凝集反應(yīng)（免疫學(xué)檢驗課件）

直接凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)：

細菌、紅細胞等顆粒性抗原，或表面覆蓋抗原（或抗體）的顆粒狀物質(zhì)（紅細胞、聚苯乙烯膠乳）等，與相應(yīng)的抗體（或抗原）結(jié)合，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象?？梢杂糜诙ㄐ詸z測（陽性或陰性），也可以進行半定量檢測（滴度）概述

主要技術(shù)類型概念：

顆粒性抗原，在適當(dāng)電解質(zhì)參與下，直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。方法：

玻片法試管法

微孔板法柱凝集法凝集原–反應(yīng)中的抗原凝集素—反應(yīng)中的抗體

直接凝集反應(yīng)一、玻片法YYY+原理：在玻片上顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接結(jié)合，在一定的條件下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。臨床應(yīng)用:1.菌種鑒定2.血清學(xué)分型3.血型鑒定方法評價:1.操作簡單、快速2.敏感度低3.定性檢測

二、試管法原理：在試管內(nèi)顆粒性抗原直接與抗體結(jié)合，在電解質(zhì)的作用下，出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。為半定量試驗方法，在微生物學(xué)檢驗中常用已知菌液與一系列稀釋的受檢血清混合，保溫后觀察每管內(nèi)抗原凝集程度，通常以產(chǎn)生明顯凝集現(xiàn)象的最高稀釋倍數(shù)作為血清中抗體的效價，亦稱為滴度。++++++++++-很強，全部凝集，管內(nèi)液體澄清，管底大片凝集物強，大部分凝集，液體輕度混濁，管底有邊緣不整凝集物中等強度，部分凝集，液體較混濁，管底有少量顆粒狀凝集物弱，少量凝集，液體混濁，管底凝集細小顆粒不易觀察不凝集臨床應(yīng)用：1.肥達試驗Widaltest2.外斐氏試驗Weil-felixtest3.交叉配血試驗方法評價：1.半定量試驗2.操作簡便、快速3.敏感度不高4.可有假陽性

三、微孔板法微孔板法又叫微量法，是指在微孔板內(nèi)顆粒性抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生特異性結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。

四、柱凝集法柱凝集法又稱柱凝集試驗在，是指在柱凝集卡內(nèi)顆粒性抗原與凝膠柱中相應(yīng)的抗體直接與抗體發(fā)生特異性結(jié)合出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。凝集反應(yīng)概念：

用人工方法將可溶性抗原或抗體吸附或偶聯(lián)于與免疫無關(guān)的顆粒上，使之成為致敏顆粒，再與相應(yīng)抗體或抗原作用，在適宜電解質(zhì)存在的條件下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象。載體致敏致敏顆粒間接凝集反應(yīng)載體的條件：1.不溶于水，理化性質(zhì)穩(wěn)定且無化學(xué)和免疫學(xué)活性。2.大小均勻，密度與介質(zhì)相近。3.能直接吸附和通過偶聯(lián)劑牢固結(jié)合抗原抗體。一、載體

RBC

聚苯乙烯膠乳載體的種類離子交換樹脂活性炭明膠顆粒二、方法類型

根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝集反應(yīng)的方式不同，間接凝集反應(yīng)可分為4類:1.正向間接凝集試驗

2.反向間接凝集試驗

3.間接凝集抑制試驗

4.協(xié)同凝集試驗（一）正向間接凝集試驗（二）反向間接凝集試驗（三）間接凝集抑制試驗（四）協(xié)同凝集試驗以金黃色葡萄球菌作為載體，與IgG結(jié)合，再與相應(yīng)的抗原結(jié)合，出現(xiàn)特異性的凝集現(xiàn)象。原理：將可溶性抗原或抗體吸附于人的O型紅細胞或綿羊紅細胞制成抗原致敏的紅細胞，與相應(yīng)抗體或抗原作用，在有電解質(zhì)存在的條件下，經(jīng)過一定時間可出現(xiàn)肉眼可見的紅細胞凝集現(xiàn)象。技術(shù)要點：方法評價：敏感度高于膠乳凝集試驗和直接凝集試驗，且簡便易行，快速，成本低兼。間接血凝試驗原理：抗原或抗體與膠乳結(jié)合后，直接與待測標(biāo)本中抗體或抗原發(fā)生凝集反應(yīng)。技術(shù)要點：方法評價：敏感度低于血凝試驗?zāi)z乳凝集試驗間接凝集試驗的應(yīng)用抗體的檢測1、用于檢測細菌、病毒、寄生蟲等感染后產(chǎn)生的抗體。2、用于自身免疫性病患者的自身抗體檢測。3、用于變態(tài)反應(yīng)患者的抗體測定?？乖臋z測細菌、絨毛膜促性腺激素等小結(jié)方法類型原理臨床用途方法評價玻片凝集試驗抗原與抗體在玻片上直接反應(yīng)血型的鑒定、菌種診斷或分型簡便、快速，敏感度低，多用于定性試驗試管凝集試驗抗原與系列倍比稀釋的血清在試管內(nèi)反應(yīng)交叉配血、輔助診斷傷寒和斑疹傷寒操作簡單，敏感度不高，為半定量試驗間接凝集試驗抗原（抗體）致敏載體，檢測標(biāo)本中相應(yīng)抗體（抗原）檢測病原微生物和自身免疫病相關(guān)抗體操作簡單、快速，敏感度和特異性高間接凝集抑制試驗抗原致敏載體檢測是否存在與致敏抗原相同的抗原絨毛膜促性腺激素(HCG)的檢測靈敏度高于上面間接凝集試驗協(xié)同凝集試驗抗體致敏金黃葡萄球菌顆粒作為診斷試劑檢測抗原適用于細