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ICS65.020B16DB43DB43/T1370—2017葫蘆科蔬菜小西葫蘆黃花葉病毒檢測技術規(guī)程TechnicalRegulationforDetectionofZucchiniYellowMosaicVirusinCucurbitaceaeVegetables2017-12-31發(fā)布2018-03-31實施湖南省質(zhì)量技術監(jiān)督局發(fā)布I Ⅱ 2規(guī)范性引用文件 4儀器和耗材 6檢測結果判定 本標準按照GB/T1.1—2009給出本標準主要起草人：孫書娥、朱春暉、劉勇、張德詠、劉駿、張松柏、譚新球、張卓葫蘆科蔬菜小西葫蘆黃花葉病毒檢測技術規(guī)程Na2SO3Na2EDTA?2H2O不同生產(chǎn)廠家的反轉錄試劑盒操作步驟應參照相應產(chǎn)5b變性94℃30sc退火56℃30s步驟b-d35個循環(huán)后，72℃延伸10min,4℃終止反應，擴增產(chǎn)物4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?結果記錄見圖A1。圖A1西葫蘆上ZYMW的RT-PCR檢測(MARK:DL2000,CK1:空白對照，CK2:陰性對照，1:陽性對照，2～7陽性樣品)7結果判斷果有效。待測樣品在620bp左右出現(xiàn)核酸條帶，表明樣品為陽性，無目標條帶則為陰性。上述合成的cDNA模板0.8μL75結果記錄見圖B1和表B1。圖B1田間南瓜病葉的溶解曲線表B1田間南瓜病葉的定量檢測6結果判定陽性對照的溶

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