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PAGEPAGE8微生物的試驗(yàn)室培育1.下列有關(guān)自養(yǎng)型微生物的養(yǎng)分的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.NaHCO3可供應(yīng)兩類養(yǎng)分物質(zhì)B.N2在一般條件下可成為氮源C.含C、H、O、N的物質(zhì)可供應(yīng)碳源、氮源D.自養(yǎng)型微生物需五類養(yǎng)分物質(zhì)答案B解析只有固氮微生物才能利用N2作氮源。2.有關(guān)培育基配制原則表述正確的是()A.任何培育基都必需含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水及生長(zhǎng)因子B.碳源和氮源必需具有肯定比例,碳元素的含量最多,其次為氮元素C.微生物的生長(zhǎng)除受養(yǎng)分因素影響外,還受到pH、氧、滲透壓等的影響D.養(yǎng)分物質(zhì)的濃度越高越好答案C解析培育自養(yǎng)型微生物時(shí)不須要添加碳源,培育固氮菌時(shí)可以不加氮源;一般來說,培育基中含量最多的是水;配制培育基時(shí)要合理限制養(yǎng)分物質(zhì)的濃度,必需考慮微生物對(duì)滲透壓的耐受實(shí)力。3.下表所示為某微生物培育基的配方,有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()成分含量成分含量NaNO33gFeSO40.01gK2HPO41g(CH2O)30g瓊脂15gH2O1000mLMgSO4·7H2O0.5g青霉素0.1萬單位A.依物理性質(zhì)劃分,該培育基屬于固體培育基;依用途劃分,該培育基屬于選擇培育基B.由培育基的原料可知,所培育微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型,培育的微生物可以是酵母菌或毛霉C.本培育基中青霉素的添加滿意了微生物生長(zhǎng)對(duì)特別養(yǎng)分物質(zhì)的要求D.若用該培育基分別能分解尿素的細(xì)菌,應(yīng)除去青霉素和NaNO3,并應(yīng)加入尿素答案C解析由培育基中含有瓊脂可推想其為固體培育基,由培育基中含有青霉素可推想其為選擇培育基。培育基中含有有機(jī)碳源,故所培育微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型;由于青霉素能抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)而不抑制真菌的生長(zhǎng),故能培育酵母菌或毛霉。若用該培育基分別能分解尿素的細(xì)菌,則應(yīng)以尿素為唯一氮源,即應(yīng)除去NaNO3,同時(shí)還應(yīng)除去青霉素以防止其抑制目的菌的生長(zhǎng)。4.做“微生物的分別與培育”試驗(yàn)時(shí),下列敘述正確的是()A.高壓蒸汽滅菌加熱結(jié)束時(shí),打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B.倒平板時(shí),應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培育基濺到皿蓋上C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D.用記號(hào)筆標(biāo)記培育皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上答案D解析在高壓蒸汽滅菌的操作過程中,加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,待壓力表的指針回到零時(shí),打開放氣閥,旋松螺栓,打開蓋子。倒平板時(shí),用左手將培育皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不是完全取下放到一邊。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后,再用其挑取菌落。在微生物的培育中,一般在皿底上用記號(hào)筆做標(biāo)記。5.下列有關(guān)平板劃線法操作的敘述,錯(cuò)誤的是()A.第一步灼燒接種環(huán)是為了避開接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物B.每次劃線前,灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種C.在每一區(qū)域內(nèi)劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種干脆來源于菌液D.劃線結(jié)束后,灼燒接種環(huán)能剛好殺死接種環(huán)上的菌種,避開細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者答案C解析在用平板劃線法分別菌種的試驗(yàn)中,接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是避開接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物;以后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后殘留的菌種;從其次次劃線起先,每次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種干脆來源于上次劃線的末端;劃線結(jié)束后仍需灼燒接種環(huán),是為了避開細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。6.右圖是微生物平板劃線示意圖,劃線的依次為1、2、3、4、5,下列說法正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在火焰旁灼燒滅菌B.劃線操作必需在火焰上進(jìn)行C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域劃線的前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌答案D解析在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌,接種環(huán)的滅菌方法是在火焰的外焰灼燒,接種時(shí)劃線操作是在火焰旁的無菌區(qū)進(jìn)行的。在5個(gè)區(qū)域中,只要有單個(gè)活細(xì)菌,通過培育即可獲得所需菌落。7.現(xiàn)有菌液10mL,按下圖進(jìn)行系列稀釋,在最終一個(gè)試管中測(cè)得細(xì)菌數(shù)為20個(gè),則未稀釋前的試管中有細(xì)菌()A.600個(gè) B.1200個(gè)C.2×107個(gè) D.2×106個(gè)答案C解析由題圖可知,每次稀釋10倍,總共稀釋6次,即稀釋106倍,最終一個(gè)試管中有20個(gè)細(xì)菌,即原來菌液中應(yīng)當(dāng)有細(xì)菌2×107個(gè)。8.(1)在大腸桿菌培育過程中,除考慮養(yǎng)分條件外,還要考慮________、________和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、變異類型簡(jiǎn)潔選擇、________、________等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)探討的試驗(yàn)材料。(2)在微生物培育操作過程中,為防止雜菌污染,需對(duì)培育基和培育皿進(jìn)行________(填“消毒”或“滅菌”);操作者的雙手須要進(jìn)行清洗和________(填“消毒”或“滅菌”);空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其緣由是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能______________。(3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù),要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值,除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外,還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的________。(4)通常,對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形態(tài)、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的________。(5)培育大腸桿菌時(shí),在接種前須要檢測(cè)培育基是否被污染。對(duì)于固體培育基應(yīng)采納的檢測(cè)方法是_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)溫度酸堿度易培育生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)鑒定(或分類)(5)將未接種的培育基在相宜的溫度下放置相宜的時(shí)間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生解析(1)大腸桿菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、變異類型簡(jiǎn)潔選擇、易培育、生活周期短等優(yōu)點(diǎn),培育過程中,除考慮養(yǎng)分條件外,還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(2)為防止操作過程中雜菌污染,培育基和培育皿應(yīng)進(jìn)行滅菌處理,操作者的雙手須要進(jìn)行清洗和消毒。紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(3)涂布平板時(shí)要先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基的表面進(jìn)行培育,操作中應(yīng)保證樣品稀釋的比例合適。(4)對(duì)獲得的純菌種可以依據(jù)菌落的形態(tài)、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。(5)檢測(cè)固體培育基是否被污染的方法是將未接種的培育基在相宜條件下進(jìn)行培育,視察是否有菌落形成。9.微生物培育過程中,要非常重視無菌操作,現(xiàn)代生物學(xué)試驗(yàn)中的很多方面也要進(jìn)行無菌操作,防止雜菌污染。請(qǐng)分析下列操作,其中錯(cuò)誤的是()①煮沸消毒可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢②接種操作要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行③家庭制作葡萄酒時(shí)要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌④培育基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌⑤加入培育基中的指示劑或染色劑不須要滅菌A.①② B.②④C.②⑤ D.③⑤答案D解析無菌操作包括消毒和滅菌。需進(jìn)行消毒處理的有植物的外植體及操作人員的雙手等,需進(jìn)行滅菌的有器皿、培育基、添加劑(指示劑或染色劑)等。煮沸可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢,屬于消毒;為防止空氣中雜菌污染,接種時(shí)要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行;家庭制作葡萄酒時(shí)所利用的微生物是葡萄皮表面的野生型酵母菌,故不能對(duì)葡萄進(jìn)行滅菌;培育基滅菌常用高壓蒸汽滅菌法;故③⑤操作錯(cuò)誤。10.接種微生物的方法很多,平板劃線法是最常用的一種。如圖是平板劃線示意圖,劃線的依次為①②③④。操作方法中錯(cuò)誤的是()A.劃線操作時(shí),將沾有菌種的接種環(huán)插入培育基B.平板劃線后培育微生物時(shí)要倒置培育C.不能將第④區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連D.在②~④區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌答案A解析將沾有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,不能插入培育基;用平板培育基培育微生物時(shí),為防止水蒸氣凝集滴入培育基造成干擾或污染,應(yīng)將平板倒過來放置培育;劃線時(shí)要避開最終一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連,假如相連則有可能影響單個(gè)菌落的分別效果;在②~④區(qū)域中劃線前都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌,保證每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端,劃線結(jié)束時(shí)灼燒接種環(huán)是為了防止菌種污染環(huán)境和感染操作者。11.某探討小組從有機(jī)廢水中分別微生物用于廢水處理,下列敘述正確的是()A.培育基分裝到培育皿后進(jìn)行滅菌B.轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線C.接種后的培育皿須放在光照培育箱中培育D.培育過程中每隔一周視察一次答案B解析在配制培育基的過程中要先滅菌后倒平板;轉(zhuǎn)換劃線角度后要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌,殺滅接種環(huán)上殘留的菌種,再進(jìn)行劃線;接種后的培育皿應(yīng)放置在恒溫培育箱中培育;微生物生長(zhǎng)、繁殖較快,在培育過程中一般要隔天視察一次。12.科學(xué)家通過試驗(yàn)發(fā)覺了細(xì)菌的快速進(jìn)化過程。人們發(fā)覺,用肉湯培育假單胞桿菌,假如肉湯保持不動(dòng),不久后,在肉湯的不同部位,如表面、底部或其他部位,細(xì)菌的形態(tài)發(fā)生了如圖所示的改變,出現(xiàn)肯定數(shù)量的變異株。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是()A.這個(gè)試驗(yàn)說明白細(xì)菌在不同的小環(huán)境中發(fā)生了進(jìn)化B.細(xì)菌的生命周期短,繁殖速度快,簡(jiǎn)潔受到外界環(huán)境影響而發(fā)生改變C.用靜置的肉湯培育FS細(xì)菌,其菌落形態(tài)將趨于一樣D.用不斷搖動(dòng)的肉湯培育SM細(xì)菌,不會(huì)出現(xiàn)FS細(xì)菌和WS細(xì)菌答案C解析由題意可知,最初的SM細(xì)菌在靜置的肉湯表面繁殖,一段時(shí)間后,有一部分在肉湯底部繁殖,這部分可能向厭氧方向進(jìn)化,故細(xì)菌在不同的小環(huán)境下可發(fā)生進(jìn)化。細(xì)菌生命周期短,繁殖速度快,簡(jiǎn)潔受外界環(huán)境因素(如溫度、氧氣)的影響。用靜置的肉湯培育FS細(xì)菌,該細(xì)菌也有可能向不同方向進(jìn)化,如進(jìn)化成WS細(xì)菌。不斷搖動(dòng)肉湯,肉湯中的溶氧會(huì)抑制厭氧型的FS細(xì)菌;不斷搖動(dòng)肉湯,容器與肉湯無固定接觸面,WS細(xì)菌無法附著生長(zhǎng)繁殖。13.下面為牛肉膏蛋白胨培育基的成分列表,據(jù)此回答:成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5g1g0.5g100mL(1)蛋白胨在培育基中的作用是_____________________________________________________________________________。(2)要用此材料配制視察細(xì)菌菌落狀況的培育基,還需添加的成分是________。(3)確定表中各成分含量依據(jù)的原則是_________________________________________________________________________。(4)培育基配制好后,分裝前應(yīng)進(jìn)行的工作是________________________________________________________________________。(5)從配制培育基直到培育完成,所采納的預(yù)防雜菌污染的方法有________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(6)在培育基凝固前要擱置斜面,其目的是______________________________________________________________________________。答案(1)供應(yīng)碳源、氮源、生長(zhǎng)因子(特別養(yǎng)分物質(zhì))(2)瓊脂(或凝固劑)(3)所培育微生物對(duì)各養(yǎng)分成分的須要量(4)調(diào)整pH(5)對(duì)培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌、灼燒接種環(huán)、酒精棉擦手、在酒精燈火焰旁接種、在酒精燈火焰旁快速用棉塞塞住試管口(6)擴(kuò)大接種面積解析蛋白胨中含有大量的蛋白質(zhì)降解而成的多肽類物質(zhì)等,因而蛋白胨在培育基中的作用是供應(yīng)碳源、氮源和生長(zhǎng)因子(特別養(yǎng)分物質(zhì))。細(xì)菌菌落是在固體培育基上形成的。確定各養(yǎng)分成分含量要依據(jù)所培育的微生物對(duì)各養(yǎng)分成分的須要。培育基配制好后,首先要調(diào)整pH,然后再分裝,整個(gè)操作過程都要保證無雜菌污染。14.在培育基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞,使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落,這個(gè)菌落就是一個(gè)純化的細(xì)菌菌落。試驗(yàn)基本步驟如下:eq\x(配制培育基)→eq\x(滅菌、倒平板)→eq\x(培育)→eq\x(視察)請(qǐng)回答下列有關(guān)問題:(1)配制培育基時(shí),各成分含量確定的原則是________________________。不論何種培育基,在各種成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是________。(2)倒平板的相宜溫度是50℃左右,緣由是_________________________________________________________________________________________________。待平板冷凝后,要將平板倒置,這樣既可使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可防止________________________________________________________________________。(3)純化菌株時(shí),若運(yùn)用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種,應(yīng)選擇的涂布工具是圖中的________;若運(yùn)用平板劃線法進(jìn)行接種,應(yīng)選擇的接種工具是圖中的________。(4)劃線的某個(gè)平板培育后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落,其次劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_____________________________________________________________________________________。(5)若用大腸桿菌進(jìn)行試驗(yàn),運(yùn)用過的培育基及培育物必需經(jīng)過________處理后才能丟棄,以防止培育物的擴(kuò)散。答案(1)所培育微生物對(duì)各養(yǎng)分成分的須要量調(diào)整pH(2)溫度過高會(huì)燙手,過低培育基又會(huì)凝固皿蓋上的水珠落入培育基,造成污染(3)BA(4)①接種環(huán)灼燒后未冷卻;②劃線未從第一區(qū)域末端起先(5)滅菌解析培育基中各成分含量要依據(jù)微生物的生長(zhǎng)須要來確定。微生物生長(zhǎng)須要肯定的pH,所以培育基裝瓶前須要調(diào)整pH。由圖可知,A為接種環(huán),B為涂布器,C為膠頭滴管,D為接種針,稀釋涂布平板法應(yīng)選擇的涂布工具是B,平板劃線法應(yīng)選擇的接種工具是A。第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落,其次劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落,造成此現(xiàn)象的緣由可能有兩個(gè):一是接種環(huán)灼燒后未冷卻,菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡;二是劃其次劃線區(qū)域第一條線時(shí)未從第一區(qū)域末端起先。依據(jù)微生物試驗(yàn)室的平安規(guī)定,運(yùn)用過的培育基及其培育物必需經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄,以防止培育物的擴(kuò)散。15.(2024·長(zhǎng)沙模擬)蘋果干腐病是一種由茶蔍子葡萄座腔菌引起的疾病。病菌通常由枝條傷口入侵引起感染,在傷口處形成潰瘍。某中學(xué)的科研小組安排分別出該真菌,并進(jìn)行藥物防治試驗(yàn),為蘋果干腐病的防治供應(yīng)合理的建議。經(jīng)過查閱資料,確定了分別時(shí)所用的PDA培育基配方,如表所示:物質(zhì)馬鈴薯葡萄糖自來水氯霉素含量200g20g1000mL0.3g該真菌在上述PDA培育基上生長(zhǎng)時(shí)有特定的形態(tài)特征:輻射狀白色匍匐菌絲,絨毛狀。(1)要獲得菌落,則上表中還應(yīng)添加的成分是________。氯霉素的作

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