DB34T 4208-2022 草地貪夜蛾抗藥性監(jiān)測技術(shù)規(guī)范

34GuidelineforinsecticideresistancemonitoringofthefallarmywormI本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定成、蔣山、高全、肖金京、鄭兆陽、吳向輝、馬書芳、徐麗娜、陳浩梁、張前進(jìn)、1草地貪夜蛾抗藥性監(jiān)測技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了草地貪夜蛾[Spodopterafrugiperda(J.E.Smith)]抗藥性監(jiān)測的化學(xué)藥劑、監(jiān)測點NY/TNY/TNY/T4化學(xué)藥劑氯蟲苯甲酰胺、溴氰蟲酰胺、乙基多殺菌素、虱螨脲和其它取得登記在長江以南草地貪夜蛾遷飛過渡區(qū)選取1個～2個市縣、江淮之間26.2試蟲的采集和飼養(yǎng)選取代表性玉米田3塊～5塊，每塊田采用“W”型五點取樣，每個監(jiān)測點采集草地貪夜蛾卵塊200塊以上，或采集幼蟲、蛹500頭以上，或利用誘蟲燈誘集活成蟲200頭以上。采集的卵塊孵化后，幼蟲生長至3齡初，可直接用于生物測定。其他蟲態(tài)室內(nèi)飼養(yǎng)至F1代，3齡初幼蟲用于生物測定。飼養(yǎng)條件為(26±1)℃,相對濕度為40%～70%,光周期L/D=16h/8h,幼蟲采用人工飼料飼養(yǎng)，人工飼料的配方參見附錄A所示，成蟲飼喂10%蜂蜜水。6.3藥劑的配制6.3.1母液配制6.3.2飼料混毒法使用同一溶劑稀釋母液，配制系列濃度的工作液，再與人工飼料按照質(zhì)量比1:99均勻混合，加入藥液量不少于2g。將母液用0.1%Triton-100水溶液梯度稀釋至工作液濃度，每個濃度藥液量不少于400mL。6.4.2飼料混毒法選取生長一致、健康的3齡初幼蟲作為試蟲。在12孔培養(yǎng)板中加入適量混毒人工飼料，并接入1頭試蟲。12頭為一個重復(fù)，每個濃度重復(fù)3次；每個藥劑設(shè)置5個～7個濃度梯度。以添加相同溶劑處理的飼料作為對照。處理后的試蟲轉(zhuǎn)移至(26±1)℃、相對濕度為40%～70%、光周期L/D=16h/8h選取生長一致、健康的3齡初幼蟲作為試蟲。用微量點滴器將0.2μL藥液點滴在幼蟲的胸部背板，從低濃度到高濃度依次處理。12頭試蟲為一個重復(fù)，每個濃度重復(fù)3次，每個藥劑設(shè)置5個~7個濃度梯度。以點滴相同溶劑的試蟲作為對照。處理后的試蟲轉(zhuǎn)移至12孔培養(yǎng)板飼養(yǎng)，每孔1頭，并加入適量人工飼料或新鮮玉米葉片，于(26±1)℃、相對濕度為40%～70%、光周期L/D=16h/8h的選取生長一致、健康的3齡初幼蟲作為試蟲。采集未接觸任何農(nóng)藥的新鮮玉米葉片，用打孔器打成直徑略小于12孔培養(yǎng)板孔徑的葉碟，浸入待測藥液中10s,取出置于吸水紙自然晾干，每孔放入33個葉碟，接入1頭試蟲。12頭試蟲為一個重復(fù)，每個濃度重復(fù)3次，每個藥劑設(shè)置5個～7個(26±1)℃、相對濕度為40%～70%、光周期L/D=16h/8h的條件下飼養(yǎng)。的LCo值(T),按公式(1)計算監(jiān)測地區(qū)種群的抗性倍數(shù)(RR),計算公式如下：中等水平抗性4A.2B組份稱取瓊脂26g，加入蒸餾水400A.5煮沸后冷卻至70℃~80℃,加入C組并攪拌均勻。A.6待冷卻至50℃~60℃,加入微量元素組合4mL，并攪拌均勻，微量元素組合見表。1234鹽酸硫胺素（Thiaminehydroc5鹽酸吡哆醇（Pyridoxinehydroc678鈷胺素（Cobalamin,vitam注：準(zhǔn)確稱取以上各組分，加入蒸餾水160mLA.7將配制完成的飼料倒入16.7cm×12.3cm×5 12312312