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文檔簡介
基因工程整合—轉基因動物
情境:人血清白蛋白(HSA)在臨床上需求量很大,通常從人血液中提取,但提取量有
限,因此科學家利用基因工程和胚胎工程等技術培育轉HSA基因牛,該種牛能生產(chǎn)含HSA
的牛乳。
任務:根據(jù)你所學知識,用鉛筆構建一個培育HSA流程(開闊思路,可以構建多條路徑)
(-)獲取目的基因并構建重組DNA分子
1.如何保證該基因只在乳腺細胞內表達?
(-)將重組DNA分子導入受體細胞(法)
①受體細胞是()——()
1.如何獲得精子和卵細胞?
2.獲得的精子和卵細胞能否直接受精?
②受體細胞是()——()
1.胚胎干細胞是囊胚期部位的細胞,是一種未的細胞,具有和
2.胚胎干細胞培養(yǎng)時,需要在培養(yǎng)皿底部制備一層細胞,怎么來,作用是什么?
3.胚胎取出后放在培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),直到,然后用
消化,或者內細胞團,再把它用消化成單個胚胎干細胞,
再置于含有新鮮培養(yǎng)液和的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。
③受體細胞是()——()
1.體細胞核移植時,再取核前,體細胞需要先進行什么操作,有何目的?
2.核移植的方法有哪些?
3.核移植后構成重組細胞,想要發(fā)育成胚胎前,得先進行什么操作?
4.上述三者,哪種需要進行性別鑒定,如何鑒定?
(三)胚胎體外培養(yǎng)
1.培養(yǎng)到什么時候進行進行胚胎移植?
2.為什么要進行胚胎移植?
3.胚胎體外培養(yǎng)時對培養(yǎng)液有何要求?
4.如何獲得更多的胚胎?
(四)胚胎移植
1.代孕母畜有何要求,移植到什么部位?
2.同期發(fā)情(?)的目的是什么?
3.什么時候移植到輸卵管,什么時候移植到子宮角?
4.胚胎移植到受體時是否會被免疫排斥?
(五)分娩,發(fā)育,鑒定
1.如何鑒定乳汁中是否含有該蛋白?
2.如何制取抗體作為探針?
(六)單克隆抗體制備技術
①細胞融合
1.為何要注射特定抗原?
2.從哪里獲得B淋巴細胞?
3.用什么方法融合?
4.有哪些融合的可能性?
②雜交瘤細胞的篩選
5.能夠存活下來的細胞就是能夠分泌需要的
特異性抗體的細胞了么?
6.如何篩選出哪個孔含有我們想要的細胞?
③篩選特定的雜交瘤細胞
7.專一性抗體檢驗陽性的孔里有沒有
可能含有其他類型的細胞?
8.如何進一步篩選?
④單克隆抗體制備
體內:再克降陽性細胞
體外:
BBH合
小★畀:
?融合
B1上海巴修麻詠、且蛆_合成DNA
傳融合*????B垃逞------合成DNA
2DM徑魚被一#化合,(氧基夙斷
3B恭已,也不住長期存活
B淋巴編思
將各種細胞培養(yǎng)在含有氨基喋吟的選擇培養(yǎng)基(H
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