黃根藥效學(xué)研究

1/1黃根藥效學(xué)研究第一部分黃根的化學(xué)成分分析 2第二部分黃根對血液系統(tǒng)的影響 5第三部分黃根的抗炎作用研究 10第四部分黃根對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié) 16第五部分黃根的抗腫瘤作用探討 19第六部分黃根的抗氧化應(yīng)激能力 26第七部分黃根的藥物代謝動力學(xué) 33第八部分黃根的臨床應(yīng)用前景展望 38

第一部分黃根的化學(xué)成分分析關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點黃根的化學(xué)成分分析

1.黃根中含有多種化學(xué)成分，包括生物堿、黃酮類、甾體類、多糖類等。

2.生物堿是黃根的主要活性成分之一，包括黃根堿、去氫黃根堿等。

3.黃酮類化合物具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤等多種生物活性，黃根中含有多種黃酮類成分，如芹菜素、木犀草素等。

4.甾體類化合物在黃根中含量較低，但具有重要的生物活性，如促進(jìn)骨髓造血、調(diào)節(jié)免疫功能等。

5.多糖類成分是黃根的重要組成部分，具有增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤、降血糖等多種生物活性。

6.黃根的化學(xué)成分分析為其藥效學(xué)研究和臨床應(yīng)用提供了重要的依據(jù)。

黃根的藥理作用研究

1.黃根具有抗貧血作用，能夠促進(jìn)骨髓造血功能，提高血紅蛋白含量。

2.黃根具有免疫調(diào)節(jié)作用，能夠增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，提高抗病能力。

3.黃根具有抗腫瘤作用，能夠抑制腫瘤細(xì)胞的生長和增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。

4.黃根具有抗氧化作用，能夠清除自由基，減輕氧化應(yīng)激損傷。

5.黃根具有抗炎作用，能夠抑制炎癥反應(yīng)，減輕炎癥損傷。

6.黃根的藥理作用研究為其臨床應(yīng)用提供了重要的實驗依據(jù)。

黃根的臨床應(yīng)用研究

1.黃根在臨床上主要用于治療貧血、免疫功能低下、腫瘤等疾病。

2.黃根治療貧血的療效顯著，能夠提高血紅蛋白含量，改善貧血癥狀。

3.黃根治療免疫功能低下的療效確切，能夠增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，提高抗病能力。

4.黃根治療腫瘤的效果有待進(jìn)一步研究，但其具有一定的抗腫瘤作用，能夠抑制腫瘤細(xì)胞的生長和增殖。

5.黃根在臨床上的應(yīng)用還需要進(jìn)一步擴(kuò)大和深入研究，以提高其療效和安全性。

6.黃根的臨床應(yīng)用研究為其推廣應(yīng)用提供了重要的臨床依據(jù)。黃根的化學(xué)成分分析

黃根為茜草科植物南山花的根，在我國廣西民間作為壯藥已有悠久的應(yīng)用歷史，主要用于治療急慢性肝炎、膽囊炎、尿路結(jié)石、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等疾病[1]。黃根的化學(xué)成分復(fù)雜，主要包括多糖、蒽醌類、黃酮類、甾體類、揮發(fā)油等成分[2]。

1.多糖：黃根多糖是黃根的主要活性成分之一，具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、降血糖等多種生物活性[3]。采用苯酚-硫酸法測定黃根多糖的含量，結(jié)果表明，黃根多糖的含量為12.3%[4]。

2.蒽醌類：蒽醌類化合物是黃根的主要化學(xué)成分之一，具有瀉下、抗菌、抗病毒、抗腫瘤等多種生物活性[5]。采用高效液相色譜法測定黃根中蒽醌類化合物的含量，結(jié)果表明，黃根中含有大黃素、大黃酚、大黃酸等多種蒽醌類化合物[6]。

3.黃酮類：黃酮類化合物是黃根的主要化學(xué)成分之一，具有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、抗炎等多種生物活性[7]。采用高效液相色譜法測定黃根中黃酮類化合物的含量，結(jié)果表明，黃根中含有蘆丁、槲皮素、山奈酚等多種黃酮類化合物[8]。

4.甾體類：甾體類化合物是黃根的主要化學(xué)成分之一，具有抗炎、抗腫瘤、抗氧化等多種生物活性[9]。采用高效液相色譜法測定黃根中甾體類化合物的含量，結(jié)果表明，黃根中含有β-谷甾醇、豆甾醇等多種甾體類化合物[10]。

5.揮發(fā)油：揮發(fā)油是黃根的主要化學(xué)成分之一，具有抗菌、抗病毒、抗炎等多種生物活性[11]。采用水蒸氣蒸餾法提取黃根揮發(fā)油，并用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對其化學(xué)成分進(jìn)行分析，結(jié)果表明，黃根揮發(fā)油中含有多種萜類化合物，如α-蒎烯、β-蒎烯、檸檬烯等[12]。

綜上所述，黃根的化學(xué)成分復(fù)雜，主要包括多糖、蒽醌類、黃酮類、甾體類、揮發(fā)油等成分。這些成分具有多種生物活性，為黃根的臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。

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[12]李典鵬,張健,林軍,等.黃根揮發(fā)油的抑菌作用研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2008,19(5):1038-1039.第二部分黃根對血液系統(tǒng)的影響關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點黃根對血液系統(tǒng)的影響

1.黃根能增加外周血細(xì)胞數(shù)量，對造血功能有促進(jìn)作用。

2.黃根可降低血小板聚集率，對血液流變學(xué)有改善作用。

3.黃根能提高血清鐵含量，對缺鐵性貧血有治療作用。

4.黃根可降低血清膽紅素含量，對黃疸有消退作用。

5.黃根能抑制白血病細(xì)胞增殖，對白血病有一定的治療作用。

6.黃根對造血干細(xì)胞有動員作用，可用于造血干細(xì)胞移植。

黃根的藥理作用

1.黃根有止血作用，可用于治療各種出血性疾病。

2.黃根有抗炎作用，可用于治療炎癥性疾病。

3.黃根有抗氧化作用，可用于抗衰老和抗腫瘤。

4.黃根有免疫調(diào)節(jié)作用，可用于治療免疫性疾病。

5.黃根有保肝作用，可用于治療肝臟疾病。

6.黃根有降血糖作用，可用于治療糖尿病。

黃根的臨床應(yīng)用

1.黃根可用于治療貧血、血小板減少性紫癜、白血病等血液病。

2.黃根可用于治療炎癥、感染、燒傷等疾病。

3.黃根可用于治療衰老、腫瘤、糖尿病等疾病。

4.黃根可用于治療肝臟疾病、心血管疾病等疾病。

5.黃根可用于治療免疫性疾病、過敏性疾病等疾病。

6.黃根可用于治療其他疾病，如失眠、焦慮、抑郁等。

黃根的不良反應(yīng)

1.黃根有一定的毒性，長期或大量使用可能會導(dǎo)致中毒。

2.黃根可能會引起過敏反應(yīng)，如皮疹、瘙癢、呼吸困難等。

3.黃根可能會影響消化系統(tǒng)，如惡心、嘔吐、腹瀉等。

4.黃根可能會影響神經(jīng)系統(tǒng)，如頭痛、頭暈、失眠等。

5.黃根可能會影響心血管系統(tǒng)，如心悸、胸悶、血壓升高等。

6.黃根可能會影響生殖系統(tǒng)，如月經(jīng)不調(diào)、性功能下降等。

黃根的藥物相互作用

1.黃根與其他藥物可能會發(fā)生相互作用，影響藥效或增加不良反應(yīng)。

2.黃根與抗凝藥物、抗血小板藥物、溶栓藥物等可能會增加出血風(fēng)險。

3.黃根與免疫抑制劑、抗腫瘤藥物等可能會影響免疫功能或加重不良反應(yīng)。

4.黃根與降糖藥物、降壓藥物等可能會影響血糖、血壓等指標(biāo)。

5.黃根與其他中藥或西藥可能會發(fā)生相互作用，應(yīng)避免同時使用。

6.黃根在使用過程中應(yīng)注意觀察藥物不良反應(yīng)，如出現(xiàn)不適癥狀應(yīng)及時就醫(yī)。

黃根的研究進(jìn)展

1.黃根的化學(xué)成分研究不斷深入，已發(fā)現(xiàn)多種有效成分。

2.黃根的藥理作用研究不斷拓展，已發(fā)現(xiàn)多種新的藥理作用。

3.黃根的臨床應(yīng)用研究不斷增加，已用于治療多種疾病。

4.黃根的不良反應(yīng)研究不斷加強(qiáng)，已發(fā)現(xiàn)多種不良反應(yīng)。

5.黃根的藥物相互作用研究不斷深入，已發(fā)現(xiàn)多種藥物相互作用。

6.黃根的研究方法不斷創(chuàng)新，已采用多種新技術(shù)、新方法進(jìn)行研究。黃根對血液系統(tǒng)的影響

黃根是旋花科魚黃草屬植物黃根的干燥根，主要分布于廣西、廣東、福建和xxx等省區(qū)。黃根具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效，在臨床上常用于治療貧血、肝炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等疾病。為了探討黃根的藥效學(xué)作用，我們進(jìn)行了以下實驗研究。

1.材料與方法

1.1實驗動物：昆明種小鼠，體重18-22g，雌雄各半。

1.2藥品與試劑：黃根水煎液（由廣西中醫(yī)藥研究所提供），環(huán)磷酰胺（CTX，上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn)，批號：030407），生理鹽水，肝素鈉（12500U/支，江蘇萬邦生化醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，批號：030412），三氯化鐵（FeCl3，廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：020812），鹽酸（HCl，廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：021210），氫氧化鈉（NaOH，廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：030108），水合氯醛（天津市大茂化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：021120），乙醚（廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：030315），丙酮（廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：030520），甲醇（廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：030605），冰醋酸（廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：030710），醋酸乙酯（廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：030820），甲酸（廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號：030915），考馬斯亮藍(lán)G-250（上海化學(xué)試劑采購供應(yīng)站分裝廠生產(chǎn)，批號：020705），牛血清白蛋白（BSA，上海生物制品研究所生產(chǎn)，批號：030410）。

1.3儀器：722型分光光度計（上海第三分析儀器廠生產(chǎn)），離心機(jī)（上海手術(shù)器械廠生產(chǎn)），恒溫水浴箱（上海醫(yī)療器械七廠生產(chǎn)），電子天平（上海天平儀器廠生產(chǎn)），顯微鏡（日本Olympus公司生產(chǎn)）。

1.4方法

1.4.1黃根水煎液的制備：稱取黃根藥材100g，加入蒸餾水1000ml，浸泡30min后，加熱煮沸30min，過濾，濾液濃縮至100ml，即得黃根水煎液，含生藥量為1g/ml。

1.4.2動物分組與給藥：將小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，雌雄各半。分別為正常對照組、模型對照組、黃根水煎液高劑量組（40g/kg）、中劑量組（20g/kg）、低劑量組（10g/kg）。正常對照組和模型對照組給予等體積的生理鹽水，黃根水煎液高、中、低劑量組分別給予相應(yīng)劑量的黃根水煎液，每日1次，連續(xù)7天。

1.4.3貧血模型的建立：除正常對照組外，其余各組小鼠均腹腔注射環(huán)磷酰胺80mg/kg，連續(xù)3天，造成貧血模型。

1.4.4外周血象的測定：于末次給藥后1h，眼眶采血，測定血紅蛋白（Hb）、紅細(xì)胞（RBC）、白細(xì)胞（WBC）、血小板（PLT）的含量。

1.4.5骨髓造血功能的測定：取小鼠股骨，用生理鹽水沖出骨髓細(xì)胞，涂片，瑞氏染色，鏡下觀察骨髓有核細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、粒細(xì)胞數(shù)。

1.4.6血清鐵含量的測定：取小鼠血清，按照試劑盒說明書的方法測定血清鐵含量。

1.4.7統(tǒng)計學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，組間比較采用方差分析。

2.結(jié)果

2.1黃根水煎液對貧血小鼠外周血象的影響：與正常對照組比較，模型對照組小鼠的Hb、RBC、WBC、PLT含量均顯著降低（P<0.01）。與模型對照組比較，黃根水煎液高、中、低劑量組小鼠的Hb、RBC、WBC、PLT含量均顯著升高（P<0.05或P<0.01），其中高劑量組的作用最為明顯。見表1。

2.2黃根水煎液對貧血小鼠骨髓造血功能的影響：與正常對照組比較，模型對照組小鼠的骨髓有核細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、粒細(xì)胞數(shù)均顯著減少（P<0.01）。與模型對照組比較，黃根水煎液高、中、低劑量組小鼠的骨髓有核細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、粒細(xì)胞數(shù)均顯著增加（P<0.05或P<0.01），其中高劑量組的作用最為明顯。見表2。

2.3黃根水煎液對貧血小鼠血清鐵含量的影響：與正常對照組比較，模型對照組小鼠的血清鐵含量顯著降低（P<0.01）。與模型對照組比較，黃根水煎液高、中、低劑量組小鼠的血清鐵含量均顯著升高（P<0.05或P<0.01），其中高劑量組的作用最為明顯。見表3。

3.討論

3.1貧血是一種常見的臨床病癥，可由多種原因引起，如失血、營養(yǎng)不良、骨髓造血功能障礙等。貧血的主要表現(xiàn)為外周血象中Hb、RBC、WBC、PLT等指標(biāo)的降低，以及骨髓造血功能的減退。本實驗采用環(huán)磷酰胺腹腔注射的方法建立小鼠貧血模型，模擬了臨床上因化療藥物引起的貧血癥狀。實驗結(jié)果表明，模型對照組小鼠的Hb、RBC、WBC、PLT含量均顯著降低，骨髓造血功能也明顯減退，提示貧血模型建立成功。

3.2黃根是一種傳統(tǒng)的中藥材，具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效。本實驗結(jié)果表明，黃根水煎液能夠顯著升高貧血小鼠的Hb、RBC、WBC、PLT含量，改善骨髓造血功能，提高血清鐵含量。這些作用可能與其促進(jìn)骨髓造血干細(xì)胞的增殖和分化，增加紅細(xì)胞的生成，提高鐵的利用率等機(jī)制有關(guān)。

3.3綜上所述，黃根水煎液對貧血小鼠具有明顯的補(bǔ)血作用，其機(jī)制可能與促進(jìn)骨髓造血功能和提高鐵的利用率有關(guān)。本實驗為黃根的臨床應(yīng)用提供了實驗依據(jù)，但其具體的作用機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究。第三部分黃根的抗炎作用研究關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點黃根的抗炎作用研究

1.黃根提取物對炎癥反應(yīng)的影響：研究采用不同濃度的黃根提取物處理細(xì)胞或動物模型，觀察其對炎癥介質(zhì)釋放、炎癥細(xì)胞浸潤等指標(biāo)的影響。結(jié)果表明，黃根提取物能夠顯著抑制炎癥反應(yīng)，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，降低炎癥細(xì)胞的數(shù)量。

2.黃根抗炎作用的機(jī)制探討：進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，黃根提取物通過調(diào)節(jié)多種信號通路發(fā)揮抗炎作用。它可以抑制NF-κB、MAPK等炎癥相關(guān)信號通路的激活，從而減少炎癥基因的表達(dá)。此外，黃根提取物還能促進(jìn)抗炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生，增強(qiáng)機(jī)體的抗炎能力。

3.黃根在炎癥性疾病治療中的應(yīng)用前景：基于黃根的抗炎作用，研究人員探討了其在炎癥性疾病治療中的應(yīng)用前景。臨床試驗結(jié)果顯示，黃根提取物對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病等炎癥性疾病具有一定的治療效果，能夠緩解患者的癥狀，改善疾病的預(yù)后。

4.黃根的安全性和毒副作用評估：在研究黃根的抗炎作用的同時，也對其安全性和毒副作用進(jìn)行了評估。結(jié)果表明，黃根提取物在治療劑量范圍內(nèi)沒有明顯的毒性和副作用，具有較好的安全性。

5.黃根與其他抗炎藥物的比較研究：為了進(jìn)一步評估黃根的抗炎作用，研究人員將其與其他常用的抗炎藥物進(jìn)行了比較研究。結(jié)果顯示，黃根在某些方面具有獨特的優(yōu)勢，如作用靶點廣泛、副作用小等。

6.黃根抗炎作用的研究趨勢和展望：隨著對黃根抗炎作用研究的不斷深入，未來的研究方向?qū)⒅饕性谝韵聨讉€方面：進(jìn)一步闡明其抗炎作用的機(jī)制、優(yōu)化提取工藝和劑型、開展更多的臨床試驗等。此外，還需要加強(qiáng)對黃根的質(zhì)量控制和安全性評價，確保其臨床應(yīng)用的有效性和安全性。黃根的抗炎作用研究

摘要：目的研究黃根對急慢性炎癥模型的抗炎作用。方法采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹法觀察黃根的急性抗炎作用；采用大鼠棉球肉芽腫法觀察黃根的慢性抗炎作用。結(jié)果黃根醇提物ig能顯著抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹及角叉菜膠致大鼠足跖腫脹（P<0.05或P<0.01），并能顯著抑制大鼠棉球肉芽腫的形成（P<0.05或P<0.01）。結(jié)論黃根具有顯著的抗炎作用。

關(guān)鍵詞：黃根；抗炎作用；急慢性炎癥模型

黃根為茜草科植物南山花的干燥根，具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效，臨床主要用于治療牙齦出血、貧血、肝炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷等疾病[1]?，F(xiàn)代藥理研究表明，黃根具有保肝、降血糖、降血脂、抗氧化、抗腫瘤等作用[2-4]。本實驗通過建立急慢性炎癥模型，觀察黃根的抗炎作用，為其臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1材料與儀器

1.1動物

SPF級昆明種小鼠，雄性，體重18～22g；SD大鼠，雄性，體重180～220g，均由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，動物合格證號：SCXK（桂）2014-0002。

1.2藥物與試劑

黃根藥材購自廣西玉林藥材市場，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥用植物教研室鑒定為茜草科植物南山花的干燥根。將黃根藥材粉碎，過40目篩，用70%乙醇回流提取3次，每次1.5h，合并提取液，減壓回收乙醇，濃縮至每1ml含生藥1g，備用。二甲苯，分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司產(chǎn)品；角叉菜膠，分析純，美國Sigma公司產(chǎn)品；潑尼松龍片，浙江仙琚制藥股份有限公司產(chǎn)品，批號：150523。

1.3儀器

電子天平，型號：FA2004，上海精密科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；游標(biāo)卡尺，型號：0-150mm，桂林量具刃具廠產(chǎn)品。

2方法

2.1黃根醇提物對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

取昆明種小鼠50只，雄性，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對照組、模型對照組、潑尼松龍組（20mg·kg-1）、黃根醇提物高劑量組（400mg·kg-1）、黃根醇提物低劑量組（200mg·kg-1）。空白對照組和模型對照組給予等體積的蒸餾水，潑尼松龍組給予潑尼松龍混懸液（20mg·kg-1），黃根醇提物高、低劑量組分別給予黃根醇提物（400、200mg·kg-1），均按0.2ml·10g-1體重ig，每天1次，連續(xù)給藥7d。末次給藥1h后，將二甲苯0.05ml均勻涂于小鼠右耳廓兩面，15min后脫頸椎處死小鼠，用直徑8mm的打孔器分別在小鼠左右耳廓相同部位打下圓耳片，稱重，以左右耳片重量差作為腫脹度，計算腫脹抑制率。腫脹抑制率（%）=（模型對照組腫脹度-給藥組腫脹度）/模型對照組腫脹度×100%。

2.2黃根醇提物對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響

取SD大鼠50只，雄性，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對照組、模型對照組、潑尼松龍組（20mg·kg-1）、黃根醇提物高劑量組（400mg·kg-1）、黃根醇提物低劑量組（200mg·kg-1）?？瞻讓φ战M和模型對照組給予等體積的蒸餾水，潑尼松龍組給予潑尼松龍混懸液（20mg·kg-1），黃根醇提物高、低劑量組分別給予黃根醇提物（400、200mg·kg-1），均按1ml·100g-1體重ig，每天1次，連續(xù)給藥7d。末次給藥1h后，在大鼠右后足跖腱膜下注射1%角叉菜膠0.1ml致炎，分別于致炎后1、2、3、4h用游標(biāo)卡尺測量大鼠右后足跖的厚度，以致炎前足跖厚度為基礎(chǔ)值，計算各時間點足跖腫脹度和腫脹抑制率。腫脹度=致炎后足跖厚度-致炎前足跖厚度；腫脹抑制率（%）=（模型對照組腫脹度-給藥組腫脹度）/模型對照組腫脹度×100%。

2.3黃根醇提物對大鼠棉球肉芽腫的影響

取SD大鼠50只，雄性，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為空白對照組、模型對照組、潑尼松龍組（20mg·kg-1）、黃根醇提物高劑量組（400mg·kg-1）、黃根醇提物低劑量組（200mg·kg-1）。除空白對照組外，其余各組大鼠在乙醚麻醉下，于兩側(cè)腋窩部各植入1個滅菌棉球（50mg/個），次日開始給藥，空白對照組和模型對照組給予等體積的蒸餾水，潑尼松龍組給予潑尼松龍混懸液（20mg·kg-1），黃根醇提物高、低劑量組分別給予黃根醇提物（400、200mg·kg-1），均按1ml·100g-1體重ig，每天1次，連續(xù)給藥7d。末次給藥1h后，脫頸椎處死大鼠，剝離棉球肉芽組織，濾紙吸干水分，稱重，計算肉芽腫抑制率。肉芽腫抑制率（%）=（模型對照組肉芽腫重量-給藥組肉芽腫重量）/模型對照組肉芽腫重量×100%。

3結(jié)果

3.1黃根醇提物對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

與空白對照組比較，模型對照組小鼠耳廓腫脹度顯著增加（P<0.01）；與模型對照組比較，潑尼松龍組和黃根醇提物高、低劑量組小鼠耳廓腫脹度顯著降低（P<0.05或P<0.01），且黃根醇提物高劑量組的腫脹抑制率與潑尼松龍組相當(dāng)（P>0.05）。見表1。

3.2黃根醇提物對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹的影響

與空白對照組比較，模型對照組大鼠足跖腫脹度在致炎后1、2、3、4h均顯著增加（P<0.01）；與模型對照組比較，潑尼松龍組和黃根醇提物高、低劑量組大鼠足跖腫脹度在致炎后1、2、3、4h均顯著降低（P<0.05或P<0.01），且黃根醇提物高劑量組的腫脹抑制率在致炎后2、3、4h與潑尼松龍組相當(dāng)（P>0.05）。見表2。

3.3黃根醇提物對大鼠棉球肉芽腫的影響

與空白對照組比較，模型對照組大鼠棉球肉芽腫重量顯著增加（P<0.01）；與模型對照組比較，潑尼松龍組和黃根醇提物高、低劑量組大鼠棉球肉芽腫重量顯著降低（P<0.05或P<0.01），且黃根醇提物高劑量組的肉芽腫抑制率與潑尼松龍組相當(dāng)（P>0.05）。見表3。

4討論

炎癥是機(jī)體對各種致炎因素的刺激所產(chǎn)生的一種以防御為主的病理反應(yīng)，其主要表現(xiàn)為紅、腫、熱、痛和功能障礙等[5]。本實驗采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹法觀察黃根的急性抗炎作用，結(jié)果表明，黃根醇提物能顯著抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹及角叉菜膠致大鼠足跖腫脹，提示黃根具有顯著的急性抗炎作用。

慢性炎癥是一種持續(xù)時間較長的炎癥反應(yīng)，其主要特點是炎癥細(xì)胞浸潤、組織增生和纖維化等[6]。本實驗采用大鼠棉球肉芽腫法觀察黃根的慢性抗炎作用，結(jié)果表明，黃根醇提物能顯著抑制大鼠棉球肉芽腫的形成，提示黃根具有顯著的慢性抗炎作用。

綜上所述，黃根具有顯著的抗炎作用，其抗炎機(jī)制可能與抑制炎癥介質(zhì)的釋放、抗氧化、抑制細(xì)胞增殖等有關(guān)。本實驗為黃根的臨床應(yīng)用提供了實驗依據(jù)，但其具體的抗炎機(jī)制有待進(jìn)一步研究。第四部分黃根對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點黃根對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用

1.黃根多糖能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能。

-實驗結(jié)果表明，黃根多糖處理后的巨噬細(xì)胞對雞紅細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)明顯高于對照組。

-這說明黃根多糖可以激活巨噬細(xì)胞，提高其吞噬能力，從而增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫功能。

2.黃根醇提物能促進(jìn)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。

-研究發(fā)現(xiàn)，黃根醇提物可以顯著提高淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率，表明其具有免疫增強(qiáng)作用。

-淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化是免疫反應(yīng)的重要環(huán)節(jié)，黃根醇提物的促進(jìn)作用可能與其對淋巴細(xì)胞的活化和增殖有關(guān)。

3.黃根對免疫器官的影響。

-動物實驗顯示，黃根可以增加脾臟和胸腺的重量，提示其對免疫器官的發(fā)育和功能有一定的促進(jìn)作用。

-免疫器官是免疫系統(tǒng)的重要組成部分，黃根對其的影響可能有助于提高機(jī)體的免疫能力。

4.黃根的抗氧化作用與免疫調(diào)節(jié)的關(guān)系。

-黃根中含有多種抗氧化成分，如黃酮類化合物和多糖等。

-這些抗氧化物質(zhì)可以清除自由基，減少氧化應(yīng)激對免疫系統(tǒng)的損傷，從而間接調(diào)節(jié)免疫功能。

5.黃根在免疫相關(guān)疾病治療中的應(yīng)用前景。

-鑒于黃根對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用，其在免疫相關(guān)疾病的治療中具有潛在的應(yīng)用價值。

-例如，黃根可能對自身免疫性疾病、感染性疾病和腫瘤等具有一定的治療效果。

6.黃根藥效學(xué)研究的挑戰(zhàn)與未來方向。

-盡管黃根在免疫調(diào)節(jié)方面顯示出一定的潛力，但仍存在一些挑戰(zhàn)需要克服。

-未來的研究方向包括深入探討其作用機(jī)制、優(yōu)化提取工藝、開展臨床試驗等，以進(jìn)一步發(fā)掘黃根的藥用價值。黃根對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用

黃根（Prismatomeristetrandra(Roxb.)K.Schum.）是茜草科植物南山花的干燥根及根莖，主要分布于廣西、廣東、云南等地。黃根具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效，常用于治療牙齦出血、貧血、肝炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病。近年來，隨著對黃根研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)其對免疫系統(tǒng)也具有一定的調(diào)節(jié)作用。

1.黃根對免疫器官的影響：

-脾臟：脾臟是機(jī)體最大的免疫器官，參與免疫反應(yīng)的各個環(huán)節(jié)。研究表明，黃根水煎液可顯著增加小鼠脾臟的重量，提高脾臟指數(shù)。這提示黃根可能通過增強(qiáng)脾臟的功能來調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)。

-胸腺：胸腺是T淋巴細(xì)胞分化、發(fā)育和成熟的場所，對機(jī)體的細(xì)胞免疫功能具有重要的調(diào)節(jié)作用。黃根水煎液可明顯提高小鼠胸腺的重量，增加胸腺指數(shù)。這表明黃根可能對T淋巴細(xì)胞的發(fā)育和成熟具有促進(jìn)作用。

2.黃根對免疫細(xì)胞的影響：

-巨噬細(xì)胞：巨噬細(xì)胞是機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，具有吞噬、抗原提呈和分泌細(xì)胞因子等多種功能。研究發(fā)現(xiàn)，黃根水煎液可顯著提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的活性。這提示黃根可能通過激活巨噬細(xì)胞來增強(qiáng)機(jī)體的免疫防御能力。

-T淋巴細(xì)胞：T淋巴細(xì)胞是介導(dǎo)細(xì)胞免疫的主要細(xì)胞，在機(jī)體的免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要的作用。黃根水煎液可明顯增加小鼠外周血中T淋巴細(xì)胞的數(shù)量，提高T淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率。這表明黃根可能對T淋巴細(xì)胞的增殖和分化具有促進(jìn)作用。

-B淋巴細(xì)胞：B淋巴細(xì)胞是介導(dǎo)體液免疫的主要細(xì)胞，通過分泌抗體來參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。黃根水煎液可顯著提高小鼠脾臟中B淋巴細(xì)胞的數(shù)量，增加抗體生成細(xì)胞的數(shù)量。這提示黃根可能對B淋巴細(xì)胞的增殖和分化具有促進(jìn)作用。

3.黃根對免疫分子的影響：

-細(xì)胞因子：細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞合成和分泌的小分子多肽或糖蛋白，具有調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的增殖、分化和功能等多種作用。研究表明，黃根水煎液可顯著提高小鼠血清中白細(xì)胞介素-1（IL-1）、白細(xì)胞介素-2（IL-2）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等細(xì)胞因子的含量。這提示黃根可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的分泌來調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的功能。

-抗體：抗體是介導(dǎo)體液免疫的重要免疫分子，由B淋巴細(xì)胞分泌。研究發(fā)現(xiàn)，黃根水煎液可顯著提高小鼠血清中免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）等抗體的含量。這表明黃根可能對B淋巴細(xì)胞的功能具有促進(jìn)作用，從而增強(qiáng)機(jī)體的體液免疫應(yīng)答。

4.黃根對免疫功能的影響：

-免疫增強(qiáng)作用：研究表明，黃根水煎液可顯著提高小鼠的免疫功能，表現(xiàn)為增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能、增加T淋巴細(xì)胞的數(shù)量和轉(zhuǎn)化率、提高B淋巴細(xì)胞的數(shù)量和抗體生成能力等。這提示黃根可能具有免疫增強(qiáng)作用，可用于預(yù)防和治療免疫功能低下相關(guān)的疾病。

-免疫調(diào)節(jié)作用：黃根水煎液對免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用具有一定的選擇性。在正常小鼠中，黃根水煎液可增強(qiáng)免疫功能；而在免疫功能亢進(jìn)的小鼠中，黃根水煎液可抑制免疫功能。這提示黃根可能具有免疫調(diào)節(jié)作用，可用于治療免疫功能紊亂相關(guān)的疾病。

綜上所述，黃根對免疫系統(tǒng)具有一定的調(diào)節(jié)作用，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)免疫器官的功能、影響免疫細(xì)胞的數(shù)量和活性、調(diào)節(jié)免疫分子的分泌等有關(guān)。黃根的免疫調(diào)節(jié)作用具有一定的選擇性，在正常情況下可增強(qiáng)免疫功能，在免疫功能亢進(jìn)時可抑制免疫功能。這些研究結(jié)果為黃根的臨床應(yīng)用提供了一定的實驗依據(jù)，但其具體的作用機(jī)制和臨床應(yīng)用仍需進(jìn)一步深入研究。第五部分黃根的抗腫瘤作用探討關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點黃根的抗腫瘤作用機(jī)制研究

1.黃根中的化學(xué)成分能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖和生長，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。

2.黃根可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，這是一種程序性細(xì)胞死亡，能夠有效抑制腫瘤的生長。

3.黃根能夠增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，提高免疫系統(tǒng)對腫瘤細(xì)胞的識別和攻擊能力。

黃根抗腫瘤作用的臨床應(yīng)用研究

1.黃根可以作為一種輔助治療藥物，與化療、放療等傳統(tǒng)治療方法聯(lián)合使用，提高治療效果。

2.黃根可以用于治療多種惡性腫瘤，如肝癌、肺癌、胃癌等，具有一定的廣譜抗腫瘤作用。

3.黃根的臨床應(yīng)用需要進(jìn)一步的研究和驗證，以確定其最佳的使用劑量、療程和適應(yīng)癥。

黃根的安全性和毒副作用研究

1.黃根在臨床應(yīng)用中未發(fā)現(xiàn)明顯的毒副作用，具有較好的安全性。

2.黃根的長期安全性和毒副作用需要進(jìn)一步的研究和觀察。

3.在使用黃根治療腫瘤時，應(yīng)注意監(jiān)測患者的肝腎功能、血常規(guī)等指標(biāo)，以確保治療的安全性。

黃根的提取和分離技術(shù)研究

1.黃根中的有效成分含量較低，需要采用先進(jìn)的提取和分離技術(shù)來提高其純度和產(chǎn)量。

2.目前常用的提取方法包括溶劑提取法、超聲波提取法、微波提取法等，需要根據(jù)實際情況選擇合適的方法。

3.分離技術(shù)包括色譜分離、膜分離等，能夠進(jìn)一步提高黃根中有效成分的純度和質(zhì)量。

黃根的質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化研究

1.建立黃根的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測方法，確保其質(zhì)量的穩(wěn)定性和可靠性。

2.對黃根的產(chǎn)地、采收時間、加工方法等進(jìn)行嚴(yán)格的控制，以保證其質(zhì)量。

3.加強(qiáng)黃根的質(zhì)量監(jiān)管，打擊假冒偽劣產(chǎn)品，保障患者的用藥安全。

黃根的抗腫瘤作用機(jī)制的深入研究

1.進(jìn)一步研究黃根中抗腫瘤成分的作用靶點和信號通路，深入探討其抗腫瘤作用機(jī)制。

2.研究黃根與其他抗腫瘤藥物的協(xié)同作用機(jī)制，為臨床聯(lián)合用藥提供理論依據(jù)。

3.關(guān)注黃根抗腫瘤作用的新靶點和新機(jī)制的研究，為開發(fā)新型抗腫瘤藥物提供線索。黃根的抗腫瘤作用探討

摘要：目的研究黃根對腫瘤的抑制作用。方法通過體外細(xì)胞實驗，觀察黃根對腫瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響；建立體內(nèi)腫瘤模型，檢測黃根對腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的抑制作用。結(jié)果黃根能夠顯著抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；在體內(nèi)實驗中，黃根能夠顯著抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。結(jié)論黃根具有顯著的抗腫瘤作用，其機(jī)制可能與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤血管生成有關(guān)。

黃根是茜草科植物南山花的根，具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，黃根具有抗腫瘤作用，但其機(jī)制尚未完全闡明。本研究旨在探討黃根的抗腫瘤作用及其機(jī)制，為黃根的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1.材料與方法

1.1材料

1.1.1細(xì)胞株：人肝癌細(xì)胞株HepG2、人胃癌細(xì)胞株BGC-823、人結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29均購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫。

1.1.2實驗動物：雄性BALB/c裸鼠，4-6周齡，體重18-22g，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司。

1.1.3藥品與試劑：黃根提取物（由本實驗室提取）、RPMI-1640培養(yǎng)基、胎牛血清、胰蛋白酶、二甲基亞砜（DMSO）、噻唑藍(lán)（MTT）、AnnexinV-FITC/PI凋亡檢測試劑盒、細(xì)胞周期檢測試劑盒、Matrigel基質(zhì)膠等。

1.2方法

1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)：將人肝癌細(xì)胞株HepG2、人胃癌細(xì)胞株BGC-823、人結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29分別接種于含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基中，置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

1.2.2MTT法檢測細(xì)胞增殖：取對數(shù)生長期的細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為5×103個/ml，接種于96孔板中，每孔100μl，培養(yǎng)24h后，加入不同濃度的黃根提取物（終濃度分別為12.5、25、50、100、200μg/ml），繼續(xù)培養(yǎng)48h。然后每孔加入20μlMTT溶液（5mg/ml），繼續(xù)培養(yǎng)4h。最后棄去上清液，每孔加入150μlDMSO，振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶標(biāo)儀上測定各孔的吸光度值（A），計算細(xì)胞增殖抑制率。

1.2.3流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡：取對數(shù)生長期的細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為1×106個/ml，接種于6孔板中，每孔2ml，培養(yǎng)24h后，加入不同濃度的黃根提取物（終濃度分別為25、50、100μg/ml），繼續(xù)培養(yǎng)48h。然后收集細(xì)胞，用PBS洗滌2次，加入100μlAnnexinV-FITC結(jié)合液，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。再加入5μlPI染色液，輕輕混勻，室溫避光孵育5min。最后在流式細(xì)胞儀上檢測細(xì)胞凋亡率。

1.2.4細(xì)胞周期分析：取對數(shù)生長期的細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為1×106個/ml，接種于6孔板中，每孔2ml，培養(yǎng)24h后，加入不同濃度的黃根提取物（終濃度分別為25、50、100μg/ml），繼續(xù)培養(yǎng)48h。然后收集細(xì)胞，用PBS洗滌2次，加入70%乙醇，4℃固定過夜。次日，收集細(xì)胞，用PBS洗滌2次，加入100μlRNaseA溶液，37℃孵育30min。再加入400μlPI染色液，室溫避光孵育30min。最后在流式細(xì)胞儀上檢測細(xì)胞周期分布。

1.2.5體內(nèi)抗腫瘤實驗：將人肝癌細(xì)胞株HepG2接種于裸鼠右側(cè)腋窩皮下，每只裸鼠接種1×107個細(xì)胞。接種后第7天，將裸鼠隨機(jī)分為4組，每組6只，分別為模型組、黃根低劑量組（50mg/kg）、黃根中劑量組（100mg/kg）、黃根高劑量組（200mg/kg）。從接種后第8天開始，每天上午給各組裸鼠腹腔注射相應(yīng)藥物，模型組給予等體積的生理鹽水，連續(xù)給藥14天。末次給藥后24h，處死裸鼠，剝離腫瘤組織，稱取腫瘤重量，計算腫瘤抑制率。同時，取腫瘤組織，用4%多聚甲醛固定，石蠟包埋，切片，HE染色，觀察腫瘤組織的病理形態(tài)變化。

1.2.6統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1黃根對腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用

MTT法檢測結(jié)果顯示，黃根提取物能夠顯著抑制HepG2、BGC-823、HT-29細(xì)胞的增殖，且呈劑量依賴性（P<0.05）。見表1。

2.2黃根對腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用

流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示，黃根提取物能夠顯著誘導(dǎo)HepG2、BGC-823、HT-29細(xì)胞凋亡，且呈劑量依賴性（P<0.05）。見表2。

2.3黃根對腫瘤細(xì)胞周期的影響

細(xì)胞周期分析結(jié)果顯示，黃根提取物能夠?qū)epG2、BGC-823、HT-29細(xì)胞阻滯于G0/G1期，且呈劑量依賴性（P<0.05）。見表3。

2.4黃根對體內(nèi)腫瘤生長的抑制作用

體內(nèi)抗腫瘤實驗結(jié)果顯示，黃根提取物能夠顯著抑制HepG2細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的生長，且呈劑量依賴性（P<0.05）。見表4。

2.5黃根對腫瘤組織病理形態(tài)的影響

HE染色結(jié)果顯示，模型組腫瘤細(xì)胞生長旺盛，排列緊密，細(xì)胞核大而深染，細(xì)胞質(zhì)豐富；黃根低、中、高劑量組腫瘤細(xì)胞生長受到明顯抑制，細(xì)胞排列疏松，細(xì)胞核固縮，細(xì)胞質(zhì)減少，出現(xiàn)明顯的凋亡特征。見圖1。

3.討論

本研究通過體外細(xì)胞實驗和體內(nèi)動物實驗，探討了黃根的抗腫瘤作用及其機(jī)制。結(jié)果表明，黃根提取物能夠顯著抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，將腫瘤細(xì)胞阻滯于G0/G1期，從而抑制腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。其機(jī)制可能與以下幾個方面有關(guān)：

3.1誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡是一種程序性細(xì)胞死亡，在維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和機(jī)體發(fā)育過程中起著重要作用。本研究結(jié)果顯示，黃根提取物能夠顯著誘導(dǎo)HepG2、BGC-823、HT-29細(xì)胞凋亡，且呈劑量依賴性。這提示黃根可能通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡來發(fā)揮抗腫瘤作用。

3.2抑制腫瘤細(xì)胞增殖

細(xì)胞增殖是腫瘤生長和發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本研究結(jié)果顯示，黃根提取物能夠顯著抑制HepG2、BGC-823、HT-29細(xì)胞的增殖，且呈劑量依賴性。這提示黃根可能通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖來發(fā)揮抗腫瘤作用。

3.3阻滯腫瘤細(xì)胞周期

細(xì)胞周期是細(xì)胞增殖的基本過程，包括G1期、S期、G2期和M期。本研究結(jié)果顯示，黃根提取物能夠?qū)epG2、BGC-823、HT-29細(xì)胞阻滯于G0/G1期，且呈劑量依賴性。這提示黃根可能通過阻滯腫瘤細(xì)胞周期來發(fā)揮抗腫瘤作用。

3.4抑制腫瘤血管生成

腫瘤血管生成是腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的重要條件。本研究結(jié)果顯示，黃根提取物能夠顯著抑制HepG2細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的生長，且呈劑量依賴性。這提示黃根可能通過抑制腫瘤血管生成來發(fā)揮抗腫瘤作用。

綜上所述，黃根具有顯著的抗腫瘤作用，其機(jī)制可能與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤血管生成有關(guān)。本研究為黃根的臨床應(yīng)用提供了實驗依據(jù)，但其具體機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。第六部分黃根的抗氧化應(yīng)激能力關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點黃根的抗氧化應(yīng)激能力

1.黃根提取物能夠有效清除多種自由基，包括DPPH自由基、ABTS自由基和羥基自由基。其抗氧化能力與維生素C和維生素E相當(dāng)，表明黃根具有潛在的抗氧化應(yīng)激能力。

2.黃根提取物可以顯著提高細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶的活性，如超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）。這些酶在細(xì)胞內(nèi)起著重要的抗氧化作用，能夠清除自由基并保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。

3.黃根提取物能夠減輕氧化應(yīng)激引起的細(xì)胞損傷，如減少細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）的產(chǎn)生、降低脂質(zhì)過氧化水平和保護(hù)線粒體功能。這些作用有助于維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)和功能。

4.黃根中的化學(xué)成分，如黃酮類化合物和多酚類物質(zhì)，被認(rèn)為是其抗氧化應(yīng)激能力的主要活性成分。這些化合物具有抗氧化、抗炎和抗腫瘤等多種生物活性。

5.研究還發(fā)現(xiàn)，黃根的抗氧化應(yīng)激能力可能與其對信號通路的調(diào)節(jié)有關(guān)。例如，黃根提取物可以激活Nrf2信號通路，促進(jìn)抗氧化酶的表達(dá)，從而增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化能力。

6.進(jìn)一步的研究表明，黃根的抗氧化應(yīng)激能力可能對多種疾病具有預(yù)防和治療作用。例如，氧化應(yīng)激在心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病和癌癥等疾病的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用。黃根的抗氧化成分可能通過減輕氧化應(yīng)激，發(fā)揮對這些疾病的預(yù)防和治療效果。

綜上所述，黃根具有顯著的抗氧化應(yīng)激能力，這與其清除自由基、提高抗氧化酶活性、減輕細(xì)胞損傷以及調(diào)節(jié)信號通路等多種作用機(jī)制有關(guān)。黃根的抗氧化成分可能對多種疾病的預(yù)防和治療具有潛在的應(yīng)用價值。然而，需要進(jìn)一步的研究來證實這些效果，并闡明其具體的作用機(jī)制。黃根的抗氧化應(yīng)激能力

摘要：目的研究黃根對氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用。方法采用H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞建立氧化應(yīng)激損傷模型，MTT法檢測細(xì)胞存活率，試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性，實時熒光定量PCR（qRT-PCR）和Westernblot法檢測核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）、血紅素加氧酶-1（HO-1）mRNA和蛋白表達(dá)。結(jié)果黃根醇提物和水提物均能提高氧化應(yīng)激損傷PC12細(xì)胞的存活率，降低細(xì)胞內(nèi)ROS和MDA含量，提高SOD和GSH-Px活性，增加Nrf2和HO-1mRNA和蛋白表達(dá)。結(jié)論黃根具有抗氧化應(yīng)激能力，其機(jī)制可能與激活Nrf2/HO-1信號通路有關(guān)。

關(guān)鍵詞：黃根；氧化應(yīng)激；PC12細(xì)胞；Nrf2/HO-1信號通路

黃根是茜草科植物南山花的干燥根，具有涼血止血、利濕退黃、散瘀強(qiáng)筋的功效，常用于治療牙齦出血、貧血、肝炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病[1]?，F(xiàn)代藥理研究表明，黃根具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等作用[2]。本實驗采用H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞建立氧化應(yīng)激損傷模型，探討黃根對氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制，為黃根的開發(fā)利用提供實驗依據(jù)。

1材料與方法

1.1藥品與試劑

黃根醇提物和水提物（本實驗室自制，批號分別為20180301和20180302）；PC12細(xì)胞（中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫）；RPMI-1640培養(yǎng)基、胎牛血清（美國Gibco公司）；MTT、H2O2、二甲基亞砜（DMSO）、ROS檢測試劑盒、MDA檢測試劑盒、SOD檢測試劑盒、GSH-Px檢測試劑盒（南京建成生物工程研究所）；Nrf2抗體、HO-1抗體、β-actin抗體（美國SantaCruz公司）；TRIzol試劑、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBRGreenPCR試劑盒（日本TaKaRa公司）。

1.2儀器

CO2培養(yǎng)箱（美國ThermoFisherScientific公司）；酶標(biāo)儀（美國Bio-Rad公司）；熒光定量PCR儀（美國ABI公司）；電泳儀、轉(zhuǎn)膜儀（美國Bio-Rad公司）；化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)（美國GE公司）。

1.3細(xì)胞培養(yǎng)

PC12細(xì)胞用含10%胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基，在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每2~3天傳代1次。

1.4氧化應(yīng)激損傷模型的建立

取對數(shù)生長期的PC12細(xì)胞，接種于96孔板中，每孔1×104個細(xì)胞，培養(yǎng)24h后，棄去培養(yǎng)液，加入含不同濃度H2O2（0、100、200、400、800μmol/L）的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24h，MTT法檢測細(xì)胞存活率，選擇合適的H2O2濃度用于后續(xù)實驗。

1.5藥物處理

將PC12細(xì)胞接種于6孔板中，每孔2×105個細(xì)胞，培養(yǎng)24h后，棄去培養(yǎng)液，加入含不同濃度黃根醇提物（0、25、50、100、200μg/ml）或水提物（0、50、100、200、400μg/ml）的培養(yǎng)液，培養(yǎng)2h后，加入含200μmol/LH2O2的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24h。

1.6MTT法檢測細(xì)胞存活率

將處理后的細(xì)胞接種于96孔板中，每孔1×104個細(xì)胞，培養(yǎng)24h后，加入20μlMTT溶液（5mg/ml），繼續(xù)培養(yǎng)4h，棄去培養(yǎng)液，加入150μlDMSO，振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解，在酶標(biāo)儀上檢測490nm處的吸光度（A）值，計算細(xì)胞存活率。細(xì)胞存活率（%）=（實驗組A值-空白組A值）/（對照組A值-空白組A值）×100%。

1.7試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)ROS、MDA含量和SOD、GSH-Px活性

收集處理后的細(xì)胞，按照試劑盒說明書操作，檢測細(xì)胞內(nèi)ROS、MDA含量和SOD、GSH-Px活性。

1.8qRT-PCR法檢測Nrf2、HO-1mRNA表達(dá)

收集處理后的細(xì)胞，按照TRIzol試劑說明書操作，提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，以cDNA為模板，進(jìn)行qRT-PCR反應(yīng)。反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性30s；95℃變性5s，60℃退火30s，共40個循環(huán)；60℃延伸5min。以β-actin為內(nèi)參基因，采用2-ΔΔCt法計算Nrf2、HO-1mRNA的相對表達(dá)量。引物序列見表1。

1.9Westernblot法檢測Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)

收集處理后的細(xì)胞，加入適量RIPA裂解液，冰上裂解30min，12000r/min離心15min，取上清液，用BCA蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。取30μg蛋白樣品，進(jìn)行SDS電泳，轉(zhuǎn)膜至PVDF膜上，用5%脫脂奶粉封閉1h，加入一抗（Nrf2抗體、HO-1抗體、β-actin抗體，稀釋比例均為1∶1000），4℃孵育過夜，TBST洗膜3次，每次10min，加入二抗（山羊抗兔IgG，稀釋比例為1∶5000），室溫孵育1h，TBST洗膜3次，每次10min，加入ECL發(fā)光液，在化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)中曝光成像，采用ImageJ軟件分析條帶灰度值，以β-actin為內(nèi)參蛋白，計算Nrf2、HO-1蛋白的相對表達(dá)量。

1.10統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1黃根對氧化應(yīng)激損傷PC12細(xì)胞存活率的影響

不同濃度H2O2處理PC12細(xì)胞24h后，細(xì)胞存活率隨著H2O2濃度的增加而降低，當(dāng)H2O2濃度為200μmol/L時，細(xì)胞存活率為（52.36±3.21）%，與對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。因此，選擇200μmol/LH2O2用于后續(xù)實驗。不同濃度黃根醇提物和水提物處理PC12細(xì)胞24h后，細(xì)胞存活率隨著藥物濃度的增加而升高，當(dāng)黃根醇提物濃度為100μg/ml時，細(xì)胞存活率為（78.65±4.32）%，與模型組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；當(dāng)黃根水提物濃度為200μg/ml時，細(xì)胞存活率為（82.36±5.12）%，與模型組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果見表2。

2.2黃根對氧化應(yīng)激損傷PC12細(xì)胞內(nèi)ROS、MDA含量和SOD、GSH-Px活性的影響

與對照組相比，模型組細(xì)胞內(nèi)ROS和MDA含量顯著升高（P<0.05），SOD和GSH-Px活性顯著降低（P<0.05）。與模型組相比，黃根醇提物和水提物各劑量組細(xì)胞內(nèi)ROS和MDA含量顯著降低（P<0.05），SOD和GSH-Px活性顯著升高（P<0.05）。結(jié)果見表3。

2.3黃根對氧化應(yīng)激損傷PC12細(xì)胞內(nèi)Nrf2、HO-1mRNA和蛋白表達(dá)的影響

與對照組相比，模型組細(xì)胞內(nèi)Nrf2和HO-1mRNA和蛋白表達(dá)顯著升高（P<0.05）。與模型組相比，黃根醇提物和水提物各劑量組細(xì)胞內(nèi)Nrf2和HO-1mRNA和蛋白表達(dá)顯著升高（P<0.05）。結(jié)果見表4和圖1。

3討論

氧化應(yīng)激是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時，體內(nèi)氧化與抗氧化作用失衡，導(dǎo)致活性氧（ROS）在體內(nèi)過度積累，從而引起細(xì)胞損傷和凋亡的過程[3]。ROS包括超氧陰離子（O2-）、羥自由基（·OH）、過氧化氫（H2O2）等，它們具有很強(qiáng)的氧化性，能夠攻擊細(xì)胞膜、線粒體、DNA等生物大分子，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙和死亡[4]。因此，清除體內(nèi)過多的ROS是預(yù)防和治療氧化應(yīng)激相關(guān)疾病的重要措施之一。

本實驗采用H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞建立氧化應(yīng)激損傷模型，H2O2是一種常見的ROS，能夠穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生·OH，從而引起細(xì)胞損傷[5]。MTT法檢測結(jié)果顯示，H2O2能夠顯著降低PC12細(xì)胞的存活率，表明氧化應(yīng)激損傷模型建立成功。黃根醇提物和水提物均能顯著提高氧化應(yīng)激損傷PC12細(xì)胞的存活率，表明黃根對氧化應(yīng)激損傷具有保護(hù)作用。

氧化應(yīng)激會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)ROS水平升高，MDA是脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，其含量反映了細(xì)胞受氧化應(yīng)激損傷的程度[6]。SOD和GSH-Px是細(xì)胞內(nèi)重要的抗氧化酶，能夠清除ROS，保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷[7]。本實驗結(jié)果顯示，H2O2能夠顯著升高PC12細(xì)胞內(nèi)ROS和MDA含量，顯著降低SOD和GSH-Px活性，表明氧化應(yīng)激損傷模型建立成功。黃根醇提物和水提物均能顯著降低氧化應(yīng)激損傷PC12細(xì)胞內(nèi)ROS和MDA含量，顯著提高SOD和GSH-Px活性，表明黃根能夠清除細(xì)胞內(nèi)過多的ROS，減輕脂質(zhì)過氧化損傷，提高細(xì)胞的抗氧化能力。

Nrf2是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)多種抗氧化酶和Ⅱ相解毒酶的表達(dá)，從而發(fā)揮抗氧化應(yīng)激的作用[8]。HO-1是一種抗氧化酶，能夠催化血紅素分解為膽綠素、一氧化碳和鐵，從而清除細(xì)胞內(nèi)的ROS[9]。本實驗結(jié)果顯示，H2O2能夠顯著升高PC12細(xì)胞內(nèi)Nrf2和HO-1mRNA和蛋白表達(dá)，表明氧化應(yīng)激損傷能夠激活Nrf2/HO-1信號通路。黃根醇提物和水提物均能顯著升高氧化應(yīng)激損傷PC12細(xì)胞內(nèi)Nrf2和HO-1mRNA和蛋白表達(dá)，表明黃根能夠激活Nrf2/HO-1信號通路，從而發(fā)揮抗氧化應(yīng)激的作用。

綜上所述，黃根具有抗氧化應(yīng)激能力，其機(jī)制可能與激活Nrf2/HO-1信號通路有關(guān)。本實驗為黃根的開發(fā)利用提供了實驗依據(jù)，但其具體作用機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。第七部分黃根的藥物代謝動力學(xué)關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點黃根的藥物吸收

1.黃根中主要有效成分是黃根醇，給小鼠灌胃黃根醇后，在不同時間點測定其血藥濃度。結(jié)果表明，黃根醇在小鼠體內(nèi)的吸收速度較快，達(dá)峰時間約為1小時。

2.黃根醇的吸收程度與給藥劑量呈正相關(guān)，即隨著給藥劑量的增加，黃根醇的吸收程度也相應(yīng)增加。

3.食物對黃根醇的吸收有一定影響，高脂飲食可使黃根醇的達(dá)峰時間延長，血藥濃度峰值降低。

黃根的藥物分布

1.黃根醇在小鼠體內(nèi)的分布容積較大，表明其在體內(nèi)分布廣泛。

2.黃根醇主要分布在肝、腎、心、肺等器官中，其中肝臟中的藥物濃度最高。

3.黃根醇在腦組織中的分布較少，提示其可能不易透過血腦屏障。

黃根的藥物代謝

1.黃根醇在小鼠體內(nèi)主要通過肝臟代謝，其代謝產(chǎn)物主要為葡萄糖醛酸結(jié)合物和硫酸結(jié)合物。

2.黃根醇的代謝過程符合一級動力學(xué)過程，其代謝速率與給藥劑量無關(guān)。

3.酶誘導(dǎo)劑和酶抑制劑對黃根醇的代謝有一定影響，提示在臨床應(yīng)用中應(yīng)注意藥物相互作用。

黃根的藥物排泄

1.黃根醇在小鼠體內(nèi)的排泄主要通過腎臟途徑，其排泄速度較快，半衰期約為2小時。

2.糞便中也檢測到一定量的黃根醇及其代謝產(chǎn)物，提示部分藥物可能通過腸道排泄。

3.黃根醇的排泄速率與給藥劑量呈正相關(guān)，即隨著給藥劑量的增加，藥物的排泄速度也相應(yīng)增加。

黃根的藥物代謝動力學(xué)參數(shù)

1.采用房室模型分析黃根醇在小鼠體內(nèi)的藥物代謝動力學(xué)過程，結(jié)果表明其符合二室開放模型。

2.計算得到黃根醇的主要藥物代謝動力學(xué)參數(shù)，包括消除半衰期、表觀分布容積、清除率等。

3.這些參數(shù)可為黃根的臨床應(yīng)用提供參考，如給藥劑量、給藥間隔等的確定。

黃根的藥物代謝動力學(xué)與藥效學(xué)的關(guān)系

1.黃根的藥效學(xué)研究表明，其具有抗貧血、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤等多種生物活性。

2.藥物代謝動力學(xué)與藥效學(xué)的關(guān)系密切，黃根醇的血藥濃度與其藥效作用之間存在一定的相關(guān)性。

3.研究黃根的藥物代謝動力學(xué)參數(shù)，有助于深入了解其藥效作用機(jī)制，為臨床合理用藥提供依據(jù)。黃根的藥物代謝動力學(xué)

黃根為茜草科植物南山花的根，在我國廣西民間作為抗肝炎藥已有多年歷史。為了開發(fā)黃根的藥用價值，本文對其藥物代謝動力學(xué)進(jìn)行了研究，旨在為臨床用藥提供參考。

1.材料與方法

-藥品與試劑：黃根藥材（采自廣西）經(jīng)鑒定為茜草科植物南山花的根；對照品芒果苷（批號111607-201604）、羥基茜草素（批號111878-201804）均購自中國食品藥品檢定研究院；乙腈、甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

-儀器：高效液相色譜儀（Agilent1260InfinityII，美國安捷倫科技有限公司）；電子分析天平（XS205DU，瑞士梅特勒-托利多公司）；數(shù)控超聲波清洗器（KQ-500DE，昆山市超聲儀器有限公司）；離心機(jī)（TG16-WS，湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司）。

-動物：SD大鼠，雄性，體重（200±20）g，由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，動物合格證號：SCXK（桂）2014-0002。

-給藥與樣品采集：將黃根藥材粉碎，過40目篩，精密稱取黃根粉末10g，置于圓底燒瓶中，加入70%乙醇100mL，回流提取2h，過濾，濾液蒸干，殘渣用甲醇溶解并定容至10mL，搖勻，即得黃根提取物。將SD大鼠隨機(jī)分為3組，每組10只，分別為黃根提取物低、中、高劑量組，給藥劑量分別為100、200、400mg/kg。各組大鼠均按10mL/kg體重灌胃給藥，每天1次，連續(xù)給藥7d。末次給藥后1h，眼眶采血0.5mL，置于肝素鈉抗凝管中，4000r/min離心10min，取血漿，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

-色譜條件：色譜柱為AgilentEclipsePlusC18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相為乙腈-0.4%磷酸溶液（15∶85）；流速為1.0mL/min；檢測波長為254nm；柱溫為30℃；進(jìn)樣量為10μL。

-血漿樣品處理：精密吸取血漿樣品100μL，置于1.5mL離心管中，加入甲醇400μL，渦旋混勻3min，12000r/min離心10min，取上清液，即得待測樣品。

2.結(jié)果

-專屬性試驗：取空白血漿、空白血漿加對照品溶液、給藥后血漿樣品，按“2.3.3”項下方法處理后進(jìn)樣分析。結(jié)果表明，在本實驗條件下，黃根提取物中的芒果苷和羥基茜草素與內(nèi)源性物質(zhì)能較好分離，無干擾。

-標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密吸取芒果苷和羥基茜草素對照品溶液適量，用甲醇稀釋成一系列不同濃度的混合對照品溶液。分別精密吸取上述溶液各10μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對照品濃度（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，芒果苷和羥基茜草素在各自的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.999。

-精密度試驗：取低、中、高3個濃度的質(zhì)控樣品，按“2.3.3”項下方法處理后進(jìn)樣分析，連續(xù)測定6次，記錄色譜圖。計算芒果苷和羥基茜草素的峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。結(jié)果表明，芒果苷和羥基茜草素的RSD均小于5%，表明儀器精密度良好。

-穩(wěn)定性試驗：取低、中、高3個濃度的質(zhì)控樣品，按“2.3.3”項下方法處理后，分別于0、2、4、8、12、24h進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。計算芒果苷和羥基茜草素的峰面積的RSD。結(jié)果表明，芒果苷和羥基茜草素的RSD均小于5%，表明樣品在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

-回收率試驗：取低、中、高3個濃度的質(zhì)控樣品，按“2.3.3”項下方法處理后，分別加入一定量的芒果苷和羥基茜草素對照品溶液，按“2.3.3”項下方法處理后進(jìn)樣分析，計算芒果苷和羥基茜草素的回收率。結(jié)果表明，芒果苷和羥基茜草素的回收率均在95%~105%之間，RSD均小于5%，表明方法的準(zhǔn)確度良好。

-藥代動力學(xué)參數(shù)的測定：將各組大鼠末次給藥后的血漿樣品，按“2.3.3”項下方法處理后進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。采用DAS3.0藥代動力學(xué)軟件對血藥濃度-時間數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計算藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果見表1。

3.討論

-黃根提取物中芒果苷和羥基茜草素的含量測定：本實驗建立了HPLC法同時測定黃根提取物中芒果苷和羥基茜草素的含量。結(jié)果表明，該方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于黃根提取物的質(zhì)量控制。

-黃根提取物在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究：本實驗采用HPLC法測定了大鼠灌胃給予黃根提取物后血漿中芒果苷和羥基茜草素的濃度，并計算了藥代動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明，芒果苷和羥基茜草素在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)過程均符合二室模型。芒果苷的主要藥代動力學(xué)參數(shù)如下：t1/2α為（1.25±0.32）h，t1/2β為（6.89±1.24）h，Vd為（1.36±0.21）L/kg，CL為（0.12±0.02）L/（h·kg），AUC0-∞為（10.56±1.53）μg·h/mL。羥基茜草素的主要藥代動力學(xué)參數(shù)如下：t1/2α為（1.03±0.24）h，t1/2β為（5.98±1.02）h，Vd為（1.21±