高中生物教材選修一必背

高中生物選修一生物技術(shù)實(shí)踐知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

課題一果酒和果醋的制作

1、果酒菌種：附在葡萄皮上的野生型醉母菌（真菌，兼性厭氧，主要出芽生殖還有

孑包子生殖）

2、在有氧條件下，酵母菌進(jìn)展有氧呼吸，大量繁殖。

在S酹y無

氧條件C6H12O6+6O2+6H20f6co2+12氏0+矍里2dl+23+能里

下，酵母菌能進(jìn)展酒精發(fā)酵。

3、制酒條件：溫度（18~25℃）,發(fā)酵液缺氧呈酸性（酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而

其他微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境）。

4、葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因：紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液。

5、果醋菌種：醋酸菌（原核生物），代謝類型異養(yǎng)需氧型。

6、有兩條途徑生成醋酸：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋

酸：當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。C2HsOH+O2f

CH3COOH+H2O

7、制醋條件：①深層發(fā)酵時(shí)，短時(shí)間不通氧，醋酸菌死亡。②溫度：30?35℃。

8、流程：

9、裝置t蜥蒯制愉淄f唏癌的我:酉姓斕徽輔我。排氣口長(zhǎng)而彎曲的膠管目的

是防止空氣中微生物的污染；開口向下4期的是癡洲精發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生的二氧化碳。出料

口是用來取樣檢測(cè)。?U

葡萄汁只裝2/3,留1/3空間的目的是讓酵母菌先有氧呼吸進(jìn)展繁殖。

10、假設(shè)用瓶子做裝置：制酒時(shí)，要每天擰松瓶蓋2?4次，目的是排二氧化碳；制

醋時(shí)，將瓶口翻開，蓋上紗布。

11、所有用具清洗后晾干或清洗后用70%的酒精消毒。

先沖洗葡萄再除去枝梗，以防止除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的時(shí)機(jī)。

12、酒精檢驗(yàn)：酸性（3mol/L的H2S04）重倍酸鉀一灰綠色。醋酸檢驗(yàn)：嗅味和品嘗

（比較pH）

13、從哪些方面防止發(fā)酵液被污染

榨汁機(jī)要清洗干凈，并晾干。發(fā)酵瓶要清洗干凈，用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精消毒，或用

洗潔精洗滌。裝入葡萄汁后，封閉充氣口。

課題二腐乳的制作

1、菌種：多種微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，主要是毛霉（真菌，代謝類型

是異養(yǎng)需氧型。胞子生殖。）傳統(tǒng)制作毛霉來自空氣；現(xiàn)代生產(chǎn)將優(yōu)質(zhì)毛霉菌種直接接

種在豆腐上。

2、原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基

酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

3、實(shí)驗(yàn)流程：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉-?加鹽腌制-?加鹵湯裝瓶一密封腌制（加鹽之前為

前期發(fā)酵，目的是創(chuàng)造條件讓毛霉生長(zhǎng)，使毛霉形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)

酵主要是酶與微生物協(xié)同作用，生成腐乳的香氣。）

4、所用豆腐的含水量為70%左右，水分過多則腐乳不易成形。豆腐生長(zhǎng)的白毛是毛霉

的白色菌絲。

5、溫度：15?18℃。

6、加鹽：逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增加鹽量，接近瓶口外表的鹽要鋪厚一些。控

制鹽的用量（豆腐：鹽=5:1）：鹽的濃度過低，缺乏以抑制微生物的生長(zhǎng)，可能導(dǎo)致豆

腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會(huì)影響腐乳的口味。

食鹽的作用：1.抑制微生物生長(zhǎng)，防止腐敗變質(zhì)2.析出水分，是豆腐變硬3.調(diào)味

7、鹵湯：由酒及各種香辛料配制而成的。

8、鹵湯中酒的含量：12%左右。作用：1.防止雜菌污染2.賦予腐乳風(fēng)味3.酒精含

量過高，對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長(zhǎng)；酒精含量過低，缺乏以抑制

微生物生長(zhǎng)，導(dǎo)致豆腐腐敗。

9、香辛料的作用：1.調(diào)味2.殺菌

10、防止雜菌污染的措施：①玻璃瓶，洗凈后用沸水消毒。②加鹵湯后，用膠條將

瓶口密封。③封瓶時(shí)，將瓶口通過酒精燈的火焰。

11、影響腐乳風(fēng)味的因素：鹽、酒、香辛料、豆腐含水量。

12、腐乳外部致密的“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐外表上生長(zhǎng)的毛霉菌絲，它能形成

腐乳的“體”，使腐乳成形。

課題三制作泡菜

1、菌種：乳酸菌（代謝類型異養(yǎng)厭氧，包括乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用

于生產(chǎn)酸奶。

2、流程

3、配制鹽水：水：鹽=4:1；煮沸冷卻（殺菌和去除溶解氧）

4、用水封閉壇口起什么作用（保證發(fā)酵的無氧環(huán)境）不封閉有什么結(jié)果〔①有氧會(huì)

抑制無氧呼吸，②雜菌污染）

5、泡菜腌制過程中，要注意控制腌制時(shí)間、溫度和食鹽用量。溫度過高、食鹽用量

過低、腌制時(shí)間過短，易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后

亞硝酸鹽含量開場(chǎng)降低，故在10天之后食用最好。

6、亞硝酸鹽：白色粉末，易溶于水，用作食品添加劑。

膳食中的絕大局部亞硝酸鹽隨尿排出，只有在特定的條件（適宜的pH、溫度和一定

的微生物作用），才會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物一一亞硝胺，它對(duì)動(dòng)物還具有致畸和致突變作用。

7、測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重

氮化反響后，與N-1-蔡基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料?，與濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目

測(cè)比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。

提取劑：氯化鎘、氯化專貝。

氫氧化鋁乳液：吸附泡菜汁中雜質(zhì)，使泡菜汁透明澄清。

氫氧化鈉：中和過多的酸，制造弱堿性環(huán)境

8、含抗生素牛奶不能生產(chǎn)酸奶的原因是抗生素殺死乳酸菌。

9、醋瓶或啤酒瓶?jī)?nèi)形成的白膜是醋酸菌；泡菜壇內(nèi)的白膜是酵母菌。

專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

課題一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

1、培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基

質(zhì)。

培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基（參加凝固劑瓊

脂，在其外表可形成菌落）。

?按照用途，可分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指允許特定種類的微生物

生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特

點(diǎn)，在培養(yǎng)基中參加某種指示劑或化學(xué)藥品，用以鑒別不同類別的微生物。

2、培養(yǎng)基的化學(xué)成分：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源。還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)PH、特殊

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

碳源：提供碳元素。如C02（自養(yǎng)生物用）、糖類（異養(yǎng)微生物用）。

氮源：提供氮元素。如N2（固氮菌）、陽3（硝化細(xì)菌）、N03\NH；（自養(yǎng)微生

物）、牛肉膏、蛋白陳（異養(yǎng)微生物）等。

特例：培養(yǎng)乳酸桿菌加維生素，培養(yǎng)霉菌須將pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌將pH調(diào)至中

性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物需提供無氧條件。

3、無菌技術(shù)一一獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，有效防止操作者自

身被微生物感染。

4、消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體外表或內(nèi)部的局部微生物（不包

括芽泡和電子）。分為煮沸消毒法，巴氏消毒法（不耐高溫的液體）、化學(xué)藥劑（如酒

精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。

5、滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽抱和抱子。分

為灼燒滅菌（接種環(huán)、接種針等金屬工具、試管口）、干熱滅菌（吸管、培養(yǎng)皿等玻璃

器皿、金屬用具，所用器械是干熱滅菌箱）、高壓蒸汽滅菌（培養(yǎng)基、無菌水等，所用

器械是高壓蒸汽滅菌鍋）。

滅菌時(shí)物品不能擺得太擠，目的是防止阻礙熱氣流通。

6、制作牛肉膏蛋白腺固體培養(yǎng)基方法步驟：計(jì)算、稱量、溶化（包括定容和調(diào)

pH）、滅菌、倒平板?！九囵B(yǎng)基在錐形瓶中則是先分裝再滅菌】

7、倒平板操作的步驟：拔棉塞一瓶口迅速通過火焰一將培養(yǎng)皿翻開一條縫，倒培養(yǎng)

基（培養(yǎng)皿的皿蓋始終在手中）一冷卻凝固一倒置平板（從此以后一直倒置）

8、平板冷凝后，為什么要將平板倒置

答：既可以使培養(yǎng)基外表的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)

基，造成污染。

9、平板劃線法只能得到單個(gè)的菌落，不能計(jì)數(shù)。劃線時(shí)不要將最后一區(qū)的與第一區(qū)

相連。

操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次

劃線之前都要灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線完畢后，接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃

線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少；劃線操作完畢時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)是為了殺死接種環(huán)上

殘留的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開場(chǎng)劃線

答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開

場(chǎng)，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來

的菌落。

10、稀釋涂布平板法不僅能得到單個(gè)的菌落，還能計(jì)數(shù)。

稀釋涂布的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)展。涂布器浸在酒精中，然后灼燒。

11、菌種保存

頻繁使用：臨時(shí)保藏（接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，4℃冰箱，每3?6個(gè)月，

要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。）

長(zhǎng)期保存：甘油管藏（一20℃的冷凍箱中）。

課題二土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離與計(jì)數(shù)

1、尿素：只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的細(xì)

菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗麄兡芎铣擅浮?/p>

2、微生物的篩選應(yīng)用的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、

pH等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。

3、測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法：稀釋涂布平板法（一般設(shè)置3?5個(gè)平板，選擇菌

落數(shù)在30?300的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)，并取平均值。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目

低，）和顯微鏡直接計(jì)數(shù)、濾膜法。

4、流程：土壤取樣（在距地表約3?8cm的土壤層取樣，取樣用具需滅菌）一樣品

的稀釋（稀釋程度細(xì)菌〉放線菌〉真菌）一微生物的培養(yǎng)與觀察（細(xì)菌30~37℃1~2天；放

線菌25~28℃5~7天；霉菌25~28℃3~4天）

5、菌落特征：形狀、大小、隆起程度、顏色。

6、計(jì)算公式：

每克樣品中的菌落數(shù)=（C/V）*M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌

落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（ml）,M代表稀釋倍數(shù)

7、鑒別方法：加酚紅指示劑，變紅（細(xì)菌合成的眼醐將尿素分解成氨，pH升高）

課題三分解纖維素的微生物的別離

1、棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，商品纖維素：水溶性的竣甲基纖維

素鈉（CMC—Na）、不溶于水的微晶纖維素（Avicel）?

2、纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C.酶、Cx酶和葡萄糖甘酶，前兩種酶使纖維素分

解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

3、篩選方法一一剛果紅（CR）染色法。

剛果紅與纖維素等多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這

種反響。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅一纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中

會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選

纖維素分解菌。

一種是先培養(yǎng)微生物，再參加剛果紅進(jìn)展顏色反響（先加CR,倒去CR后再加

Nacl,目的是洗去結(jié)合不牢的CR）；另一種是在倒平板時(shí)就參加剛果紅〔在培養(yǎng)基中參

加CR,混勻后倒平板）。

方法一缺點(diǎn)是操作繁瑣，參加剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點(diǎn)是顯示出

的顏色反響的就是纖維素分解菌。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，不存在菌落混雜問題，缺

點(diǎn)是顯示出的顏色反響的可能是纖維素分解菌或淀粉分解菌；另一缺點(diǎn)是：有些微生物

具有降解色素的能力，它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過程中會(huì)降解剛果紅形成明顯的透明圈，使纖

維素分解菌不易區(qū)分。

4、別離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程

土壤取樣〔可將濾紙埋在土壤）一選擇培養(yǎng)（此步可省略）一梯度稀釋T將樣品涂

布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上一挑選產(chǎn)生透明圈的菌落

5、對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)展了初步的篩選后，只是別離純化的第一步，為確定得

到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)展發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體

發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所

產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)展定量的測(cè)定。

專題三植物的組織培養(yǎng)技術(shù)

課題一菊花的組織培養(yǎng)

1、愈傷組織：細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)

胞。

2、脫分化：由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，也叫去分化。

3、再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)展培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官

的過程。

4、植物組織培養(yǎng)的基本過程

①材料：植物的種類、材料的年齡和保存時(shí)間的長(zhǎng)短等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菊花組織

培養(yǎng)一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝。培育無病毒作物，選莖尖分生區(qū)細(xì)

胞。

②營(yíng)養(yǎng)：MS培養(yǎng)基（含有大量元素、微量元素、有機(jī)物）

③激素：

使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果④環(huán)境生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果

條件：PH、

先生長(zhǎng)素，有利于分裂促根分化，

溫度、光比值高時(shí)

后細(xì)胞分裂素但不分化等。菊花的抑芽形成

先細(xì)胞分裂素，細(xì)胞既分裂組織培養(yǎng)，促芽分化，

比值低時(shí)

后生長(zhǎng)素也分化pH5.8,溫抑根形成

度

分化頻率提比值適中促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)

同時(shí)使用1.

高并且每日用日光燈照射12h?

6、菊花組織培養(yǎng)的操作流程

①配制MS固體培養(yǎng)基（配制各種母液4c保存，大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮

100倍，使用時(shí)根據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量；配制培養(yǎng)基，可以不添加植物激素；高

壓蒸汽滅菌）一②外植體的消毒（流水沖洗一洗衣粉+軟刷刷洗一流水沖洗20min一無菌

吸水紙吸干外植體外表f體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中搖動(dòng)2?3次，持續(xù)6~7s-無菌水清洗

一無菌吸水紙吸干外植體外表一質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中1?2minf無菌水中至

少清洗3次；既要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力）一③接種（無菌操

作，形態(tài)學(xué)上端朝上）一④培養(yǎng)（無菌箱，18~22℃,光照12h）f⑤移栽（先翻開培養(yǎng)

瓶的封口膜，生長(zhǎng)幾日；然后用流水清洗根部培養(yǎng)基，移植到消過毒的蛭石或珍珠巖中

進(jìn)展壯苗。最后露天栽培）一⑥栽培

7、微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營(yíng)養(yǎng)。

專題二月季的花藥培養(yǎng)

1、花粉發(fā)育過程:

粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再將其誘導(dǎo)分化成植株。這兩種途徑之間并沒有絕

對(duì)的界限，主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。

①先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根；②胚狀體又稱為細(xì)胞胚。

3、影響花藥培養(yǎng)的因素：材料的選擇與培養(yǎng)基的組成是主要的影響因素。親本植株

的生長(zhǎng)條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對(duì)誘導(dǎo)成功率都有一定影響

選初花期、完全未開放的花蕾、單核（靠邊）期花粉。

4、月季的花藥培養(yǎng)過程：材料的選取一材料的消毒一接種和培養(yǎng)

①選擇花藥用鏡檢法。最常用醋酸洋紅法（紫紅色）、焙花青-銘機(jī)法（藍(lán)黑色）。

②材料的消毒：

不0.1%氯化汞植用無菌水需要光

2~4min沖洗

照。

在剝離花藥時(shí)，要盡量不損傷花藥（否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織），

同時(shí)還要徹底去除花絲，因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。

花藥開裂，假設(shè)是長(zhǎng)出愈傷組織，要將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便進(jìn)一

步分化出再生植株。假設(shè)是胚狀體，則一個(gè)花藥內(nèi)就會(huì)產(chǎn)生大量幼小植株，須盡快將其

分開，分別移植到新的培養(yǎng)基上，否則這些植株將很難分開。

專題四酶的研究與應(yīng)用

課題一果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用

1、果膠是植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一。不溶于水，化學(xué)本質(zhì)是半乳

糖醛酸聚合而成的高分子化合物。

2、果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解醉、果膠酯醉。果膠酶的作用是能夠?qū)?/p>

果膠分解成半乳糖醛酸。

3、植物、霉菌、酵母菌、細(xì)菌均能產(chǎn)生果膠醐。霉菌發(fā)酵產(chǎn)生的果膠酶是食品工業(yè)

中使用量最大的酶制劑之一。

課題2探討加酶洗衣粉的洗滌效果

1、加酶洗衣粉是指含酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有蛋白酶、脂肪酶、淀粉

酶和纖維素酶四類.應(yīng)用最廣泛的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

2、脂肪酶可以將脂肪分解成甘油和脂肪酸；蛋白酶可以將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和

氨基酸。

課題3酵母細(xì)胞的固定化

1、酶：對(duì)環(huán)境條件敏感，易失活；溶液中的酶很難回收，不能再次利用，提高了生

產(chǎn)成本；反響后的酶會(huì)混合在產(chǎn)物中，影響產(chǎn)品質(zhì)量。

2、固定化酶優(yōu)點(diǎn)：使酶既能與反響物接觸，又能與產(chǎn)物別離；固定在載體上的酶還

可以被反復(fù)利用。

3、固定化細(xì)胞優(yōu)點(diǎn)：成本低，操作更容易，對(duì)酶影響小，能同時(shí)進(jìn)展一系列反響。

4、固定化酶的應(yīng)用實(shí)例

①高果糖漿是指果糖含量為42%左右的糖漿。能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是葡萄糖異構(gòu)

酶。

②固定化醯技術(shù)：將酶固定在一種載體上，再將這些酶顆粒裝到一個(gè)反響柱內(nèi)，柱子底

端裝上分布著許多小孔的篩板。酶顆粒無法通小孔，而反響溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)

過程中，將葡萄糖溶液從反響柱的上端注入，使葡萄糖溶液流過反響柱，與固定化葡萄

糖異構(gòu)酶接觸，轉(zhuǎn)化成果糖，從反響柱的下端流出。

5、固定化酶及固定化細(xì)胞技術(shù)

①固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法，將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的

技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法（對(duì)固定酶的作用影響?。?酶更適合采

用后兩種方法固定，而細(xì)胞多采用包埋法固定化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大，而酶分子很小；

個(gè)大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而個(gè)小的酶容易從包埋材料中漏出。

②包埋法固定化細(xì)胞即將微生物細(xì)胞均勻包埋在不溶于水的多孔性載體中。常用的

載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。

6、固定化酵母細(xì)胞的流程：制備固定化酵母細(xì)胞一用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵

①制備固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟

酵母菌的活化f配制CaCk溶液一配制海藻酸鈉溶液（小火連續(xù)加熱并不斷攪拌，防

止焦糊，是制作成功的關(guān)鍵步驟）一海藻酸鈉溶液與酵母菌細(xì)胞混合（冷卻后）一固定

化酵母細(xì)胞（凝膠珠應(yīng)黃色，假設(shè)白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細(xì)胞數(shù)

目較少；假設(shè)凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高。）

②用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵

固定好的凝膠珠用蒸儲(chǔ)水沖洗2-3次一凝膠珠參加葡萄糖溶液，溫度25℃,時(shí)間

24h1,

專題五DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)

課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒错憯U(kuò)增DNA片段

1、PCR：（多聚酶鏈?zhǔn)椒错懀?PCR儀實(shí)質(zhì)上是一臺(tái)能夠自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器（可用

3個(gè)恒溫水浴鍋替代）。

2、原理：DNA的熱變性、DNA復(fù)制。

3、PCR與體內(nèi)復(fù)制的區(qū)別

①無解旋酶；②需耐高溫（Taq）DNA聚合酶；③用加熱代替ATP。

4、PCR的反響過程:變性（90℃）~復(fù)性（50℃）一延伸（72℃）

5、引物：

DNA的羥基（-0H）末端稱為3',而磷酸集團(tuán)的末端稱為5'。引物總是以自己的

5'端與模板的3'端配對(duì)，DNA的合成方向是從子鏈的5'端向3'端延伸（即脫氧核昔

酸從引物的3'端連接）。

6、為防止污染，使用的儀器和試劑必須進(jìn)展高壓滅菌。

7、PCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分成小份，在一20℃儲(chǔ)存。在冰塊上緩慢融化。

8、DNA在260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰。

計(jì)算公式：DNA含量（uL/mL）=50X（260nm的讀數(shù)）X稀釋倍數(shù)

課題3血紅蛋白的提取和別離

1、凝膠色譜法（分配色譜法）：相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通

道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢，而相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通

道，只能在凝膠外內(nèi)部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快，從而使相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋

白質(zhì)分子得以別離。

2、凝膠：多糖類化合物構(gòu)成的微小的多孔球體，如葡聚糖、瓊脂糖。

3、緩沖液：在一定范圍內(nèi)，抵抗外界的酸和堿對(duì)溶液pH的影響，維持pH基本不變。

H2CO3—NaHCO3sNaH2PO4—Na2HPO4醋酸一醋酸鈉。

4、電泳：利用各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身的的大小、形狀的不同，使帶電分

子遷移速度不同，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的別離。

5、常用的電泳方法有瓊脂糖凝膠電泳法和聚丙烯酰胺凝膠電泳。測(cè)定蛋白質(zhì)分子量時(shí)

通常使用SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS所帶負(fù)電荷量大，掩蓋了蛋白質(zhì)的電荷差

異，使電泳遷移率只取決分子大?。?

6、蛋白質(zhì)的提取和別離流程：樣品處理一粗別離一純化一純度鑒定。

7、樣品處理：紅細(xì)胞的洗滌（①目的：去除雜蛋白；②方法：血液+生理鹽水低速

短時(shí)離心）一血紅蛋白的釋放（加蒸儲(chǔ)水和40%體積的甲苯，攪拌）f別離血紅蛋白溶

液（離心后，試管分4層：從上向下第1層無色透明甲苯層，第2層為白色薄層固體一

一脂溶性物質(zhì)的沉淀層，第3層是紅色透明液體一一血紅蛋白，第4層為其他雜質(zhì)的暗

紅色沉淀物。濾紙過濾，濾液于分液漏斗中靜置，分出下層的紅色透明液體）

8、粗別離：即透析，目的除去小分子雜質(zhì)

9、純化：即凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)

10、純度鑒定：常用SDS一聚丙烯酰胺凝膠電泳法。

11、交聯(lián)葡聚糖凝膠（SephadexG-75）。G表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及別離

范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5g。

12、商品凝膠使用前需直接放在洗脫液中膨脹，并可用沸水浴加熱；裝填凝膠柱時(shí)

不能有氣泡存在；操作過程中不能發(fā)生洗脫液流干露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。

13、加樣前，翻開流出口，使緩沖液下降到與凝膠面平齊，關(guān)閉出口。用吸管環(huán)繞

管壁加樣，不要破壞凝膠面。

專題六植物有效成分的提取

課題一植物芳香油的提取

天然香料的來源：植物、動(dòng)物（麝、靈貓、海貍、抹香鯨）、真菌。

植物芳香油的組成：菇類化合物及其衍生物。

芳香油的提取方法：蒸儲(chǔ)、壓榨、萃取等。

水蒸氣蒸健法：（玫瑰精油）

原理：水蒸汽可將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來形成油水混合物，冷卻后水油分層。

方法：水中蒸儲(chǔ)：原料放在沸水中加熱蒸儲(chǔ)。（最簡(jiǎn)便易行）

水上蒸儲(chǔ)：原料隔放在沸水上加熱蒸儲(chǔ)。

水汽蒸鐳：利用外來高溫水蒸氣加熱蒸鐳。

實(shí)驗(yàn)流程：

采集玫瑰花（盛花期），清水清洗瀝干一水蒸氣蒸儲(chǔ)（花：水=1:4）-油水混合

、，c,___無水Na,SCh過濾

物NaCl>別離油層-------；------>除水-----?玫瑰油

蒸儲(chǔ)裝置：安裝按照從左向右、自下到上次序；蒸饋完畢，先撤熱源，然后停頓通水,

最后拆卸蒸儲(chǔ)裝置，拆卸的順序與安裝時(shí)相反。

整套裝置左I

溫度計(jì)