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備案號(hào)：59146-2018DB22DB22/T2782—2017犬瘟熱病毒檢測(cè)熒光定量RT-PCR方法DetectionofcaninedistempervirusFluorescencequantitativeRT-PCRmethod2017-12-11發(fā)布2018-04-01實(shí)施吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)RT-PCR：反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RevePCR：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymerasHSTaqDNA：熱啟動(dòng)脫氧核糖核酸聚合酶（HotStartThermosAquaticusDeoxyribonucleicAcid）DEPC：二乙基焦磷酰胺（DiethyAMV：鳥(niǎo)類(lèi)成髓細(xì)胞白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶（AvianMyeloblastosisRetrovirusReverse采取TaqMan方法，以犬瘟熱病毒F基因?yàn)榘谢蛟O(shè)計(jì)一對(duì)保守的特異性引物和一條特異性的熒這樣探針上的R基團(tuán)游離出來(lái)，所發(fā)出的熒光不再為Q所吸收而被檢測(cè)儀所接受。隨著PCR反應(yīng)的25.1.6AMV反轉(zhuǎn)錄酶，5U/表1犬瘟熱病毒熒光定量RT-PC5'-CACAAATCACTGCAGGGAT5'-CAAGGCTAGTTCTCAGAGATTGFAM-TCCAACCTCAATGCTC38.2.2病死犬可采集肺、肝、脾等μLRNA酶抑制劑（5.1.7輕柔混勻，溶解管壁上的RNA，冰上4試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)束后，根據(jù)收集的熒光曲線(xiàn)和Ct值直接讀取檢測(cè)結(jié)果，Ct值為每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光9.3.3疑似，30.0＜Ct值＜36.0，出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線(xiàn)，樣品判為5A.30.02mol/Lp

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