植物樣品的采集制備和保存作業(yè)指導(dǎo)書

植物樣品的采集制備和保存作業(yè)指導(dǎo)書

1.1植物組織樣品的采集植物組織樣品多用于診斷分析，采集植物組織樣品首先要選定植株。樣株必須有充分的代表性，通常也象采集土樣一樣按照一定路線多點(diǎn)采集，組成平均樣品。組成每一平均樣品的樣株數(shù)目視作物種類、種植密度、株型大小、株齡或生育期以及要求的準(zhǔn)確度而定。從大田或試驗(yàn)區(qū)選擇樣株要注意群體密度，植株長相、植株長勢(shì)、生育期的一致，過大或過小，遭受病蟲害或機(jī)械損傷以及由于邊際效應(yīng)長勢(shì)過強(qiáng)的植株都不應(yīng)采用。如果為了某一特定目的，例如缺素診斷而采樣時(shí)，則應(yīng)注意植株的典型性，并要同時(shí)在附近地塊另行選取有對(duì)比意義的正常典型植株，使分析的結(jié)果能在相互比較的情況下，說明問題。植株選定后還要決定取樣的部位和組織器官，重要的原則是所選部位的組織器官要具有最大的指示意義，也就是說，植株在該生育期對(duì)該養(yǎng)分的豐欠最敏感的組織器官。大田作物在生殖生長開始時(shí)期常采取主莖或主枝頂部新成熟的健壯葉或功能葉；幼嫩組織的養(yǎng)分組成變化很快，一般不宜采樣。苗期診斷則多采集整個(gè)地上部分。大田作物開始結(jié)實(shí)后，營養(yǎng)體中的養(yǎng)分轉(zhuǎn)化很快，不宜再做葉分析，故一般谷類作物在授粉后即不再采診斷用的樣品。如果為了研究施肥等措施對(duì)產(chǎn)品品質(zhì)的影響，則當(dāng)然要在成熟期采取莖稈、籽粒、果實(shí)、塊莖、塊根等樣品，果樹和林木多年生植物的營養(yǎng)診斷通常采用“葉分析”或不帶葉柄的“葉片分析”，個(gè)別果樹如葡萄、棉花則常做“葉柄分析”。植物體內(nèi)各種物質(zhì)，特別是活動(dòng)性成分如硝態(tài)氮、氨基態(tài)氮，還原糖等都處于不斷的代謝變化之中，不僅在不同生育期的含量有很大的差別，并且在一日之間也有顯著的周期性變化。因此在分期采樣時(shí)，取樣時(shí)間應(yīng)規(guī)定一致，通常以上午8—10時(shí)為宜，因?yàn)檫@時(shí)植物的生理活動(dòng)已趨活躍，地下部分的根系吸收速率與地上部正趨于上升的光合作用強(qiáng)度接近動(dòng)態(tài)平衡。此時(shí)植物組織中的養(yǎng)料貯量最能反映根系養(yǎng)料吸收與植物同化需要的相對(duì)關(guān)系，因此最具有營養(yǎng)診斷的意義。診斷作物氮、磷、鉀、鈣、鎂的營養(yǎng)成分狀況的采樣還應(yīng)考慮各元素在植物營養(yǎng)中的特殊性。采得的植株樣品如需要分不同器官(例如葉片，葉鞘或葉柄、莖、果實(shí)等部分)測(cè)定，須立即將其剪開，以免養(yǎng)分運(yùn)轉(zhuǎn)。1.2植株組織樣品的制備與保存采得的樣品一般說是需要洗滌的，否則可能引起泥土、施肥噴藥等顯著的污染，這對(duì)微量營養(yǎng)元素如鐵、錳等的分析尤為重要。洗滌方法一般可用濕布仔細(xì)擦凈表面沾污物。測(cè)定易起變化的成分(例如硝態(tài)氮、氨基態(tài)氮、氰、無機(jī)磷、水溶性糖、維生素等)須用新鮮樣品，鮮樣品如需短期保存，必須在冰箱中冷藏，以抑制其變化。分析時(shí)將洗凈的鮮樣剪碎混勻后立即稱樣，放入瓷研缽中與適當(dāng)溶劑(或再加石英砂)共研磨，進(jìn)行浸提測(cè)定。測(cè)定不易變化的成分則常用干燥樣品。洗凈的鮮樣必須盡快干燥，以減少化學(xué)和生物的變化。如果延遲過久，細(xì)胞的呼吸和霉菌的分解都會(huì)消耗組織的干物質(zhì)而致改變各成分的百分含量、蛋白質(zhì)也會(huì)裂解成較簡(jiǎn)單的含氮化合物。殺酶要有足夠的高溫，但烘干的溫度不能太高，以防止組織外部結(jié)成干殼而阻礙內(nèi)部水分的蒸發(fā)，而且高溫還可能引起組織的熱分解或焦化。因此，分析用的植物鮮樣要分兩步干燥，通常先將鮮樣在80—90℃烘箱(最好用鼓風(fēng)烘箱)中烘15—30分鐘，(松軟組織烘15分鐘，致密堅(jiān)實(shí)的組織烘30分鐘)，然后，降溫至60—70℃，逐盡水分。時(shí)間須視鮮樣水分含量而定，大約12—24小時(shí)。干燥的樣品可用研缽或帶刀片的(用于莖葉樣品)或帶齒狀的(用于種子樣品)磨樣機(jī)粉碎，并全部過篩。分析樣品的細(xì)度須視稱樣的大小而定，通?？捎脠A孔直徑為1mm的篩；如稱樣僅1—2g者，宜用0.5mm的篩；稱樣小于1g者，須用0.25或0.1mm篩。磨樣和過篩都必須考慮到樣品沾污的可能性。樣品過篩后須充分混勻，保存于磨口廣口瓶中，內(nèi)外各貼放一樣品標(biāo)簽。樣品在粉碎和貯存過程中又將吸收一些空氣中的水分，所以在精密分析工作中，稱樣前還須將粉狀樣品在65℃(12—24小時(shí))或90℃(2小時(shí))再次烘干，一般常規(guī)分析則不必。干燥的磨細(xì)樣品必須保存在密封的玻璃瓶中，稱樣時(shí)應(yīng)充分混勻后多點(diǎn)勺取。1.3植物微量元素分析樣品制備與保存。樣品的采集與制備chapman(chapman,H.D1966DignosticCriteriaforplantsandsoils,Univ.ofCalif.Berkeley)的采樣技術(shù)得到普遍承認(rèn)，可供參考。植物微量元素分析樣品的干燥和粉碎過程中，所用方法與分析常量元素樣品相似，特別指出的是防止干燥和粉碎過程中儀器對(duì)樣品的污染。例如干燥箱中烘干時(shí)，防止金屬粉末等的污染，粉碎樣品選用的研磨設(shè)備，應(yīng)采用不銹鋼工具鋼刀