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高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE2江蘇省徐州市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中試題說明:1.答題前,請將自己的姓名、考號及所在學(xué)校、班級等填寫在答題卡指定位置。2.〖答案〗必須按要求寫在答題卡的對應(yīng)位置上,在草稿紙、試卷上答題一律無效。一、單項(xiàng)選擇題:共14題,每題2分,共28分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意。1.下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作說法正確的是()A.培養(yǎng)酵母菌的試劑和器具都要進(jìn)行濕熱滅菌B.配制培養(yǎng)基、倒平板、接種均需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.倒好的平板要立即使用,以免表面干燥,影響酵母菌生長D.轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線〖答案〗D〖祥解〗1、滅菌常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和濕熱滅菌。消毒常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。
2、平板劃線操作:(1)平板劃線操作的第一步之前要灼燒接種環(huán),目的是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基。(2)平板劃線除首次劃線外,每次劃線前都要灼燒接種環(huán),目的是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種。(3)平板劃線結(jié)束時(shí)要灼燒接種環(huán),其目的是避免接種環(huán)上殘留的菌種污染環(huán)境和感染操作者?!驹斘觥緼、接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理,接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理,吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理,培養(yǎng)基及多種器材用濕熱滅菌法處理,A錯(cuò)誤;B、倒平板、接種需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,而配培養(yǎng)基不需要在酒精燈的火焰旁進(jìn)行,因?yàn)榕囵B(yǎng)基最后還需要滅菌,B錯(cuò)誤;C、倒好的平板需要冷卻后使用,且不宜久存,以免表面干燥,影響接種后微生物的生長,C錯(cuò)誤;D、平板劃線轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線,主要目的是殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,D正確。故選D。2.某生物興趣小組的同學(xué)利用圖示裝置進(jìn)行果酒和果醋的制作,下列相關(guān)敘述正確的是()A.乙酸發(fā)酵期間,關(guān)閉閥a和閥b,避免空氣的進(jìn)入B.新鮮葡萄沖洗、晾干、榨汁、滅菌后裝入發(fā)酵瓶C.酒精發(fā)酵期間,開啟磁力攪拌器來提高發(fā)酵液中的溶解氧D.果酒制作過程中,酵母菌進(jìn)行了有氧呼吸和無氧呼吸〖答案〗D〖祥解〗1、果酒制作的原理是利用酵母菌在無氧條件下才能進(jìn)行酒精發(fā)酵產(chǎn)生酒精,若是在有氧條件下則進(jìn)行有氧呼吸而大量繁殖。果酒發(fā)酵是在18~30°C、缺氧、呈酸性的環(huán)境中。2、果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧氣充足的條件將乙醇先轉(zhuǎn)化為乙醛,在進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為醋酸。醋酸菌是好氧菌,必須生活在氧氣充足的環(huán)境中,且最適生長溫度是30~35°C?!驹斘觥緼、乙酸發(fā)酵所需的菌種是需氧菌,發(fā)酵期間不能將兩個(gè)閥門都關(guān)閉,A錯(cuò)誤;B、新鮮葡萄不能滅菌,否則會導(dǎo)致酵母菌死亡,從而使發(fā)酵失敗,B錯(cuò)誤;C、酒精發(fā)酵利用的是酵母菌的無氧呼吸,不能提高溶解氧含量,C錯(cuò)誤;D、果酒制作過程中,酵母菌進(jìn)行了有氧呼吸以增加酵母菌數(shù)量,進(jìn)行無氧呼吸進(jìn)行發(fā)酵,D正確。故選D。3.下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用的敘述,正確的是()A.濕熱滅菌后倒的平板需倒置,接種后的平板可以不倒置B.同一稀釋度下涂布一個(gè)平板即可,待菌落數(shù)穩(wěn)定后計(jì)數(shù)C.將未接種的平板培養(yǎng)并觀察有無菌落,以判斷培養(yǎng)基滅菌是否合格D.纖維素分解菌鑒定時(shí),在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,若指示劑變紅則能初步鑒定〖答案〗C〖祥解〗1、制備培養(yǎng)基的步驟:計(jì)算、稱量、溶化、(調(diào)節(jié)pH)、滅菌、倒平板。2、平板冷凝后要將平板倒置,既可防止皿蓋上凝結(jié)的水滴滴入培養(yǎng)基造成污染,又可避免培養(yǎng)基表面的水分過快揮發(fā)。3、稀釋涂布平板法:用移液管和無菌水將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后用涂布器將不同稀釋度的菌液分別均勻地涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)?!驹斘觥緼、平板倒置,既可防止皿蓋上凝結(jié)的水滴滴入培養(yǎng)基造成污染,又可避免培養(yǎng)基表面的水分過快揮發(fā),接種后的平板也需要倒置培養(yǎng),A錯(cuò)誤;B、同一稀釋度下至少要涂布三個(gè)平板,進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn),并且要培養(yǎng)到菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)計(jì)數(shù),菌落數(shù)在30~300之間,B錯(cuò)誤;C、將未接種的平板培養(yǎng)并觀察有無菌落,若未接種的培養(yǎng)基表面有菌落生長,則培養(yǎng)基滅菌不合格,若未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長,則培養(yǎng)基滅菌合格,C正確;D、尿素分解菌可以產(chǎn)生脲酶,脲酶可以催化尿素分解為NH3,NH3呈堿性遇酚紅試劑變?yōu)榧t色,故尿素分解菌鑒定時(shí),在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,指示劑變紅則能初步鑒定;若對纖維素分解菌鑒定時(shí),需在培養(yǎng)基中加入剛果紅試劑,D錯(cuò)誤。故選C。4.如圖是微生物平板劃線示意圖,劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.第1區(qū)和第5區(qū)的劃線不能相連B.劃線操作時(shí)完全打開皿蓋,劃完立即蓋上C.在五個(gè)區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌D.接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基,否則難以達(dá)到分離單菌落的目的〖答案〗B〖祥解〗平板劃線的操作的基本步驟是:(1)右手持接種環(huán),經(jīng)火焰滅菌,待涼后,在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞,并將試管口過火焰,將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液,沾取一環(huán)菌液,將試管口過火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持瓊脂平板,皿蓋打開一條縫,右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋,接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面。(3)燒灼接種環(huán),殺滅環(huán)上殘留菌液,待冷卻,從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線,重復(fù)以上操作,在第三四五區(qū)內(nèi)劃線,注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。(4)將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?!驹斘觥緼、進(jìn)行平板劃線時(shí),不能將第1區(qū)和第5區(qū)的劃線相連,避免已分離開的菌種再次聚集,最終無法獲得單菌落,A正確;B、為避免雜菌污染,劃線操作時(shí)不能將皿蓋完全打開,只能打開一條縫,B錯(cuò)誤;C、在五個(gè)區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌,以防止雜菌污染,并保證每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端以及防止污染環(huán)境和操作者,C正確;D、接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基,因?yàn)閯澠婆囵B(yǎng)基會導(dǎo)致菌種不容易擴(kuò)散開,難以達(dá)到分離單菌落的目的,D正確。故選B。5.利用胡蘿卜根段培養(yǎng)獲得試管苗的過程如下圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.對試管苗煉苗(馴化)的操作步驟之一是用流水除去根部培養(yǎng)基B.步驟②消毒一般是先用70%酒精浸泡10min,再用無菌水沖洗2~3次C.步驟③切取的組織塊中需帶有形成層,原因是其分裂旺盛易脫分化D.步驟⑤和步驟⑥所用培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素相對含量不同〖答案〗B〖祥解〗離體的植物組織或細(xì)胞,在培養(yǎng)一段時(shí)間后,會通過細(xì)胞分裂形成愈傷組織。愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱為植物細(xì)胞的脫分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官,這個(gè)過程叫做再分化。再分化形成的試管苗,移栽到地里,可以發(fā)育成完整的植物體?!驹斘觥緼、對試管苗煉苗(馴化)的操作步驟之一是用流水除去根部培養(yǎng)基,將幼苗需移植到消過毒的新環(huán)境下生活一段時(shí)間,等幼苗長壯后再移栽到土壤中,A正確;B、步驟②消毒方法一般是先用70%酒精浸泡10s(時(shí)間過程會傷害植物細(xì)胞),再用無菌水沖洗2~3次,B錯(cuò)誤;C、步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,其原因是形成層有大量的紡錘狀原始細(xì)胞和射線原始細(xì)胞,它們分裂迅速,組培時(shí)容易形成愈傷組織,繼而獲得組培苗,C正確;D、步驟⑤(脫分化)和步驟⑥(再分化)所用培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素相對含量不同,D正確。故選B。6.細(xì)胞融合技術(shù)在生物育種和免疫學(xué)中有著廣泛應(yīng)用,下圖為細(xì)胞融合的簡略過程,據(jù)下圖分析,下列相關(guān)敘述正確的是()A.形成乙所依賴的生物學(xué)原理為細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性B.甲中a和b在體外受精前,需在體外進(jìn)行卵子的成熟培養(yǎng)和精子獲得能量的處理C.若a和b分別為基因型AaBB、aaBb個(gè)體所產(chǎn)生的花粉細(xì)胞,則c有4種基因型D.對于已形成細(xì)胞d,利用選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞即可大規(guī)模生產(chǎn)單克隆抗體丙〖答案〗A〖祥解〗據(jù)圖分析,圖中甲是有性雜交產(chǎn)生的后代,則a、b分別表示精子和卵細(xì)胞;乙是植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的后代,則a、b表示兩種植物細(xì)胞,融合前需要用酶解法去掉細(xì)胞壁;丙是單克隆抗體,則a、b表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,融合產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞d。【詳析】A、乙是植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的后代,細(xì)胞融合過程體現(xiàn)細(xì)胞膜的流動(dòng)性,用雜交細(xì)胞培養(yǎng)出植株的過程體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性,A正確;B、圖中甲是有性雜交產(chǎn)生的后代試管動(dòng)物,則a、b分別表示精子和卵細(xì)胞,需在體外進(jìn)行卵子的成熟培養(yǎng)和精子獲能處理(獲得能力而非獲得能量)才能進(jìn)行體外受精,B錯(cuò)誤;C、若a和b分別為基因型AaBB、aaBb植株的花粉細(xì)胞,AaBB能產(chǎn)生AB、aB兩種花粉,aaBb能產(chǎn)生aB、ab兩種花粉,去壁兩兩融合可以得到AABB、aaBB、aabb、AaBB、AaBb、aaBb共6種基因型的細(xì)胞,C錯(cuò)誤;D、對于已融合形成的細(xì)胞d,還需要經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢驗(yàn)陽性的篩選,才能大規(guī)模生產(chǎn)單克隆抗體丙,D錯(cuò)誤。故選A。7.下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎工程和細(xì)胞工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.猴的核移植細(xì)胞通過胚胎工程已成功地培育出了克隆猴B.早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體C.培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)液需要定期更換,防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞造成危害D.進(jìn)行胚胎移植前,要對供體和受體進(jìn)行免疫檢查,以防止發(fā)生免疫排斥反應(yīng)〖答案〗D〖祥解〗胚胎移植的生理基礎(chǔ)(1)供體與受體相同的生理變化,為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境;(2)胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài),這就為胚胎的收集提供了可能;(3)子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng),這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能;(4)胚胎遺傳性狀不受受體任何影響?!驹斘觥緼、成功培育克隆猴的過程涉及的生物技術(shù)有核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等,A正確;B、為了提高胚胎移植的成功率,早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體,B正確;C、為防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害,培養(yǎng)液需要定期更換,C正確;D、子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng),則不需要對供體和受體進(jìn)行免疫檢查,D錯(cuò)誤。故選D。8.科研人員用小鼠胚胎干細(xì)胞(mESCs)構(gòu)建“體外卵巢”。該卵巢中的卵子受精后產(chǎn)生了健康、有生育能力的后代,基本過程如下圖。下列相關(guān)敘述正確的是()A.過程①細(xì)胞內(nèi)存在基因的選擇性表達(dá)B.過程②用滅活的病毒誘導(dǎo)兩種細(xì)胞融合C.該研究結(jié)果說明小鼠的胚胎干細(xì)胞具有全能性D.后代小鼠的遺傳物質(zhì)僅僅來自親代小鼠胚胎干細(xì)胞〖答案〗A〖祥解〗物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程,融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法也類似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等?!驹斘觥緼、過程①表示細(xì)胞的分裂分化,細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇表達(dá),故過程①細(xì)胞內(nèi)存在基因的選擇性表達(dá),A正確;B、過程②是胚胎性卵巢體細(xì)胞與卵母細(xì)胞結(jié)構(gòu)重建過程,該過程不需要細(xì)胞融合,B錯(cuò)誤;C、該研究結(jié)果利用了精卵結(jié)合形成的受精卵發(fā)育為正常小鼠,不能說明小鼠的胚胎干細(xì)胞具有全能性,C錯(cuò)誤;D、后代小鼠的遺傳物質(zhì)來自親代小鼠胚胎干細(xì)胞和精子,D錯(cuò)誤。故選A。9.狼爪瓦松是一種具有觀賞價(jià)值的野生花卉且其細(xì)胞中的黃酮類化合物可入藥。狼爪瓦松的擴(kuò)大培養(yǎng)具體過程如圖所示(其中數(shù)字序號代表相應(yīng)處理過程)。下列有關(guān)分析正確的有()A.過程③先在生長素/細(xì)胞分裂素的值高的培養(yǎng)基中培養(yǎng),再轉(zhuǎn)移至其值低的培養(yǎng)基中B.制備培養(yǎng)基的正確順序是:稱量→溶解→定容→調(diào)pH值→分裝→滅菌C.過程④常用射線或化學(xué)物質(zhì)處理即可獲得大量所需的突變體植株丙D.過程⑥利用愈傷組織分裂能力強(qiáng)、全能性高的特點(diǎn)可大量獲得黃酮類化合物〖答案〗B〖祥解〗生長素/細(xì)胞分裂素的比值高的培養(yǎng)基為誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基,由愈傷組織經(jīng)脫分化誘導(dǎo)再生植株的過程中應(yīng)先誘導(dǎo)發(fā)芽,再誘導(dǎo)生根?!驹斘觥緼、生長素/細(xì)胞分裂素的比值高的培養(yǎng)基為誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基,由愈傷組織經(jīng)脫分化誘導(dǎo)再生植株的過程中應(yīng)先誘導(dǎo)發(fā)芽,再誘導(dǎo)生根,A錯(cuò)誤;B、制備培養(yǎng)基的正確順序?yàn)椋悍Q量→溶解→定容→調(diào)pH值→分裝→滅菌,B正確;C、生物變異具有低頻性和不定向性,因此射線或化學(xué)物質(zhì)處理可以提高突變植株出現(xiàn)的概率,對突變植株進(jìn)行選擇、培養(yǎng)后才能獲得大量所需的突變體植株丙,C錯(cuò)誤;D、過程⑥利用愈傷組織分裂能力強(qiáng)、全能性高的特點(diǎn)可誘導(dǎo)出能產(chǎn)生黃酮類化合物的組織細(xì)胞,對其進(jìn)行細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)即可大量獲得黃酮類化合物,D錯(cuò)誤。故選B。10.大腸桿菌是基因工程技術(shù)中被廣泛采用的工具,人生長激素的基因工程過程如圖所示。下列敘述正確的是()A.經(jīng)①獲得該mRNA的最佳材料是受精卵B.通過①②過程,可以構(gòu)建基因組文庫C.要檢測③⑥過程的產(chǎn)物可分別用PCR技術(shù)和抗原—抗體雜交技術(shù)D.⑤過程要在低溫和較高濃度的氯化鈣溶液中處理使重組DNA易進(jìn)入受體細(xì)胞〖答案〗C〖祥解〗基因工程過程:1、目的基因的提?。?、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合;3、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;4、受體細(xì)胞內(nèi)基因的表達(dá)。【詳析】A、經(jīng)①獲得該mRNA的最佳材料是特定的組織細(xì)胞,而不是受精卵,A錯(cuò)誤;B、通過①②過程得到cDNA,cDNA所含的基因不是全部基因不能構(gòu)建基因組文庫,B錯(cuò)誤;C、要檢測③的產(chǎn)物生長激素基因可以用PCR技術(shù)擴(kuò)增,要檢測⑥過程的產(chǎn)物可用抗原—抗體雜交技術(shù),C正確;D、⑤過程要在低溫和低滲氯化鈣溶液中處理,通過增大細(xì)菌細(xì)胞壁通透性使重組DNA易進(jìn)入受體細(xì)胞,D錯(cuò)誤。故選C。11.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列相關(guān)敘述正確的是()A.導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞B.擴(kuò)增目的基因時(shí),利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3’-端進(jìn)行子鏈合成C.若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的,則該基因中不含啟動(dòng)子序列D.利用顯微注射法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上〖答案〗C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。(4)目的基因的檢測與鑒定。【詳析】A、導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞不是乳腺細(xì)胞,而是受精卵或早期胚胎細(xì)胞,A錯(cuò)誤;B、在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,擴(kuò)增目的基因時(shí),利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'-端進(jìn)行子鏈合成,B錯(cuò)誤;C、成熟的mRNA是由基因轉(zhuǎn)錄后經(jīng)剪切而成,不含啟動(dòng)子序列,故若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的,則該基因中不含啟動(dòng)子序列,C正確;D、農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上,根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn),將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上,將基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法,但顯微注射法不能將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上,D錯(cuò)誤。故選C。12.科學(xué)家利用基因工程將編碼天然蜘蛛絲蛋白的基因?qū)爰倚Q,生產(chǎn)出一種特殊的復(fù)合纖維蛋白,該復(fù)合纖維蛋白的韌性優(yōu)于天然蠶絲蛋白。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.該蛋白的肽鏈由氨基酸通過氫鍵連接而成B.加熱變性的蛋白質(zhì)不能恢復(fù)原有的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)C.該蛋白的特定結(jié)構(gòu)決定其韌性優(yōu)于天然蠶絲蛋白D.該蛋白與天然蜘蛛絲蛋白的基本組成單位都是氨基酸〖答案〗A〖祥解〗構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸,每種氨基酸分子至少都含有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基,且都有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基連接在同一個(gè)碳原子上,這個(gè)碳原子還連接一個(gè)氫和一個(gè)R基,氨基酸的不同在于R基的不同。【詳析】A、該蛋白的肽鏈由氨基酸通過肽鍵連接而成,A錯(cuò)誤;B、加熱破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)導(dǎo)致其變性,結(jié)構(gòu)和性質(zhì)改變,無法恢復(fù),B正確;C、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定功能,該蛋白的特定結(jié)構(gòu)決定其韌性優(yōu)于天然蠶絲蛋白,C正確;D、該蛋白的基本組成單位是氨基酸,與天然蜘蛛絲蛋白的基本單位相同,D正確。故選A。13.圖甲、乙中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。下列關(guān)于培育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌的敘述正確的是()A.若通過PCR獲取該目的基因,應(yīng)該選用引物甲和引物丙B.圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建表達(dá)載體,可選用BamHI和HindⅢ剪切C.若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞中,需選用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.在受體細(xì)胞中,氨芐青霉素抗性基因和目的基因可同時(shí)表達(dá)〖答案〗A〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。(4)目的基因的檢測與鑒定。【詳析】A、引物是根據(jù)目的基因兩側(cè)序列獲得,需要與目的基因兩端互補(bǔ),故若通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增該目的基因,應(yīng)該選用引物甲和引物丙,A正確;B、圖甲中BamHⅠ會破壞兩種抗性基因,不能選用,故圖乙中目基因左側(cè)只能選BclⅠ,而質(zhì)粒上沒有目的基因右側(cè)Sau3A的切點(diǎn),兩者都有HindⅢ的切點(diǎn),為了防止目的基因與質(zhì)粒隨意連接,故質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建表達(dá)載體,應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ剪切,B錯(cuò)誤;C、若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞大腸桿菌(微生物細(xì)胞)時(shí),需要用鈣離子等處理,使其處于感受態(tài),C錯(cuò)誤;D、在受體細(xì)胞中,插入目的基因時(shí)氨芐青霉素抗性基因被破壞,不能和目的基因同時(shí)表達(dá),D錯(cuò)誤。故選A。14.下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性及倫理問題的觀點(diǎn),正確的是()A.生物武器具有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn),應(yīng)嚴(yán)格禁止B.放寬轉(zhuǎn)基因植物限制,盡可能多的種植轉(zhuǎn)基因植物,提高經(jīng)濟(jì)效益C.當(dāng)今社會的普遍觀點(diǎn)是禁止一切克隆實(shí)驗(yàn),包括治療性克隆和克隆人D.反對設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是因?yàn)樵嚬軏雰杭夹g(shù)屬于無性繁殖方式〖答案〗A〖祥解〗生物技術(shù)的安全性和倫理問題:(1)生物技術(shù)安全性問題包括食物安全、生物安全、環(huán)境安全三個(gè)方面;(2)倫理問題主要在克隆人的問題上出現(xiàn)爭議,據(jù)此分析答題?!驹斘觥緼、生物武器是指有意識的利用微生物、毒素、昆蟲侵襲敵人的軍隊(duì)、人口、農(nóng)作物或者牲畜等目標(biāo),以達(dá)到戰(zhàn)爭目的一類武器,有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn),應(yīng)嚴(yán)格禁止,A正確;B、轉(zhuǎn)基因植物的種植應(yīng)有一定限度,不能盡可能多的種植轉(zhuǎn)基因植物,以免造成基因污染和環(huán)境問題,B錯(cuò)誤;C、當(dāng)今社會的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn),反對生殖性克隆,但是不反對治療性克隆,C錯(cuò)誤;D、試管嬰兒技術(shù)屬于有性繁殖,反對設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是可能有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒的性別,D錯(cuò)誤。故選A。二、多項(xiàng)選擇題:共4題,每題3分,共12分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對者得3分,選對但不全的得1分,錯(cuò)選或不答的得0分。15.科研人員將釀酒酵母質(zhì)粒上的丙酮酸脫氫酶基因(PD)替換為植物乳桿菌中的乳酸脫氫酶基因(L-PG),可獲得乳酸乙酯(白酒香味的主要來源)高產(chǎn)菌株,過程如圖。下列分析合理的是()A.轉(zhuǎn)入的L-PG基因表達(dá)產(chǎn)物將影響釀酒酵母的活性B.L-PG基因替換質(zhì)粒上的PD基因是通過同源重組實(shí)現(xiàn)的C.標(biāo)記基因Ampr可檢測否成功構(gòu)建乳酸乙酯高產(chǎn)菌株D.可以利用PCR技術(shù)篩選含有L-PG基因的受體細(xì)胞〖答案〗ABD〖祥解〗分析題圖:圖示是采用基因工程技術(shù)將釀酒酵母質(zhì)粒上的丙酮酸脫氫酶基因(PD)替換為植物乳桿菌中的乳酸脫氫酶基因(L-PG),從而獲得乳酸乙酯高產(chǎn)菌株?!驹斘觥緼、目的基因表達(dá)產(chǎn)物不能影響受體細(xì)胞的生存和活性,因此轉(zhuǎn)入的L-PG基因表達(dá)產(chǎn)物不能影響釀酒酵母活性,A正確;B、基因工程的實(shí)質(zhì)是基因重組,由圖可知,通過基因工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)酵母菌的PD基因被替換為L-PG基因,即L-PG基因替換質(zhì)粒上的PD基因是通過同源重組實(shí)現(xiàn)的,B正確;C、標(biāo)記基因Ampr可篩選含有目的基因的受體細(xì)胞,但不能檢測是否成功構(gòu)建乳酸乙酯高產(chǎn)菌株,C錯(cuò)誤;D、PCR技術(shù)是一項(xiàng)體外擴(kuò)增基因的技術(shù),依據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則,可以用于篩選含有L-PG基因的受體細(xì)胞,D正確。故選ABD。16.6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G-6PD)有F和S兩種類型,分別由一對等位基因XF和XS編碼?;蛐蜑閄FXS的女性體細(xì)胞中的兩個(gè)X染色體,會有一個(gè)隨機(jī)失活。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理后先進(jìn)行細(xì)胞的原代培養(yǎng),再對不同的細(xì)胞分別進(jìn)行單克隆培養(yǎng)。分別對原代培養(yǎng)和單克隆培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行G-6PD蛋白電泳檢測,結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.該過程用到的主要細(xì)胞工程技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)B.用胰蛋白酶處理皮膚組織可使其分散成單個(gè)細(xì)胞C.單克隆培養(yǎng)的細(xì)胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因不同D.原代培養(yǎng)細(xì)胞電泳圖有2個(gè)條帶是因?yàn)榧?xì)胞中兩個(gè)X染色體都有活性〖答案〗CD〖祥解〗1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程:取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖。【詳析】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞工程的基礎(chǔ),無論是原代培養(yǎng)還是單克隆培養(yǎng),用到的主要細(xì)胞工程技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),A正確;B、動(dòng)物細(xì)胞之間的蛋白質(zhì),被胰蛋白酶或膠原蛋白酶分解,分散成單個(gè)細(xì)胞,B正確;C、單克隆培養(yǎng)的細(xì)胞,是通過有絲分裂得到的增殖的細(xì)胞,故單克隆培養(yǎng)的細(xì)胞1、2、4、5、8、9與3、6、7,所含基因相同,表達(dá)的基因不相同,C錯(cuò)誤;D、結(jié)合題干,基因型為XFXS女性體細(xì)胞中的兩個(gè)X色體會有一個(gè)隨機(jī)失活(不是兩個(gè)染色體都有活性),故一個(gè)細(xì)胞中6-磷酸葡萄糖脫氫酶,電泳后只顯示一個(gè)條帶,原代培養(yǎng)的細(xì)胞電泳有2個(gè)條帶,故同時(shí)檢測了多個(gè)細(xì)胞,D錯(cuò)誤。故選CD。17.為研究多種血糖調(diào)節(jié)因子的作用,我國科學(xué)家開發(fā)出胰島素抵抗模型鼠。為擴(kuò)增模型鼠數(shù)量,科學(xué)家通過誘導(dǎo)優(yōu)良模型鼠體細(xì)胞轉(zhuǎn)化獲得誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞(iPS細(xì)胞),繼而利用iPS細(xì)胞培育出與模型鼠遺傳特性相同的克隆鼠,具體步驟如下圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是()A.胚胎移植后,重構(gòu)胚進(jìn)一步擴(kuò)大導(dǎo)致囊胚腔破裂的過程稱為孵化B.為確定克隆鼠培育是否成功,須對黑色鼠3進(jìn)行胰島素抵抗的相關(guān)檢測C.誘導(dǎo)優(yōu)良模型鼠體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞的過程類似于植物組織培養(yǎng)的脫分化D.為獲得更多的雙細(xì)胞胚,可對白色鼠1注射雌激素達(dá)到超數(shù)排卵的目的〖答案〗BC〖祥解〗哺乳動(dòng)物胚胎干細(xì)胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞;胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞核一般較大,核仁明顯,具有全能性?!驹斘觥緼、囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,會導(dǎo)致透明帶的破裂,胚胎從其中伸展出來,這一過程叫做孵化,A錯(cuò)誤;B、據(jù)圖示,最終得到了黑色鼠3個(gè)體,實(shí)驗(yàn)最終目的為“開發(fā)出胰島素抵抗模型鼠”,故為確定克隆鼠培有是否成功,須對黑色鼠3進(jìn)行胰島素抵抗的相關(guān)檢測,B正確;C、優(yōu)良模型鼠體細(xì)胞在誘導(dǎo)因子的作用下轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞的過程與植物組織培養(yǎng)中的脫分化過程類似,是組織細(xì)胞恢復(fù)分裂能力的過程,C正確;D、用促性腺激素處理,使其排出更多的卵子,而非注射雌激素,D錯(cuò)誤。故選BC。18.為了從土壤中篩選對抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物,研究人員利用土壤浸出液進(jìn)行了如圖所示操作。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.在X培養(yǎng)基上接種的方法為平板劃線法B.X培養(yǎng)基含有淀粉和抗生素,Y培養(yǎng)基是含瓊脂的培養(yǎng)基C.菌落①可能是硝化細(xì)菌,因不能產(chǎn)生淀粉酶所以無透明圈D.圖中降解淀粉最高效的是菌落⑤,可根據(jù)菌落特征初步判斷微生物類型〖答案〗AB〖祥解〗微生物常見的接種的方法:①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)制成平板,接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分,微生物往往連在一起生長,隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?!驹斘觥緼、根據(jù)培養(yǎng)后培養(yǎng)基上形成的菌落分布可知,將含目的菌的土壤浸出液接種在X培養(yǎng)基上采用的是稀釋涂布平板法,A錯(cuò)誤;B、實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選對抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物,根據(jù)圖示中在X培養(yǎng)基上滴加碘液后形成了透明圈,說明X培養(yǎng)基上含有淀粉,菌體分解淀粉的能力強(qiáng),在其周圍形成的透明圈就大,同時(shí)為了篩選到對抗生素有抗性的菌體,因此X培養(yǎng)基還應(yīng)該含有抗生素,Y培養(yǎng)基是將篩選到的目的菌擴(kuò)大培養(yǎng),為不含瓊脂的液體培養(yǎng)基,B錯(cuò)誤;C、菌落①不能降解淀粉,可能是硝化細(xì)菌,因不能產(chǎn)生淀粉酶所以無透明圈,C正確;D、碘液遇淀粉會變藍(lán),淀粉被分解,藍(lán)色消失,圖中⑤的透明圈最大,說明菌體⑤降解淀粉的能力最強(qiáng),不同菌體形成的菌落特征不同,因此可根據(jù)菌落特征初步判斷微生物類型,D正確。故選AB。三、非選擇題:共5題,共60分。除特別說明外,每空1分。19.為提高作物產(chǎn)量,種植業(yè)往往使用大量的氮素化肥,既增加了生產(chǎn)成本,又易造成環(huán)境污染。自生固氮菌營獨(dú)立生活,為改變這種現(xiàn)狀帶來了希望??蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究,部分實(shí)驗(yàn)流程如下圖?;卮鹣铝袉栴}:(1)步驟①土樣應(yīng)取自表層土壤的原因是____________。步驟③中需用手指輕壓移液管_________上的橡皮頭,吹吸3次的作用是___________。步驟④所用的接種工具是__________(2)下表為兩種培養(yǎng)基的配方,步驟④應(yīng)選其中的培養(yǎng)基_________。培養(yǎng)基類型培養(yǎng)基組分培養(yǎng)基甲甘露醇、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸餾水培養(yǎng)基乙甘露醇、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸餾水、瓊脂(3)若在④的平板上統(tǒng)計(jì)出菌落的平均數(shù)量為130個(gè),則每克土壤中含有的固氮菌為_________個(gè)。(4)將純化的固氮菌置于完全培養(yǎng)液中擴(kuò)大培養(yǎng)48h,經(jīng)離心后收集下層細(xì)胞并轉(zhuǎn)移至特定培養(yǎng)基中進(jìn)行固氮能力的測定,篩選出固氮能力最強(qiáng)的菌種CM12,為進(jìn)一步鑒定其固氮能力,科研人員選用發(fā)芽一致的玉米種子進(jìn)行3組盆栽實(shí)驗(yàn),30d后測定土壤微生物有機(jī)氮含量,結(jié)果如下圖。N:尿素處理組[每盆土壤澆灌50mL有氮全營養(yǎng)液(在1000mL無氮植物營養(yǎng)液中加入0.12g尿素)];CM12:自生固氮菌CM12處理組(每盆土壤澆灌50mL接種自固氮菌的無氮植物營養(yǎng)液)①對照組(CK)的處理為_________②實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機(jī)氮含量。與尿素處理組相比,CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量增加了約_________%。③自生固氮菌較共生固氮菌(如根瘤菌)應(yīng)用范圍更廣,原因是_________?!即鸢浮剑?)①.在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層,有更多的固氮菌生長(或固氮菌一般為需氧型,生活在土壤表層)②.輕壓③.使菌種和無菌水充分混勻④.涂布器(2)乙(3)1.3×107(4)①.每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液
②.120③.自生固氮菌能在土壤中獨(dú)立固氮,不受宿主的限制
〖祥解〗培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì);分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽,其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏,因?yàn)樗鼈儊碓从趧?dòng)物原料,含有糖、維生素和有機(jī)氮等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上,培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。(1)土壤中含有豐富微生物,同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物數(shù)量最大、種類最多,在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層,有更多的固氮菌生長,故步驟①土樣取自當(dāng)?shù)乇韺油寥?;步驟③對菌液進(jìn)行梯度稀釋的過程中,用移液管取樣前,需用手指輕壓移液管上的橡皮頭,吹吸3次,目的是使菌種和無菌水充分混勻;由圖觀察可知,實(shí)驗(yàn)采用的是稀釋涂布平板法,所以步驟④中所用的接種工具是涂布器。(2)由題干信息分析可知,科研人員的目的是分離土壤中自生固氮菌,故為了模擬類似的生長環(huán)境,培養(yǎng)基中需要添加多種無機(jī)鹽來模擬土壤環(huán)境,且應(yīng)為固體培養(yǎng)基,需要添加凝固劑如瓊脂,故應(yīng)選擇培養(yǎng)基乙。(3)由圖觀察可知,10g土壤加到90ml無菌水是稀釋10倍,此后共稀釋104倍,若在④的平板上統(tǒng)計(jì)的菌落的平均數(shù)量為130個(gè),則每克土壤中含有的固氮菌為130÷0.1×104=1.3×107個(gè)。(4)①對照組的目的是排除無關(guān)變量對實(shí)驗(yàn)的影響,故對照組(CK)的處理為每盆土壤澆50mL無氮植物營養(yǎng)液。②由柱狀圖可知,空白對照組中土壤微生物有機(jī)氮含量為10,CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量為22,故與對照組相比,CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量增加值大概為(22-10)÷10×100%=120%。③自生固氮菌比共生固氮菌(如根瘤菌)的應(yīng)用范圍更廣,原因是自生固氮菌能在土壤中獨(dú)立固氮,不受宿主的限制。20.Bad基因編碼204個(gè)氨基酸,是Bel2(B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2)家族中相關(guān)的促凋亡基因。下圖為科研人員獲得Bad基因重組細(xì)菌的主要流程。請回答:(1)構(gòu)建Bad基因的克隆時(shí),基因組DNA不能直接用作PCR擴(kuò)增的模板,原因是真核生物基因組中存在_________序列,在形成mRNA的剪接加工過程中被切除。從細(xì)胞中提取總RNA或mRNA,在__________的引導(dǎo)下使用逆轉(zhuǎn)錄酶來合成cDNA鏈。(2)引物設(shè)計(jì)的質(zhì)量是決定圖中“②PCR”成敗的關(guān)鍵因素。首先從核酸數(shù)據(jù)庫中獲得mBad基因的編碼序列,然后在引物的_________端加上不同的限制酶切位點(diǎn)序列,第三步為了保證抗原標(biāo)簽與mBad基因表達(dá)產(chǎn)物中氨基酸順序正確,有時(shí)需要補(bǔ)加核苷酸,但是注意不能產(chǎn)生_____________,否則會導(dǎo)致蛋End白質(zhì)分子量的減小。(3)如圖為②PCR過程的程序參數(shù)。②過程PCR反應(yīng)體系配制完成后,先在冰上預(yù)冷,等程序設(shè)置完畢后再放入PCR儀中,這種冷啟動(dòng)法可以_________。Step1和Step8的主要目的分別是_________。由于Step3引物含有___________,不能和模板完全匹配,所以Step3的溫度比Step6要低一點(diǎn)。(4)一般而言,②過程中雙鏈DNA分子越大則電泳遷移速率越____________。除此之外,DNA分子的構(gòu)型對其電泳遷移速率影響也大:環(huán)狀超螺旋DNA電泳的速率一般快于線形DNA。從結(jié)構(gòu)的角度分析,原因可能是______________。(5)研究人員在④過程中應(yīng)優(yōu)先選擇___________和_____________兩種限制酶及E.colDNA連接酶形成重組質(zhì)粒。(6)篩選得到的陽性重組子細(xì)菌還需要進(jìn)一步通過DNA測序,原因是____________?!即鸢浮剑?)①.內(nèi)含子②.mRNA(2)①.5'②.終止密碼子(3)①.降低TaqDNA聚合酶的活性;減少引物錯(cuò)配形成的產(chǎn)物②.將模板DNA完全變性、使未完全延伸的產(chǎn)物實(shí)現(xiàn)充分延伸③.限制酶序列(4)①.慢②.超螺旋狀的DNA體積最小,在凝膠(凝膠其實(shí)是多孔的物質(zhì))中的孔中運(yùn)動(dòng)的阻力小,因此泳動(dòng)的快(5)①.EcoRI②.BamHI(6)可能目的基因沒有與載體連接〖祥解〗多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段:1、PCR原理:在解旋酶作用下,打開DNA雙鏈,每條DNA單鏈作為母鏈,以4中游離脫氧核苷酸為原料,合成子鏈,在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。2、PCR反應(yīng)過程是:變性→復(fù)性→延伸。(1)真核生物基因組中存在內(nèi)含子序列,在形成mRNA的剪接加工過程中被切除,所以構(gòu)建Bad基因的克隆時(shí),基因組DNA不能直接用作PCR擴(kuò)增的模板。在mRNA的的引導(dǎo)下使用逆轉(zhuǎn)錄酶來合成cDNA鏈。(2)DNA的合成方向是從5'端到3'端延伸,限制酶會破壞DNA序列,所以在引物的5'端加上不同的限制酶切位點(diǎn)序列,第三步為了保證抗原標(biāo)簽與mBad基因表達(dá)產(chǎn)物中氨基酸順序正確,有時(shí)需要補(bǔ)加核苷酸,有氧終止密碼子會導(dǎo)致翻譯的終止,所以補(bǔ)加的核苷酸不能產(chǎn)生終止密碼子,否則會導(dǎo)致蛋End白質(zhì)分子量的減小。(3)冷啟動(dòng)法可降低TaqDNA聚合酶的活性;減少引物錯(cuò)配形成的產(chǎn)物。Step1,94℃5min,目的是將模板DNA完全變性;Step8,72℃10min的目的是使未完全延伸的產(chǎn)物實(shí)現(xiàn)充分延伸。由于Step3引物含有添加的限制酶序列,不能和模板完全匹配,所以Step3的溫度比Step6要低一點(diǎn)。(4)電泳是根據(jù)DNA分子的大小進(jìn)行分離的技術(shù),雙鏈DNA分子越大則電泳遷移速率越慢。因?yàn)槌菪隣畹腄NA體積最小,在凝膠(凝膠其實(shí)是多孔的物質(zhì))中的孔中運(yùn)動(dòng)的阻力小,因此泳動(dòng)的快,線狀的DNA在孔內(nèi)運(yùn)動(dòng)阻力很大,因此泳動(dòng)慢。(5)由于SmaI和HindIII的酶切結(jié)果都是平末端,不容易連接,所以一般用EcoRI和BamHI兩種限制酶進(jìn)行切割目的基因,然后用E.coliDNA連接酶形成重組質(zhì)粒。(6)目的基因沒有與載體連接,空質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞也會出現(xiàn)陽性重組子細(xì)菌,所以篩選得到的陽性重組子細(xì)菌還需要進(jìn)一步通過DNA測序鑒定。21.細(xì)胞工程在藥物生產(chǎn)和育種等領(lǐng)域應(yīng)用十分廣泛。閱讀下列材料,回答下列問題。材料一:人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白。如圖是制備抗HCG單克隆抗體流程示意圖。材料二:西湖龍井含有的茶堿是植物細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,具有提神、抗衰老功效,可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)來實(shí)現(xiàn)茶堿的工業(yè)化生產(chǎn)。(1)免疫處理的小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞群能合成并分泌___________(填“一種”或“多種”)抗體。步驟③需對選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行___________及抗體檢測,該過程一般在多孔細(xì)胞培養(yǎng)板上進(jìn)行:先將細(xì)胞懸浮液稀釋到7~10個(gè)細(xì)胞/mL,再在每個(gè)培養(yǎng)孔中滴入0.1mL細(xì)胞稀釋液,其目的是___________。(2)單克隆抗體最廣泛的用途是用作體外診斷試劑,如科學(xué)家利用人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體,制作出了早孕試紙,該試紙可以利用尿液診斷早孕的理由是_______________。鼠源性單克隆抗體可應(yīng)用于腫瘤的臨床免疫治療,在注射前需要進(jìn)行人源化改造,除抗原結(jié)合區(qū)域外,其他部分都替換為人抗體區(qū)段,目的是降低___________。(3)若利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),可將龍井茶葉細(xì)胞培養(yǎng)到___________階段,然后從___________(填細(xì)胞器)中提取茶堿;若要獲得神奇的人工種子,可將龍井茶葉細(xì)胞培養(yǎng)到___________,再和具有養(yǎng)分的人工胚乳一起包埋在具有保護(hù)功能的人工種皮中;由其培育成的植株生殖方式為___________。(4)與常規(guī)育種相比,植物組織培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)生的植株特點(diǎn)有___________?!即鸢浮剑?)①.多種②.克隆化培養(yǎng)③.使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞,達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的(2)①.懷孕后尿液中含有HCG,單克隆抗體可以與它特異性結(jié)合,從而診斷早孕②.免疫排斥反應(yīng)(3)①.愈傷組織②.液泡③.胚狀體④.無性生殖(4)能保持植物原有的遺傳特性、繁殖速度快〖祥解〗1、單克隆抗體的制備過程:首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi),使其發(fā)生免疫,小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。2、植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用:植物繁殖的新途徑(微型繁殖、作物脫毒、人工種子)、作物新品種的培育(單倍體育種、突變體的利用)、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(1)免疫處理的小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞群,能合成并分泌多種抗體,而1個(gè)漿細(xì)胞只能合成一種抗體;步驟③需對選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)及抗體檢測,該過程一般在多孔細(xì)胞培養(yǎng)板上進(jìn)行;用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)時(shí),需要稀釋,其目的是使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞,達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。(2)人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體本質(zhì)為蛋白質(zhì),所用檢測早孕的方法為抗原-抗體雜交,生產(chǎn)的單克隆抗體可以與人絨毛膜促性腺激素(或HCG)特異性結(jié)合,懷孕后尿液中含有HCG,單克隆抗體可以與它特異性結(jié)合,從而診斷早孕。為避免鼠源性單克隆抗體進(jìn)入人體后被人體免疫系統(tǒng)識別并清除,降低免疫排斥反應(yīng),在注射前需要進(jìn)行人源化改造,除抗原結(jié)合區(qū)域外,其他部分都替換為人抗體區(qū)段。(3)液泡中含有無機(jī)鹽、糖類等有機(jī)物,故若利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),可將龍井茶葉細(xì)胞培養(yǎng)到愈傷組織階段,愈傷組織細(xì)胞呈高度液泡化,然后從其液泡中提取茶堿;若要獲得神奇的人工種子,可將龍井茶葉細(xì)胞培養(yǎng)到胚狀體階段,經(jīng)過人工薄膜包裹得到人工種子;由于該過程中沒有經(jīng)過精卵結(jié)合,故生殖方式為無性生殖。(4)植物組織培養(yǎng)為無性生殖,與常規(guī)育種相比,植物組織培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)生的植株特點(diǎn)是:能保持植物原有的遺傳特性、繁殖速度快等。22.近年來,我國科研工作者在國際上首次利用體細(xì)胞成功創(chuàng)建克隆獼猴中中、華華和夢夢。體細(xì)胞克隆猴的誕生,是人類認(rèn)識克隆技術(shù),研究細(xì)胞功能和治療性克隆的里程碑式研究結(jié)果。同時(shí),也是人類干細(xì)胞研究方興未艾事業(yè)的一個(gè)開始??寺∩鲜霁J猴的操作流程如圖1。與此同時(shí),我國科研人員利用大鼠、小鼠兩個(gè)遠(yuǎn)親物種創(chuàng)造出世界首例異源二倍體胚胎干細(xì)胞(AdESCs),操作流程如圖2。請回答下列問題:(1)利用_________酶處理一只流產(chǎn)獼猴胎兒的皮膚,獲取分散的成纖維細(xì)胞,制備細(xì)胞懸液。然后放入氣體條件是_________的恒溫箱中培養(yǎng)。(2)請你推測圖1中注入的神秘濃度比的藥物的作用是__________,注入細(xì)胞的方法是_________(3)通常情況下,卵母細(xì)胞要發(fā)育到減數(shù)第_________次分裂中期時(shí)才適合核移植,早期胚胎要發(fā)育到__________時(shí)才適合進(jìn)行胚胎移植。(4)我們大膽推測,通過體細(xì)胞克隆猴的研究,將來會找到讓高度分化的人體細(xì)胞逆向生成_________的方法,進(jìn)而誘導(dǎo)克隆出_________用于替換人體相應(yīng)病變的結(jié)構(gòu)(5)圖2過程涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)和__________不用大鼠和小鼠直接交配制備異源二倍體胚胎干細(xì)胞的原因是二者之間存在_________〖答案〗(1)①.胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)②.95%空氣和5%的CO2(2)①.激活重構(gòu)胚,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程②.顯微注射法(3)①.二②.桑椹胚或囊胚(4)①.胚胎干細(xì)胞②.相應(yīng)器官(5)①.動(dòng)物細(xì)胞融合(孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞和孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞融合)②.生殖隔離〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程:取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。(1)用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理組織可分散成單個(gè)細(xì)胞,故利用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理一只流產(chǎn)獼猴胎兒的皮膚,獲取分散的成纖維細(xì)胞,制備細(xì)胞懸液。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,恒溫箱的氣體條件是95%空氣和5%的CO2。(2)結(jié)合圖可知,注入的神秘濃度比的藥物的作用是激活重構(gòu)胚,使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。圖1中的重組細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞,將神秘濃度比的藥物注入細(xì)胞的方法是顯微注射法。(3)卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí),細(xì)胞已經(jīng)成熟,具備受精能力,故卵母細(xì)胞要發(fā)育到減數(shù)第二次分裂中期時(shí)才適合核移植,早期胚胎要發(fā)育到桑椹胚或囊胚時(shí)才適合進(jìn)行胚胎移植。(4)通過體細(xì)胞克隆猴的研究,我們將來會找到方法,讓高度分化的人體細(xì)胞逆向生成胚胎干細(xì)胞,并誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞克隆出相應(yīng)器官用于替換人體相應(yīng)病變結(jié)構(gòu)。(5)圖2過程涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合(孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞和孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞融合)。由題干可知,大鼠和小鼠是兩個(gè)遠(yuǎn)親物種,二者之間存在生殖隔離,自然狀態(tài)下無法完成受精作用,或者即便能完成也不能發(fā)育,因此不用大鼠和小鼠直接交配制備異源二倍體胚胎干細(xì)胞。23.草莓常用匍匐莖進(jìn)行營養(yǎng)繁殖,植株若感染病毒易傳播給后代,病毒在作物體內(nèi)積累,會導(dǎo)致產(chǎn)量降低,品質(zhì)變差??蒲腥藛T通過一系列的方法、步驟,建立了草莓脫毒快速繁殖體系。(1)外植體經(jīng)過_________________等過程能夠發(fā)育成完整植株,體現(xiàn)了植物細(xì)胞有______________。若培育脫毒組培苗,通常選取植株分生組織(如莖尖或根尖)作為外植體的主要原因是_________________________________。(2)在超凈工作臺上,先后用75%酒精和0.1%的氯化汞對草莓匍匐莖尖進(jìn)行_________,每次處理后均需用_________沖洗3至5次,然后接種到經(jīng)_____________處理的培養(yǎng)基上。(3)圖是兩種植物激素不同濃度與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系,其中植物激素Y屬于_________________(生長素類、細(xì)胞分裂素類)激素。不同植物激素濃度與芽、根、愈傷組織的關(guān)系(4)科研人員進(jìn)一步用不同濃度和比例的植物激素處理外植體,一段時(shí)間后觀察結(jié)果如下表(6-BA是細(xì)胞分裂素類激素,IBA是生長素類激素):處理組6-BA(mg/L)IBA(mg/L)接種數(shù)(個(gè))萌芽率(%)增殖系數(shù)10.501233.35.420.50.11283.36.630.50.21258.34.341.001250.03.951.00.11241.03.861.o0.21233.33.0萌芽率(%)=草莓外植體萌芽數(shù)/草莓外植體總接種數(shù)×100%增殖系數(shù)=草莓組培苗增殖腋芽數(shù)/草莓組培苗總接種數(shù)從表中可以看出,處理組___________草莓的萌芽率和增殖系數(shù)顯著高于其他組,該組激素配比可用于草莓的快速繁殖。若將組培苗移植到大田中種植,還需要誘導(dǎo)_________。結(jié)合圖1分析,此時(shí)6-BA與IBA比值應(yīng)_________(大于1、等于1、小于1)?!即鸢浮剑?)①.脫分化、再分化②.全能性③.分生區(qū)附近的病毒極少,甚至無病毒(2)①.消毒②.無菌水③.(高壓蒸汽)滅菌(3)生長素類(4)①.2②.生根③.小于1〖祥解〗分析題圖:在植物組織培養(yǎng)時(shí),通過調(diào)節(jié)生長素和細(xì)胞分裂素的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。生長素用量比細(xì)胞分裂素用量,比值高時(shí),有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低時(shí),有利于芽的分化、抑制根的形成;比值適中時(shí),促進(jìn)愈傷組織的生長。所以圖中激素Y是生長素,激素X是細(xì)胞分裂素。(1)外植體經(jīng)過脫分化、再分化等過程能夠發(fā)育成完整植株,體現(xiàn)了植物細(xì)胞有全能性。若培育脫毒組培苗,由于分生區(qū)附近的病毒極少,甚至無病毒,因此通常選取植株分生組織(如莖尖或根尖)作為外植體。(2)在超凈工作臺上,先后用75%酒精和0.1%的氯化汞對草莓匍匐莖尖進(jìn)行消毒,每次處理后均需用無菌水沖洗3至5次,然后接種到經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基上。(3)據(jù)題圖分析可知,生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值高時(shí)(大于1),有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低時(shí)(小于1),有利于芽的分化、抑制根的形成;比值適中時(shí)(等于1),促進(jìn)愈傷組織的生長。由圖可知,當(dāng)植物激素Y用量越高時(shí),有利于根的分化,而當(dāng)植物激素X用量越高時(shí),有利于芽的分化,所以圖中激素Y是生長素,激素X是細(xì)胞分裂素。(4)從表中可以看出,處理組2草莓的萌芽率和增殖系數(shù)顯著高于其他組,該組激素配比可用于草莓的快速繁殖。若將組培苗移植到大田中種植,還需要誘導(dǎo)生根。結(jié)合圖1分析,生長素用量大于細(xì)胞分裂素用量時(shí),有利于根的分化,因此6-BA與IBA比值應(yīng)小于1,這樣有利于根的分化。江蘇省徐州市2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中試題說明:1.答題前,請將自己的姓名、考號及所在學(xué)校、班級等填寫在答題卡指定位置。2.〖答案〗必須按要求寫在答題卡的對應(yīng)位置上,在草稿紙、試卷上答題一律無效。一、單項(xiàng)選擇題:共14題,每題2分,共28分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意。1.下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作說法正確的是()A.培養(yǎng)酵母菌的試劑和器具都要進(jìn)行濕熱滅菌B.配制培養(yǎng)基、倒平板、接種均需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.倒好的平板要立即使用,以免表面干燥,影響酵母菌生長D.轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線〖答案〗D〖祥解〗1、滅菌常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和濕熱滅菌。消毒常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。
2、平板劃線操作:(1)平板劃線操作的第一步之前要灼燒接種環(huán),目的是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基。(2)平板劃線除首次劃線外,每次劃線前都要灼燒接種環(huán),目的是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種。(3)平板劃線結(jié)束時(shí)要灼燒接種環(huán),其目的是避免接種環(huán)上殘留的菌種污染環(huán)境和感染操作者?!驹斘觥緼、接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理,接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理,吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理,培養(yǎng)基及多種器材用濕熱滅菌法處理,A錯(cuò)誤;B、倒平板、接種需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,而配培養(yǎng)基不需要在酒精燈的火焰旁進(jìn)行,因?yàn)榕囵B(yǎng)基最后還需要滅菌,B錯(cuò)誤;C、倒好的平板需要冷卻后使用,且不宜久存,以免表面干燥,影響接種后微生物的生長,C錯(cuò)誤;D、平板劃線轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線,主要目的是殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,D正確。故選D。2.某生物興趣小組的同學(xué)利用圖示裝置進(jìn)行果酒和果醋的制作,下列相關(guān)敘述正確的是()A.乙酸發(fā)酵期間,關(guān)閉閥a和閥b,避免空氣的進(jìn)入B.新鮮葡萄沖洗、晾干、榨汁、滅菌后裝入發(fā)酵瓶C.酒精發(fā)酵期間,開啟磁力攪拌器來提高發(fā)酵液中的溶解氧D.果酒制作過程中,酵母菌進(jìn)行了有氧呼吸和無氧呼吸〖答案〗D〖祥解〗1、果酒制作的原理是利用酵母菌在無氧條件下才能進(jìn)行酒精發(fā)酵產(chǎn)生酒精,若是在有氧條件下則進(jìn)行有氧呼吸而大量繁殖。果酒發(fā)酵是在18~30°C、缺氧、呈酸性的環(huán)境中。2、果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧氣充足的條件將乙醇先轉(zhuǎn)化為乙醛,在進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為醋酸。醋酸菌是好氧菌,必須生活在氧氣充足的環(huán)境中,且最適生長溫度是30~35°C?!驹斘觥緼、乙酸發(fā)酵所需的菌種是需氧菌,發(fā)酵期間不能將兩個(gè)閥門都關(guān)閉,A錯(cuò)誤;B、新鮮葡萄不能滅菌,否則會導(dǎo)致酵母菌死亡,從而使發(fā)酵失敗,B錯(cuò)誤;C、酒精發(fā)酵利用的是酵母菌的無氧呼吸,不能提高溶解氧含量,C錯(cuò)誤;D、果酒制作過程中,酵母菌進(jìn)行了有氧呼吸以增加酵母菌數(shù)量,進(jìn)行無氧呼吸進(jìn)行發(fā)酵,D正確。故選D。3.下列有關(guān)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用的敘述,正確的是()A.濕熱滅菌后倒的平板需倒置,接種后的平板可以不倒置B.同一稀釋度下涂布一個(gè)平板即可,待菌落數(shù)穩(wěn)定后計(jì)數(shù)C.將未接種的平板培養(yǎng)并觀察有無菌落,以判斷培養(yǎng)基滅菌是否合格D.纖維素分解菌鑒定時(shí),在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,若指示劑變紅則能初步鑒定〖答案〗C〖祥解〗1、制備培養(yǎng)基的步驟:計(jì)算、稱量、溶化、(調(diào)節(jié)pH)、滅菌、倒平板。2、平板冷凝后要將平板倒置,既可防止皿蓋上凝結(jié)的水滴滴入培養(yǎng)基造成污染,又可避免培養(yǎng)基表面的水分過快揮發(fā)。3、稀釋涂布平板法:用移液管和無菌水將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后用涂布器將不同稀釋度的菌液分別均勻地涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)?!驹斘觥緼、平板倒置,既可防止皿蓋上凝結(jié)的水滴滴入培養(yǎng)基造成污染,又可避免培養(yǎng)基表面的水分過快揮發(fā),接種后的平板也需要倒置培養(yǎng),A錯(cuò)誤;B、同一稀釋度下至少要涂布三個(gè)平板,進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn),并且要培養(yǎng)到菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)計(jì)數(shù),菌落數(shù)在30~300之間,B錯(cuò)誤;C、將未接種的平板培養(yǎng)并觀察有無菌落,若未接種的培養(yǎng)基表面有菌落生長,則培養(yǎng)基滅菌不合格,若未接種的培養(yǎng)基表面無菌落生長,則培養(yǎng)基滅菌合格,C正確;D、尿素分解菌可以產(chǎn)生脲酶,脲酶可以催化尿素分解為NH3,NH3呈堿性遇酚紅試劑變?yōu)榧t色,故尿素分解菌鑒定時(shí),在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,指示劑變紅則能初步鑒定;若對纖維素分解菌鑒定時(shí),需在培養(yǎng)基中加入剛果紅試劑,D錯(cuò)誤。故選C。4.如圖是微生物平板劃線示意圖,劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.第1區(qū)和第5區(qū)的劃線不能相連B.劃線操作時(shí)完全打開皿蓋,劃完立即蓋上C.在五個(gè)區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌D.接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基,否則難以達(dá)到分離單菌落的目的〖答案〗B〖祥解〗平板劃線的操作的基本步驟是:(1)右手持接種環(huán),經(jīng)火焰滅菌,待涼后,在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞,并將試管口過火焰,將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液,沾取一環(huán)菌液,將試管口過火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持瓊脂平板,皿蓋打開一條縫,右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋,接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面。(3)燒灼接種環(huán),殺滅環(huán)上殘留菌液,待冷卻,從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線,重復(fù)以上操作,在第三四五區(qū)內(nèi)劃線,注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。(4)將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。【詳析】A、進(jìn)行平板劃線時(shí),不能將第1區(qū)和第5區(qū)的劃線相連,避免已分離開的菌種再次聚集,最終無法獲得單菌落,A正確;B、為避免雜菌污染,劃線操作時(shí)不能將皿蓋完全打開,只能打開一條縫,B錯(cuò)誤;C、在五個(gè)區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌,以防止雜菌污染,并保證每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端以及防止污染環(huán)境和操作者,C正確;D、接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基,因?yàn)閯澠婆囵B(yǎng)基會導(dǎo)致菌種不容易擴(kuò)散開,難以達(dá)到分離單菌落的目的,D正確。故選B。5.利用胡蘿卜根段培養(yǎng)獲得試管苗的過程如下圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.對試管苗煉苗(馴化)的操作步驟之一是用流水除去根部培養(yǎng)基B.步驟②消毒一般是先用70%酒精浸泡10min,再用無菌水沖洗2~3次C.步驟③切取的組織塊中需帶有形成層,原因是其分裂旺盛易脫分化D.步驟⑤和步驟⑥所用培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素相對含量不同〖答案〗B〖祥解〗離體的植物組織或細(xì)胞,在培養(yǎng)一段時(shí)間后,會通過細(xì)胞分裂形成愈傷組織。愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱為植物細(xì)胞的脫分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官,這個(gè)過程叫做再分化。再分化形成的試管苗,移栽到地里,可以發(fā)育成完整的植物體?!驹斘觥緼、對試管苗煉苗(馴化)的操作步驟之一是用流水除去根部培養(yǎng)基,將幼苗需移植到消過毒的新環(huán)境下生活一段時(shí)間,等幼苗長壯后再移栽到土壤中,A正確;B、步驟②消毒方法一般是先用70%酒精浸泡10s(時(shí)間過程會傷害植物細(xì)胞),再用無菌水沖洗2~3次,B錯(cuò)誤;C、步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,其原因是形成層有大量的紡錘狀原始細(xì)胞和射線原始細(xì)胞,它們分裂迅速,組培時(shí)容易形成愈傷組織,繼而獲得組培苗,C正確;D、步驟⑤(脫分化)和步驟⑥(再分化)所用培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素相對含量不同,D正確。故選B。6.細(xì)胞融合技術(shù)在生物育種和免疫學(xué)中有著廣泛應(yīng)用,下圖為細(xì)胞融合的簡略過程,據(jù)下圖分析,下列相關(guān)敘述正確的是()A.形成乙所依賴的生物學(xué)原理為細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性B.甲中a和b在體外受精前,需在體外進(jìn)行卵子的成熟培養(yǎng)和精子獲得能量的處理C.若a和b分別為基因型AaBB、aaBb個(gè)體所產(chǎn)生的花粉細(xì)胞,則c有4種基因型D.對于已形成細(xì)胞d,利用選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞即可大規(guī)模生產(chǎn)單克隆抗體丙〖答案〗A〖祥解〗據(jù)圖分析,圖中甲是有性雜交產(chǎn)生的后代,則a、b分別表示精子和卵細(xì)胞;乙是植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的后代,則a、b表示兩種植物細(xì)胞,融合前需要用酶解法去掉細(xì)胞壁;丙是單克隆抗體,則a、b表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,融合產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞d?!驹斘觥緼、乙是植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的后代,細(xì)胞融合過程體現(xiàn)細(xì)胞膜的流動(dòng)性,用雜交細(xì)胞培養(yǎng)出植株的過程體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性,A正確;B、圖中甲是有性雜交產(chǎn)生的后代試管動(dòng)物,則a、b分別表示精子和卵細(xì)胞,需在體外進(jìn)行卵子的成熟培養(yǎng)和精子獲能處理(獲得能力而非獲得能量)才能進(jìn)行體外受精,B錯(cuò)誤;C、若a和b分別為基因型AaBB、aaBb植株的花粉細(xì)胞,AaBB能產(chǎn)生AB、aB兩種花粉,aaBb能產(chǎn)生aB、ab兩種花粉,去壁兩兩融合可以得到AABB、aaBB、aabb、AaBB、AaBb、aaBb共6種基因型的細(xì)胞,C錯(cuò)誤;D、對于已融合形成的細(xì)胞d,還需要經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢驗(yàn)陽性的篩選,才能大規(guī)模生產(chǎn)單克隆抗體丙,D錯(cuò)誤。故選A。7.下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎工程和細(xì)胞工程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.猴的核移植細(xì)胞通過胚胎工程已成功地培育出了克隆猴B.早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體C.培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)液需要定期更換,防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞造成危害D.進(jìn)行胚胎移植前,要對供體和受體進(jìn)行免疫檢查,以防止發(fā)生免疫排斥反應(yīng)〖答案〗D〖祥解〗胚胎移植的生理基礎(chǔ)(1)供體與受體相同的生理變化,為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境;(2)胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài),這就為胚胎的收集提供了可能;(3)子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng),這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能;(4)胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。【詳析】A、成功培育克隆猴的過程涉及的生物技術(shù)有核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等,A正確;B、為了提高胚胎移植的成功率,早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體,B正確;C、為防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害,培養(yǎng)液需要定期更換,C正確;D、子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng),則不需要對供體和受體進(jìn)行免疫檢查,D錯(cuò)誤。故選D。8.科研人員用小鼠胚胎干細(xì)胞(mESCs)構(gòu)建“體外卵巢”。該卵巢中的卵子受精后產(chǎn)生了健康、有生育能力的后代,基本過程如下圖。下列相關(guān)敘述正確的是()A.過程①細(xì)胞內(nèi)存在基因的選擇性表達(dá)B.過程②用滅活的病毒誘導(dǎo)兩種細(xì)胞融合C.該研究結(jié)果說明小鼠的胚胎干細(xì)胞具有全能性D.后代小鼠的遺傳物質(zhì)僅僅來自親代小鼠胚胎干細(xì)胞〖答案〗A〖祥解〗物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程,融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法也類似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。【詳析】A、過程①表示細(xì)胞的分裂分化,細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇表達(dá),故過程①細(xì)胞內(nèi)存在基因的選擇性表達(dá),A正確;B、過程②是胚胎性卵巢體細(xì)胞與卵母細(xì)胞結(jié)構(gòu)重建過程,該過程不需要細(xì)胞融合,B錯(cuò)誤;C、該研究結(jié)果利用了精卵結(jié)合形成的受精卵發(fā)育為正常小鼠,不能說明小鼠的胚胎干細(xì)胞具有全能性,C錯(cuò)誤;D、后代小鼠的遺傳物質(zhì)來自親代小鼠胚胎干細(xì)胞和精子,D錯(cuò)誤。故選A。9.狼爪瓦松是一種具有觀賞價(jià)值的野生花卉且其細(xì)胞中的黃酮類化合物可入藥。狼爪瓦松的擴(kuò)大培養(yǎng)具體過程如圖所示(其中數(shù)字序號代表相應(yīng)處理過程)。下列有關(guān)分析正確的有()A.過程③先在生長素/細(xì)胞分裂素的值高的培養(yǎng)基中培養(yǎng),再轉(zhuǎn)移至其值低的培養(yǎng)基中B.制備培養(yǎng)基的正確順序是:稱量→溶解→定容→調(diào)pH值→分裝→滅菌C.過程④常用射線或化學(xué)物質(zhì)處理即可獲得大量所需的突變體植株丙D.過程⑥利用愈傷組織分裂能力強(qiáng)、全能性高的特點(diǎn)可大量獲得黃酮類化合物〖答案〗B〖祥解〗生長素/細(xì)胞分裂素的比值高的培養(yǎng)基為誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基,由愈傷組織經(jīng)脫分化誘導(dǎo)再生植株的過程中應(yīng)先誘導(dǎo)發(fā)芽,再誘導(dǎo)生根。【詳析】A、生長素/細(xì)胞分裂素的比值高的培養(yǎng)基為誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基,由愈傷組織經(jīng)脫分化誘導(dǎo)再生植株的過程中應(yīng)先誘導(dǎo)發(fā)芽,再誘導(dǎo)生根,A錯(cuò)誤;B、制備培養(yǎng)基的正確順序?yàn)椋悍Q量→溶解→定容→調(diào)pH值→分裝→滅菌,B正確;C、生物變異具有低頻性和不定向性,因此射線或化學(xué)物質(zhì)處理可以提高突變植株出現(xiàn)的概率,對突變植株進(jìn)行選擇、培養(yǎng)后才能獲得大量所需的突變體植株丙,C錯(cuò)誤;D、過程⑥利用愈傷組織分裂能力強(qiáng)、全能性高的特點(diǎn)可誘導(dǎo)出能產(chǎn)生黃酮類化合物的組織細(xì)胞,對其進(jìn)行細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)即可大量獲得黃酮類化合物,D錯(cuò)誤。故選B。10.大腸桿菌是基因工程技術(shù)中被廣泛采用的工具,人生長激素的基因工程過程如圖所示。下列敘述正確的是()A.經(jīng)①獲得該mRNA的最佳材料是受精卵B.通過①②過程,可以構(gòu)建基因組文庫C.要檢測③⑥過程的產(chǎn)物可分別用PCR技術(shù)和抗原—抗體雜交技術(shù)D.⑤過程要在低溫和較高濃度的氯化鈣溶液中處理使重組DNA易進(jìn)入受體細(xì)胞〖答案〗C〖祥解〗基因工程過程:1、目的基因的提?。?、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合;3、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;4、受體細(xì)胞內(nèi)基因的表達(dá)?!驹斘觥緼、經(jīng)①獲得該mRNA的最佳材料是特定的組織細(xì)胞,而不是受精卵,A錯(cuò)誤;B、通過①②過程得到cDNA,cDNA所含的基因不是全部基因不能構(gòu)建基因組文庫,B錯(cuò)誤;C、要檢測③的產(chǎn)物生長激素基因可以用PCR技術(shù)擴(kuò)增,要檢測⑥過程的產(chǎn)物可用抗原—抗體雜交技術(shù),C正確;D、⑤過程要在低溫和低滲氯化鈣溶液中處理,通過增大細(xì)菌細(xì)胞壁通透性使重組DNA易進(jìn)入受體細(xì)胞,D錯(cuò)誤。故選C。11.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列相關(guān)敘述正確的是()A.導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞B.擴(kuò)增目的基因時(shí),利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3’-端進(jìn)行子鏈合成C.若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的,則該基因中不含啟動(dòng)子序列D.利用顯微注射法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上〖答案〗C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。(4)目的基因的檢測與鑒定?!驹斘觥緼、導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞不是乳腺細(xì)胞,而是受精卵或早期胚胎細(xì)胞,A錯(cuò)誤;B、在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,擴(kuò)增目的基因時(shí),利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'-端進(jìn)行子鏈合成,B錯(cuò)誤;C、成熟的mRNA是由基因轉(zhuǎn)錄后經(jīng)剪切而成,不含啟動(dòng)子序列,故若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的,則該基因中不含啟動(dòng)子序列,C正確;D、農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上,根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn),將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上,將基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法,但顯微注射法不能將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上,D錯(cuò)誤。故選C。12.科學(xué)家利用基因工程將編碼天然蜘蛛絲蛋白的基因?qū)爰倚Q,生產(chǎn)出一種特殊的復(fù)合纖維蛋白,該復(fù)合纖維蛋白的韌性優(yōu)于天然蠶絲蛋白。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.該蛋白的肽鏈由氨基酸通過氫鍵連接而成B.加熱變性的蛋白質(zhì)不能恢復(fù)原有的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)C.該蛋白的特定結(jié)構(gòu)決定其韌性優(yōu)于天然蠶絲蛋白D.該蛋白與天然蜘蛛絲蛋白的基本組成單位都是氨基酸〖答案〗A〖祥解〗構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸,每種氨基酸分子至少都含有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基,且都有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基連接在同一個(gè)碳原子上,這個(gè)碳原子還連接一個(gè)氫和一個(gè)R基,氨基酸的不同在于R基的不同。【詳析】A、該蛋白的肽鏈由氨基酸通過肽鍵連接而成,A錯(cuò)誤;B、加熱破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)導(dǎo)致其變性,結(jié)構(gòu)和性質(zhì)改變,無法恢復(fù),B正確;C、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定功能,該蛋白的特定結(jié)構(gòu)決定其韌性優(yōu)于天然蠶絲蛋白,C正確;D、該蛋白的基本組成單位是氨基酸,與天然蜘蛛絲蛋白的基本單位相同,D正確。故選A。13.圖甲、乙中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。下列關(guān)于培育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌的敘述正確的是()A.若通過PCR獲取該目的基因,應(yīng)該選用引物甲和引物丙B.圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建表達(dá)載體,可選用BamHI和HindⅢ剪切C.若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞中,需選用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.在受體細(xì)胞中,氨芐青霉素抗性基因和目的基因可同時(shí)表達(dá)〖答案〗A〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。(4)目的基因的檢測與鑒定?!驹斘觥緼、引物是根據(jù)目的基因兩側(cè)序列獲得,需要與目的基因兩端互補(bǔ),故若通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增該目的基因,應(yīng)該選用引物甲和引物丙,A正確;B、圖甲中BamHⅠ會破壞兩種抗性基因,不能選用,故圖乙中目基因左側(cè)只能選BclⅠ,而質(zhì)粒上沒有目的基因右側(cè)Sau3A的切點(diǎn),兩者都有HindⅢ的切點(diǎn),為了防止目的基因與質(zhì)粒隨意連接,故質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建表達(dá)載體,應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ剪切,B錯(cuò)誤;C、若將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞大腸桿菌(微生物細(xì)胞)時(shí),需要用鈣離子等處理,使其處于感受態(tài),C錯(cuò)誤;D、在受體細(xì)胞中,插入目的基因時(shí)氨芐青霉素抗性基因被破壞,不能和目的基因同時(shí)表達(dá),D錯(cuò)誤。故選A。14.下列關(guān)于生物技術(shù)的安全性及倫理問題的觀點(diǎn),正確的是()A.生物武器具有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn),應(yīng)嚴(yán)格禁止B.放寬轉(zhuǎn)基因植物限制,盡可能多的種植轉(zhuǎn)基因植物,提高經(jīng)濟(jì)效益C.當(dāng)今社會的普遍觀點(diǎn)是禁止一切克隆實(shí)驗(yàn),包括治療性克隆和克隆人D.反對設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是因?yàn)樵嚬軏雰杭夹g(shù)屬于無性繁殖方式〖答案〗A〖祥解〗生物技術(shù)的安全性和倫理問題:(1)生物技術(shù)安全性問題包括食物安全、生物安全、環(huán)境安全三個(gè)方面;(2)倫理問題主要在克隆人的問題上出現(xiàn)爭議,據(jù)此分析答題?!驹斘觥緼、生物武器是指有意識的利用微生物、毒素、昆蟲侵襲敵人的軍隊(duì)、人口、農(nóng)作物或者牲畜等目標(biāo),以達(dá)到戰(zhàn)爭目的一類武器,有傳染性強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn),應(yīng)嚴(yán)格禁止,A正確;B、轉(zhuǎn)基因植物的種植應(yīng)有一定限度,不能盡可能多的種植轉(zhuǎn)基因植物,以免造成基因污染和環(huán)境問題,B錯(cuò)誤;C、當(dāng)今社會的普遍觀點(diǎn)是禁止克隆人的實(shí)驗(yàn),反對生殖性克隆,但是不反對治療性克隆,C錯(cuò)誤;D、試管嬰兒技術(shù)屬于有性繁殖,反對設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是可能有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒的性別,D錯(cuò)誤。故選A。二、多項(xiàng)選擇題:共4題,每題3分,共12分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對者得3分,選對但不全的得1分,錯(cuò)選或不答的得0分。15.科研人員將釀酒酵母質(zhì)粒上的丙酮酸脫氫酶基因(PD)替換為植物乳桿菌中的乳酸脫氫酶基因(L-PG),可獲得乳酸乙酯(白酒香味的主要來源)高產(chǎn)菌株,過程如圖。下列分析合理的是()A.轉(zhuǎn)入的L-PG基因表達(dá)產(chǎn)物將影響釀酒酵母的活性B.L-PG基因替換質(zhì)粒上的PD基因是通過同源重組實(shí)現(xiàn)的C.標(biāo)記基因Ampr可檢測否成功構(gòu)建乳酸乙酯高產(chǎn)菌株D.可以利用PCR技術(shù)篩選含有L-PG基因的受體細(xì)胞〖答案〗ABD〖祥解〗分析題圖:圖示是采用基因工程技術(shù)將釀酒酵母質(zhì)粒
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