生物成長訓練：專題課題土壤中分解尿素的細菌的分離與計數

學必求其心得，業(yè)必貴于專精學必求其心得，業(yè)必貴于專精學必求其心得，業(yè)必貴于專精主動成長夯基達標1。某同學在101、102、103倍稀釋液的平均菌落數為2760、295和46，則菌落總數（個/mL)為（）A.2.76×104 B。2.95×104 C.4。6×104 D.3.775×104解析:菌落計數法，注意是計算不同稀釋度的平均菌落數。首先選擇平均菌落數在30~300之間的，當只有一個稀釋倍數的平均菌落數符合此范圍時,則以該平均菌落數乘以稀釋倍數即為該樣品的細菌總數;若有兩個稀釋倍數的平均菌落數均在30～300之間,則按兩者菌落總數之比值來決定,若比值小于2應采取兩者的平均數,若大于2,則取其中較小的菌落總數。本題295、46在30～300之間，46×103與295×102比值為1.6,應取二者平均數（46×103+295×102)÷2=3.775×104。所有稀釋倍數的菌落數均不在30～300之間，則應以最接近300或30的平均菌落數乘以稀釋倍數。答案：D2.微生物發(fā)酵工程的第一個重要工作是選擇優(yōu)良的單一純種,消滅雜菌，獲得純種的方法不包括(）A.根據微生物對碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基B.根據微生物缺乏維生素的種類，在培養(yǎng)基中增減不同的維生素C。根據微生物遺傳組成的差異,在培養(yǎng)基中加入不同比例的核酸D。根據微生物對抗生素敏感性的差異，在培養(yǎng)基中加入不同的抗生素解析:在微生物學中，要篩選優(yōu)良單一的純種必須用選擇培養(yǎng)基，即通過加入某種特定的化學物質,允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基.而培養(yǎng)基中加入核酸并不能直接轉化為微生物的遺傳物質，因此對提純分離菌種是無用的。答案:C3.PCR技術要求使用耐高溫的DNA聚合酶,這種酶要能忍受93℃左右的高溫。如果請你來尋找這種耐高溫的酶，你會去哪里尋找（）A.土壤中 B。海水中 C。熱泉中 D.冷庫中解析：在尋找目的菌株時，要根據它對生存環(huán)境的要求，到相應的高溫環(huán)境中去尋找。答案：C4。下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是（）A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂、水B。KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、瓊脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、瓊脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水解析：所用選擇培養(yǎng)基的基本要求是滿足分解尿素的細菌的生長條件，抑制或阻止其他微生物的生長。尿素是唯一的氮源。答案：A5.某同學在稀釋倍數為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數的平均值為234，那么每克樣品中的菌落數是（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL)（）A。2.34×108 B。2.34×109 C。234 D.23。4解析：每克樣品中的菌落數=（C÷V）×M，其中C=234，V=0.1mL，M=106。答案:B6.在做分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從對應106培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的結果產生原因可能有（)①由于土樣不同②由于培養(yǎng)基污染③由于操作失誤④沒有設置對照A.①②③ B.②③④ C.①③④ D。①②④解析：不同的土壤樣品，培養(yǎng)基的質量等因素都可影響菌落數。設置對照實驗可以排除上述因素的影響。答案：A7.關于土壤取樣的敘述錯誤的是（）A。土壤取樣,應選取肥沃、濕潤的土壤 B。先鏟去表層土3cm左右，再取樣C。取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌 D.應在火焰旁稱取土壤解析：考查土壤取樣的基本要求和方法。取樣過程中要確保無雜菌的混入。答案：C8.請選出下列正確的操作步驟（）①土壤取樣②稱取10g土壤取出加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中③吸取0。1mL進行平板涂布④依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A。①→②→③→④ B。①→③→②→④C.①→②→④→③ D.①→④→②→③解析:考查細菌分離和計數的實驗操作步驟。答案：C9。關于測定土壤中細菌的數量,正確的敘述是（）A。測定土壤中細菌的數量，一般選用105、106和107倍的稀釋液B.測定放線菌的數量，一般選用103、104和105倍的稀釋液C.測定真菌的數量，一般選用103、104和105倍的稀釋液D.當第一次測定某種細菌的數量，可以將101~107倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)解析：測定真菌的數量,一般用102、103和104倍稀釋；第一次測定某種細菌的數量，可用103～107倍稀釋；測定細菌數量,一般用104、105和106倍稀釋。答案:B10。關于微生物的培養(yǎng),敘述錯誤的是（)A.細菌一般在30～37℃的溫度下培養(yǎng)1～2dB.放線菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)5～7dC。霉菌一般在25～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4dD。不同種類的微生物，一般需要相同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間解析：不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。答案:D11。需要在火焰旁操作的有（）①土壤取樣②稱取土壤③稀釋土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培養(yǎng)A。①②③④⑤ B。②③④⑤ C。③④⑤ D.②③④解析：微生物分離和計數的實驗操作需要防止雜菌污染.土壤取樣時要鏟去表層土；微生物的培養(yǎng)需在適宜溫度條件下。答案：D12?？梢澡b定出分解尿素的細菌的方法是（)A。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C。以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹Ⅲ試劑D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮脲試劑解析:以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變紅.答案：A13.土壤取樣時最好選擇哪種環(huán)境中的土壤做實驗…(）A。街道旁 B?；ㄅ柚? C.農田中 D。菜園里解析:在富含有機質的土壤表層，有更多的微生物生長。因此菜園里的土壤是最佳選擇土壤取樣的環(huán)境。答案：D14。下面是某同學做自生固氮菌分離實驗的方案和觀察結果:一、實驗目的(略）二、實驗材料和用具（略）三、實驗方法和步驟1.接種（1)接種前，準備好盛有配方如下的培養(yǎng)基，放在培養(yǎng)皿中并滅菌,供做實驗用。NaNO32g,K2HPO41g，KCl0.5g，MgSO40.5g，FeSO40.01g,蔗糖30g，瓊脂15～20g，蒸餾水1000mL。（2）取10g表層土壤,放在無菌研缽中，注入5mL蒸餾水，用無菌玻璃棒攪拌均勻，備用.（3）將接種環(huán)放在酒精燈的火焰上滅菌,將培養(yǎng)皿蓋輕輕放在桌面上,手拿培養(yǎng)皿.將接種環(huán)放在培養(yǎng)皿邊緣冷卻。然后，用接種環(huán)蘸取少量泥漿，輕輕點在培養(yǎng)基的表面,共點15～20處。（4)接種后，輕輕蓋上培養(yǎng)皿蓋,將培養(yǎng)皿放在實驗桌上.2。培養(yǎng):將接種過的培養(yǎng)皿放入恒溫箱，在28～30℃的溫度下培養(yǎng)3~4天。3.觀察：3～4天后,取出培養(yǎng)皿，仔細觀察培養(yǎng)基上的菌落，其中大而扁平、邊緣呈波狀或鋸齒狀并為褐色菌落的為自生固氮菌。4.鏡檢（略）該實驗方案和觀察結果有幾處明顯的錯誤，請指出并改正。解析:該題綜合考查從土壤中分離某種微生物的具體操作步驟.涉及以下幾方面的知識：①根據自生固氮菌的特點如何制備選擇培養(yǎng)基;②取樣、接種時的無菌操作；③微生物的培養(yǎng)，不同微生物的培養(yǎng)條件不同；④自生固氮菌的菌落特點。答案：（1)培養(yǎng)基中含氮源是錯誤的，應將NaNO3改為不含氮的鈉鹽。（2)用蒸餾水是錯誤的，應用無菌水。(3）把培養(yǎng)皿蓋放在桌面上是錯誤的，改為略微打開培養(yǎng)皿蓋。（4)沒有寫實驗內容、接種人姓名、接種日期。（5）其中大而扁平、邊緣呈波狀或鋸齒狀并為褐色菌落的為自生固氮菌是錯誤的，改為仔細觀察稀泥漿周圍出現的黏液（最初為無色透明→乳白色→褐色)。15.將50mL牛奶煮沸,冷卻到室溫后倒入一消毒后的錐形瓶內,錐形瓶瓶口用棉團堵住，加入新鮮的花園土，每日觀察牛奶的情況，共進行4天.(1）這個實驗可證明的假設是。(2）為這個實驗所設計的對照實驗是。（3）實驗結束時，牛奶會,檢測方法是。產生這一現象的原因是.（4）牛奶在這個實驗中的作用是。（5）實驗前先將牛奶煮沸的原因是。（6）加入土樣前,先讓牛奶冷卻到室溫的原因是.（7）用棉團堵住錐形瓶的原因是。(8)實驗前是否需要對錐形瓶進行消毒?。理由是。解析：這是一道實驗設計題，考查實驗設計的原則、微生物的培養(yǎng)與鑒定、滅菌等