2025年福建省龍巖市連城一中4月高三階段性檢測試題考試生物試題含解析

2025年福建省龍巖市連城一中4月高三階段性檢測試題考試生物試題注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．如圖中的甲、乙、丙分別代表人體體液中物質(zhì)交換、食物網(wǎng)中能量流動、生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)示意圖。以下說法中正確的是（）A．圖甲D與B間以及D與C之間不能直接進(jìn)行物質(zhì)交換B．圖丙中B所處的營養(yǎng)級所含能量最少C．圖乙中B從上一營養(yǎng)級獲得的能量中，C占的比例為a，B體重增加x至少需要A的量為y，則y＝20ax＋5xD．從研究內(nèi)容來看，甲、乙、丙所代表的生命系統(tǒng)層次分別屬于個體、群落和生態(tài)系統(tǒng)水平2．如圖為突觸結(jié)構(gòu)示意圖，相關(guān)敘述正確的是（）A．物質(zhì)①與受體結(jié)合，使下一個神經(jīng)元興奮B．突觸后膜上產(chǎn)生的小電位能傳播C．②與神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合會引起突觸后膜的極化D．突觸上的興奮傳遞過程體現(xiàn)細(xì)胞膜的流動性3．下列關(guān)于生物變異、育種進(jìn)化等相關(guān)知識的敘述，正確的是（）①DNA分子中發(fā)生堿基對的缺失或改變必然引起基因突變②將二倍體植株的花粉進(jìn)行離體培養(yǎng)，得到的是能穩(wěn)定遺傳的植株③突變和基因重組是不定向的，雜合子自交不會導(dǎo)致基因頻率發(fā)生改變④雜交育種就是將不同物種的優(yōu)良性狀通過交配集中在一起⑤北京京巴狗、德國獵犬、澳洲牧羊犬等犬類的多樣性反應(yīng)了物種多樣性⑥共同進(jìn)化指的是不同物種之間在相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展A．①③④ B．①③⑥ C．③ D．⑤⑥4．下列有關(guān)果酒、果醋和腐乳制作的敘述，正確的是（）A．參與果酒發(fā)酵和果醋發(fā)酵的微生物都含有線粒體B．果酒制成后只需將裝置轉(zhuǎn)移至溫度較高的環(huán)境中即可制作果醋C．在腐乳制作過程中必須有能生產(chǎn)蛋白酶的微生物參與D．在腐乳裝瓶時自下而上隨層數(shù)的增加逐漸減少鹽量5．某同學(xué)欲在棄耕一年的自家菜地中開展兩個活動：調(diào)查蒲公英種群密度、調(diào)查土壤中小動物類群豐富度。下列做法正確的是A．兩活動的取樣點應(yīng)相同，且要隨機(jī)取樣B．對土壤中活動能力強(qiáng)的小動物應(yīng)用標(biāo)志重捕法調(diào)查C．只需對樣方中的蒲公英、樣土中的各種存活動物逐個計數(shù)D．調(diào)査結(jié)果不能說明棄耕對蒲公英種群密度及土壤小動物豐富度的影響6．癌癥是嚴(yán)重威脅人類健康的疾病之一，下列有關(guān)描述正確的是（）A．黃曲霉素屬于生物致癌因子B．亞硝胺可通過改變基因的結(jié)構(gòu)而致癌C．長期接觸癌癥患者的人細(xì)胞癌變幾率增加D．癌癥是致癌因子引發(fā)的，患病幾率與年齡無關(guān)二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某沙漠中的嚙齒動物和螞蟻都以植物種子為食，嚙齒動物喜歡取食大的種子，螞蟻偏愛小的種子。下圖為實驗區(qū)保留和移走全部嚙齒動物后螞蟻種群數(shù)量的變化?；卮鹣铝袉栴}：（1）嚙齒動物和螞蟻是否存在競爭關(guān)系？___________，依據(jù)是_____________。（2）當(dāng)所有的嚙齒動物都從實驗區(qū)域中移走后，螞蟻種群數(shù)量的變化是_________，原因是_________。8．（10分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學(xué)家欲獲得高效表達(dá)蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細(xì)胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá)效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進(jìn)行4次PCR擴(kuò)增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進(jìn)一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。為檢測表達(dá)產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較_________的大小，以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點是_________。9．（10分）回答下列（一）、（二）小題：（一）混菌發(fā)酵是指利用兩種以上具有共同作用的微生物，聯(lián)合完成某種發(fā)酵的新型技術(shù)，回答下列與發(fā)酵有關(guān)的問題。芒果挑選和清洗→打漿→___?___→加熱→過濾→滅菌→果酒發(fā)酵→果醋發(fā)酵→澄清→成品芒果醋（1）某研究所打算開展芒果醋的研究，若該研究考慮混合菌發(fā)酵，則最可能選擇________菌。如圖為芒果醋釀造的工藝流程圖，圖中“?”處應(yīng)填寫為_________。（2）芒果醋發(fā)酵過程中需提供的氧氣條件是________________________________________，影響其產(chǎn)物風(fēng)味的原因有___________________________（至少寫兩點）。（3）為提高乙酸含量和縮短發(fā)酵時間，科研人員開展了酵母菌接種量對發(fā)酵影響的實驗，實驗結(jié)果見圖：當(dāng)酵母菌接種量超過1．15%時，___________明顯下降，原因最可能是___________________________。（4）發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液常需進(jìn)行_______________處理，若濾液還是渾濁，可采取靜置沉淀、加熱或___________等方法獲得澄清果醋。（二）回答下列關(guān)于植物克隆方面的問題：（1）在不斷攪動或搖動的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行的培養(yǎng)叫植物細(xì)胞液體懸浮培養(yǎng)，通過該方法可獲得藥用植物細(xì)胞的______________產(chǎn)物，如抗癌藥物紫杉醇等。（2）進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞大多數(shù)來自愈傷組織，愈傷組織通過長時期的___________培養(yǎng)，多個細(xì)胞之間發(fā)生了_____________差異，篩選出生長速度快、次生代謝產(chǎn)物積累多的細(xì)胞系。該培養(yǎng)基可選擇含有大量元素、___________和有機(jī)物的MS基本培養(yǎng)基。（3）在培養(yǎng)方法上可選擇先使用適用________________的生長培養(yǎng)基，然后再使用產(chǎn)物合成培養(yǎng)基。（4）如圖表示某植物體內(nèi)物質(zhì)的合成圖：由代謝過程圖可知，可通過人工增加______________物質(zhì)來提高C物質(zhì)的產(chǎn)量，原理是______________。促進(jìn)更多的B物質(zhì)轉(zhuǎn)化為C物質(zhì)，也可以通過克隆酶2基因并進(jìn)行________________，然后轉(zhuǎn)基因構(gòu)建出C物質(zhì)高產(chǎn)細(xì)胞系。10．（10分）轉(zhuǎn)基因生物培育成功的關(guān)鍵是保證目的基因在受體中的正常表達(dá)或抑制特定基因的表達(dá)。在這個過程中，根據(jù)獲得的目的基因不同、采取的措施不同等，培育時選擇的方法也不相同?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題：（1）利用乳腺生物反應(yīng)器獲得胰島素的過程中，為保證通過反轉(zhuǎn)錄法獲得的胰島素基因能正常表達(dá)，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時需將獲得的含目的基因的片段連接在__________之間，然后通過_________的方法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入__________________中。（2）為降低耐除草劑轉(zhuǎn)基因水稻通過花粉傳播而引起的環(huán)境生物安全問題，一是利用轉(zhuǎn)入的耐除草劑基因的位置進(jìn)行控制，如__________________；二是將耐除草劑基因拆分為兩部分，只有兩部分片段同時存在才具有耐除草劑的特性，請?zhí)岢隹尚械拇胧篲___________________________________。（3）下圖中插入顛倒的轉(zhuǎn)錄區(qū)的目的是__________________，其原理可能是顛倒的轉(zhuǎn)錄區(qū)與轉(zhuǎn)錄區(qū)形成的RNA通過_________原則形成雙鏈而無法使轉(zhuǎn)錄區(qū)形成的RNA與核糖體結(jié)合。11．（15分）下圖為培育某種轉(zhuǎn)基因抗蟲植物的過程示意圖。請回答下列問題：（1）實施基因工程的核心操作是________，目的是________。（2）圖中將含抗蟲基因的質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌前，常用________處理農(nóng)桿菌。一般情況下，不能用未處理的農(nóng)桿菌作為受體細(xì)胞，原因是________________。（3）重組Ti質(zhì)粒上的青霉素抗性基因是作為________。含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與愈傷組織在培養(yǎng)基2上共同培養(yǎng)的目的是________________。由植物未成熟的胚獲得愈傷組織的過程稱為________。（4）培養(yǎng)基2與培養(yǎng)基3中所添加物質(zhì)的主要區(qū)別是除了特定的、起篩選作用的物質(zhì)外，還有________的不同。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

本題考查內(nèi)環(huán)境的組成成分和相互關(guān)系、生態(tài)系統(tǒng)中物質(zhì)循環(huán)和能量流動的基本規(guī)律及應(yīng)用的相關(guān)內(nèi)容。分析題圖：圖甲代表人體體液中物質(zhì)交換示意圖，其中A為組織液、B為淋巴、C為血漿、D為細(xì)胞內(nèi)液；圖乙代表食物網(wǎng)中能量流動示意圖，其中A為生產(chǎn)者、B和C為消費者；圖丙代表生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的示意圖，其中A為生產(chǎn)者、B為分解者、C為消費者、D為大氣中的二氧化碳庫?！驹斀狻緼、圖甲中淋巴細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)液D可以與淋巴B之間直接進(jìn)行物質(zhì)交換，血細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)液D可以與血漿C之間直接進(jìn)行物質(zhì)交換，A正確；B、圖丙中的B是分解者，不屬于食物鏈或食物網(wǎng)中的營養(yǎng)級，B錯誤；C、圖乙食物網(wǎng)中的能量流動中B從上一營養(yǎng)級獲得的能量中，C占的比例為a，則A占的比例為1－a，B體重增加x，至少需要A的量為y，按照能量傳遞效率20%計算，從A→C→B這條食物鏈，需要A的量為ax÷20%÷20%，即25ax；A→B這條食物鏈，需要A的量為(1－a)x÷20%，即5(1－a)x，則總共消耗A的量y＝25ax＋5(1－a)x＝20ax＋5x，C正確；D、乙表示食物鏈，只包含生產(chǎn)者和消費者，還缺少分解者，因此不能構(gòu)成群落，D錯誤。故選C。2、D【解析】

興奮在兩個神經(jīng)元之間傳遞是通過突觸進(jìn)行的，突觸由突觸前膜、突觸間隙和突觸后膜三部分組成；分析題圖可知：①為神經(jīng)遞質(zhì)，②為突觸后膜的特異性受體?！驹斀狻緼C、不同神經(jīng)元的軸突末梢可以釋放不同的神經(jīng)遞質(zhì)（物質(zhì)①），有的化學(xué)遞質(zhì)與突觸后膜上的受體（②）結(jié)合后，引起后膜去極化（興奮）；有的化學(xué)遞質(zhì)與突觸后膜上的受體結(jié)合后，使后膜極化作用反而加大，即引起超極化（抑制），A、C錯誤；B、小電位不能傳播，當(dāng)電位加大達(dá)到一定闊值引起動作電位才傳播到肌纖維內(nèi)部，引起肌肉收縮，B錯誤；D、遞質(zhì)經(jīng)突觸前膜釋放到突觸間隙，該過程可體現(xiàn)細(xì)胞膜的流動性，D正確。故選D。本題考查突觸結(jié)構(gòu)，要求學(xué)生識記和理解突觸結(jié)構(gòu)，掌握神經(jīng)遞質(zhì)的類型及作用特點，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項。3、C【解析】

1、生物進(jìn)化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變，影響種群基因頻率變化的因素有變異，自然選擇，遷入和遷出，遺傳漂變等。2、基因重組包括自由組合型和交叉互換型，自由組合型發(fā)生在減數(shù)分裂后期，指非同源染色體上的非等位基因隨非同源染色體的自由組合而自由組合，交叉互換型是指在減數(shù)第一次分裂前期，同源染色體上的非姐妹染色單體之間的交叉互換。3、基因突變是由于堿基對的缺失、替換或增添而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變，基因突變使轉(zhuǎn)錄形成的密碼子發(fā)生改變，翻譯過程中形成的蛋白質(zhì)的氨基酸序列有可能發(fā)生改變進(jìn)而導(dǎo)致生物性狀改變。4、現(xiàn)代生物進(jìn)化理論認(rèn)為：生物進(jìn)化的單位是種群，突變和基因重組為生物進(jìn)化提供原材料，自然選擇使種群基因頻率發(fā)生定向改變進(jìn)而使生物朝著一定的方向進(jìn)化，生物多樣性的層次包括遺傳多樣性、物種多樣性和生態(tài)系統(tǒng)的多樣性。【詳解】①DNA分子中發(fā)生的堿基對的替換、增添和缺失，如果這種改變發(fā)生在DNA分子中的無效片段中，則不會引起基因結(jié)構(gòu)的改變，①錯誤；②將二倍體植株花藥離體培養(yǎng)獲得是單倍體植株，只有再用秋水仙素處理單倍體幼苗，才能獲得穩(wěn)定遺傳的純合體植株，②錯誤；③突變和基因重組都是不定向的，都能為生物進(jìn)化提供原材料，自交不會導(dǎo)致基因頻率發(fā)生改變，③正確；④雜交育種就是將相同物種的優(yōu)良性狀通過交配集中在一起，④錯誤；⑤北京巴兒狗、德國獵犬、澳洲牧羊犬等犬類屬于同一物種，多樣性反映了遺傳的多樣性，⑤錯誤；⑥生物的共同進(jìn)化是指不同物種之間，生物與無機(jī)環(huán)境之間在相互影響中不斷進(jìn)化和發(fā)展，經(jīng)過漫長生物共同進(jìn)化形成了生物多樣性，⑥錯誤。綜上正確的選項有③，故選C。4、C【解析】

A、果醋制作醋酸菌是原核生物無線粒體，A錯誤；B、果酒制成果醋溫度要升高，還要不斷地通入氧氣，B錯誤；C、、在腐乳制作過程中必須有能生產(chǎn)蛋白酶的微生物參與才能將蛋白質(zhì)水解，提高利用價值，C正確；D、在腐乳裝瓶時自下而上隨層數(shù)的增加逐漸增加鹽量，D錯誤。故選C。5、D【解析】

調(diào)查植物和活動能力不強(qiáng)的蟲卵、動物種群密度常用樣方法；調(diào)查活動能力強(qiáng)，運(yùn)動范圍大的動物種群密度常用標(biāo)志重捕法；土壤中小動物身體微小，有較強(qiáng)的活動能力，調(diào)查其豐富度不適合用樣方法和標(biāo)志重捕法，而采用取樣器取樣法，樣方法用于調(diào)查植物的豐富度。【詳解】調(diào)查蒲公英種群密度和調(diào)查土壤中小動物類群豐富度是兩個獨立活動，取樣點不要求相同，調(diào)查蒲公英種群密度用樣方法，要做到隨機(jī)取樣，調(diào)查土壤中小動物類群豐富度采用取樣器取樣法，應(yīng)選擇有代表性的地點取樣，A錯誤；大多土壤小動物，有較強(qiáng)的活動能力，而且身體微小，不適合用標(biāo)志重捕法調(diào)查其豐富度，B錯誤；調(diào)查蒲公英種群密度需對樣方中的蒲公英進(jìn)行逐個計數(shù)，調(diào)查土壤中小動物類群豐富度只需計數(shù)小動物的種類數(shù)，不必對生物個體逐個計數(shù)，C錯誤；調(diào)査結(jié)果均是棄耕后的蒲公英種群密度、土壤中小動物類群豐富度，而沒有對棄耕前進(jìn)行調(diào)查，因此不能說明棄耕對蒲公英種群密度及土壤小動物豐富度的影響，D正確；故選D。6、B【解析】

1、癌細(xì)胞的主要特征是：能夠無限增殖，形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，細(xì)胞表面發(fā)生了變化；2、細(xì)胞癌變的原因：（1）外因：主要是三類致癌因子，即物理致癌因子、化學(xué)致癌因子和病毒致癌因子；（2）內(nèi)因：原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變?！驹斀狻緼、黃曲霉素屬于化學(xué)致癌因子，A錯誤；B、亞硝胺是化學(xué)致癌因子，可以使人的原癌基因和抑癌基因的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生癌變，B正確；C、癌癥不是傳染病，所以接觸癌癥患者的人細(xì)胞癌變幾率不對增加，C錯誤；D、年齡越大，免疫能力越低，所以患癌的可能性越大，D錯誤；故選B。本題考查細(xì)胞癌變的原因，要求考生識記引發(fā)細(xì)胞癌變的外因和內(nèi)因（根本原因），理解細(xì)胞癌變除了與致癌因子有關(guān)外，還與人的心理、年齡及免疫能力等方面有關(guān)，并對選項作出準(zhǔn)確的判斷。二、綜合題：本大題共4小題7、是兩者生活區(qū)域相同，在生存空間上存在競爭關(guān)系先增加后減少，最后趨于穩(wěn)定嚙齒動物和螞蟻具有競爭關(guān)系，因此嚙齒動物移走初期，螞蟻種群數(shù)量上升；隨螞蟻種群數(shù)量上升，種內(nèi)斗爭加劇，導(dǎo)致種群數(shù)量下降，最后趨于穩(wěn)定?！窘馕觥?/p>

生態(tài)系統(tǒng)中的生物之間的種間關(guān)系主要有競爭、捕食、寄生和互利共生等，其中的競爭不僅僅是食物的競爭，也包括生存空間的競爭。【詳解】（1）在該生態(tài)系統(tǒng)中，嚙齒動物和螞蟻在食物上沒有競爭關(guān)系，但二者生活區(qū)域相同，在生存在空間上存在競爭關(guān)系；故兩者之間存在競爭關(guān)系。（2）由于嚙齒動物和螞蟻具有競爭關(guān)系，因此嚙齒動物移走初期，螞蟻因為競爭者消失，種群數(shù)量上升；后期隨螞蟻種群數(shù)量上升，種內(nèi)斗爭加劇，導(dǎo)致種群數(shù)量下降，最后趨于穩(wěn)定。明確種間關(guān)系的類型及含義是解答本題的關(guān)鍵。8、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運(yùn)輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建1、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)．此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后，篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。第四步：目的基因的檢測和表達(dá)1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原——抗體雜交。4、有時還需進(jìn)行個體生物學(xué)水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。【詳解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細(xì)胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術(shù)。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計了與蛋白A基因結(jié)合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實驗中的對照原則，若要比較新蛋白A的表達(dá)效率是否提高，則需設(shè)置三組實驗實驗變量的處理分別為：僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒，僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對照（僅含空質(zhì)粒，以排除空質(zhì)?？赡墚a(chǎn)生的影響）。因此，將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用抗原——抗體雜交方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以為檢測表達(dá)產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較抑菌圈的大小，以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，是因為蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高。本題主要考查基因工程、PCR技術(shù)等相關(guān)知識，考生需要理解和記憶相關(guān)知識，并學(xué)會應(yīng)用所學(xué)知識正確答題。9、酵母菌和醋化醋桿酶解（或加果膠酶）先通氧一定時間，再保持無氧條件，最后再持續(xù)通氧菌種、發(fā)酵溫度乙酸產(chǎn)量（或醋酸產(chǎn)量）酵母菌快速繁殖消耗過多營養(yǎng)物質(zhì)，導(dǎo)致醋化醋桿菌得不到足夠營養(yǎng)，生長受到抑制過濾離心次生代謝繼代遺傳性微量元素細(xì)胞生長D抑制物質(zhì)B轉(zhuǎn)化為物質(zhì)D修飾（或加工）【命題意圖】本題主要考查果酒和果醋、植物克隆等知識，意在考查學(xué)生的理解與表達(dá)能力。【解題思路】（一）（1）因為需要的產(chǎn)物是醋酸，原料為葡萄糖，所以需要酵母菌和醋化醋桿菌進(jìn)行共同發(fā)酵；圖中是為獲得澄清果汁，后面有了加熱處理，所以“?”處應(yīng)填酶解（或加果膠酶）。（2）本研究是混合發(fā)酵，先進(jìn)行果酒發(fā)酵然后是果醋發(fā)酵，根據(jù)兩種發(fā)酵的菌種特點，所以發(fā)酵的氧氣條件為先通氧一定時間，再保持無氧條件，最后再持續(xù)通氧；影響其產(chǎn)物風(fēng)味的原因有菌種、發(fā)酵溫度不同。（3）本實驗是為了生產(chǎn)乙酸，所以需提高乙酸產(chǎn)量；據(jù)圖分析可推測酵母菌快速繁殖消耗過多營養(yǎng)物質(zhì)，導(dǎo)致醋化醋桿菌得不到足夠營養(yǎng)，生長受到抑制。（4）發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液常需進(jìn)行過濾處理；若濾液還是渾濁，可采取靜置沉淀﹑加熱或離心等方法獲得澄清果醋。（二）（1）通過植物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得藥用植物細(xì)胞的次生代謝產(chǎn)物。（2）植物細(xì)胞在進(jìn)行繼代培養(yǎng)過程中，細(xì)胞會發(fā)生變異，從而篩選出生長速度快、次生代謝產(chǎn)物積累多的細(xì)胞系；MS基本培養(yǎng)基含有大量元素、微量元素和有機(jī)物。（3）生長培養(yǎng)基是適合細(xì)胞生長的培養(yǎng)基。（4）據(jù)圖分析可知通過人工增加D物質(zhì)來提高C物質(zhì)的產(chǎn)量；原理是抑制B物質(zhì)轉(zhuǎn)化為D物質(zhì)，促進(jìn)更多的B物質(zhì)轉(zhuǎn)化為C物質(zhì)；也可以通過克隆酶2基因并進(jìn)行修飾，然后轉(zhuǎn)基因構(gòu)建出C物質(zhì)高產(chǎn)細(xì)胞系?！窘馕觥?/p>

本研究是混合發(fā)酵，先進(jìn)行果酒發(fā)酵然后是果醋發(fā)酵，根據(jù)兩種發(fā)酵的菌種特點，所以需要酵母菌和醋化醋桿菌進(jìn)行共同發(fā)酵，發(fā)酵的氧氣條件為先通氧一定時間，再保持無氧條件，最后再持續(xù)通氧；影響其產(chǎn)物風(fēng)味的原因有菌種、發(fā)酵溫度不同。據(jù)圖分析可知通過人工增加D物質(zhì)來提高C物質(zhì)的產(chǎn)量；原理是抑制B物質(zhì)轉(zhuǎn)化為D物質(zhì)，促進(jìn)更多的B物質(zhì)轉(zhuǎn)化為C物質(zhì)；也可以通過克隆酶2基因并進(jìn)行修飾，然后轉(zhuǎn)基因構(gòu)建出C物質(zhì)高產(chǎn)細(xì)胞系?！驹斀狻浚ㄒ唬?）因為需要的產(chǎn)物是醋酸，原料為葡萄糖，所以需要酵母菌和醋化醋桿菌進(jìn)行共同發(fā)酵；圖中是為獲得澄清果汁，后面有了加熱處理，所以“?”處應(yīng)填酶解（或加果膠酶）。（2）本研究是混合發(fā)酵，先進(jìn)行果酒發(fā)酵然后是果醋發(fā)酵，根據(jù)兩種發(fā)酵的菌種特點，所以發(fā)酵的氧氣條件為先通氧一定時間，再保持無氧條件，最后再持續(xù)通氧；影響其產(chǎn)物風(fēng)味的原因有菌種、發(fā)酵溫度不同。（3）本實驗是為了生產(chǎn)乙酸，所以需提高乙酸產(chǎn)量；據(jù)圖分析可推測酵母菌快速繁殖消耗過多營養(yǎng)物質(zhì)，導(dǎo)致醋化醋桿菌得不到足夠營養(yǎng)，生長受到抑制。（4）發(fā)酵結(jié)束后，發(fā)酵液常需進(jìn)行過濾處理；若濾液還是渾濁，可采取靜置沉淀﹑加熱或離心等方法獲得澄清果醋。（二）（1）通過植物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得藥用植物細(xì)胞的次生代謝產(chǎn)物。（2）植物細(xì)胞在進(jìn)行繼代培養(yǎng)過程中，細(xì)胞會發(fā)生變異，從而篩選出生長速度快、次生代謝產(chǎn)物積累多的細(xì)胞系；MS基本培養(yǎng)基含有大量元素、微量元素和有機(jī)物。（3）生長培養(yǎng)基是適合細(xì)胞生長的培養(yǎng)基。（4）據(jù)圖分析可知通過人工增加D物質(zhì)來提高C物質(zhì)的產(chǎn)量；原理是抑制B物質(zhì)轉(zhuǎn)化為D物質(zhì)，促進(jìn)更多的B物質(zhì)轉(zhuǎn)化為C物質(zhì)；也可以通過克隆酶2基因并進(jìn)行修飾，然后轉(zhuǎn)基因構(gòu)建出C物質(zhì)高產(chǎn)細(xì)胞系。熟練掌握果酒和果醋的制作流程及相關(guān)菌種的生存條件，發(fā)酵條件的控制等，正確解讀題目信息對相關(guān)問題進(jìn)行解答；明確植物培養(yǎng)過程及應(yīng)用，提取題目中有用信息進(jìn)行解答。10、（乳腺蛋白基因的）啟動子和終止子顯微注射（發(fā)育為）雌性個體的受精卵將耐除草劑基因?qū)氲饺~綠體中將拆分后的基因分別導(dǎo)入不同的個體，獲得純合品系1和品系2，將兩者雜交獲得同時具有兩個片段的個體抑制轉(zhuǎn)錄區(qū)基因的表達(dá)堿基互補(bǔ)配對【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)?/p>