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PAGE4-特別“組合4”主觀題模擬真演練(四)1.[2024·遼寧省大連市高三一模]微衛(wèi)星DNA是廣泛分布于真核生物基因組中的簡(jiǎn)潔重復(fù)序列。由于重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富,因此,微衛(wèi)星DNA可以作為分子標(biāo)記,并有著廣泛應(yīng)用。(1)為了分別捕獲到某種生物的微衛(wèi)星DNA分子標(biāo)記,可以用同位素標(biāo)記的特定簡(jiǎn)潔重復(fù)序列作為探針,與該生物的________文庫(kù)進(jìn)行雜交,然后再經(jīng)多個(gè)步驟篩選獲得微衛(wèi)星DNA。(2)擴(kuò)增分別到的微衛(wèi)星DNA序列的PCR反應(yīng)體系中含緩沖液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物及熱穩(wěn)定DNA聚合酶等。其中dNTP的作用是________________;該技術(shù)的前提是______________________________________,以便依據(jù)這一序列合成引物,所以引物應(yīng)選用圖中________(填圖中標(biāo)號(hào))。(3)PCR的基本反應(yīng)步驟為_(kāi)___________________________________,其產(chǎn)物量以____________形式擴(kuò)增。(4)依據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點(diǎn)推斷,這種分子標(biāo)記可應(yīng)用于________(填字母)。A.人類(lèi)親子鑒定B.種群遺傳多樣性探討C.誘導(dǎo)基因突變D.冠狀病毒遺傳物質(zhì)測(cè)序2.[2024·山東省試驗(yàn)中學(xué)高三模擬]人乳鐵蛋白(hLF)對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。探討人員開(kāi)展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染探討,主要流程如下圖,圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點(diǎn),neor為新霉素抗性基因,BLG基因?yàn)锽乳球蛋白基因,GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題:(1)過(guò)程①中,不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR,是因?yàn)開(kāi)_____________________________________。在RT-PCR過(guò)程中,加入的引物需在5′端添加____________________兩種限制酶的識(shí)別序列,以便于hLF基因插入pEB中。(2)過(guò)程②中,hLF基因插入到BLG基因之后的目的是___________________________________________________________________________________________________。(3)將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培育液中培育,能夠存活的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)是導(dǎo)入________的細(xì)胞,再利用熒光顯微鏡視察山羊乳腺上皮細(xì)胞中________,以篩選出轉(zhuǎn)染勝利的細(xì)胞。(4)要獲得轉(zhuǎn)基因山羊,還須要將勝利表達(dá)hLF的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移植到山羊去核卵母細(xì)胞中,再借助____________________________________________________________技術(shù)孕育出羊羔。3.[2024·黑龍江省哈爾濱市三中高三其次次模擬]3月30日,《自然》期刊報(bào)道了清華高校生命學(xué)院王新泉和醫(yī)學(xué)院張林琦課題組關(guān)于新冠病毒(SARS-CoV-2)的重要探討成果。該探討解析了新冠病毒表面S蛋白(抗原)與人受體蛋白ACE2的高辨別率晶體結(jié)構(gòu)(新冠病毒主要通過(guò)S蛋白與受體ACE2結(jié)合侵染人體細(xì)胞),揭示了受體ACE2特異性介導(dǎo)新冠病毒侵染細(xì)胞的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),為治療性抗體藥物開(kāi)發(fā)以及疫苗的設(shè)計(jì)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。(1)探討發(fā)覺(jué),新冠病毒主要侵染人體肺部細(xì)胞,對(duì)機(jī)體其他部位細(xì)胞侵染實(shí)力相對(duì)較弱,可能緣由是________________________________________________________________。(2)人們可利用胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育全能性的特點(diǎn),在培育液中添加________________,誘導(dǎo)其分化成肺泡樣細(xì)胞,用來(lái)培育足量的新冠病毒以用于科學(xué)探討。(3)若用小鼠來(lái)生產(chǎn)新冠病毒疫苗,可將________________注入到小鼠體內(nèi),再?gòu)钠⑴K中分別出B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,并用________________篩選出雜交瘤細(xì)胞。對(duì)上述篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行克隆化培育和抗體檢測(cè),該步驟的目的是____________________________________。(4)培育雜交瘤細(xì)胞時(shí),須要定期____________,以便清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。與傳統(tǒng)血清抗體相比,單克隆抗體主要的優(yōu)點(diǎn)是______________________________。4.[2024·安徽省安慶市高三第三次模擬]我國(guó)科學(xué)家利用生物工程技術(shù)勝利地培育出了人溶菌酶轉(zhuǎn)基因豬。回答下列問(wèn)題:(1)為獲得大量的人溶菌酶基因,常用________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,該技術(shù)的原理是____________。(2)培育人溶菌酶轉(zhuǎn)基因豬過(guò)程中,其核心步驟是________________。目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞,并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程,稱為_(kāi)_______。(3)將受精卵培育至早期胚胎,胚胎的培育液成分一般比較困難,除一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽外,還須要維生素、激素、氨基酸、核苷酸等養(yǎng)分成分,以及________等物質(zhì)。體外培育受精卵時(shí),須要供應(yīng)肯定濃度的CO2,其目的是________________________。(4)受精卵經(jīng)早期胚胎培育后進(jìn)行胚胎移植,移植到受體子宮中,早期胚胎的________會(huì)形成胎盤(pán)和胎膜。也可在移植前對(duì)早期胚胎進(jìn)行胚胎分割而得到兩個(gè)或多個(gè)胚胎,要留意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等分割,否則__________________________________________________________________________________________________________________。特別“組合4”主觀題模擬真演練(四)1.(1)基因組(2)合成DNA的原料、供應(yīng)能量有一段已知目的基因的核苷酸序列Ⅰ和Ⅳ(3)DNA解鏈→引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈→互補(bǔ)鏈的合成(變性、復(fù)性/退火、延長(zhǎng))(加熱解鏈→冷卻引物結(jié)合→加熱互補(bǔ)鏈合成)指數(shù)(約為2n)(4)AB解析:(1)由于微衛(wèi)星DNA是簡(jiǎn)潔重復(fù)序列,可以用同位素標(biāo)記的特定簡(jiǎn)潔重復(fù)序列作為探針,與該生物的基因組文庫(kù)進(jìn)行雜交,然后再經(jīng)多個(gè)步驟篩選獲得微衛(wèi)星DNA。(2)dNTP在PCR過(guò)程中作為合成DNA分子的原料和供應(yīng)能量。PCR技術(shù)的前提是有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便依據(jù)這一序列合成引物,這兩個(gè)DNA引物分別與目的基因雙鏈各一端序列相互補(bǔ),所以引物應(yīng)選用圖中Ⅰ和Ⅳ。(3)PCR的基本反應(yīng)步驟為目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈,引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合,然后在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延長(zhǎng),如此重復(fù)循環(huán),因而每一次循環(huán)后目的基因的量可以增加一倍,即成指數(shù)形式擴(kuò)增(約為2n,其中n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù))。PCR技術(shù)的步驟可簡(jiǎn)潔概括為變性、復(fù)性/退火、延長(zhǎng)。(4)微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡(jiǎn)潔重復(fù)序列,且重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間呈高度特異性,因此可用于人類(lèi)親子鑒定、物種間親緣關(guān)系鑒定、物質(zhì)和遺傳多樣性的探討等,AB正確;誘導(dǎo)基因突變的因素有物理因素、化學(xué)因素和生物因素,與微衛(wèi)星DNA的特性無(wú)關(guān),C錯(cuò)誤;冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,其測(cè)序與微衛(wèi)星DNA的特性無(wú)關(guān),D錯(cuò)誤。2.(1)hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄(表達(dá))SalⅠ和BamHⅠ(2)使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)(或使目的基因表達(dá))(3)pEB質(zhì)?;騪EBL質(zhì)粒(或一般質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒)是否有綠色熒光(或是否有熒光)(4)早期胚胎培育和胚胎移植解析:(1)人肌肉細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞,hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄(表達(dá)),故過(guò)程①中,不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR。SalⅠ和BamHⅠ在質(zhì)粒上挨著,切割質(zhì)粒時(shí)不會(huì)破壞其他基因,故在RT-PCR過(guò)程中,加入的引物需在5′端添加SalⅠ和BamHⅠ兩種限制酶的識(shí)別序列,以便于hLF基因插入pEB中。(2)過(guò)程②重組載體的構(gòu)建,hLF基因插入到BLG基因之后的目的是使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)。過(guò)程③重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞,運(yùn)用人工膜制成的脂質(zhì)體將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞,依據(jù)的主要原理是生物膜具有肯定的流淌性。(3)neor為新霉素抗性基因,具有抗新霉素的作用,故將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培育液中培育,能夠存活的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)是導(dǎo)入pEB質(zhì)?;騪EBL質(zhì)粒的細(xì)胞,GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因,作為標(biāo)記基因,可再利用熒光顯微鏡視察山羊乳腺上皮細(xì)胞中是否有綠色熒光,以篩選出轉(zhuǎn)染勝利的細(xì)胞。(4)要獲得轉(zhuǎn)基因山羊,還須要將勝利表達(dá)hLF的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移植到山羊去核卵母細(xì)胞中,再借助早期胚胎培育和胚胎移植技術(shù)孕育出羊羔。3.(1)ACE2蛋白基因主要在人體肺部細(xì)胞表達(dá)(2)分化誘導(dǎo)因子(3)新冠病毒(S蛋白)(特定的)選擇性培育基篩選出足量的能分泌抗新冠病毒(S蛋白)抗體的雜交瘤細(xì)胞(4)更換培育液特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備解析:(1)病毒是專(zhuān)性寄生物,新冠病毒主要侵染人體肺部細(xì)胞,對(duì)機(jī)體其他部位細(xì)胞侵染實(shí)力相對(duì)較弱,依據(jù)題目信息可知,新冠病毒對(duì)其他部位細(xì)胞侵染實(shí)力較弱的緣由是能特異性識(shí)別新冠病毒的受體ACE2基因主要在人體肺部細(xì)胞中表達(dá)。(2)胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性,在培育液中添加分化誘導(dǎo)因子,誘導(dǎo)其分化成肺泡樣細(xì)胞,以滿意培育新冠病毒的要求,為科學(xué)探討創(chuàng)建條件。(3)若用小鼠來(lái)生產(chǎn)新冠病毒疫苗,則須要將新冠病毒表面S蛋白注入到小鼠體內(nèi),再?gòu)钠⑴K中分別出B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,并用特定的選擇培育基將雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái),對(duì)上述篩選出的符合要求的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行克隆化培育和抗體檢測(cè),進(jìn)一步找到能分泌新冠抗體(抗S蛋白)的雜交瘤細(xì)胞,然后再進(jìn)行擴(kuò)大培育獲得抗體。(4)培育雜交瘤細(xì)胞時(shí),須要定期更換培育基,以便給雜交瘤細(xì)胞創(chuàng)建有利的生長(zhǎng)條件,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。與傳統(tǒng)血清抗體相比,單克隆抗體主要的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備。4.(1)PCRDNA雙鏈復(fù)制(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建轉(zhuǎn)化(3)血清維持培育液的pH(4)滋養(yǎng)層會(huì)影響分割后胚胎的復(fù)原和進(jìn)一步發(fā)育解析:(1)為獲得大量的目的基因,常用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,該技術(shù)的原理是DNA
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