2025屆浙江紹興市高三生物第一學(xué)期期末檢測試題含解析

2025屆浙江紹興市高三生物第一學(xué)期期末檢測試題注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．利用人胰島B細胞構(gòu)建cDNA文庫，然后通過核酸分子雜交技術(shù)從中篩選目的基因，篩選過程如圖所示。下列說法錯誤的是（）A．cDNA文庫的構(gòu)建需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶 B．圖中的菌落是通過稀釋涂布法獲得的C．核酸分子雜交的原理是堿基互補配對 D．從該文庫中可篩選到胰高血糖素基因2．結(jié)核桿菌侵入人體后，機體可產(chǎn)生的免疫反應(yīng)是（）A．吞噬細胞處理結(jié)核桿菌后，將抗原傳遞給B細胞B．B細胞釋放淋巴因子刺激T細胞，使其增殖分化C．效應(yīng)T細胞特異性識別靶細胞，并使其裂解死亡D．漿細胞增殖分化成記憶細胞，迅速產(chǎn)生大量抗體3．研究表明線粒體上的PT孔和細胞凋亡直接相關(guān)，促凋亡因素能通過誘導(dǎo)線粒體上PT孔的開放，導(dǎo)致線粒體膜電位喪失，促使細胞色素c和凋亡誘導(dǎo)因子進入細胞質(zhì)基質(zhì)中，誘導(dǎo)凋亡基因的表達，促使細胞凋亡，據(jù)此下列說法中正確的是A．線粒體上的PT孔是某些離子進出線粒體的通道B．癌細胞不會發(fā)生細胞凋亡的原因是沒有凋亡基因C．紅細胞沒有線粒體，其凋亡過程和線粒體無關(guān)D．燒傷的皮膚細胞也是通過誘導(dǎo)形成PT孔使細胞死亡4．以下判斷細胞死活的方法及解釋正確的是（）A．硝酸鉀溶液處理紫色洋蔥外表皮細胞，一段時間后沒有發(fā)現(xiàn)質(zhì)壁分離，說明是死細胞B．健那綠處理人體蛔蟲的體細胞，顯微鏡下沒有發(fā)現(xiàn)染成藍綠色的線粒體，說明是死細胞C．顯微鏡觀察到黑藻的葉綠體在細胞質(zhì)中運動，并隨著光線強弱而改變受光面，說明是活細胞D．適宜光照等條件下，裝有某植物的透明密閉小室內(nèi)氣壓沒有變化，說明植物已經(jīng)死亡5．下列有關(guān)細胞中元素和化合物的敘述，正確的是A．脂肪分子中含H比糖類多，是主要的能源物質(zhì)B．存在于葉綠體而不存在于線粒體中的糖是葡萄糖C．ATP、核酸、抗體、DNA的組成元素中都有C、H、O、N、PD．蛋白質(zhì)分子中的N主要存在于氨基中，核酸中的N主要存在于堿基中6．下列有關(guān)生物學(xué)實驗的敘述，正確的是A．低倍鏡下看到洋蔥根尖分生區(qū)細胞呈長方形，排列疏松不規(guī)則B．用顯微鏡觀察洋蔥根尖有絲分裂過程，需要保持細胞生物活性C．加入斐林試劑并水浴加熱才能檢測試管內(nèi)梨汁中是否含還原糖D．葉綠體色素濾液細線浸入層析液，會導(dǎo)致濾紙條上色素帶重疊二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）[生物—選修3現(xiàn)代生物科技專題]下圖為純種荷斯坦奶牛的繁殖過程，據(jù)圖回答下列問題:(1)克隆動物培養(yǎng)過程與圖示繁殖過程相比特有的技術(shù)手段是________技術(shù)，這兩種繁殖動物的方式相比，實質(zhì)性的區(qū)別為前者是___________生殖(填“無性生殖”或“有性生殖”)，后者是__________生殖(填“無性生殖”或“有性生殖”)。(2)一般用_________激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。用孕激素處理受體牛以利于胚胎移植。(3)受精卵體外培養(yǎng)所需的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜，除一些無機鹽和有機鹽類外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及________等物質(zhì)。(4)純種荷斯坦奶牛繁殖成功原因之一是純種荷斯坦奶牛胚胎可與受體黃牛的子宮建立_____，但是移入受體的供體胚胎的_________在孕育過程中不受任何影響。(5)某研究所決定培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛，科研人員先構(gòu)建含藥用蛋白基因的表達載體；再將其導(dǎo)入受精卵中；然后還要采用DNA分子雜交技術(shù)檢測_______________。8．（10分）蛋白質(zhì)是生命活動的主要承擔(dān)者，回答下列問題：（1）組成生物體的蛋白質(zhì)種類多，功能有差異。許多蛋白質(zhì)是構(gòu)成細胞和生物體結(jié)構(gòu)的重要物質(zhì)，稱為____________；一些激素的化學(xué)成分是蛋白質(zhì)，能夠調(diào)節(jié)機體的生命活動，說明有些蛋白質(zhì)起____________作用。（2）雙縮脲試劑是鑒定蛋白質(zhì)的常用試劑。若以蛋白質(zhì)為底物驗證酶的專一性，________（填“能”或“不能”）用雙縮脲試劑檢測底物是否被分解，原因是__________________。（3）蛋白質(zhì)混合液中硫酸銨濃度的不同可以使不同種類的蛋白質(zhì)析出（或沉淀），隨著硫酸銨濃度增加，混合液中蛋白質(zhì)析出的種類和總量增加。下表是某蛋白質(zhì)混合液中的不同蛋白質(zhì)從開始析出到完全析出所需要的蛋白質(zhì)混合液中的硫酸銨濃度范圍。蛋白質(zhì)混合液中硫酸銨濃度（%）15～2023～3025～3538～40析出的蛋白質(zhì)甲蛋白乙蛋白丙蛋白丁蛋白簡要寫出從該蛋白質(zhì)混合液中分離出全部丁蛋白的實驗設(shè)計思路______________。9．（10分）納豆和腐乳都是豆類發(fā)酵品，用納豆桿菌發(fā)酵大豆制作納豆的流程原理與腐乳的制作相似。納豆桿菌能分泌納豆激酶等?；卮鹣铝袉栴}（1）納豆制作的原理是___________________________。（2）納豆激酶能夠水解血栓中水不溶性的纖維蛋白，所以具有溶解血栓的作用。納豆桿菌的篩選和分離常用到由磷酸鹽緩沖液、纖維蛋白和瓊脂配制而成的乳白色的纖維蛋白培養(yǎng)基。從培養(yǎng)基營養(yǎng)組成的角度來看，其中的纖維蛋白的作用是__________________________。若培養(yǎng)基上出現(xiàn)_________________________，說明含有納豆桿菌。（3）提純納豆激酶可用于制備藥物。為提取純化納豆激酶，可進行下列實驗：①接種具有高纖溶活性的菌落到液體發(fā)酵培養(yǎng)基。37℃，搖床振蕩，發(fā)酵3天。②收集發(fā)酵液，離心，分層，取_____________作為提取納豆激酶的材料。③透析法分離：將上述離心所得樣品裝人透析袋，置于25mmo/L磷酸鹽緩沖液中透析，以便達到__________________________的目的。④凝膠色譜純化：將透析液進行柱層析，用____________進行洗脫，試管連續(xù)收集。⑤為了確認(rèn)試管收集液中是否含有納豆激酶，還要__________________________。10．（10分）我國一科研團隊將小麥液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因（TaNHX2基因）轉(zhuǎn)移到水稻細胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽水稻新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片斷，Sau3AI、EcoRI、BamHI為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種限制酶的切點；圖2是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請分析回答：（l）據(jù)圖分析可知，要構(gòu)建基因表達載體，需要用________限制酶對DNA片段和質(zhì)粒進行切割，再用____連接。（2）為了獲得更多的目的基因用于實驗研究，可以用小麥葉肉細胞的基因組為模板，利用TaNHX，基因的特異引物，通過________方法進行擴增，該方法用到的酶是____。（3）常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將耐鹽基因?qū)胨炯毎?。先將耐鹽基因插入Ti質(zhì)粒的_________中，然后導(dǎo)入農(nóng)桿菌中，再通過農(nóng)桿菌侵染水稻細胞，將耐鹽基因插入水稻細胞的_________上，最后通過植物細胞工程中的____技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株，從而使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。（4）為了檢測實驗成果，科研工作者在個體水平的檢測方法是____。11．（15分）家族性高膽固醇血癥（FH）可以引起嚴(yán)重的動脈阻塞，患者通常20歲前后死于心臟病發(fā)作。（1）膽固醇是合成性激素的前體物質(zhì)，在人體內(nèi)還參與血漿中脂質(zhì)的運輸，所以內(nèi)環(huán)境中膽固醇含量的_____________是機體進行正常生命活動的必要條件。（2）膽固醇合成酶（HMGCoA）的活性直接影響膽固醇的含量。研究脂蛋白（LDL）對HMGCoA活性的影響，培養(yǎng)液中分別加入無LDL的血清、含LDL的血清，培養(yǎng)取自健康個體成纖維細胞，結(jié)果如圖甲。該實驗結(jié)果表明__________________________________。（3）進一步研究脂蛋白（LDL）對FH患者體內(nèi)HMGCoA活性的影響，研究人員將健康人和FH患者的成纖維細胞在血清培養(yǎng)液中培養(yǎng)六天（相當(dāng)于圖乙中的0h）后，轉(zhuǎn)入去除LDL的血清培養(yǎng)液中培養(yǎng)，結(jié)果如圖乙。①由圖乙可知，LDL對FH患者膽固醇合成酶（HMGCoA）的活性_________________。②培養(yǎng)液中LDL通過胞吞方式被吸收進入健康者成纖維細胞發(fā)揮作用，但不能進入FH患者成纖維細胞，推測可能的原因是：FH患者細胞膜上缺少LDL的____________，導(dǎo)致LDL不能被識別。③為驗證上述推測，研究者進一步研究，實驗處理及結(jié)果如圖丙。你認(rèn)為該實驗結(jié)果是否支持上述推測？作出判斷的依據(jù)是什么？____________________________________。（4）綜合上述實驗，從細胞代謝角度分析，F(xiàn)H患者膽固醇含量高的原因是__________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

1、基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，如cDNA文庫。2、以mRNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化，在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA，與適當(dāng)?shù)妮d體（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉(zhuǎn)化受體菌，則每個細菌含有一段cDNA，并能繁殖擴增，這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細胞的cDNA文庫?！驹斀狻緼、cDNA是以mRNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄酶催化形成的，故cDNA文庫的構(gòu)建需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶，A正確；B、由圖中菌落分布特點可知，圖中的菌落是通過稀釋涂布法獲得的，B正確；C、核酸分子雜交的原理是堿基互補配對，C正確；D、胰島B細胞內(nèi)的胰高血糖素基因不表達，所以從胰島B細胞內(nèi)提取不到胰高血糖素基因的mRNA，無法逆轉(zhuǎn)錄形成胰高血糖素基因的cDNA，故不能從利用人胰島B細胞構(gòu)建的cDNA文庫中篩選到胰高血糖素基因，D錯誤。故選D。2、C【解析】

免疫是指身體對抗病原體引起的疾病的能力。人體有三道防線，保護自身免受外來病原體的侵襲。第一道防線是體表的屏障，第二道防線是體內(nèi)的非特異性保護作用，第三道防線是免疫系統(tǒng)的特異性免疫反應(yīng)，特異性免疫反應(yīng)又分為細胞免疫和體液免疫?！驹斀狻緼、吞噬細胞處理結(jié)核桿菌后，將抗原傳遞給T細胞，A錯誤；B、T細胞釋放淋巴因子刺激B細胞，使其增殖分化，B錯誤；C、效應(yīng)T細胞特異性識別靶細胞，并使其裂解死亡，C正確；D、記憶細胞增殖分化成漿細胞，迅速產(chǎn)生大量抗體，D錯誤。故選C。3、A【解析】

A、促凋亡因素能通過誘導(dǎo)線粒體上PT孔的開放，導(dǎo)致線粒體膜電位喪失，而膜電位與離子的進出有關(guān)，因此線粒體上的PT孔是某些離子進出線粒體的通道，A正確；

所有細胞都具有凋亡基因，癌細胞的凋亡基因沒有表達，B錯誤；

哺乳動物成熟的紅細胞才沒有線粒體，C錯誤；

PT孔和細胞凋亡直接相關(guān)，而燒傷的皮膚細胞的死亡屬于細胞壞死，D錯誤。

故選A

4、C【解析】

科研上鑒別死細胞和活細胞，常用“染色排除法”。例如，用臺盼藍染色，死的動物細胞會被染成藍色，而活的動物細胞不著色，從而判斷細胞是否死亡。健那綠染液是將活細胞中線粒體染色的專一性染料，可以使活細胞中的線粒體呈現(xiàn)藍綠色，而細胞質(zhì)接近無色。活細胞的葉綠體會運動。【詳解】用硝酸鉀溶液處理紫色洋蔥外表皮細胞，一段時間后沒有發(fā)現(xiàn)質(zhì)壁分離，可能是硝酸鉀溶液的濃度過高，殺死了植物細胞，A錯誤；蛔蟲生活在無氧的環(huán)境中，無線粒體，用健那綠染色，顯微鏡下觀察不到染成藍綠色的線粒體，B錯誤；顯微鏡觀察到黑藻的葉綠體在細胞質(zhì)中運動，即胞質(zhì)環(huán)流，并隨著光線強弱而改變受光面，說明是活細胞，C正確；適宜光照等條件下，裝有某植物的透明密閉小室內(nèi)氣壓沒有變化，可能是光合作用和呼吸作用強度相等，氣體體積未發(fā)生變化，D錯誤?！军c睛】本題的易錯點是蛔蟲生活在人體的腸道中，長期處于無氧的環(huán)境，細胞內(nèi)無線粒體，只進行無氧呼吸。5、B【解析】

據(jù)題文和選項的描述可知：該題考查學(xué)生對細胞中的有機化合物（糖類、蛋白質(zhì)、核酸、脂肪等）的元素組成、結(jié)構(gòu)、功能等相關(guān)知識的識記和理解能力?！驹斀狻恐痉肿又蠬的含量比糖類多，而氧的含量低于糖類，相同質(zhì)量的脂肪氧化分解釋放的能量多于糖類，因此脂肪是細胞內(nèi)良好的儲能物質(zhì)，A錯誤；葡萄糖是光合作用的產(chǎn)物，而葡萄糖分解為丙酮酸發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中，可見，葡萄糖存在于葉綠體而不存在于線粒體中，B正確；ATP、核酸、DNA的組成元素中都有C、H、O、N、P，抗體屬于蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)的基本組成元素是C、H、O、N四種，有的蛋白質(zhì)還含有S等元素，C錯誤；蛋白質(zhì)分子中的N主要存在于肽鍵中，核酸中的N主要存在于堿基中，D錯誤?！军c睛】解答此題的關(guān)鍵是識記和理解細胞中的細胞中的糖類、蛋白質(zhì)、核酸（含DNA）、脂肪、ATP的元素組成，識記和理解蛋白質(zhì)與核酸的結(jié)構(gòu)、糖類的分布等相關(guān)知識，并與細胞呼吸、光合作用建立聯(lián)系，據(jù)此分析判斷各選項。6、C【解析】

1、洋蔥根尖分生區(qū)細胞呈正方形，排列緊密，有的細胞正在分裂，觀察根尖細胞有絲分裂的實驗步驟：取材→解離→漂洗→染色→制片→觀察。2、斐林試劑與還原糖在水浴加熱的條件下產(chǎn)生磚紅色沉淀。3、綠葉中色素的提取與分離的原理是:色素能夠溶解到有機溶劑乙醇中，綠葉中的色素在層析液中的溶解度不同，溶解度大的擴散的快，溶解度小的擴散的慢，因此可以把綠葉中的色素分離?！驹斀狻緼.低倍鏡下看到洋蔥根尖分生區(qū)細胞呈正方形，排列緊密，A錯誤；B.觀察洋蔥根尖有絲分裂過程的實驗過程中，解離步驟已經(jīng)將細胞殺死，故觀察過程中不需要保持細胞生物活性，B錯誤；C.用斐林試劑檢測生物組織中還原糖存在時，需要在加入斐林試劑后并水浴加熱才能檢測到，C正確；D.葉綠體色素濾液細線浸入層析液，會導(dǎo)致濾紙條上無色素帶出現(xiàn)，D錯誤。故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、核移植無性生殖有性生殖促性腺血清正常的生理和組織聯(lián)系遺傳特性轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛的DNA上是否插入了藥用蛋白基因【解析】

試題分析：(1)培育克隆動物，采用的特有的技術(shù)手段是核移植技術(shù)，核移植技術(shù)為無性生殖。圖示繁殖過程采用了體外受精和早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)，屬于有性生殖。(2)一般使用促性腺激素對供體母牛進行超數(shù)排卵處理。(3)受精卵在體外培養(yǎng)所用的發(fā)育培養(yǎng)液的成分，除一些無機鹽和有機鹽類外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸以及血清等物質(zhì)。(4)胚胎移植成功的原因之一是：供體胚胎（純種荷斯坦奶牛的胚胎）可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但移入受體的供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受任何影響。(5)在基因工程中，常采用DNA分子雜交技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因荷斯坦奶牛的DNA上是否插入了藥用蛋白基因。8、結(jié)構(gòu)蛋白信息傳遞不能蛋白酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，也可與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)（或蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物也可與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)）向該蛋白質(zhì)混合液中加入硫酸銨溶液（或硫酸銨），使其濃度達到35％(或35％≤硫酸銨濃度＜38％范圍內(nèi)的其它濃度)，分離析出物與溶液，保留溶液；取保留溶液，再加入硫酸銨溶液（或硫酸銨），使硫酸銨在溶液中的濃度達到40％(或40％以上)，分離析出物與溶液，析出物即為丁蛋白【解析】

由表中信息可以看出，若只完全析出甲蛋白，混合液中最合適的硫酸銨濃度應(yīng)為20%。根據(jù)“隨著硫酸銨濃度的增加，混合液中析出蛋白質(zhì)的種類和總量也增加”及結(jié)合表格數(shù)據(jù)可知混合液中的硫酸銨濃度達到30%時，會有甲、乙蛋白的全部析出和丙蛋白的部分析出。乙蛋白完全析出的硫酸銨濃度應(yīng)為30%，但硫酸銨濃度為30%時還有丙蛋白和甲蛋白析出，所以通過改變混合液中的硫酸銨濃度不能從混合液中得到所有的、不含有其他蛋白質(zhì)的乙蛋白。在硫酸銨濃度為38～40%時丁蛋白會析出，可以先用較低濃度的硫酸銨濃度分別將甲、乙、丙蛋白析出，然后在將硫酸銨濃度設(shè)為38～40%，將丁蛋白析出?！驹斀狻浚?）構(gòu)成細胞和生物體結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)為結(jié)構(gòu)蛋白；激素能夠傳遞信息，調(diào)節(jié)生命活動，所以一些激素的化學(xué)成分是蛋白質(zhì)，說明有些蛋白質(zhì)起信息傳遞的作用。（2）分解蛋白質(zhì)的酶本質(zhì)也是蛋白質(zhì)，也能與雙縮脲試劑反應(yīng)出現(xiàn)紫色，而酶在反應(yīng)前后結(jié)構(gòu)不變，溶液中始終存在該酶，所以若以蛋白質(zhì)為底物驗證酶的專一性，不能用雙縮脲試劑檢測底物是否被分解。（3）根據(jù)上述分析可知，若要從該蛋白質(zhì)混合液中分離出全部丁蛋白的實驗設(shè)計思路為：向該蛋白質(zhì)混合液中加入硫酸銨溶液（或硫酸銨），使其濃度達到35％(或35％≤硫酸銨濃度＜38％范圍內(nèi)的其它濃度)，分離析出物與溶液，保留溶液；取保留溶液，再加入硫酸銨溶液（或硫酸銨），使硫酸銨在溶液中的濃度達到40％(或40％以上)，分離析出物與溶液，析出物即為丁蛋白?！军c睛】本題考查了蛋白質(zhì)的功能和考生從表格中獲取解題信息的能力，考生必需具有一定的表格文字的轉(zhuǎn)換能力，才能順利解答該題，難度適中。9、納豆桿菌等微生物分泌的蛋白酶能將豆類中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸充當(dāng)碳源和氮源，提供能源物質(zhì)（較大）溶解圈上清液去除/置換樣品中分子量較小的雜質(zhì)（25mmol/L）磷酸（鹽）緩沖液添加適量收集液到纖維蛋白培養(yǎng)基上（或添加適量收集液到含有血栓的溶液里）【解析】

1、腐乳的制作原理：以豆腐為原料利用毛霉等微生物分泌出各種酶，促使豆腐坯中的蛋白質(zhì)分解成營養(yǎng)價值高的氨基酸和一些風(fēng)味物質(zhì)。有些氨基酸本身就有一定的鮮味，腐乳在發(fā)酵過程中也促使豆腐坯中的淀粉轉(zhuǎn)化成酒精和有機酸，同時還有輔料中的酒及香料也參與作用，共同生成了帶有香味的酯類及其他一些風(fēng)味成分，從而構(gòu)成了腐乳所特有的風(fēng)味。腐乳在制作過程中發(fā)酵，蛋白酶和附著在菌皮上的細菌慢慢地滲入到豆腐坯的內(nèi)部，逐漸將蛋白質(zhì)分解，大約經(jīng)過三個月至半年的時間，松酥細膩的腐乳就做好了，滋味也變得質(zhì)地細膩、鮮美適口。2、培養(yǎng)基的成分包括：碳源、氮源、無機鹽和水，有的需要生長因子等。碳源分為無機碳源和有機碳源，無機碳源如二氧化碳，有機碳源如葡萄糖，碳源是構(gòu)成生物體細胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)；氮源分為無機氮源（銨鹽、硝酸鹽等）和有機氮源（尿素、牛肉膏等），合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物。3、血紅蛋白的提取和分離：（1）樣品處理：洗滌，用生理鹽水洗滌，低速離心，直至上清液中沒有黃色；（2）血紅蛋白釋放：加入蒸餾水和甲苯，細胞破碎釋放血紅蛋白；（3）分離：低速離心，分成4層，第三層紅色透明液體為血紅蛋白水溶液層，分出該層；（4）透析：放入透析袋，出去分子量較小的雜質(zhì)；（5）過凝膠色譜柱收集純蛋白?！驹斀狻浚?）根據(jù)題意可知，用納豆桿菌發(fā)酵大豆制作納豆的流程原理與腐乳的制作相似，因此納豆制作的原理是：利用納豆桿菌等微生物分泌的蛋白酶能將豆類中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。（2）根據(jù)培養(yǎng)基的成分可知，纖維蛋白既含有碳元素也含有氮元素，因此可以作為碳源和氮源使用，提供能源物質(zhì)，由于納豆桿菌能分泌納豆激酶，納豆激酶能夠水解水不溶性的纖維蛋白，在乳白色的固體培養(yǎng)基上如果存在納豆桿菌，則可以在培養(yǎng)基上形成較大的溶解圈。（3）納豆激酶的化學(xué)本質(zhì)屬于蛋白質(zhì)，因此提純納豆激酶的方法即提純蛋白質(zhì)的方法。實驗步驟：①接種具有高纖溶活性的菌落到液體發(fā)酵培養(yǎng)基。37℃，搖床振蕩，發(fā)酵3天。②收集發(fā)酵液，離心，分層，取上清液作為提取納豆激酶的材料。③透析法分離：將上述離心所得樣品裝人透析袋，置于25mmo/L磷酸鹽緩沖液中透析，透析的目的是去除/置換樣品中分子量較小的雜質(zhì)。④凝膠色譜純化：將透析液進行柱層析，用25mmo/L磷酸鹽緩沖液進行洗脫，試管連續(xù)收集。⑤為了確認(rèn)試管收集液中是否含有納豆激酶，還要添加適量收集液到纖維蛋白培養(yǎng)基上，觀察是否出現(xiàn)溶解圈?！军c睛】本題考查微生物的培養(yǎng)和發(fā)酵以及蛋白質(zhì)的提純的知識點，要求學(xué)生掌握培養(yǎng)基的成分及功能，理解分離微生物的原則和方法，把握腐乳的制作原理，利用該原理解釋納豆的制作依據(jù)的原理，掌握蛋白質(zhì)的提取和分離的操作方法和過程，這是突破第（3）問的關(guān)鍵。10、EcoRIDNA連接酶PCRTaq酶（或耐高溫的DNA聚合酶）T-DNA染色體DNA植物組織培養(yǎng)將轉(zhuǎn)基因水稻種植在鹽堿地上或用一定濃度的鹽水澆灌觀察結(jié)果【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）如圖所示，用EcoRI酶切可獲得目的基因，同時質(zhì)粒上也具有EcoRI酶切位點，因此可用EcoRI限制酶對DNA片段和質(zhì)粒進行切割，再用DNA連接酶將兩個片段連接起來。（2）在體外可用PCR擴增技術(shù)對目的基因進行擴增，PCR用的酶是耐熱的Taq酶。（3）在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胨炯毎ㄖ参锛毎r，應(yīng)該將耐鹽基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，經(jīng)過轉(zhuǎn)化作用進入水稻細胞，并將其插入水稻細胞染色體的DNA上，最后通過植物細胞工程中的植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株，從而使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。（4）耐鹽目的基因在個體水平上的檢測方法是：將轉(zhuǎn)基因水稻種植在鹽堿地上或用一定濃度的鹽水澆灌觀察結(jié)果。【點睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟等，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。11、穩(wěn)態(tài)LDL抑制膽固醇合成酶（HMGCoA）的活性無