2025屆陜西省西安市新城區(qū)西安中學(xué)生物高三上期末復(fù)習(xí)檢測試題含解析

2025屆陜西省西安市新城區(qū)西安中學(xué)生物高三上期末復(fù)習(xí)檢測試題注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列有關(guān)細胞工程的敘述，正確的是（）A．核移植得到的克隆動物，其線粒體DNA來自供卵母體B．動物細胞培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是動物細胞核具有全能性C．骨髓瘤細胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D．PEG是促細胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細胞融合2．關(guān)于體液免疫的下列敘述正確的是（）A．成熟B淋巴細胞不能合成特定的抗體分子B．體液免疫不需要輔助性T淋巴細胞的參與C．并非所有抗體分子都是蛋白質(zhì)D．一種抗體分子的結(jié)合位點只能與一種抗原匹配3．在我國北方，游泳愛好者冬泳入水后，身體立即發(fā)生一系列生理反應(yīng)。下列為機體會發(fā)生的反應(yīng)是（）A．抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，加強肌肉收縮B．通過反射活動引起皮膚毛細血管舒張C．通過神經(jīng)調(diào)節(jié)減少機體各部分汗腺分泌D．興奮垂體活動導(dǎo)致甲狀腺激素分泌減少4．近年來的研究初步表明，β-AP（β-淀粉樣蛋白）沉積是Alzheimer型老年癡呆的主要病因。β-AP是由其前體蛋白APP（一種含695個氨基酸的跨膜蛋白）在病理狀態(tài)下異常加工而成的。APP形成β-AP的過程如圖所示。根據(jù)上述信息所做的推論錯誤的是（）A．用雙縮脲試劑檢測β-AP，有紫色反應(yīng)B．β-AP的效果可能是引起大腦功能異常C．一個β-AP分子中至少含有39個肽鍵D．β-分泌酶很可能是突變基因表達的產(chǎn)物5．下表是對某單基因遺傳病進行調(diào)查后整理出的數(shù)據(jù)。下列敘述正確的是（）雙親調(diào)查的家庭數(shù)子女子女總數(shù)父親母親兒子女兒正?；疾≌；疾〉谝唤M正常正常9526013第二組正?；疾?01405第三組患病正常321025第四組患病患病603047合計227710630A．研究課題是調(diào)查該遺傳病的發(fā)病率B．可基本判定此病為伴X隱性遺傳病C．第1組母親的基因型均為雜合子D．利用表中數(shù)據(jù)可計算出該遺傳病在人群中的發(fā)病率約為43%6．蜜蜂中的蜂王和工蜂都由受精卵發(fā)育形成，屬于卵式生殖；雄蜂由卵細胞發(fā)育形成，屬于孤雌生殖。一個基因型為AaBb（A、a基因位于1號染色體上，B、b基因位于2號染色體上）的蜂王與基因型為ab的雄蜂交配，生出了一只基因型為AA而缺少B、b基因的雄蜂。僅考慮染色體數(shù)目變異，下列可產(chǎn)生該基因型為AA的雄蜂的組合是（）①1號染色體在減數(shù)第一次分裂時未分離②1號染色體在減數(shù)第二次分裂時未分離③2號染色體在減數(shù)第一次分裂時未分離④2號染色體在減數(shù)第二次分裂時正常分離A．①③ B．①④ C．②④ D．②③7．已知某一動物種群中僅有Aabb和AAbb兩種類型個體，Aabb：AAbb=1：2，該種群的每種基因型中雄雌個體比例為1：1，個體間可以自由交配，則該種群自由交配產(chǎn)生的子代中能穩(wěn)定遺傳的個體比例為A．5/8 B．5/9 C．13/16 D．13/188．（10分）棉花在生長發(fā)育過程中，多種激素起著調(diào)節(jié)作用。下列說法正確的是（）A．棉花的生長素可由谷氨酸轉(zhuǎn)變而來B．高濃度的細胞分裂素能通過促進乙烯合成抑制棉花生長C．棉花頂芽合成的2，4-D通過主動運輸運輸?shù)絺?cè)芽D．棉花的幼芽和幼根可以合成乙烯二、非選擇題9．（10分）2018年7月，某生物公司的百白破疫苗檢驗不符合規(guī)定。為生產(chǎn)高效價疫苗和簡化計劃免疫程序，科學(xué)家研制出基因工程乙肝-百白破(rHB-DTP)四聯(lián)疫苗，經(jīng)各項檢測均通過rHB-DTP四聯(lián)疫苗制檢規(guī)程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳桿菌、白喉桿菌和破傷風(fēng)桿菌的四種類毒素。請分析回答下列問題：(1)為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細胞中提取對應(yīng)____________，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的cDNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列__________________(填“相同”或“不同”)。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用__________，然后通過____________大量擴增，此技術(shù)的前提是已知一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物。(3)把目的基因?qū)荏w細胞時，科學(xué)家采用了改造后的腺病毒作為載體，寫出你認(rèn)為科學(xué)家選它的理由________________________________________________。(寫出2點)(4)研究發(fā)現(xiàn)，如果將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，免疫效果更好，請寫出此種技術(shù)的基本流程____________________________________。(5)實驗證明，一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的_________數(shù)量增多，當(dāng)同種抗原再次侵入人體時二次免疫的特點是____________，免疫預(yù)防作用更強。10．（14分）美國科學(xué)家卡爾文利用同位素標(biāo)記法對小球藻的光合作用進行研究，最終探明了光合作用中碳的轉(zhuǎn)化途徑，因此獲得了1961年的諾貝爾化學(xué)獎。下圖為簡化的卡爾文循環(huán)示意圖，①②③表示相關(guān)物質(zhì)，請回答問題：（1）卡爾文循環(huán)中，3-磷酸甘油酸在①和ATP的作用下被還原為③___________，其中的①為3-磷酸甘油酸的還原提供了____________和能量，②在__________（場所）重新形成①，所以卡爾文循環(huán)只有在____________條件下才能一輪一輪循環(huán)不已。（2）對培養(yǎng)小球藻的試管，先進行一定強度的光照后，再黑暗處理，暗處理后短時間內(nèi)3-磷酸甘油酸的含量會______________。如果加入18O標(biāo)記CO2，則會形成__________，進而產(chǎn)生18O2.（3）提取并分離小球藻中的光合色素，濾紙條上從上至下第二個色素帶的顏色是__________。11．（14分）乙烯具有促進果實成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細胞合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。利用反義DNA技術(shù)（原理如圖1），可以抑制這兩個基因的表達，從而使番茄具有耐儲存、宜運輸?shù)膬?yōu)點。圖2為融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反義表達載體的結(jié)構(gòu)示意圖。（1）圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的____________（器官）中表達。（2）從番茄成熟果實中提取___________為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進行拼接構(gòu)成融合基因并擴增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，用限制酶____________對上述兩個基因進行酶切，再串聯(lián)成融合基因，相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶_______________進行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）為了實現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因_______（正向/反向）插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有___的培養(yǎng)基中，可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。（5）在檢測番茄細胞中是否存在反義融合基因時，____________（填“能”/“不能”）用放射性物質(zhì)標(biāo)記的ACC氧化（合成）酶基因片段做探針進行檢測，理由是____________。12．某同學(xué)進行的探究實驗一環(huán)境因素對光合作用強度的影響：圖甲是探究在溫度為30℃時影響植物光合速率的因素的實驗裝置圖；圖乙表示該植物的某葉肉細胞在光照強度分別為a、b、c、d時，單位時間內(nèi)葉肉細胞CO2釋放量和葉綠體O2產(chǎn)生總量的變化。請回答：（1）為了避免無關(guān)變量對實驗結(jié)果的影響，在圖甲裝置的燈與試管之間安置了盛水玻璃柱，目的是_____；為了改變光照強度，你認(rèn)為應(yīng)該釆取的措施是_______________。（2）圖乙中光照強度為b時，該葉肉細胞光合作用速率___________（填“小于”、“等于”或“大于”）呼吸作用速率；光照強度為d時，光反應(yīng)產(chǎn)生的并能夠為暗反應(yīng)所利用的物質(zhì)有___________。（3）已知葉肉細胞光合作用和呼吸作用的最適溫度分別為25℃和30℃，在其他條件不變的情況下，將溫度調(diào)節(jié)到25℃，若乙圖中的直方柱的高度不發(fā)生改變，則c點應(yīng)該向___________平移。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

細胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術(shù)必不可少的環(huán)節(jié)，而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆?！驹斀狻緼、核移植是將供體的細胞核移植到去核的卵細胞中，因此得到的克隆動物，其線粒體DNA來自供卵母體，A正確；B、動物細胞培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是細胞分裂，B錯誤；C、骨髓瘤細胞不能產(chǎn)生抗體，需和B淋巴細胞融合形成雜交瘤細胞才能獲得單克隆抗體，C錯誤；D、PEG是促細胞融合劑，可直接誘導(dǎo)動物細胞融合，而植物細胞含有細胞壁，不能直接融合，D錯誤。故選A。2、D【解析】

免疫是指身體對抗病原體引起的疾病的能力，特異性免疫包含細胞免疫和體液免疫。細胞免疫對抗被病原體感染的細胞和癌細胞，此外也對抗移植器官的異體細胞?；罨募毎拘訲淋巴細胞識別嵌有抗原－MHC復(fù)合體的細胞，并消滅之。體液免疫為效應(yīng)B細胞產(chǎn)生和分泌大量的抗體分子分布到血液和體液中，體液免疫的主要目標(biāo)是細胞外的病原體和毒素。這些病原體和毒素在組織和體液中自由的循環(huán)流動時，抗體與這類細胞外的病原體和毒素結(jié)合，致使病毒一類的抗原失去進入寄主細胞的能力，使一些細菌產(chǎn)生的毒素被中和而失效，還可使一些抗原（如可溶的蛋白質(zhì)）凝聚而被巨噬細胞吞噬?！驹斀狻緼、成熟B淋巴細胞合成能與特定抗原特異性結(jié)合的受體分子，也就是相對應(yīng)的抗體分子，A錯誤；B、體液免疫需要輔助性T淋巴細胞的參與，分泌白細胞介素-2促進致敏B淋巴細胞的增殖，B錯誤；C、所有抗體分子都是蛋白質(zhì)（免疫球蛋白），C錯誤；D、抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，一種抗體分子的結(jié)合位點（受體）只能與一種抗原特異性結(jié)合，D正確。故選D。3、C【解析】

1、在我國北方游泳愛好者冬泳入水之后，身體立即發(fā)生一系列的生理反應(yīng)，以維持體溫恒定。

2、寒冷環(huán)境→皮膚冷覺感受器→下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞→增加產(chǎn)熱（骨骼肌戰(zhàn)栗、立毛肌收縮、甲狀腺激素分泌增加），減少散熱（毛細血管收縮、汗腺分泌減少）→體溫維持相對恒定?！驹斀狻緼、冬泳入水后，通過調(diào)節(jié)散熱減少，產(chǎn)熱增多，以維持體溫恒定，入水后，中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮，通過神經(jīng)調(diào)節(jié)，肌肉收縮使產(chǎn)熱增加，A錯誤；

B、皮膚毛細血管收縮，減少散熱量，B錯誤；

C、冬泳入水后，通過神經(jīng)調(diào)節(jié)減少汗腺分泌，使散熱減少，C正確；

D、通過神經(jīng)調(diào)節(jié)促進下丘腦的分泌活動，促進垂體的分泌活動進而促進甲狀腺分泌甲狀腺激素，甲狀腺激素分泌增加，使產(chǎn)熱增加，D錯誤。

故選C。4、C【解析】

根據(jù)題意，β-AP（p-淀粉樣蛋白）的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，用雙縮脲試劑檢測成紫色，A正確；“β-AP（p-淀粉樣蛋白）沉積是Alzheimer型老年癡呆的主要病理征”，則β-AP的作用效果可能是引起大腦功能異常，B正確；據(jù)圖分析，β-AP分子中氨基酸=695-596-（695-635）=39，則肽鍵數(shù)=氨基酸數(shù)-肽鏈數(shù)=38個，C錯誤；β-AP的過程需在β-分泌酶和γ-分泌酶的作用下將APP分解，正常的機體發(fā)生病變，很可能是基因突變的結(jié)果，D正確；故選C。5、B【解析】

分析題表可知，父母正常的家庭中有患病的子女，故該遺傳病為隱性遺傳??；再根據(jù)父親正常，母親患病的家庭中，兒子全部患病，女兒均未患病，可判斷該遺傳病為伴X隱性遺傳病。【詳解】A、題中所示的調(diào)查的群體數(shù)不夠大也不具有普遍性，所以不適合調(diào)查人群中遺傳病的發(fā)病率，A錯誤；B、根據(jù)第一組父母均正常的家庭中有兒子患病可知該遺傳病為隱性基因控制，再根據(jù)四組中后代的正?；蚧疾⌒誀罹c性別有關(guān)，母親患病兒子一定患病，父親正常女兒均為正?？苫九卸ㄔ摬榘閄隱性遺傳病，B正確；C、第一組中共9個家庭，無法確定每個家庭母親的基因型是否均為雜合子，C錯誤；D、題中所示的調(diào)查的群體數(shù)不夠大也不具有普遍性，根據(jù)表中數(shù)據(jù)計算出的遺傳病人群發(fā)病的數(shù)據(jù)不可靠，D錯誤；故選B。6、D【解析】

雄蜂由卵細胞發(fā)育形成，故基因型為AA而缺少B、b基因的雄蜂由基因型為AA的卵細胞發(fā)育而成?！驹斀狻繐?jù)上分析可知，基因型為AA的雄蜂是由基因型為AA的卵細胞發(fā)育而成。母本的基因型為AaBb，卵細胞中出現(xiàn)兩個A基因的原因：1號染色體的兩條姐妹染色單體在減數(shù)第二次分裂時未分離，兩個A基因進入卵細胞。缺少B、b基因的可能原因：一是2號染色體在減數(shù)第一次分裂時未分離，形成了不含2號染色體的次級卵母細胞，最終產(chǎn)生的卵細胞中不含B、b基因；二是減數(shù)第一次分裂正常，減數(shù)第二次分裂時兩個b基因或B基因進入極體，產(chǎn)生了不含2號染色體的卵細胞。綜上所述，②③正確。故選D?！军c睛】本題主要考查減數(shù)分裂，考查學(xué)生的理解能力和獲取信息的能力。7、D【解析】

本題應(yīng)選用配子法來計算基因型概率。在開始審題的時候看到有兩對等位基因，但是由于親本均為bb，因此只要考慮Aa和AA這一對基因，此時應(yīng)選擇基因的分離定律解題?！驹斀狻恳阎H本的基因型是Aabb和AAbb，分析基因型可知只要考慮A與a這一對相對性狀個體間的自由交配（因為兩個親本都是bb，后代也全為bb）。據(jù)題意無論雌性或雄性，都有Aa和AA兩種類型，Aa：AA=1：2，這樣親本AA占2/3、Aa占1/3，這樣親本產(chǎn)生的配子中A占1/3×1/2+2/3=5/1，a占1/1．無論雌、雄均有這兩種，均為這樣的比例，因此后代AA的概率為5/1×5/1=25/31，aa的概率為1/1×1/1=1/31，Aa的概率2×5/1×1/1=10/31，因此該種群自由交配產(chǎn)生的子代中能穩(wěn)定遺傳的個體比例為25/31+1/31=13/18。故選D。8、D【解析】

五類植物激素的比較：名稱合成部位存在較多的部位功能生長素幼嫩的芽、葉、發(fā)育中的種子集中在生長旺盛的部位既能促進生長，也能抑制生長；既能促進發(fā)芽，也能抑制發(fā)芽；既能防止落花落果，也能疏花蔬果赤霉素未成熟的種子、幼根和幼芽普遍存在于植物體內(nèi)①促進細胞伸長，從而引起植株增高②促進種子萌發(fā)和果實發(fā)育細胞分裂素主要是根尖細胞分裂的部位促進細胞分裂脫落酸根冠、萎蔫的葉片將要脫落的器官和組織中①抑制細胞分裂②促進葉和果實的衰老和脫落乙烯植物的各個部位成熟的果實中較多促進果實成熟【詳解】A、生長素可由色氨酸轉(zhuǎn)變而來，A錯誤；B、高濃度的生長素能通過促進乙烯合成抑制棉花生長，B錯誤；C、2，4-D是人工合成的對植物生長發(fā)育有調(diào)節(jié)作用的化學(xué)物質(zhì)，棉花頂芽不能合成該物質(zhì)，C錯誤；D、植物體各個部位都能合成乙烯，故棉花的幼芽和幼根可以合成乙烯，D正確。故選D。二、非選擇題9、mRNA不同化學(xué)方法人工合成（人工化學(xué)合成）PCR技術(shù)能自主復(fù)制有多個限制酶切位點、有標(biāo)記基因從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列記憶細胞短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細胞【解析】

目的基因可以直接分離，也可以用人工的方法合成，目前常用方法有：①從基因文庫中獲??；②人工合成（反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法）；③PCR技術(shù)擴增目的基因。人工合成法只能合成已知序列片段，而且片段越長，合成難度越大；基因組文庫中獲取的目的基因是這種生物的所有基因，包含啟動子，終止子以及內(nèi)含子等；cDNA文庫獲取的目的基因是mRNA反轉(zhuǎn)錄來的，是這種生物的部分基因，不含啟動子，終止子以及內(nèi)含子，因此對真核細胞來說，從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同。蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求，蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成DNA→表達出蛋白質(zhì)。注射疫苗目的是促使機體發(fā)生免疫反應(yīng)，產(chǎn)生抗體和記憶細胞，多次注射的目的是增多機體內(nèi)的記憶細胞的數(shù)量，導(dǎo)致應(yīng)答效果顯著增強?！驹斀狻?1)為獲取百日咳桿菌類毒素的基因，可從百日咳桿菌的細胞中提取對應(yīng)mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成雙鏈cDNA片段，獲得的cDNA片段與百日咳桿菌中該基因堿基序列不同。(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比較小，且序列已知，獲得目的基因可采用化學(xué)方法人工合成（人工化學(xué)合成），然后通過PCR技術(shù)大量擴增。(3)改造后的腺病毒有多個限制酶切位點、有標(biāo)記基因，且能自主復(fù)制，因此可作為載體將目的基因?qū)荏w細胞。(4)將白喉桿菌類毒素20位和24位的氨基酸改變?yōu)榘腚装彼崂玫氖堑鞍踪|(zhì)工程原理，基本流程是：從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列。(5)實驗證明，一定時間內(nèi)間隔注射該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細胞數(shù)量增多，當(dāng)同種抗原再次侵入人體時會引發(fā)二次免疫，二次免疫的特點是短時間內(nèi)迅速產(chǎn)生大量的抗體和記憶細胞，免疫預(yù)防作用更強。【點睛】本題結(jié)合免疫，以基因工程乙肝-百白破四聯(lián)疫苗的產(chǎn)生為背景，考查基因工程中目的基因獲取的方法、基因表達載體構(gòu)建和蛋白質(zhì)工程等內(nèi)容，難度不大。10、三碳糖氫類囊體（基粒）有光增加H218O黃色【解析】

（1）卡爾文循環(huán)中，3-磷酸甘油酸在①NADPH和ATP的作用下被還原為三碳糖，NADPH為3-磷酸甘油酸的還原提供了氫和能量，②在光反應(yīng)階段產(chǎn)生，場所在類囊體上進行，所以卡爾文循環(huán)離不開光。（2）暗處理后短時間內(nèi)3-磷酸甘油酸的含量會增加，18O標(biāo)記CO2，暗反應(yīng)會產(chǎn)生水，水中含有18O，再參與光反應(yīng)，則會產(chǎn)生18O2。（3）提取葉片的色素需要用無水乙醇，濾紙條上從上至下第二條色素帶的顏色是黃色的葉黃素。11、果實RNAXbalBamHl和Sacl反向卡那霉素不能番茄細胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交【解析】

分析題意和題圖：番茄細胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細胞合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。圖1所示為反義基因轉(zhuǎn)錄成的RNA可與靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成RNA雙鏈，使靶mRNA不能與核糖體結(jié)合或被RNA酶降解，從而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成，影響細胞中乙烯的合成，使番茄具有耐儲存、宜運輸?shù)膬?yōu)點。圖2所示的基因表達載體的組成包括復(fù)制原點、啟動子、終止子、標(biāo)記基因和目的基因，目的基因插入點在啟動子和終止子之間?！驹斀狻浚?）乙烯具有促進果實成熟的作用，因此圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的果實中表達。（2）從番茄成熟果實中提取RNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進行拼接構(gòu)成融合基因并擴增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，要將兩個基因融合，需用同一種限制酶即XbaⅠ酶對上述兩個基因進行酶切，再用DNA連接酶串聯(lián)成融合基因，這樣融合基因上有三個限制酶切點：BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ，其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分別位于融合基因的兩端，因此相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶BamHl和Sacl進行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）反義融合基因是由番茄果實細胞中的靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的，因此為了實現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因反向插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有卡那霉素的培養(yǎng)基中，可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。（5）在檢測番茄細胞中是否存在反義融合基因時，因為番茄細胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合