等。
(3)檢驗及尸體剖驗系統(tǒng)化、記錄規(guī)范化并全面系統(tǒng)地進行尸體檢查,
對體表的各種損傷均需逐?檢查。尸體解剖應(yīng)全面,一般進行“三腔”包括
顱腔、胸腔、腹腔均應(yīng)剖開檢查,如特殊情況需要打開脊髓腔檢查,切忌進
行“局部解剖”。否則可能遺漏重要所見。
檢查記錄要規(guī)范,如對創(chuàng)口的檢驗,不但要記錄解剖位置,測量大小,
描述創(chuàng)口及周圍皮膚、組織的改變,還要對創(chuàng)的各部分特征詳細描述、記錄,
并按檢查順序?qū)p傷編號。記錄用語應(yīng)確切,簡明扼要。如需要進一步檢查、
化驗,應(yīng)按量提取組織器官及體液等檢材;取材的部位要有代表性,各個器
它不能遺漏。其大小、厚薄及固定或分析方法,按要求進行。
(4)攝影工作應(yīng)在現(xiàn)場對尸體的姿勢、外貌、衣服、損傷等攝影取證。
尸體剖驗時對各種檢查所見也應(yīng)予以充分顯露和拍照,拍攝時應(yīng)標記編號及
比例尺。
2.尸體解剖示教
仔細聽取教師對法醫(yī)學尸體檢查及剖驗的講解并認真觀察檢驗步驟及操
作方法。
3.熟悉解剖室的設(shè)備、常用器械及使用方法
現(xiàn)代化法醫(yī)病理解剖室應(yīng)具備的設(shè)施及設(shè)備包括充分的照明、通風、消
毒、上下水設(shè)施、自動升降式解剖臺、尸體秤、臟器秤、火線檢查及照像設(shè)
備、自動電吸引器、閉路電視攝像系統(tǒng)、尸體冷藏冷凍庫、常用解剖器材(如
電動開顱鋸及各種外科手術(shù)器械)等。
4.寰椎后弓切除術(shù)式檢查枕骨大孔疝
枕骨大孔疝是危及人體生命的嚴重病理損害,也是研究顱腦病變和損傷
及腦死亡的不容遺漏或忽視的重要所見。經(jīng)大量的法醫(yī)病理尸體剖驗表明,
采用傳統(tǒng)的尸體剖驗術(shù)式,即將大、小腦及腦干聯(lián)合取出通過觀察小腦扁桃
9
壓跡來判斷是否有小腦扁桃體疝的檢查方法還有許多不足之處,如尸體本身
個體差異,檢查者判定的誤差等。為使枕骨大孔疝及其病變在原位即可顯露
清楚.檢查即時、準確,防止人為改變和破壞,采用寰椎后弓切除術(shù)這一術(shù)
式,既能準確及時地查明腦疝的有無以及病變所見,還能有效防止諸多人為
現(xiàn)象。
寰椎后弓切除術(shù)式
1.開顱前,先使尸體俯臥位,在胸部下放一木枕,使項部伸展以便于操
作。
2.沿雙側(cè)顆骨乳突及其間的后發(fā)際作頭皮及皮下軟組織切口,深達骨膜。
3.再取此切口的中點,自枕骨粗隆起始沿背部正中線上的棘突作縱行切
開,也深達骨膜,必要時此切口沿棘突延至舐部。
4.緊貼枕骨、寰椎后弓、各棘突及兩側(cè)椎板骨膜剝離軟組織(肌肉、肌
腱等),充分顯露枕骨大孔下緣寰椎后弓及其下位椎弓等。
5.切除寰椎后弓(用咬骨鉗先咬斷此兩側(cè)薄弱部分,再用手術(shù)刀摘出后
弓),先查枕骨大孔硬脊膜緊張程度、有無出血等病變和損傷,再小心地沿枕
骨大孔下緣及硬脊膜背側(cè)正中線切開硬脊膜,觀察硬脊膜下并透過蛛網(wǎng)膜觀
察蛛網(wǎng)膜下腔等有無病變和異常,尤其詳查枕骨大孔疝(小腦扁桃體疝、小
腦扁桃延髓疝)以及腦疝程度,是否伴有軟化、出血。碎斷腦組織墜入椎管
或植入有髓(須取材制片鏡檢)。
6.在檢查枕骨大孔疝的同時或之后,也須詳查椎管和脊髓,尤其須注意
檢查第?、二頸髓以及相鄰的神經(jīng)、血管有無軟化、出血等病變或異常。
其他臟器的剖開術(shù)及取出方法詳見《法醫(yī)病理學》教科書。
作業(yè)
針對一次解剖,寫出操作過程及解剖所見,并初步分析死因。
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實習三法醫(yī)病理學組織切片制作及染色
目的要求
要求每位同學能夠掌握取材、固定、水洗、脫水、透明、浸蠟與包埋,
切片制作等技術(shù)及操作過程。獨立完成實驗室的整個切片的制作過程。
一、取材
(-)要求取材是否正確、恰當直接影響切片的制作及正確診斷。
1.取材越快,越新鮮越好,防止組織腐敗。
2.取材刀要鋒利,切取時刀口垂直地切取,嚴禁擠壓或用鉗鑲鉗夾,以
免使組織或細胞變形造成人為的損傷。
3.取材大小,一般長1cm?材m,寬lcm~2cm,厚度為0.3cm?0.5cm。
材料過大在短時間內(nèi)不易固定透,影響效果。
(二)方法
以下各器官的取材方法為一般性原則,具體器官的取材部位、數(shù)量等還
要根據(jù)具體案例的檢查要求而定。
1.實質(zhì)器官
心臟:一般情況下要求取心房、瓣膜、心室。也可分別取一塊病變部位
帶正常組織。也可單獨取心室肌、乳頭肌。
肺臟:常規(guī)取材應(yīng)包括左右兩肺(五個肺葉),可根據(jù)病變需要決定取材塊
數(shù),特殊情況下為區(qū)別在哪個肺葉上取的檢材.可用形狀做標志并做好記錄。
腎臟:取材包括被膜、皮質(zhì)、髓質(zhì)和腎孟,并要求區(qū)別左右腎。
胰腺:常規(guī)取胰體部,為長方形,必要時加取胰頭、胰尾。
肝臟:取長方形或三角形均可,帶被膜。
脾臟:取材帶被膜。
11
2.管腔臟器取材時注意方向,如取大腸、小腸時,應(yīng)考慮環(huán)行皺嬖,
沿腸管的長軸取(縱切)。食管、氣管以橫切面為宜。胃常規(guī)取材以胃底為好,
總之管腔臟器的全層構(gòu)造都要取到。為了防止材料放入固定液后變形,將材
料取下后(如剪開的大小腸、胃等組織)應(yīng)將漿膜面鋪在濾紙上,然后入固
定液內(nèi),這樣能防止或減少組織受壓變形與收縮。
3.病變部位與正常部位都要兼顧
腦取材應(yīng)能反映出腦各部位的變化,大腦取材一般用冠狀切面法,包括
全腦(橋腦、延髓、小腦)、脊髓頸段及脈絡(luò)從,共十一塊。取材部位與形狀
如下:
(1)額極;(2)中央前后回;(3)海馬;(4)內(nèi)囊;(5)丘腦;(6)枕
葉;(7)脈絡(luò)叢;(8)橋腦;(9)延髓;(10)中腦;(11)小腦。必要時取脊
髓。取材時要帶上軟腦膜、腦室膜或軟脊膜,因此刀要鋒利。
取垂體時注意前、中、后葉和垂體柄都要兼顧,從前向后橫切。
二、固定
(-)意義固定為組織切片制作的第二步驟,是做好切片的重要步驟
之一,如果首次組織固定不良,再重新固定也不如一次固定效果好。
實驗時處死動物后應(yīng)立即取材,這時組織及細胞短時間內(nèi)仍然處于生前
狀態(tài),這就是“生命狀態(tài)”。迅速將其固定就能有效地防止組織及細胞發(fā)生死
后的?系列變化。固定的關(guān)鍵在于取材后盡可能地及時地將所取的材料進行
固定,以防止其“死后”變化的進展。盡量使組織接近于生前狀態(tài),另外在
標本制作過程中還要經(jīng)過許多步驟,為了防止組織結(jié)構(gòu)及成份的破壞和溶解
消失,有必要使其轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì)從而有利于保存,這就是固定的基本意
義。
固定的目的:
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1.阻止死后變化,防止組織的自溶與腐敗。
2.使組織的結(jié)構(gòu)及成份保存下來,如蛋白質(zhì)、脂肪、糖原、酶等各種成
份與生活時的形態(tài)相仿。
3.便于染色,同時對組織有媒染作用,使不同的組織成份對染料有不同
的親和力,使細胞各部易于著色。
4.能使組織硬化,為制作薄切片奠定基礎(chǔ)。
注意:材料塊不能過大,固定器皿不易過小,固定液量不易過少,應(yīng)是
固定材料體積的20—30倍。
根據(jù)檢驗?zāi)康牟煌x擇不同固定液,如做糖原檢查就不能用含水的固定
液,做電鏡檢查必須用鉞酸固定液等。
(-)固定液
用以固定組織的藥劑稱為固定液。
固定液分為兩大類:一類稱單純固定液,由一種藥劑組成;另一類稱混
合固定液(或復(fù)合),固定液由二種以上的藥劑組成,如Zenker等固定液。
1.固定液選擇標準
①具有強的穿透力,固定均勻,能迅速滲透到組織內(nèi)部使組織細胞結(jié)構(gòu)
保持生活時期的相仿狀態(tài)。
②不使組織過度收縮與膨脹而變形。
③能迅速使組織中的蛋白質(zhì)、糖、脂肪等物質(zhì)凝固而成為不溶性物質(zhì)。
④使組織達到一定的硬度便于切片制作。
⑤價格便宜,容易買到,同時要配制方便。
2.單純固定液
乙醇(酒精)(alcohol)>福爾馬林(formalin)
重銘■酸鉀(potassiumbichromate)、苦味酸(picricacid)
餓酸(osmicacid)>丙酮(acetone)、冰醋酸(glacialaceticacid)
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(1)乙醇(酒精)(alcohol)
是一種還原劑,不能與氧化劑混合使用,酒精容易購買到,固定用酒精
最好濃度在70%?80%,酒精濃度愈大組織收縮愈嚴重,反之,太低則起不
到固定作用,由于酒精能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白,而后者的沉淀物易
溶于水,所以用酒精固定的標本細胞核著色不佳,另外,酒精還可溶解脂肪、
血紅蛋白和多種色素。
脂肪組織易溶于酒精及二甲苯等有機溶劑,因此做脂肪染色必須制作冰
凍切片。
酒精優(yōu)點:
①使用方便經(jīng)濟;
②市售有兩種:一種是95%濃度,另一種稱無水乙醇為100%;
③能硬化組織起固定作用;
④也是一種最常用的脫水劑。
缺點:穿透力小,由于被固定的組織表面硬化,固定液不容易滲透到組
織中去,所以用乙醇固定的組織材料要小。另外,使組織收縮嚴重,且染色
效果一般。
(2)甲醛(福爾馬林)(formalin)
是一種還原劑,不能與氧化劑混合使用。它是一種最常用的固定液,可
應(yīng)用于組織學、酶組織化學、免疫組織化學等染色,最好臨用時現(xiàn)配。是一
種無色透明極易揮發(fā)有強烈刺激性氣味的液體。商品甲醛為37%?40%甲醛
水溶液,一般固定液的濃度為4%?8%,習慣上稱為10%或20%的福爾馬林。
此液可按前述取材大小在常溫下固定24h?48h。若需要快速固定,可加溫到
70℃?80℃或者加溫煮沸l(wèi)Omin即可達到固定要求,這種快速固定組織塊不
宜過厚或過大。缺點是組織收縮較嚴重。
配法:將商品甲醛1份與9份自來水混合即為10%(4%)濃度的甲醛固定
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液。
優(yōu)點:①滲透力較強;②組織收縮??;③細胞核染色較好。
缺點:一般質(zhì)量較差的formalin在低溫下久存容易產(chǎn)生一種白色的沉淀
物稱“三聚甲醛”即“付醛",經(jīng)氧化成為甲酸而使溶液呈酸性,可影響細胞
核的嗜堿性染色,糾正辦法是可在備用甲醛溶液中放入適量的碳酸鈣或碳酸
鎂。簡便的辦法可在溶液中投入適量的大理石或者白色粉筆作為中和劑。另
外,酸性福爾馬林固定的組織多易產(chǎn)生一種褐色或黑色細顆粒狀物,稱為福
爾馬林色素,在切片上見到的是黑色小顆粒。這種色素顆粒既不溶于水也不
溶于酒精,影響染色效果和切片的觀察。
除掉福爾馬林色素顆粒的辦法:
①Schridde法
25%氨水1ml
75%酒精200ml
切片脫蠟經(jīng)70%酒精時,用上液浸泡半小時或稍長一些時間,然后水洗
再行染色。
②Verocay氏法
1%氫氧化鉀水溶液1ml
70%酒精100ml
切片脫蠟經(jīng)80%酒精時入上液處理10分鐘.經(jīng)70%酒精入水后即可染
色。
(3)鑲酸(osmicacid),亦名四氧化鉞
鉞酸并不是酸,實際上是一種金屬氧化物,為淡黃色結(jié)晶,價格昂貴,
其水溶液呈中性反應(yīng),只適用于特殊染色前的組織固定,如制作電鏡切片前
的組織固定。鉞酸為強氧化劑不可與酒精及甲醛混用,鉞酸極易揮發(fā),氣味
有強烈的刺激性和固定作用,使用時必須十分小心,要有防護措施。
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特點:固定的組織必須小而薄,其主要優(yōu)點是能將組織固定與生活時期
相仿,鉞酸為脂肪及類脂質(zhì)的優(yōu)良固定劑,特別對顯示線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有良
好的效果。
(4)丙酮(acetone)
丙酮能使蛋白質(zhì)沉淀,其滲透力強,可使組織嚴重收縮,對核的固定欠
佳,目前在組織化學中,特別是酶的保存方面多采用冷丙酮固定法,主要用
于磷酸酶及氧化酶染色前的組織固定,有時也用于混合固定液中。
3.常用混合固定液
種類很多,根據(jù)檢查目的不同可選擇不同的固定液,現(xiàn)介紹常用的混合
固定液。
(1)Zenker固定液
重鋁酸鉀2.5g
升汞5g
蒸餌水100ml
冰醋酸5m1(臨用時加入)
配法:首先將重銘酸鉀、升汞和蒸儲水混合后加溫溶解,冷卻后過濾,
置于棕色玻璃瓶中避光保存,這種配制的液體一般稱為Zenker干液,也叫做
儲存液或底液,此液較為穩(wěn)定,即使配制一至二年后仍有固定作用,待組織
取材時在Zenker干液100ml中加入5ml冰醋酸即可使用,但加入冰醋酸后必
須立即使用,否則失去固定作用。
特點:對細胞核、胞漿染色均較清晰,也較穩(wěn)定,對肌組織及結(jié)締組織
染色效果好,材料厚度不超過2毫米,固定3-4小時即可,一般固定為12-24
小時,必須經(jīng)流水洗12-24小時后再經(jīng)酒精脫水。
(2)Camoy固定液
純酒精(或者95%)6份
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氯仿3份
冰醋酸1份
此液穿透速度快,小塊組織固定1-2小時即可,可固定細胞漿及糖原。冰
醋酸對染色質(zhì)有固定作用,同時能抵消由于酒精引起的組織過度收縮與硬化,
為了減少組織的收縮可采用冷Carnoy固定液。
低溫固定時,Carnoy固定液隨組織一起放置冰箱中固定,一般固定組織
時間以不超過12h-18h為好,經(jīng)此液固定的組織可直接入95%或者100%酒精
脫水,現(xiàn)用現(xiàn)配為佳。它既可用于?般組織學固定,乂為組織化學常用固定
劑,特別是用于糖原及脫氧核糖核酸(DNA)及核糖核酸(RNA)的固定。
三、水洗
用流水洗滌,目的是將組織塊中的固定液取代出來。水洗時間數(shù)小時至
24小時。根據(jù)材料多少、大小可靈活掌握水洗工具,可用水洗筐或用紗布包
裹均可,應(yīng)防止水流過大將組織塊沖掉或丟失。
四、脫水
組織塊固定后雖然已經(jīng)硬化,但達不到切薄片的硬度,必須進行除固定
液以外的其它處理,脫水是繼固定后的重要步驟。
經(jīng)固定和水洗后的組織含大量水分,在這種情況下首先必須除去組織內(nèi)
部的水分,這種除水的過程叫做脫水,脫水使用的藥劑稱為脫水劑。
脫水必須逐漸依次從低濃度酒精開始到高濃度酒精,否則會引起組織強
烈收縮變脆不利制片,但脫水不徹底也很難浸蠟。
常用脫水劑:酒精、丙酮、正丁醇等。
(-)酒精
一般是從70%酒精開始,80%-*90%-*95%->100%1-100%11,每步驟
脫水時間根據(jù)材料大小而靈活掌握,一般數(shù)小時到12小時更換一次酒精。
無水乙醇也用來配低濃度酒精,但價格較貴??捎檬惺?5%酒精配成,
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如70%酒精時取95%酒精70ml加蒸儲水25ml至95ml;80%酒精取95%酒
精80ml加蒸鐳水至95ml即可,依次類推。
(二)丙酮
脫水作用與酒精相似,雖其脫水作用比酒精強,但可引起組織塊的收縮,
價錢較貴,故不宜用于一般組織脫水,它既有脫水作用又有透明作用,用丙
酮固定的材料要少脫水1-8小時即可。
五、透明
組織塊脫水后需要透明,因為水與蠟不能相交換,需要借助石蠟誘導(dǎo)劑
的過度。石蠟誘導(dǎo)劑滲入之后組織塊往往呈現(xiàn)透明狀態(tài),習慣上將石蠟誘導(dǎo)
劑滲入組織內(nèi)的過程叫透明,而這種藥劑稱為透明劑。
透明的時間依組織塊的大小而定,一般采用20分鐘至1小時左右,如組
織塊過大可延長透明時間,透明好的材料如同油炸的感覺呈透明狀,最常用
的透明劑為二甲苯、氯仿、甲苯、香柏油等。
二甲苯:是無色透明的一種有機溶媒,有很強的刺激氣味,易揮發(fā),長
期接觸對粘膜有刺激作用,對組織的透明作用很強,可使組織收縮變形,故
透明時間不宜過長。如遇到組織塊內(nèi)部或某個部位呈白色混濁狀態(tài)時說明
脫水不徹底,如果造成透明不徹底應(yīng)退回到100%酒精中重新透明。
六、浸蠟與包理
浸蠟的目的是為了能制作薄切片做準備,將透明好的組織塊浸到融化的
石蠟中,使石蠟滲透到組織細胞內(nèi),將組織細胞內(nèi)的二甲苯完全徹底地取代
出來,然后再用石蠟將組織包埋起來,冷卻后,切成小塊,修整好切面,再
用切片機制作薄的切片,這一過程稱為浸蠟與包埋。
具體操作:
(-)浸蠟
將石蠟箱溫調(diào)至58℃?60℃左右,內(nèi)有標明I、II、HI等字樣的蠟杯或蠟
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缸,組織塊從透明的二甲苯II取出之后,本身就帶有二甲苯,這時放入I號
蠟杯中2?3小時左右,再將組織塊移入II號蠟杯(純蠟)2h?4h,后再移入
W號蠟杯中(純蠟)半天或者稍降蠟箱溫度過夜,最后用融化的純蠟作為包
埋用的蠟。注意浸蠟時蠟杯不要顛倒順序使用,以免脫二甲苯不徹底。如遇
特殊情況需要延長浸蠟時間時可降低蠟箱溫度或關(guān)閉蠟箱,需要時再開。溫
度越高,時間越長組織塊收縮越嚴重,而且材料脆而不易制作切片二
(-)包埋
包埋的方法有多種,最常用的是石蠟包埋法,此外還有火棉膠包埋法,
炭蠟包埋法、明膠包埋法及環(huán)氧樹脂包埋法(電鏡用)等。
包埋用純石蠟溶解后(60℃)倒入包埋框內(nèi)或者用紙盒代替也可,迅速
將浸好的組織塊依次擺入框內(nèi),待蠟逐漸冷卻凝固后,將組織材料一并凝結(jié)
在石蠟內(nèi)。然后按組織塊大小切成蠟塊,組織四周蠟邊留0.1厘米左右即可。
包埋時組織塊的切面向下、放平,如果操作不熟練或在冬天包埋時最好用酒
精燈。在材料包入石蠟之前,稍在酒精燈上過一下(稍加一下溫),以免材料
與包埋蠟溫度不符造成材料與包埋蠟有一痕跡,切片時產(chǎn)生分離現(xiàn)象。蠟塊
背面要標記年號、例號等字樣的紙片,以長期保存。切完的蠟塊表面要用燙
片板。燙一下封閉材料面,隔離空氣接觸可長期保存材料不干。
(三)蠟的種類
有兩類:
1.蜂蠟:由動物體內(nèi)提取的蠟,顏色微黃故也稱為黃蠟,熔點在54℃左
右。特點是潤滑帶有粘性,冬天用量比夏天多。
2.石蠟:由礦物質(zhì)中提取,質(zhì)地較疏松,色白。根據(jù)蠟的熔點不同又可
分為軟蠟及硬蠟。
熔點在50℃以下的石蠟稱為軟蠟,熔點在50℃以上的蠟稱為硬蠟。兩種
蠟可以混合在一起使用,無條件的情況下可用蠟燭來代替。石蠟熔點有52℃?
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54℃,56℃?58℃,58℃?60℃,60℃?62℃。
七、切片
制作一張切片需要較多工具,如切片刀、磨刀機、切片機、水浴鍋、干
燥箱等。干燥箱可用蠟箱代替使用。還需載玻片、手術(shù)刀、毛筆、彎鑲子、
托盤、大平皿(展片使用)、烤片盒、蛋白甘油等。
(-)切片機種類有輪轉(zhuǎn)式切片機,滑行式切片機(滑動式),冰凍切
片機,超薄切片機(電鏡用)等。
(二)構(gòu)造任何一個類型的切片機都是由四個基本部分組成:刀臺、
標本臺、旋轉(zhuǎn)輪、控制切片厚度的微動裝置(標有1-25或1-50的數(shù)字,每一
數(shù)字代表一個微米)??筛鶕?jù)需要調(diào)節(jié)厚度,一般組織片都采用與
(三)切片制作
1.將潔凈的載玻片涂一層菲薄的蛋白甘油放入烤片盒內(nèi)待用。
2.將切割修整好的蠟塊用普通刀片先將蠟塊的組織切面暴露出來修平,
固定在切片機上的標本臺上并擰緊螺旋。
3.蠟塊先固定在標本臺上,切片刀固定于刀臺上,擰緊固定刀的螺絲同
時調(diào)整刀與蠟塊的切片距離使刀與蠟塊貼緊后再固定刀臺螺絲,刀的角度為
25°。
4.調(diào)節(jié)微動裝置,調(diào)至切片所需厚度(一般為3-5微米)。
5.修材:右手握旋轉(zhuǎn)輪搖把按順時針方向均勻地搖動直到組織塊切面完
整暴露為止。如果以上各部操作正常,可切出一條完整的連續(xù)的切片蠟帶,
用毛筆輕輕將蠟帶順刀口挑下,放在托盤內(nèi)待用。
(四)水浴鍋通電后將平皿內(nèi)水溫升至45℃左右,將已切好的連續(xù)薄
片切分成數(shù)片,輕漂、水中展開,未展開時可用小彎鍛子輕輕展開,然后用
涂有蛋白甘油的載玻片在水中選擇完整的切片進行撈片。
(五)注意事項
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1.切片刀要鋒利,否則切片有切痕或組織破碎,甚至不能制成切片。
2.展切片時水溫要適當。水溫低,展不開切片,切片有皺折,影響效果;
如果水溫過高,切片入水后切片可發(fā)生熔化。
3.攤好的切片在烤箱(溫度60-65C)內(nèi)烤干。
八、染色
(~)染色前準備工作
1.準備的工具染色缸或者12個盛各種不同濃度酒精的廣口瓶,染色
缸及脫蠟、透明用的各兩個二甲苯染色缸,蓋片,帶磨口蓋樹膠瓶一個,鏡
子一把。
2.染色需要的試劑及染色液的配制
①蛋白甘油:用雞蛋清(不要雞蛋黃)用玻璃棒充分攪拌后用數(shù)層紗布
過濾后加等量的甘油攪均勻加數(shù)顆麝香草酚。
②鹽酸一酒精:主要是染色分色時用,一般采用0.5%—1%的濃度,即
在100ml的70%—80%酒精中加入0.5ml或者1ml的濃鹽酸。
③蘇木素(hematoxylin)
蘇木素為細胞核的染料,不經(jīng)氧化的蘇木素是不具有染色能力的。蘇木
素的配方很多,一般組織化學染色所配制的蘇木素有兩類,其一是自然氧化
的蘇木素;其二是加入氧化劑加速氧化的。
3.蘇木素的配方
自然氧化Ehrlieh氏蘇木素
蘇木精2g
錢明磯3g
無水酒精100ml
甘油100ml
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蒸播水100ml
將上述藥品配在一起后裝入玻璃瓶中,瓶口罩上數(shù)層紗布以防灰塵落入
染液,暴露于陽光中或空氣中自然氧化(此過程也稱為成熟),時間約6周一
8周以匕染液配制越久其染色能力越強,這種配方次可以大量配制以備用。
Delafield氏蘇木素
蘇木素4g
無水酒精25ml
錢明研飽和水溶液400ml
錢明祖飽和水溶液有兩種配法,一種是10%錢明帆水溶液,另一種為1
份錢明機加蒸儲水11份。
蘇木素溶入酒精后,加入錢明磯液,倒入玻璃瓶中敞開瓶口,罩以數(shù)層
紗布,置光線充足處3~5天后過濾,再加入甘油100ml。
甲醇100ml,再置光線充足處經(jīng)1個半月至兩個月后成熟,此液可保存多
年不壞,染色時多采用蒸譙水稀釋的染色液。
4.加氧化劑的蘇木素配制
Harris蘇木素
①液蘇木精1g
無水酒精10ml
②液鉀(鏤)明磯20g
蒸儲水200ml
先將①液用玻璃棒攪拌使蘇木素溶解,再將②液煮沸溶化去火,速加入
①液,再加火,煮沸后去火,立即加入氧化汞0.5g,再煮沸,迅速冷卻后加
入冰醋酸8ml過濾使用,此液為組織病理學常用染色液。
5.伊紅:又名曙紅(eosin)
是最常用的細胞質(zhì)染料之一,外觀為紅色粉末,分兩種:?種是酒精溶
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性伊紅,另一種為水溶性伊紅。使用前要閱讀說明書,以免配制錯誤。
配法:①0.5%水溶性伊紅
取伊紅0.5g,加蒸儲水100ml即可,待徹底溶解后使用。
②0.5%酒精溶性伊紅
取伊紅0.5g加70%酒精100ml即可,待徹底溶解后使用。
一般組織病理學切片染色,染細胞核用蘇木素,染細胞質(zhì)用伊紅,故一
般稱這種染色法為HE染色(蘇木素一伊紅染色法),是諸多染色法中的最基
本染色法之一。
(二)染色方法及步驟
I.脫蠟將干燥的切片入二甲苯I10min-20min,然后移入二甲苯H
lOmin_20mino
2.脫苯用100%1無水乙醇脫苯2min—5min。再經(jīng)100%II無水乙醇
2min—5min。
3.水化經(jīng)95%酒精一90%酒精一80%酒精一70%酒精各數(shù)秒至Imin,
逐步入水浸洗數(shù)分鐘,每步操作要輕柔。
4.染細胞核將切片移入蘇木素染液中染10min—20min.
5.水洗(水洗?下將浮在表面的染渣去掉)。
6.分化1%鹽酸酒精分化,時間幾秒鐘,肉眼觀察切片組織材料呈粉
紅色即可。
7.水洗水道流水洗(30min—24h),切片從粉紅色轉(zhuǎn)變?yōu)轷r艷的藍色,
這過程也稱為藍化過程。
8.染細胞質(zhì)用0.5%或者1%伊紅溶液進行復(fù)染Imin—5min。
9.脫水切片脫水是由低濃度酒精到高濃度酒精。將切片入70%-80
%―90%->95%酒精。切片在酒精內(nèi)時間為兒秒鐘,時間長,伊紅易脫色。
應(yīng)注意伊紅與蘇木素的對比染色的色調(diào)適合。
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10.徹底脫水100%酒精I5min-10min,再入100%11酒精5min-10min。
11.透明入二甲苯I2min—5min,再入二甲苯H2min-5min。
(三)封片與染色結(jié)果
用中性樹膠進行封固切片,細胞核經(jīng)蘇木素染成鮮艷的藍色,細胞質(zhì)核
仁、肌纖維、膠原纖維、紅細胞等呈紅色。
為了便于記憶:將HE染色程序列簡表如下:(脫蠟)二甲苯1-二甲苯
II-*無水酒精無水酒精11-95%-*90%-80%-70%-可用水洗一下也可
省略f蘇木素(染細胞核)(10min-20min)一自來水洗一下一1%鹽酸酒精
分化一自來水洗一0.5%伊紅(染細胞質(zhì))一可直接脫水70%f80%-90%f
95%-100%I-100%H酒精各稍停片刻(為了脫水徹底),透明二甲苯I一二
甲苯H,中性樹膠封片。
常規(guī)涂片染色的操作方法:
涂片的常規(guī)染色程序與切片染色程序一樣,不同的是固定液不同,操作
時間短。
涂片自然干燥或者加溫干燥后用甲醇固定,待固定液干燥后,直接染蘇
木素(2min-5min)-水洗一下去浮色-1%鹽酸酒精分化(浸1—2次即可)
f流水洗切片(5min以上)一染伊紅(2min-5min)f脫水:70%~80%f
90%-95%酒精各數(shù)秒,100%1—100%11酒精各稍停片刻(為了脫水徹底)
一透明:二甲苯I一二甲苯H,中性樹膠封片。
(四)兩種常用的特殊染色方法
Mallory染色
配方:酸性復(fù)紅3克
苯胺蘭1克
桔黃G3克
磷鋁酸1克
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蒸儲水200ml
染色方法:
1.石蠟切片常規(guī)脫蠟至水。
2.入3%重倍酸鉀媒染12h—24h:如果固定的材料含升汞可省此步驟,
但需脫汞。
3.蒸儲水洗兩次。
4.入Mallory染色液中染5min。
5.蒸懦水洗。
6.95%酒精分化約3min—5min,顯微鏡卜控制染色程度。
7.ioo%i、ioo%n酒精脫水。
8.二甲苯I、二甲苯II透明。
9.樹膠封片。
結(jié)果:膠原纖維及粘液呈深藍色,紅細胞呈紅黃色,肌組織呈紅色,彈
力纖維呈玫瑰紅色。
Weigert染色(彈性纖維染色法)
鹽基品紅2g
間苯二酚4g
蒸儲水200ml
配制方法:將上述藥一起放入燒杯內(nèi),加熱煮沸,再加29%三氯化鐵水
溶液25ml,用玻璃棒攪勻,繼續(xù)煮沸2min—5min,冷卻后過濾。傾去濾液不
用。
將濾紙及沉淀物一同放入燒杯內(nèi),放在干燥箱內(nèi)烘干,取出加95%酒精
200ml,加水煮至沉淀物盡溶,拿出濾紙冷卻后過濾并補足蒸發(fā)失去的酒精,
最后加入濃鹽酸4ml即可,此液可保留數(shù)月。
染色方法:
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1.切片脫蠟至酒精。
2.染W(wǎng)eigert氏液20min—60min。
3.用95%酒精洗去剩余染液,在顯微鏡下觀察結(jié)構(gòu)細節(jié),不清時可用1
%鹽酸酒精分化。
4.自來水洗。
5.以1%中性紅做對比染色或用明磯蘇木素染后,再用稀釋伊紅或用Van
gieson液染色。
6.用95%酒精分化,無水酒精脫水。
7.二甲苯I、II透明。
8.樹膠封片。
結(jié)果:彈力纖維顯示藍黑色。用中性紅做對比染色,肌組織呈紅色。用
Vangieson液對比染色,肌組織呈黃色,膠原纖維呈鮮紅色。
作業(yè):利用業(yè)余時間,熟悉制作HE切片的過程。
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實習四尸體現(xiàn)象
一、目的要求
1.熟悉尸體現(xiàn)象的種類、形成機制。
2.掌握尸體現(xiàn)象的形態(tài)特征及其法醫(yī)學意義。
二、大體標本幻燈
早期尸體現(xiàn)象:尸斑、尸僵、尸體痙攣、肌肉松馳、皮革樣化、角膜混
濁。
晚期尸體現(xiàn)象:腐敗所致巨人觀、腐敗氣泡、泡沫肝、死后分娩、白骨
化、木乃伊、尸蠟、泥炭糅尸。
三、組織切片
1.切片79號尸斑沉降期(livormortis)
皮膚層次分明,表皮完整,有角化層覆蓋,上皮腳與真皮乳頭相嵌。乳
頭及真皮內(nèi)小靜脈與毛細血管擴張。擴張的血管內(nèi)充滿紅細胞。紅細胞體積
增大,相互擁擠。
2.切片2號泡沫肝(foamyliver)
肝小葉界限不清,實質(zhì)內(nèi)有少量空泡。肝細胞索解離,肝細胞呈一致性
粉染,胞體腫脹,核溶解消失。
3.切片70號腎臟自溶(autolysisofthekidney)
可見腎皮質(zhì)、髓質(zhì)結(jié)構(gòu)層次尚清楚。皮質(zhì)腎小球結(jié)構(gòu)清晰,毛細血管略
擴張,充滿紅細胞,腎小球囊內(nèi)可見粉染物。大部分近曲小管上皮細胞腫脹、
脫落,細胞核消失,細胞溶解碎裂,部分管腔結(jié)構(gòu)不清。遠曲小管上皮細胞
核尚清楚。但大部分與基底膜分離。髓質(zhì)各腎小管上皮細胞核較清晰,間質(zhì)
血管擴張充滿紅細胞(血紅蛋白已脫失)。
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4.切片45號胰腺自溶(autolysisofpancreas)
可見粉染腺小葉,腺泡的細胞呈一致性粉染,核消失,結(jié)構(gòu)模糊,胰島
模糊不清,不能辨認。小葉內(nèi)有許多空泡,間質(zhì)疏松增寬。
5.切片39號脾自溶(autolysisofspleen)
脾內(nèi)空泡形成,紅白髓界限模糊不清,白髓解離,細胞數(shù)量減少,中央
動脈管壁粉染,被膜結(jié)締組織結(jié)構(gòu)模糊。
6.切片30號腦自溶
可以辨認為腦組織,腦實質(zhì)內(nèi)神經(jīng)細胞核著色不良,神經(jīng)細胞及膠質(zhì)細
胞腫脹,大部分神經(jīng)細胞核消失,胞質(zhì)呈均質(zhì)狀,有的神經(jīng)細胞及尼氏體呈
中心性消失,膜下積聚,細胞膜皺縮。血管壁平滑肌細胞結(jié)構(gòu)不清。
作業(yè)
1.腦死亡的標準是什么?
2.各尸體現(xiàn)象的概念、出現(xiàn)時間及法醫(yī)學意義。
3.自溶和壞死的區(qū)別。
4.尸斑、尸僵及角膜混濁的發(fā)生機制是什么?它們在推斷死亡時間上有
何意義?
5.尸斑與皮下出血怎樣鑒別?
6.死后凝血塊與血栓怎樣鑒別?
7.自溶與壞死在形態(tài)上如何區(qū)別?
8.尸體器官組織自溶的順序及影響因素是什么?
28
實習五機械性損傷1
(Mechanicalinjury)
一、目的要求
1.掌握損傷的種類、分類及其意義
2.掌握鈍器傷與銳器傷的特點及鑒定
二、大體標本幻燈
觀察內(nèi)容:
1.鈍器損傷種類:表皮剝脫、皮下出血、挫裂傷。
2.棍棒傷、磚石傷、斧錘等工具傷。
3.高墜損傷。
4.交通工具損傷。
6.切創(chuàng)(菜刀、單刃小刀,剃頭刀切創(chuàng))。
7.刺創(chuàng)(刺刀、匕首、手術(shù)刀、三角刮刀、殺豬刀刺創(chuàng))。
8.砍創(chuàng)(菜刀、砍柴刀、砍骨刀、大刀、惻刀)。
9.防衛(wèi)創(chuàng)。
10.剪切創(chuàng)。
11.槍彈創(chuàng)種類(擦過性、盲管性、回旋性、貫通性槍彈創(chuàng))。
12.射入口、射出口及槍械。
13.爆炸傷。
表皮剝脫(abrasion)、皮內(nèi)出血(intracutanoushemorrhage)>挫裂創(chuàng)
(laceration)>肝破裂(liverrupture脾破裂(spleenrupture)、腎破裂(kidney
rupture)肺破裂(lungrupture)、腎破裂(kidneyrupture)
三、組織切片
29
1.切片77號:皮下出血(subcutaneoushemorrhage)
皮下脂肪組織和結(jié)締組織內(nèi)有片狀紅染區(qū)。真皮結(jié)締組織內(nèi)(毛根和皮
脂腺之間)有散在紅細胞;皮下脂肪、結(jié)締組織內(nèi)有大量紅細胞。紅細胞有
的形態(tài)完整,著色鮮艷,有的呈星形淡染,膠原組織腫脹,呈嗜伊紅性,并
有中性粒細胞、單核細胞浸潤。
2.切片78號:皮膚擦傷(skinabrasion)
表皮處有缺失,真皮結(jié)締組織內(nèi)(毛根和皮脂腺之間)有散在紅細胞,
皮下脂肪內(nèi)出血。表皮挫碎、壞死,細胞核深染呈藍色,皮下脂肪組織間隙
有點片狀出血灶。
3.切片64號:肝破裂(liverrupture)
破碎邊緣肝細胞灶性壞死,局部出血,伴肝竇內(nèi)白細胞增多,江管區(qū)有
少量淋巴細胞浸潤。小葉中央靜脈和匯管區(qū)血管空虛。
4.切片46號:子宮破裂
子宮肌層內(nèi)可見大量聚集紅細胞,伴炎細胞浸潤。
5.切片66號:膀胱挫傷
膀胱粘膜層內(nèi)有散在紅細胞。
6.觀察檢案切片:肝破裂、腎挫裂傷、脾破裂、子宮破裂、心臟挫傷、
十二指腸壞死。
四、作業(yè)及思考題
1.通過鏡下觀察說明皮下出血與尸斑的區(qū)別。
2.鈍器傷與銳器傷的區(qū)別和聯(lián)系是什么?
3.擦傷及其法醫(yī)學意義?
4.墜落傷有哪些特點?如何進行法醫(yī)學鑒定?
5.交通事故損傷有哪些特點?如何進行法醫(yī)學鑒定?
30
實習六機械性損傷2
高墜死亡動物實驗
一、目的要求
i.掌握高墜死亡動物的損傷特征及死亡原因。
2.熟悉高墜動物的死亡過程及表現(xiàn)。
二、實驗內(nèi)容
高墜死亡動物實驗
三、實驗材料及方法
1.實驗動物:成年健康家兔,雌雄任選,體重2—2.5kg,四肢、脊柱無
陳舊性損傷及畸形。
3.步驟:
選擇平坦地面,高度15—20米。
⑴實驗前檢查記錄生命體征:呼吸、心率、瞳孔、四肢情況。
⑵選擇一高處,墜落家兔,頭顱部朝下;觀察高墜過程中家兔行為表現(xiàn)。
⑶觀察著地后家兔表現(xiàn)及損傷情況。
(4)損傷后檢查及尸體解剖檢查。
⑸必須進行系統(tǒng)檢查、解剖,記錄陽性發(fā)現(xiàn)。
4.書寫實驗報告。要求按照正規(guī)法醫(yī)病理學鑒定書的格式書寫系統(tǒng)解剖
過程并分析死亡原因,給出鑒定結(jié)論。
思考題
1.高墜損傷的基本特點有哪些?
2.高墜損傷的嚴重程度與哪些因素有關(guān)?
3.如何鑒別生前高墜致死與死后拋尸偽裝高墜?
31
附鑒定書
一九九X年X月X日十九時,刑警大隊業(yè)務(wù)值班室接和平區(qū)公安分局報
告:“今日十七時三十分許,郝XX(男,31歲,住和平區(qū)同澤街六段13里
新華大院8單元7樓1號)被發(fā)現(xiàn)躺于和平區(qū)同澤街六段13里新華大院4單
元樓前,頭上有傷,送至某醫(yī)大急診室時已死亡,要求派員勘查現(xiàn)場及檢驗
尸體”。接報后,我等立即趕赴現(xiàn)場,經(jīng)現(xiàn)場勘查及在刑警大隊解剖室檢驗尸
體后,制成本鑒定書。
一、尸體檢驗情況
(一)尸體衣著
尸體衣著已被家屬翻動。
上身外穿棕色皮夾克,前襟敞開,內(nèi)著紫紅色毛衣,棕色黃花毛背心,
藍色套頭線衣,白背心。
下身外著棕色皮褲,內(nèi)著灰色毛衣,灰色線褲,藍色三角褲衩。
腳穿黑灰色布面棉鞋,內(nèi)著藍底花襪。
外衣皮領(lǐng)左側(cè)領(lǐng)口上10cm處,可見1.0cm破口,衣領(lǐng)貫通。左前襟在底
邊上27cm,中縫左側(cè)13.5cm處可見左上右下斜行1.3X1.5cm破口,右側(cè)前襟
右底邊上36cm,中縫右側(cè)10cm處有一三角形1.3X0.8cm破口,右后襟右底
邊上30cm,右背縫上有一星芒狀0.4X0.3cm破口。左袖內(nèi)側(cè)袖口上13cm袖
縫上有一不規(guī)則形L8X1.2cm破口,破口處皮革外翻,左袖外側(cè)袖口上15cm,
袖縫前3cm處有一類圓形0.25X0.25cm破口。右袖內(nèi)側(cè)袖口上5.6cm,袖縫
前2cm有-不規(guī)則形2X0.8cm外層皮革破口,破口處皮革外翻。
各層衣著與外衣破口相對應(yīng)處均有相對應(yīng)破口。背心右前襟在底邊上
30cm有一1.8XL0cm破口,其它各層衣著與此破口相對應(yīng)處均無破口。
外褲右褲腿前側(cè)在褲口上83cm處有-1.0X0.8cm皮革皮瓣,皮瓣外翻。
右褲背側(cè)在右褲口上87.5cm處有一左上右下斜形1.3X0.2cm破口,其內(nèi)各層
32
衣著與外褲破口對應(yīng)處均有相對應(yīng)破口。
(-)尸體現(xiàn)象
尸長177cm,發(fā)育正常,營養(yǎng)良好。未見尸斑,尸僵存在于全身各大關(guān)節(jié)。
黑發(fā),發(fā)長5cm。雙瞼閉合,角膜透明,左右瞳孔直徑均0.5cm。雙眼球瞼結(jié)
膜蒼白,無出血點??诒乔患半p外耳道無異物。舌位于齒列內(nèi),牙齒無新鮮
松動。
(三)損傷及解剖檢驗
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