MSC“名實之辯”：精準鑒定只為精準治療

MSC“名實之辯”：精準鑒定只為精準治療前言MSC是一群來源廣泛、能夠體外增殖分化的異質性細胞。MSC具有免疫調節(jié)、促進組織修復等作用，應用于多種疾病的治療。由于科學進程、習慣等原因，MSC具有多種名稱。自先秦以來，就有“名實之辯”，今日我們就講一講MSC的名稱與其鑒定標準。01MSC：名，可名，非常名上世紀八九十年代，科學家發(fā)現(xiàn)從人骨髓分離組織，通過沖洗細胞、裂解紅細胞等簡單操作后就有一小部分細胞進行貼壁生長，更為重要的是這一小群異質性細胞還能夠在體外進行大量增殖，甚至可分化為成骨細胞、脂肪細胞、成軟骨細胞，因此被命名為間充質干細胞（MesenchymalStemCells，MSC）。隨著研究的深入，科學家發(fā)現(xiàn)MSC的來源并不局限于骨髓，還來源于脂肪、牙齦、臍帶血、臍帶等多種組織。并且有實驗表明MSC的外泌體也能產生與MSC相似的療效。這對MSC是否是干細胞、MSC的治療效果是否與干細胞的增殖分化能力相關提出了質疑。2018年DouglasSipp等三位科學家在Nature發(fā)表評述文章“Clearupthisstem-cellmess”，對MSC的概念提出進一步質疑。這一切以MSC干細胞（Stem）身份為核心的問題即是MSC名學之爭的由來。事實上，早在2006年，國際細胞治療協(xié)會（ISCT）就提出MSC應命名為“MultipotentMesenchymalStromalCells”，以避免干細胞之名的爭議，只有在充分證據的情況下才應命名為“MesenchymalStemCells”。此外，MSC的療效主要來源于其旁分泌產生的多種細胞因子、miRNA等。因此MSC研究的先驅ArnoldCaplan提出MSC應命名為“MedicinalSignalingCells”。盡管ISCT多次發(fā)文倡導科研界和媒體規(guī)范MSC的命名，但由于歷史、習慣等原因，在文章發(fā)表及日常討論中，MSC還是以“MesenchymalStemCells”為主。總之，目前MSC有多種名稱，包括：MarrowStromalCellsMultipotentStromalCellsMesodermalStemCellsMedicinalSignalingCellMultipotentMesenchymalStromalCellsMesenchymalStemCells02MSC治療研究進展MSC低表達MHC，免疫原性低，可進行同種異體接種。目前，MSC被用于免疫失調相關疾病、骨關節(jié)相關疾病、損傷修復、神經系統(tǒng)疾病等的治療探索，全球范圍臨床實驗數量超過上千次。MSC療法一般流程如圖，自體或異體來源的MSC在體外分離擴增，然后對患者進行注射。MSC療法流程（源自參考文獻，doi：10.1126/sciadv.aba6884）雖然MSC之名頗有爭議，其具體療效機制仍需探索，但MSC具有治療效果已被多個國家承認。目前全球已有10款MSC療法上市，用于急性移植物抗宿主?。℅vHD）、克羅恩病等疾病的治療。今年三月FDA受理了MesoblastLtd公司remestemcel-L（同種異體骨髓來源的MSC）應用于GvHd的BLA。03MSC鑒定標準MSC治療的困難之一是對于分離培養(yǎng)的MSC的判定。ISCT在2006年提出了MSC的鑒定標準[2]，主要包括三部分：MSC鑒定標準1.能貼壁培養(yǎng)2.表面標志物達標（共8個指標，包含3個陽性指標和5個陰性指標）陽性指標（≥95%）陰性指標（≤2%）CD105CD73CD90CD45CD34CD14orCD11bCD79αorCD19HLA-DR3.體外能夠分化為成骨細胞、脂肪細胞和軟成骨細胞該文獻自發(fā)表以來已經獲得超過12000次引用，堪稱行業(yè)標準。義翹神州推出MSC鑒定試劑盒（Cat:HMSC03），能夠用于MSC的所有8個表面標志物的鑒定。利用HMSC03鑒定試劑盒檢測臍帶來源的MSC。MSC的CD45、CD34、CD14、CD19、HLA-DR表達陰性（圖A）；CD73（圖B）、CD90（圖C）、CD105（圖D）表達陽性。藍色線為MSC與同型對照結果，紅色線為MSC與對應抗體結果。（源自義翹神州）隨著研究深入，更多的表面標志物也被建議納入MSC的鑒定中。例如《臨床研究用人間充質干細胞質量檢驗規(guī)范（征求意見稿）》中推薦應將CD44、CD166兩個陽性指標納入MSC的鑒定。義翹神州也緊跟步伐，推出了MSC鑒定試劑盒（Cat:HMSC07），能夠覆蓋所有10個指標的檢測。利用HMSC07鑒定試劑盒檢測臍帶來源的MSC。MSC的CD45、CD34、CD14、CD19、HLA-DR表達陰性（圖A）；CD73（圖B）、CD90（圖C）、CD105（圖D）、CD44（圖E）、CD166（圖F）表達陽性。藍色線為MSC與同型對照結果，紅色線為MSC與對應抗體結果。（源自義翹神州）?義翹神MSC鑒定服務及特色產品義翹神州可進行細胞鑒別、無菌檢測、支原體檢測、細胞內/外病毒因子檢測等在內的細胞庫檢測服務。義翹神州擁有經驗豐富的檢測團隊，依據藥典方法及ICH、FDA及其它監(jiān)管法規(guī)，根據客戶不同申報需求，提供合適的細胞庫檢定方案以及全程技術指導。還可在項目開展之前提供相關咨詢，更好地幫助客戶完成中外申報，滿足出海需求。出具的檢測報告已獲得監(jiān)管部門認可，助力多家公司完成IND和BLA申報?！緟⒖嘉墨I】1.Caplan,A.I.MesenchymalStemCells:TimetoChangetheName!StemCellsTranslMed,2017./10.1002/sctm.17-0051.2.Dominici,M.etal.Minimalcriteriafordefiningmultipotentmesenchymalstromalcells.TheInternationalSocietyforCellularTherapypositionstatement.Cytotherapy,2006./10.1080/14653240600855905.3.Galderisi,U.,Peluso,G.,&DiBernardo,G.ClinicalTrialsBasedonMesenchymalStromalCellsareExponentiallyIncreasing:WhereareWeinRecentYears?StemCellRevRep,2022./10.1007/s12015-021-10231-w.4.Gomzikova,,James&Rizvanov.TherapeuticApplicationofMesenchymalStemCellsDerivedExtracellularVesiclesforImmunomodulation.FrontImmunol,2019./10.3389/fimmu.2019.02663.5.Haynesworth,S.E.etal.Characterizationofcellswithosteogenicpotentialfromhumanmarrow.Bone,1992./10.1016/8756-3282(92)90364-3.6.Levy,O.etal.ShatteringbarrierstowardclinicallymeaningfulMSCtherapies.SciAdv,2020,eaba6884./10.1126/sciadv.aba6884.7.Wright,A.etal..TherapeuticUseofMesen