DB36T 820-2023 茶樹(shù)菇固體菌種　　

ICS67.080.20CCSB31備案號(hào)：DB36代替DB36/T820—2015solidspawnofagrocybecylindracea江西省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布IDB36/T820—2023 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語(yǔ)和定義 14質(zhì)量要求 25試驗(yàn)方法 56檢驗(yàn)規(guī)則 67包裝貯存 6附錄A（資料性附錄）母種培養(yǎng)基及其配方 8附錄B（資料性附錄）原種和栽培種常用培養(yǎng)料配方 9DB36/T820—2023本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替DB36/T820—2015《茶樹(shù)菇菌種》，與DB36/T820—2015相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性修改外，主要技術(shù)變化如下：a)文件名稱由《茶樹(shù)菇菌種》修改成《茶樹(shù)菇固體菌種》；b)修改了引言的部分內(nèi)容(見(jiàn)修改版)；c)修改了范圍的內(nèi)容（見(jiàn)第1章，DB36/T820-2015的第1章）；d)修改了術(shù)語(yǔ)和定義的相關(guān)內(nèi)容（見(jiàn)第3章，DB36/T820-2015的第3章）；e)增加了術(shù)語(yǔ)和定義的相關(guān)內(nèi)容（見(jiàn)第3章，DB36/T820-2015的第3章）；f)修改了表格1、表格3、表格5相關(guān)內(nèi)容（見(jiàn)第4章，DB36/T820-2015的第4章）；g)章節(jié)名稱抽樣改成了試驗(yàn)方法（見(jiàn)第5章，DB36/T820-2015的第5章）；h)調(diào)整并修改第6章節(jié)中部分順序和內(nèi)容（見(jiàn)第6章，DB36/T820-2015的5.1、6.5、6.6）；i)修改了微生物學(xué)指標(biāo)的部分內(nèi)容（見(jiàn)5.2.3，DB36/T820-2015的5.4.3）；j)修改了留樣的相關(guān)內(nèi)容（見(jiàn)6.3，DB36/T820-2015的6.6）；k)刪除了標(biāo)簽、運(yùn)輸兩節(jié)內(nèi)容（DB36/T820-2015的第7章）；l)修改了包裝的相關(guān)內(nèi)容（見(jiàn)第7章，DB36/T820-2015的7.2）；m)修改了貯存的相關(guān)內(nèi)容（見(jiàn)第8章，DB36/T820-2015的7.4）；n)修改了原種和栽培種常用培養(yǎng)料配方的相關(guān)內(nèi)容（見(jiàn)附錄B，DB36/T820-2015的附錄B）。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。本文件由江西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位：江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)應(yīng)用微生物研究所、廣昌縣市場(chǎng)監(jiān)督管理局、江西答鮮生物科技有限公司、廣昌縣福興食品有限公司。本文件主要起草人：魏云輝、戴建成、高志斌、孫鵬、何守文、廖妍玲、羅嗣龍、楊建平。本文件所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：DB36/T820-2015，本次為第一次修訂。DB36/T820—2023栽培茶樹(shù)菇（又名茶薪菇、楊樹(shù)菇、柱狀田頭菇，隸屬于真菌門(mén)、擔(dān)子菌亞門(mén)、傘菌目、糞銹傘科、田頭菇屬）使用的菌種是通過(guò)人工培育的純菌絲體及培養(yǎng)基的混合體。國(guó)內(nèi)通常采用三級(jí)擴(kuò)大繁育程序，即母種、原種、栽培種（生產(chǎn)種）培育茶樹(shù)菇菌種。為了規(guī)范我省茶樹(shù)菇菌種生產(chǎn)、經(jīng)銷(xiāo)和使用，促進(jìn)江西省茶樹(shù)菇生產(chǎn)健康綠色、持續(xù)發(fā)展，特制定此標(biāo)準(zhǔn)，但隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)原有的部分生產(chǎn)技術(shù)或內(nèi)容已經(jīng)得到了很大發(fā)展，本文件略顯滯后，通過(guò)查閱大量資料和實(shí)地考察，結(jié)合茶樹(shù)菇生產(chǎn)現(xiàn)狀，對(duì)原有標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了修改，因此本文件更具有先進(jìn)性和可操作性，對(duì)江西省茶樹(shù)菇生產(chǎn)企業(yè)和應(yīng)用單位具有指導(dǎo)意義。1DB36/T820—2023茶樹(shù)菇固體菌種本文件規(guī)定了茶樹(shù)菇固體菌種的術(shù)語(yǔ)和定義、質(zhì)量要求、試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、包裝、貯存等技術(shù)本文件適用于茶樹(shù)菇固體菌種的母種、原種和栽培種（生產(chǎn)種）。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T528-2010食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程《食用菌菌種管理辦法》中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部令第62號(hào)3術(shù)語(yǔ)和定義NY/T528-2010規(guī)定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1母種stockculture經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，也稱一級(jí)種、試管種。3.2原種motherspawn由母種菌絲體轉(zhuǎn)接、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱二級(jí)種。3.3栽培種spawn由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，不可再次擴(kuò)大繁殖菌種，可直接用于栽培，也稱三級(jí)種、生產(chǎn)種。3.4高溫抑制線hightemperaturedline菌種在生產(chǎn)過(guò)程中受高溫和通氣不足的不良條件影響，培養(yǎng)物出現(xiàn)的圈狀發(fā)黃、發(fā)暗或菌絲變稀弱的現(xiàn)象。3.52DB36/T820—2023活力dynamism菌種的生長(zhǎng)能力，包括：菌種生長(zhǎng)適應(yīng)能力和抗逆能力。3.6角變sectoring因菌絲體局部變異或感染病毒而導(dǎo)致菌絲變細(xì)、生長(zhǎng)緩慢、菌絲體表面特征成角狀異常的現(xiàn)象。3.7脫壁debonding因生長(zhǎng)條件不適（包括菌齡過(guò)長(zhǎng)、培養(yǎng)基水分過(guò)低或其它原因）導(dǎo)致的培養(yǎng)料萎縮、脫水而脫離菌種容器壁的現(xiàn)象。3.8拮抗現(xiàn)象antagonism具有不同遺傳基因的菌落間產(chǎn)生不生長(zhǎng)區(qū)帶或形成不同形式線行邊緣的現(xiàn)象。3.9積水ponding因培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、生長(zhǎng)條件不適（包括培養(yǎng)料過(guò)濕）或生理原因引起的菌種在培養(yǎng)容器壁或底部產(chǎn)生液體的現(xiàn)象。3.10菌種退化spawndegradation菌種在傳代過(guò)程中，因遺傳物質(zhì)發(fā)生變異而引起的原有的優(yōu)良性狀消失或變壞，出現(xiàn)長(zhǎng)勢(shì)差、出菇遲、產(chǎn)量變低、質(zhì)量變差等現(xiàn)象。3.11鎖狀聯(lián)合clampconnection次生菌絲的雙核細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞分裂時(shí)，在兩個(gè)核之間處產(chǎn)生一個(gè)短小彎曲的分枝，一個(gè)核進(jìn)入彎枝，一個(gè)留在菌絲體內(nèi)，菌絲中二個(gè)核一個(gè)向前移，一個(gè)向后移，鉤狀突起向下彎曲并與細(xì)胞壁接觸融化，分枝基部產(chǎn)生分隔膜，在原分支處形成一隔膜，產(chǎn)生一個(gè)新細(xì)胞雙核體，在分隔處保留一個(gè)橋形結(jié)構(gòu)。3.12兩級(jí)抽樣two-stagesampling先從總體中隨機(jī)抽取一定數(shù)量的群，再?gòu)乃橹械娜褐须S機(jī)抽取樣本，整個(gè)抽樣過(guò)程稱為兩級(jí)抽樣。4質(zhì)量要求4.1母種3DB36/T820—20234.1.1容器規(guī)格容器規(guī)格應(yīng)符合NY/T528-2010中4.7.1.2規(guī)定。宜使用18mm×180mm、20mm×200mm等標(biāo)準(zhǔn)玻璃試管。4.1.2感官要求感官要求應(yīng)符合表1規(guī)定。表1茶樹(shù)菇母種感官要求試管總?cè)莘e的四分之一至三分之一無(wú)無(wú)無(wú)無(wú)4.1.3微生物學(xué)要求微生物學(xué)要求應(yīng)符合表2規(guī)定。表2茶樹(shù)菇母種微生物學(xué)要求有4.1.4菌絲生長(zhǎng)速度要求在23±2℃下，菌絲在PDA培養(yǎng)基上12d～14d長(zhǎng)滿斜面。4.2原種4.2.1容器規(guī)格容器規(guī)格應(yīng)符合NY/T528-2010中4.7.1.3規(guī)定。宜使用750mL（或850mL）標(biāo)準(zhǔn)菌種瓶。4.2.2感官要求4DB36/T820—2023感官要求符合表3規(guī)定。表3茶樹(shù)菇原種感官要求50mm±5mm無(wú)無(wú)無(wú)無(wú)4.2.3微生物學(xué)要求微生物學(xué)要求應(yīng)符合表4規(guī)定。表4茶樹(shù)菇原種微生物學(xué)指標(biāo)有4.2.4菌絲生長(zhǎng)速度在23±2℃下，菌絲35d～45d長(zhǎng)滿培養(yǎng)基。4.3栽培種4.3.1容器規(guī)格容器規(guī)格應(yīng)符合NY/T528-2010中4.7.1.4規(guī)定。宜使用(120mm～130mm)×280mm、150mm×300mm等折角聚丙烯菌種袋。4.3.2感官要求感官要求應(yīng)符合表5規(guī)定。5DB36/T820—2023表5茶樹(shù)菇栽培種感官要求無(wú)無(wú)無(wú)無(wú)4.3.3微生物學(xué)要求微生物學(xué)指標(biāo)應(yīng)符合表6的規(guī)定。表6茶樹(shù)菇栽培種微生物學(xué)指標(biāo)有4.3.4菌絲生長(zhǎng)速度在23℃±2℃下，菌絲35d～45d長(zhǎng)滿栽培種培養(yǎng)基。5試驗(yàn)方法5.1感官指標(biāo)容器、棉塞、無(wú)棉塑料蓋、培養(yǎng)物表面距瓶（袋）口的距離、菌絲生長(zhǎng)量、菌絲體特征、拮抗現(xiàn)象、原基發(fā)生情況、培養(yǎng)物表面顏色、培養(yǎng)物和菌絲脫壁情況通過(guò)肉眼觀察。5.2微生物學(xué)指標(biāo)5.2.1菌絲生長(zhǎng)狀態(tài)和鎖狀聯(lián)合用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行鏡檢，放大倍數(shù)不低于10×40的光學(xué)顯微鏡對(duì)培養(yǎng)物的水封片進(jìn)行觀察，每一檢樣應(yīng)觀察不少于50個(gè)視野。5.2.2霉菌取少量疑有霉菌污染的培養(yǎng)物，按無(wú)菌操作接種于PDA培養(yǎng)基中，25℃~28℃培養(yǎng)5d～7d，菌落出現(xiàn)白色以外的雜色者，或有異味者為霉菌污染物。6DB36/T820—20235.2.3螨蟲(chóng)仔細(xì)觀察菌種瓶壁或菌種袋壁的菌絲，可以發(fā)現(xiàn)菌絲被取食的痕跡。如有此跡象，又不能做出準(zhǔn)確的判斷，可以取若干菌種放在陽(yáng)光下直曬0.5h～1h，使菌種瓶或菌種袋內(nèi)溫度上升，如果菌種帶螨，螨蟲(chóng)會(huì)從培養(yǎng)料內(nèi)爬至菌種瓶壁或菌種袋壁,可準(zhǔn)確判定菌種帶螨，或目測(cè)后挑樣在顯微鏡下進(jìn)行觀察。5.2.4細(xì)菌取少量疑有細(xì)菌污染的培養(yǎng)物，按無(wú)菌操作接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)液中，25℃~28℃振蕩培養(yǎng)1d~2d，觀察培養(yǎng)液是否混濁。培養(yǎng)液混濁，為有細(xì)菌污染。培養(yǎng)液澄清，為無(wú)細(xì)菌污染。5.2.5其它微生物感官無(wú)法檢查時(shí)，若為不同菌株或不同品種的雜菌類(lèi)，應(yīng)做鏡檢和同工酶圖譜分析，必要時(shí)進(jìn)行染色體限制性片段多態(tài)性（基因圖譜）試驗(yàn)。5.3生長(zhǎng)速度5.3.1母種按資料性附錄A.1、A.2培養(yǎng)基配方任選其一配制培養(yǎng)基，在23℃±2℃培養(yǎng)，計(jì)算長(zhǎng)滿所需天數(shù)。5.3.2原種和栽培種按資料性附錄B.1、B.2、B.3、B.4、B.5培養(yǎng)基配方任選其一配制培養(yǎng)基，在23℃±2℃培養(yǎng)，計(jì)算長(zhǎng)滿所需天數(shù)。6檢驗(yàn)規(guī)則6.1抽樣抽樣應(yīng)按照《食用菌菌種管理辦法》進(jìn)行。母種按品種、培養(yǎng)條件、接種時(shí)間分批編號(hào)；原種、栽培種按菌種來(lái)源、制種方法和接種時(shí)間分批編號(hào)。母種、原種、栽培種按批次隨機(jī)抽樣，抽樣量分別為該批菌種量的5%、2%和1%，但每批抽樣數(shù)不能少于10支（瓶、袋），超過(guò)100支（瓶、袋）的可以進(jìn)行兩級(jí)抽樣。6.2判定規(guī)則按照第四章的要求進(jìn)行，檢驗(yàn)項(xiàng)目全部符合要求時(shí)，為合格菌種，其中任何一項(xiàng)不符合要求，均為不合格菌種。6.3留樣各級(jí)菌種都要留樣備查，留樣的數(shù)量應(yīng)保證每個(gè)批號(hào)菌種3～5支(袋、瓶)，于0℃~4℃下貯存，母種和原種留樣七個(gè)月，栽培種留樣五個(gè)月；在留樣保存期內(nèi)，不得動(dòng)用樣品。7包裝貯存7.1包裝7DB36/T820—20237.1.1包裝標(biāo)志應(yīng)注明產(chǎn)品名稱、數(shù)量、規(guī)格、包裝日期以及小心輕放、防濕、防曬、防潮、防壓等圖文標(biāo)志。7.1.2母種外包裝采用木盒或有足夠強(qiáng)度的紙材制作的紙箱，內(nèi)部用棉花、碎紙、報(bào)紙等具有緩沖作用的輕質(zhì)材料填充。7.1.3原種、栽培種外包裝采用木箱、塑料筐或有足夠強(qiáng)度的紙材制作的紙箱，菌種間用碎紙、報(bào)紙等具有緩沖作用的輕質(zhì)材料填滿。紙箱上部和底部用8cm寬的膠帶封口，并用打包帶捆扎兩道，箱內(nèi)附產(chǎn)品合格證書(shū)和使用說(shuō)明(包括菌種名稱、種性、培養(yǎng)基配方及適用范圍)。7.2貯存7.2.1母種在0℃~4℃保存，貯存期不超過(guò)90d。7.2.2原種菌絲長(zhǎng)滿后，若短期不用，應(yīng)置于陰涼干燥、通風(fēng)避光、清潔衛(wèi)生的室內(nèi)貯存。原種在0℃~10℃下貯存，貯存期不超過(guò)30d。7.2.3栽培種應(yīng)盡快使用，14d內(nèi)可在溫度不超過(guò)25℃、清潔、通風(fēng)、干燥(相對(duì)濕度50%～70%)避光的室內(nèi)存放。在4℃~6℃下貯存時(shí)，貯存期不超過(guò)35d。8DB36/T820—2023（資料性附錄）母種培養(yǎng)基及其配方A.1PDA培養(yǎng)基(馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基)馬鈴薯200g(用浸出汁)，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，pH值自然。A.2CPDA培養(yǎng)基(綜合馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基)馬鈴薯200g(用浸出汁)，葡萄糖20g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂0.5g，瓊脂20g，水1000mL，pH值9DB36/T820—2023（資料性附錄）原種和栽培種常用培養(yǎng)料配方B.1木屑培養(yǎng)基闊葉樹(shù)木屑78%、麩皮15%、玉米粉6%、石膏1%，含水量58%±2