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第2課時(shí)微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)題組一選擇培養(yǎng)基和微生物的選擇培養(yǎng)1.(2023·四川成都高二月考)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3供植物吸收和利用。以下說法錯(cuò)誤的是()A.土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕窧.能分解尿素的細(xì)菌也能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源C.為了篩選可分解尿素的細(xì)菌,在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源D.篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4的作用是提供無機(jī)鹽和維持pH2.平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法,下列敘述正確的是()A.采用稀釋涂布平板法獲得的菌落數(shù)往往多于實(shí)際的活菌數(shù)B.平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面C.稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)D.與平板劃線法相比,稀釋涂布平板法形成單菌落的效果更好3.油煙污染由多種有害物質(zhì)組成,不易降解。某同學(xué)從長期受到油煙污染的環(huán)境中分離出油煙降解菌,其篩選分離過程如圖所示。下列敘述正確的是()A.圖中①~③的過程為梯度稀釋B.在培養(yǎng)基中加入油煙污染物,其作用是為微生物提供碳源和能源C.④使用的是固體培養(yǎng)基,需加入瓊脂作為微生物生長繁殖的營養(yǎng)物質(zhì)D.過程④可采用稀釋涂布平板法或平板劃線法分離菌種并進(jìn)行計(jì)數(shù)4.(2023·黑龍江哈爾濱高二期中)原油中含有大量有害的、致癌的多環(huán)芳烴。土壤中有些細(xì)菌可以利用原油中的多環(huán)芳烴為碳源,在培養(yǎng)基中形成分解圈。為篩選出能高效降解原油的菌株并投入除污,某小組同學(xué)設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述,不正確的是()A.應(yīng)配制來源于被原油污染土壤的土壤稀釋液備用B.配制以多環(huán)芳烴為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基C.將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇培養(yǎng)基上D.在選擇培養(yǎng)基上能形成分解圈的即為所需菌種5.如圖為選育高產(chǎn)β-胡蘿卜素的布拉霉菌的過程。隨β-胡蘿卜素含量增加,菌體顏色從黃A.過程①屬于誘變育種B.過程②可采用平板劃線法接種C.過程③應(yīng)選擇黃色菌株進(jìn)行富集培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中添加β-紫羅酮起選擇作用題組二微生物的數(shù)量測定6.(2023·江蘇無錫高二質(zhì)檢)養(yǎng)殖池中存在的有毒物質(zhì)主要是氨及亞硝酸,這兩種物質(zhì)可由硝A.需要配制添加一定濃度銨鹽的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,以篩選硝化細(xì)菌B.應(yīng)對采集底泥使用的工具進(jìn)行滅菌,全部接種過程均需在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.采用平板劃線法進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)時(shí),還需與未接種的空白培養(yǎng)基同時(shí)培養(yǎng)D.若空白對照組上長出了菌落,需要在實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上減去空白對照組的菌落數(shù)7.下列有關(guān)稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)和顯微鏡直接計(jì)數(shù)法的敘述,不正確的是()A.利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)屬于顯微鏡直接計(jì)數(shù)法,其缺點(diǎn)是不能區(qū)分死菌與活菌B.兩種計(jì)數(shù)方法,其統(tǒng)計(jì)值與實(shí)際值相比,均有差異,但產(chǎn)生差異的原因不同C.兩種計(jì)數(shù)方法均能在計(jì)數(shù)的同時(shí)觀察到所研究微生物的形態(tài)特征D.當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí),一般選取菌落數(shù)在30~300的且差異不大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)8.某研究小組為了探究覆蓋保鮮膜對西瓜表面微生物的種類和數(shù)量的影響,他們將覆蓋保鮮膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制備成浸出液,再將浸出液接種到培養(yǎng)基平板上進(jìn)行觀察。下列說法正確的是()A.應(yīng)用液體培養(yǎng)基接種浸出液進(jìn)行培養(yǎng)B.應(yīng)采用平板劃線法對浸出液進(jìn)行計(jì)數(shù)C.每組至少設(shè)置三個(gè)平板,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性D.只需要設(shè)置未接種瓜瓤浸出液的空白平板作對照9.(2021·山東,14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪A.甲菌屬于解脂菌B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力10.(2023·河北衡水高二期中)精氨酸依賴型菌株不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上正常生長,但可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。如圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依賴型菌并進(jìn)行篩選的過程示意圖。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.野生型菌液的培養(yǎng)皿中不會(huì)出現(xiàn)菌落B.乙培養(yǎng)基與甲相比可能缺少了精氨酸C.紫外線照射可導(dǎo)致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生可遺傳變異D.乙中的菌落A為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種11.圖甲所示是稀釋涂布平板法中的部分操作,圖乙所示是平板劃線法的操作結(jié)果。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.圖甲中涂布前要將涂布器灼燒,冷卻后才能涂布菌液B.對于濃度較高的菌液,若圖甲中的最高稀釋倍數(shù)僅為102,則所得到的菌落不一定是由單一的細(xì)胞繁殖而成的C.圖乙所示培養(yǎng)皿中每個(gè)劃線區(qū)域都可得到符合要求的菌落D.圖乙中連續(xù)劃線的起點(diǎn)是上一次劃線的末端(除第一次劃線外)12.(2022·上海長寧區(qū)高二階段練習(xí))篩選是分離和培養(yǎng)微生物新類型常用的手段,下列有關(guān)技術(shù)中不能篩選成功的是()A.在全營養(yǎng)的LB培養(yǎng)基(普通培養(yǎng)基)中,篩選大腸桿菌B.在尿素固體培養(yǎng)基中,篩選能夠分解尿素的微生物C.用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基,篩選能分解纖維素的微生物D.在培養(yǎng)基中加入不同濃度的氯化鈉,篩選抗鹽突變體的微生物13.某生物興趣小組試圖探究山羊瘤胃中的微生物對尿素是否有分解作用,設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn),并成功篩選到能降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請回答下列問題:稀釋倍數(shù)103104105106107菌落數(shù)5003672483618(1)該實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基在成分上的特殊要求是______________________;培養(yǎng)基中的KH2PO4和Na2HPO4的作用有______________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)實(shí)驗(yàn)中采用的分離純化細(xì)菌的方法是________________________________________________________________。實(shí)驗(yàn)過程中,除了需將接種后的平板放在適宜的環(huán)境中培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察,還需要設(shè)置在相同條件下培養(yǎng)的__________________________,作為對照實(shí)驗(yàn),其目的是_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為了計(jì)數(shù)細(xì)菌,將取自瘤胃中的液體進(jìn)行稀釋,接種在培養(yǎng)基上,放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h,統(tǒng)計(jì)菌落數(shù),結(jié)果如上表。其中________倍的稀釋倍數(shù)比較適合計(jì)數(shù)。有同學(xué)認(rèn)為,該計(jì)數(shù)方法統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)目會(huì)比實(shí)際數(shù)目________,他的理由是_____________________________________________________________________________________________。14.(2023·天津河西區(qū)高二期末)某種在田間廣泛使用的除草劑(含氮有機(jī)化合物)在土壤中不易降解,長期使用會(huì)污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤,可按下面程序選育能有效降解該除草劑的細(xì)菌(已知該除草劑在水中溶解度一定,該除草劑的培養(yǎng)基不透明,培養(yǎng)皿中會(huì)殘留少量無菌空氣)。回答下列問題:(1)制備土壤浸出液時(shí),為避免菌體濃度過高,需將浸出液進(jìn)行________處理。(2)要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌,從物理性質(zhì)、營養(yǎng)成分的角度要求上述培養(yǎng)基具備的特點(diǎn)是________________________________________________________。若需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH,應(yīng)在滅菌________(填“前”或“后”)進(jìn)行。對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,常采用_______________法。(3)圖中形成的菌落中,無透明帶菌落利用的氮源可能是________________,有透明帶菌落利用的氮源主要是________________,據(jù)此可篩選出目的菌。(4)若對活菌進(jìn)行計(jì)數(shù),常用的接種方法為____________________。為了測定微生物的數(shù)量,一位同學(xué)在4個(gè)平板培養(yǎng)基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液0.1mL,培養(yǎng)后菌落數(shù)目分別為155、160、176、149,則每毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量為________個(gè)。
第2課時(shí)微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)1.B[能分解尿素的細(xì)菌是一種分解者,屬于異養(yǎng)型生物,不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,B錯(cuò)誤。]2.D[由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,所以利用稀釋涂布平板法獲得的菌落數(shù)往往少于實(shí)際的活菌數(shù),A錯(cuò)誤;平板劃線法不需要稀釋菌液,是將菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面,B錯(cuò)誤;稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),C錯(cuò)誤。]3.B[圖中①~③的過程中加入油煙污染物作為唯一碳源,能夠初步篩選出能分解油煙的微生物,故該過程稱為選擇培養(yǎng),A錯(cuò)誤;配制固體培養(yǎng)基時(shí)加入瓊脂,其作用是作為凝固劑,而不是為微生物生長提供碳源,C錯(cuò)誤;分離菌種常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,但對活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)常用稀釋涂布平板法而不能用平板劃線法,D錯(cuò)誤。]4.C[若將土壤稀釋液進(jìn)行滅菌,則不能篩選出能高效降解原油的菌株,C錯(cuò)誤。]5.C[過程①表示利用紫外線誘導(dǎo)基因突變,故過程①屬于誘變育種,A正確;過程②可采用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種,B正確;菌體隨β-胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色,所以進(jìn)行過程③時(shí),應(yīng)選取橙紅色的菌落接種至液體培養(yǎng)基進(jìn)行富集培養(yǎng),C錯(cuò)誤;結(jié)合題意“未突變菌不能在含有β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長”可知,只有突變菌株可以在添加了一定濃度的β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長菌落,因此該培養(yǎng)基具有選擇功能,D正確。]6.B[要分離硝化細(xì)菌,應(yīng)該用以銨鹽為唯一氮源的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中不能加入牛肉膏蛋白胨,A錯(cuò)誤;平板劃線法不能用于菌落計(jì)數(shù),C錯(cuò)誤;若空白對照組上長出了菌落,則說明培養(yǎng)基被污染了,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)無效,需重新實(shí)驗(yàn),D錯(cuò)誤。]7.C[顯微鏡直接計(jì)數(shù)法無法區(qū)分死菌和活菌,A正確;稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí),當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,故而統(tǒng)計(jì)值比實(shí)際值?。伙@微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)時(shí)不能區(qū)分死菌和活菌,故測定的微生物數(shù)量往往大于實(shí)際的活菌數(shù),因此兩種計(jì)數(shù)方法其統(tǒng)計(jì)值與實(shí)際值相比,均有差異,但產(chǎn)生差異的原因不同,B正確;稀釋涂布平板法觀察到的是菌落的形態(tài)特征,而不是微生物的形態(tài)特征,顯微鏡直接計(jì)數(shù)法觀察到的是微生物的形態(tài)特征,C錯(cuò)誤。]8.C[要探究微生物種類和數(shù)量的變化,應(yīng)采用固體培養(yǎng)基,用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種,液體培養(yǎng)基無法觀察到菌落,不便區(qū)分微生物種類,平板劃線法不能對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù),A、B錯(cuò)誤;每組至少設(shè)置三個(gè)平板,避免偶然性,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,C正確;對照組還需要設(shè)置接種沒有覆蓋保鮮膜的西瓜的瓜瓤浸出液的平板,D錯(cuò)誤。]9.B[根據(jù)題干信息“甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色”,說明甲菌可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸,脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色,因此甲菌屬于解脂菌,A正確;乙菌落周圍沒有出現(xiàn)深藍(lán)色,說明乙菌落不能產(chǎn)生脂肪酶,不能利用脂肪為其供能,但乙菌落也可以在培養(yǎng)基上生存,說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源,B錯(cuò)誤;可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比,更加直觀,C正確;可以利用該平板來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力,觀察指標(biāo)可以是菌落周圍深藍(lán)色圈的大小,D正確。]10.D[由圖觀察可知,乙中的菌落A是野生型菌種,菌落B為精氨酸依賴型菌株,B可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種,D錯(cuò)誤。]11.C[平板劃線法中多次劃線的目的是降低菌種濃度,經(jīng)過連續(xù)劃線才有可能得到由單一的細(xì)胞繁殖而成的菌落,這種菌落才符合要求,C錯(cuò)誤。]12.A[在全營養(yǎng)的LB培養(yǎng)基(普通培養(yǎng)基)中,幾乎所有細(xì)菌都能生長,不能篩選大腸桿菌,A符合題意;在尿素固體培養(yǎng)基中,只有能分解尿素的微生物才能生長,不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生長,能夠篩選分解尿素的微生物,B不符合題意;在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中,只有能分解纖維素的微生物才能生長,不能分解纖維素的微生物因缺乏碳源不能生長,能夠篩選分解纖維素的微生物,C不符合題意;在培養(yǎng)基中加入不同濃度的氯化鈉,只有抗鹽的微生物才能生長,故可用于篩選抗鹽突變體的微生物,D不符合題意。]13.(1)以尿素為唯一氮源為細(xì)菌生長提供無機(jī)鹽、作為緩沖液維持培養(yǎng)液的pH(2)稀釋涂布平板法未接種的空白培養(yǎng)基檢測培養(yǎng)基是否被污染(3)105或106偏小當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落14.(1)稀釋(2)以除草劑為唯一
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