2025年新高考生物一輪復(fù)習(xí)第10單元生物技術(shù)與工程第38講微生物的培養(yǎng)技術(shù)和應(yīng)用(練習(xí))(學(xué)生版+解析)

第38講微生物的培養(yǎng)技術(shù)和應(yīng)用目錄01模擬基礎(chǔ)練【題型一】微生物的實驗室培養(yǎng) 【題型二】分離特定微生物并測定其數(shù)量【題型三】微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用綜合02重難創(chuàng)新練03真題實戰(zhàn)練題型一微生物的實驗室培養(yǎng)1．為研究“使用公筷對餐后菜品細菌數(shù)量的影響”，某研究小組進行了如下實驗。相關(guān)操作或敘述正確的是（）

A．固體培養(yǎng)基X對菜品中的細菌有選擇性，屬于選擇培養(yǎng)基B．配制培養(yǎng)基X并在121℃、100kPa條件下處理15～30minC．在固體培養(yǎng)基X上可用平板劃線法或涂布法接種細菌D．根據(jù)菌落的特征可準(zhǔn)確判斷細菌的種類2．防止雜菌污染是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵。下列敘述錯誤的是（

）A．利用微生物能夠寄生于多種細菌體內(nèi)使細菌裂解，可實現(xiàn)生物消毒B．利用紫外線對超凈工作臺進行消毒前，噴灑消毒液可加強消毒效果C．利用干熱滅菌箱對培養(yǎng)基進行滅菌時，應(yīng)在160℃的熱空氣中維持2～3hD．利用酒精燈對金屬用具進行灼燒滅菌時，應(yīng)在酒精燈火焰充分燃燒層進行3．瘤胃是牛、羊等反芻動物具有的特殊的器官，其中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后會死亡。如圖表示從牛的瘤胃中分離和鑒定纖維素分解菌。下列敘述正確的是（）A．牛體內(nèi)提取的瘤胃液不能使用干熱滅菌，應(yīng)使用濕熱滅菌B．甲和乙應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．乙和丁的接種方法均可分離純化并進行計數(shù)D．實驗中培養(yǎng)基表面加入一層無菌石蠟?zāi)艽龠M目的菌生長4．研究員從檉柳根際土壤中篩選出了某種耐鹽堿促生菌，對其分別進行了耐鹽堿能力測試和對植物生長發(fā)育的影響實驗，發(fā)現(xiàn)該菌株不僅能在鹽濃度為0~160g/L、pH為7.0~11.0的條件下生長，還能顯著促進擬南芥、玉米在鹽堿脅迫下的生長發(fā)育。下列敘述錯誤的是（

）A．篩選該促生菌株需要用高鹽、堿性的選擇培養(yǎng)基B．該促生菌株耐鹽堿能力測試的試驗中自變量是鹽濃度C．篩選到的促生菌株可用稀釋涂布平板法進行純培養(yǎng)并計數(shù)D．該促生菌株可以作為研究鹽堿地專用微生物肥料的候選菌株題型二分離特定微生物并測定其數(shù)量5．內(nèi)生細菌是指一類存活于植物內(nèi)部而不使植物表現(xiàn)出明顯感染癥狀的微生物，某些內(nèi)生細菌不僅能起到生物防治作用，還能減少農(nóng)藥濫用對環(huán)境的污染，在生產(chǎn)實際中有很大的應(yīng)用價值。下列有關(guān)分離純化內(nèi)生細菌的說法正確的是（）A．要分離出植物的內(nèi)生細菌，需對植物材料進行滅菌處理B．利用平板劃線法可以對內(nèi)生細菌進行分離、純化和計數(shù)C．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中能提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨、瓊脂D．實驗中通常需要設(shè)置一組空白培養(yǎng)基一起培養(yǎng)，以檢驗培養(yǎng)基滅菌是否徹底6．某科研團隊在熱帶雨林土壤中分離獲得了高效分解纖維素的細菌，為探究影響其纖維素酶活性的條件，設(shè)計了如表所示的實驗。下列敘述錯誤的是（）試管底物和試劑實驗條件1纖維素+2mL纖維素酶溶液30℃水??；pH=72纖維素+2mL纖維素酶溶液①______；pH=33纖維素+2mL纖維素酶溶液0℃水浴；pH=②______A．若試管1和試管2形成對比實驗，則①為30℃水浴處理B．實驗結(jié)束時，試管1中的纖維素含量可能最低C．試管3中纖維素酶的空間結(jié)構(gòu)在低溫條件下遭到破壞D．可增加設(shè)置其他溫度和pH的試管以完善該實驗7．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細菌并進行計數(shù)，過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．①～⑤系列的操作稱為梯度稀釋，②～⑤應(yīng)加10mL無菌水B．接種培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基C．圖示所用培養(yǎng)基需先用干熱滅菌法進行滅菌后，再調(diào)節(jié)PHD．若接種的三個平板平均菌落數(shù)為62個，則1g土樣中約有菌落6.2×107個8．牛和山羊等反芻動物具有特殊的器官-瘤胃。瘤胃中生活著多種微生物，其中有許多細菌能分解尿素。為了獲得能高效分解尿素的細菌，科研人員利用瘤胃內(nèi)容物進行了如圖所示的實驗。下列說法正確的是（

）A．該過程中所用的試劑和器具都要進行高壓蒸汽滅菌B．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基在有氧條件下能分離瘤胃中的尿素分解菌C．③過程應(yīng)選擇殘余尿素濃度最低的培養(yǎng)瓶中微生物進一步接種D．過程④的結(jié)果是由于菌液稀釋濃度太低導(dǎo)致的題型三微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用綜合9．研究人員為探究大蒜汁對4種微生物的抑菌效果。將不同濃度的大蒜汁裝入無菌牛津杯，放在培養(yǎng)基表面，使其與培養(yǎng)基充分接觸。同時用無菌水做對照實驗。再將培養(yǎng)皿放入適宜的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，收集到實驗結(jié)果，如圖所示。據(jù)圖分析下列錯誤的是（）A．不同濃度的大蒜汁對大腸桿菌的抑制效果最強B．實驗證明，大蒜汁對細菌的抑菌效果更顯著C．大蒜汁的濃度越高，對4種微生物的抑菌效果越好D．抑菌圈邊緣的菌落對大蒜汁敏感，所以選擇抑菌圈邊緣的菌落進行擴增培養(yǎng)10．牛津杯法可測定發(fā)酵液中抗生素的含量，具體做法是：在培養(yǎng)皿中倒入不含任何營養(yǎng)物質(zhì)的瓊脂凝固成底層平板，同時將牛津杯豎直立在將要凝固的底層平板上；再將含少量瓊脂的培養(yǎng)基熔化并冷卻后加入敏感指示菌，混勻后倒入底層平板上形成雙層平板，后取出牛津杯，形成小孔。向A、B、C小孔中分別加入濃度不同且已知的抗生素，在小孔D、E、F中加入等量的發(fā)酵液，培養(yǎng)一段時間后，測量小孔周圍抑菌圈的大小。下列說法錯誤的是（）

A．雙層培養(yǎng)基滅菌均可以用濕熱滅菌法，培養(yǎng)皿滅菌可以用干熱滅菌法B．底層培養(yǎng)基可以彌補培養(yǎng)皿底部或超凈工作臺不平，利于后續(xù)實驗觀察C．倒入上層平板后，需使用滅菌后的涂布器將敏感指示菌均勻地涂布在培養(yǎng)基表面D．通過比較D、E、F和A、B、C周圍抑菌圈的大小可以比較發(fā)酵液中抗生素的濃度11．合理使用消毒液有助于減少傳染病的傳播。某同學(xué)比較了3款消毒液A、B、C殺滅大腸桿菌的效果，結(jié)果如圖所示。下列敘述錯誤的是（

）A．大腸桿菌在伊紅-亞甲藍培養(yǎng)基上生長的菌落呈藍色B．據(jù)該實驗結(jié)果可知，殺菌效果最好的消毒液是AC．可采用顯微鏡直接計數(shù)法或菌落計數(shù)法測定樣品的大腸桿菌數(shù)量D．實驗中用到的吸管、培養(yǎng)皿和金屬用具可采用于熱滅菌法12．黃瓜枯萎病是由尖鐮孢菌引起的。研究表明，芽孢桿菌能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶等物質(zhì)分解尖鐮孢菌的細包壁而被廣泛用于黃瓜枯萎病的防治。實驗室對抑菌率在69%以上的3株芽孢桿菌進行復(fù)篩，結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的是（）

N1、N2和N3菌株（四周）對尖鐮孢菌（中心）的抑制效果模式圖A．該實驗的對照組設(shè)置是平板上只接種芽孢桿菌B．實驗結(jié)果表明N2菌株抑制尖鐮孢菌的效果最好C．挑選出抑制效果最強的菌株后，需要對其進行純化培養(yǎng)D．利用尖鐮孢菌發(fā)酵生產(chǎn)幾丁質(zhì)酶等物質(zhì)，可用于防治枯萎病一、單選題1．灰霉病是由灰葡萄孢（一種真菌）引起的農(nóng)作物病害。為了綠色、高效地防治灰霉病，研究人員從灰霉病多發(fā)的大棚土壤中取樣、分離出多種單菌落并進行擴大培養(yǎng)，隨后將各組微生物的無菌發(fā)酵濾液與未凝固的普通培養(yǎng)基混合后倒平板，冷卻后在平板中央接種灰葡萄孢，通過比較灰葡萄孢菌絲生長情況，從而篩選出高效的灰葡萄孢拮抗菌。下列敘述，錯誤的是（

）A．在灰霉病多發(fā)的大棚土壤取樣，比普通土壤更有可能獲得灰葡萄孢拮抗菌B．取無菌發(fā)酵濾液的目的是用拮抗菌的代謝產(chǎn)物對灰葡萄孢產(chǎn)生抑制作用C．為篩選出高效拮抗菌，只需在普通培養(yǎng)基接種等量灰葡萄孢作為對照D．灰葡萄孢菌絲生長最緩慢、稀疏的組別對應(yīng)的微生物可能為最高效拮抗菌2．某同學(xué)欲檢測消毒餐具中大腸桿菌的數(shù)量是否超標(biāo)，進行如下操作：用蒸餾水分3～5次沖洗待檢餐具內(nèi)表面，制成待測樣液備用；配制伊紅一亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基，將待測樣液接種于瓊脂培養(yǎng)基上。下列敘述錯誤的是（

）A．為了確保檢測的準(zhǔn)確性，沖洗待檢餐具的蒸餾水應(yīng)該換成無菌水B．生長在伊紅一亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落具有金屬光澤C．設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照可檢驗該鑒別培養(yǎng)基的效果D．為便于觀察菌落的顏色，應(yīng)將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性3．采用巴氏消毒法進行殺菌處理的牛奶通常被稱為“巴氏殺菌乳”，某款牛奶的產(chǎn)品介紹如圖所示。根據(jù)圖上信息，下列敘述正確的是（

）A．如果盒裝牛奶出現(xiàn)鼓包，很可能是乳酸菌污染導(dǎo)致B．巴氏消毒可以破壞微生物的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，使其失去活性C．巴氏消毒的優(yōu)點是既能殺死所有微生物，又不破壞牛奶的成分D．鮮牛奶應(yīng)保存在2~6℃條件下，因為在這個區(qū)間的溫度能夠殺死微生物4．木質(zhì)素一種大量存在于秸稈中的含碳有機物。木質(zhì)素降解菌分泌的漆酶不僅能降解木質(zhì)素，還可催化藍色物質(zhì)苯胺藍分解成H2O和CO2。研究人員利用苯胺藍培養(yǎng)基篩選高效降解木質(zhì)素的菌株。下列敘述錯誤的是（

）A．從秸稈還田的土壤中取樣并加入無菌水制備菌懸液B．使用涂布器將稀釋的菌液接種至苯胺藍培養(yǎng)基C．挑選周圍出現(xiàn)較大藍色環(huán)帶的菌落進行后續(xù)實驗D．產(chǎn)漆酶菌能在以木質(zhì)素為唯一碳源的培養(yǎng)基生長5．耐高溫纖維素酶可以加速催化纖維素的水解。某研究小組將纖維素分解菌進行誘變和高溫處理獲得新菌株甲，制作出菌株甲培養(yǎng)基的濾液，進行了下列實驗：步驟試管A試管B1加入用2mL緩沖液配制的菌株甲濾液加入2mL緩沖液2在①條件下水浴保溫30min3加入適量的纖維素液，80℃水浴保溫10min4加入適量的斐林試劑，②，觀察溶液顏色下列分析錯誤的是（）A．該實驗?zāi)芴骄烤昙追置诘睦w維素酶能否耐受80℃高溫B．表格中，①處應(yīng)該為80℃，②處可為60℃水浴加熱約2minC．若步驟4中試管A、B溶液顏色分別為磚紅色、藍色，則該酶能耐受80℃高溫D．纖維素酶在80℃下保存，有利于保持酶的活性和結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性6．廢紙主要成分是木質(zhì)纖維，利用發(fā)酵工程可將活動產(chǎn)生的大量廢紙轉(zhuǎn)化為新的資源——燃料乙醇，如圖是利用微生物由纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程，下列說法正確的是（

）A．從土壤中篩選①中的目的微生物時，培養(yǎng)基需添加牛肉膏、葡萄糖等有機物B．沒有接種微生物的培養(yǎng)基上未長出菌落，則說明選擇培養(yǎng)基有選擇作用C．可通過分解纖維素得到的葡萄糖含量判斷②獲得的酶液活性D．滿足④的常見微生物為醋酸菌，應(yīng)保證⑤發(fā)酵罐裝置密閉而產(chǎn)生乙醇7．科研人員計劃從含多種微生物的白酒大曲中分離篩選出能分泌酯化酶的菌株，并用于白酒釀造。白酒大曲中產(chǎn)酯化酶微生物初步篩選時所用培養(yǎng)基成分與操作步驟如下表所示。下列敘述錯誤的是（

）培養(yǎng)基成分牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、聚乙烯醇溶液、三丁酸甘油酯、水等。（其中聚乙烯醇溶液和三丁酸甘油酯會使培養(yǎng)基呈現(xiàn)乳白色，酯化酶可催化乳白色的物質(zhì)反應(yīng)，產(chǎn)生透明物質(zhì)）操作步驟將白酒大曲塊粉碎制成菌懸液→利用①（接種方法）接種后培養(yǎng)→將周邊出現(xiàn)②的菌落挑出→重新劃線接種至分離純化平板培養(yǎng)基上→多次重復(fù)純化至得到不同形態(tài)的單菌落→4℃冰箱保存。A．表中所示培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨可為微生物生長提供氮源B．篩選產(chǎn)酯化酶的霉菌時，應(yīng)將培養(yǎng)基在滅菌前調(diào)至中性或弱堿性C．表中①可代表稀釋涂布平板法，②處應(yīng)填透明圈D．通過劃線操作可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面8．為高效降解農(nóng)業(yè)秸稈廢棄物，研究人員從土壤中篩選纖維素分解菌并計數(shù)，部分操作流程如圖。下列敘述正確的是（

）

①土壤取樣時，應(yīng)做到隨機取樣②富集培養(yǎng)可采用液體培養(yǎng)基，可充分利用其中的營養(yǎng)物質(zhì)③選擇培養(yǎng)的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源④進行系列梯度稀釋的目的是便于涂布平板后得到單菌落⑤涂布平板時，將接種環(huán)從酒精中取出后，應(yīng)放在火焰上灼燒防止污染⑥菌落計數(shù)時，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際數(shù)目少A．①②③④ B．①③④⑥C．②③④⑥ D．②③④⑤9．下圖是實驗人員利用“影印法”初檢氨基酸S缺陷型菌株的過程，影印法培養(yǎng)微生物可以保證不同培養(yǎng)基中的同種菌株有相同接種位置。結(jié)合圖示分析，下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．對菌液進行誘變處理，可使菌種定向變異為氨基酸S缺陷型B．圖示的基本培養(yǎng)基既屬于鑒別培養(yǎng)基，也屬于選擇培養(yǎng)基C．進行過程②的操作時，應(yīng)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上D．圖示菌落B中有氨基酸S缺陷型菌，菌落A能合成氨基酸S10．野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基上生長，經(jīng)誘變獲得了兩種營養(yǎng)缺陷型的突變體M、N，且單獨培養(yǎng)時均不能在基本培養(yǎng)基上生長。若將兩種突變體在完全培養(yǎng)基（液體）中混合培養(yǎng)一段時間后，再采用稀釋涂布平板法接種在基本培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)后長出了大腸桿菌菌落。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．野生型大腸桿菌誘變時發(fā)生了生態(tài)突變或染色體變異B．突變體M和N能相互為對方提供所缺營養(yǎng)物質(zhì)C．在混合培養(yǎng)期間突變體M和N發(fā)生了遺傳物質(zhì)的交流D．混合培養(yǎng)獲得的大腸桿菌都能在基本培養(yǎng)基中生長二、多選題11．植酸酶能催化分解植酸磷，從而提高植物性物料中磷的利用率。科研人員從土壤中分離出5種能夠產(chǎn)生植酸酶的細菌菌株，分別為a、b、c、d和e。植酸磷被分解后培養(yǎng)基上會出現(xiàn)透明圈，分離的操作過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（

）

A．可用干熱滅菌法對土壤樣品進行滅菌B．該實驗采用了平板劃線法進行接種和計數(shù)C．經(jīng)過圖示的操作，土壤樣品被稀釋了10?倍D．e細菌植酸酶的活性比a細菌植酸酶的高12．為證明青霉素在某種細菌產(chǎn)生抗藥性過程中所起的作用是選擇而非誘變，實驗方案如圖所示。圖中③平板影印是指用無菌絨布輕蓋在已長好菌落的原培養(yǎng)基上，然后不轉(zhuǎn)動任何角度，“復(fù)印”至新的培養(yǎng)基上進行接種的方法。下列敘述正確的是（

）A．進行擴大培養(yǎng)的培養(yǎng)基配制過程不添加瓊脂，但需進行干熱滅菌B．②過程接種方法為稀釋涂布平板法，此法可用于微生物的分離和計數(shù)C．B組培養(yǎng)基中應(yīng)添加青霉素，且培養(yǎng)過程中應(yīng)進行倒置培養(yǎng)D．該實驗結(jié)果說明青霉素起到了選擇作用13．在一系列微生物的作用下，黑茶（中國邊疆游牧民族的主要飲品）會產(chǎn)生一種對人體非常有益的金黃色顆?！敖鸹ā?。研究人員對“金花”中的微生物進行了分離和鑒定，過程如圖。下列說法正確的是（

）

A．向“金花”樣品中加入蒸餾水制成樣品懸液B．稀釋涂布平板法用于微生物的分離計數(shù)，統(tǒng)計結(jié)果可能比實際值偏小C．涂布平板上長出的菌落可通過劃線進一步純化D．可通過生態(tài)組測序?qū)N進行準(zhǔn)確鑒定14．袋裝酸奶的包裝上通常都會注明“脹袋勿食”。某同學(xué)選擇一袋過期的脹袋密封酸奶，按圖中的操作流程進行實驗，研究其中某微生物的生長情況。下列有關(guān)敘述不正確的是（

）A．酸奶“脹袋”可能是由于混入了醋酸菌等厭氧菌B．培養(yǎng)皿中倒入培養(yǎng)基后要保證一直水平正放C．可通過觀察固體培養(yǎng)基上生長的菌落的形狀、大小和顏色等特征初步鑒定菌種D．若3個平板的平均菌落數(shù)是180個，則1mL酸奶中某微生物數(shù)目為9×105個15．某小組用傳統(tǒng)醬油為樣品，使用了兩個不同的接種方法練習(xí)菌落數(shù)目統(tǒng)計，方法1是將菌液和培養(yǎng)基一起倒入平板中混合均勻，方法2為稀釋涂布平板法，部分實驗流程如下圖，兩種方法計數(shù)結(jié)果如下表，下列有關(guān)說法正確的是（

）培養(yǎng)時間/h244872方法1平板上平均菌落數(shù)479292方法2平板上平均菌落數(shù)170190190A．實驗中，平板上生出的菌落都屬于同一種微生物B．方法1菌落數(shù)較少的原因之一可能是部分不耐熱菌死亡C．根據(jù)方法2菌落數(shù)可推算樣品中微生物密度為1.9×106個/mlD．根據(jù)實驗結(jié)果可得知，該品種醬油微生物嚴(yán)重超標(biāo)，不可食用三、非選擇題16．有機農(nóng)藥苯磺隆是一種強效除草劑，長期使用會嚴(yán)重污染環(huán)境；研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某種微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示，請回答相關(guān)問題：(1)微生物的培養(yǎng)基一般都應(yīng)該含有的成分有水、無機鹽和四類，此外，培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對pH、以及氧氣的要求。土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱，為了獲取能降解苯磺隆的菌種，選擇的土壤樣品應(yīng)來自。(2)圖甲中選擇培養(yǎng)的目的是；在劃線純化操作時，劃線工具使用前后都要進行滅菌。(3)若要檢測土樣中的細菌含量，應(yīng)采用法進行接種。運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往比實際值偏小，原因是。(4)為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液作圖乙所示實驗，該實驗設(shè)計不合理之處是因為。17．一次性口罩主要成分是由C、H兩種元素組成的聚丙烯纖維。研究人員欲從合適的土壤樣品中篩選出能高效降解一次性口罩的細菌，設(shè)計了如圖1所示的流程。請回答下列問題：(1)圖1中“甲”指的是，目的是提高聚丙烯纖維降解菌的比例和密度，此過程使用的培養(yǎng)基中應(yīng)以（填化合物名稱）為唯一碳源，為增大菌體與培養(yǎng)基的接觸面積，從物理性質(zhì)看，該培養(yǎng)基應(yīng)是。(2)將分離純化得到的不同菌種分別接種到鑒別培養(yǎng)基上，鑒別培養(yǎng)基中加入了能與聚丙烯纖維結(jié)合的顯色染色劑。設(shè)不同菌種的菌落面積為s，菌落周圍透明圈的面積為S，選擇S/s的比值的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。(3)欲估算某土壤樣品中有多少能高效降解一次性口罩的目的菌，接種平板時應(yīng)用法。根據(jù)圖2操作能計算出1g該土壤中約有個高效降解一次性口罩的目的菌。18．磷是植物生長的重要元素，施入土中的磷大多數(shù)與Ca2+等離子結(jié)合形成難溶性磷酸鹽?？蒲腥藛T從貢柑果園土中選出可以將難溶性或不溶性磷轉(zhuǎn)化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程見下圖，請回答下列問題：(1)經(jīng)步驟③最后一次稀釋之后若在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，得到的結(jié)果是：39、38、37，則每克土樣中的活菌數(shù)為個。運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往比實際值，原因是。(2)步驟④中待菌落長好后挑出溶磷圈直徑（D）與菌落直徑（d）比值較的菌落。通常情況下，對獲得的純菌種可以依據(jù)對細菌進行初步的鑒定和分類。(3)常采用法對高效解磷菌進行分離和計數(shù)，要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用，需要設(shè)置作為對照。(4)為進一步測定初步篩選的三種菌株實際溶解磷的能力，研究人員將它們接種到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，并在37℃、200r·min-1搖床培養(yǎng)，定期取上清液，測定溶液中可溶性磷含量，得到曲線：用搖床進行培養(yǎng)的好處是（寫出兩點）。結(jié)果表明最優(yōu)良的解磷菌株是。(5)純化菌種時，也可按下圖所示接種方法，接種環(huán)需要灼燒次。一、單選題1．（2024·海南·高考真題）某小組為檢測1株粗糙脈孢霉突變株的氨基酸缺陷類型，在相同培養(yǎng)溫度和時間的條件下進行實驗，結(jié)果見表。下列有關(guān)敘述錯誤的是（

）組別培養(yǎng)條件實驗結(jié)果①基礎(chǔ)培養(yǎng)基無法生長②基礎(chǔ)培養(yǎng)基-甲、乙、丙3種氨基酸正常生長③基礎(chǔ)培養(yǎng)基-甲、乙2種氨基酸無法生長④基礎(chǔ)培養(yǎng)基+甲、丙2種氨基酸正常生長⑤基礎(chǔ)培養(yǎng)基+乙、丙2種氨基酸正常生長A．組別①是②③④⑤的對照組B．培養(yǎng)溫度和時間屬于無關(guān)變量C．①②結(jié)果表明，甲、乙、丙3種氨基酸中有該突變株正常生長所必需的氨基酸D．①~⑤結(jié)果表明，該突變株為氨基酸甲缺陷型2．（2024·江西·高考真題）井岡霉素是我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的一種氨基寡糖類抗生素，它由吸水鏈霉菌井岡變種（JGs，一種放線菌，菌體呈絲狀生長）發(fā)酵而來，在水稻病害防治等領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。下列關(guān)于JGs發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素的敘述，正確的是（

）A．JGs可發(fā)酵生產(chǎn)井岡霉素，因為它含有能夠編碼井岡霉素的生態(tài)B．JGs接入發(fā)酵罐前需要擴大培養(yǎng)，該過程不影響井岡霉素的產(chǎn)量C．提高JGs發(fā)酵培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，會提高井岡霉素的產(chǎn)量D．稀釋涂布平板法不宜用于監(jiān)控JGs發(fā)酵過程中活細包數(shù)量的變化3．（2024·湖南·高考真題）微生物平板劃線和培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正確的是（）

A．①②⑤⑥ B．③④⑥⑦ C．①②⑦⑧ D．①③④⑤4．（2024·山東·高考真題）酵母菌在合成色氨酸時需要3種酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分別為相應(yīng)酶的編碼生態(tài)突變的色氨酸依賴型突變體。已知3種酶均不能進出細包，而色氨酸合成途徑的中間產(chǎn)物積累D．c點時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基二、多選題9．（2024·吉林·高考真題）某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病，其篩選流程及抗性檢測如圖。下列操作正確的是（

）A．在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi)，從感病植株上采集樣品B．將采集的樣品充分消毒后，用蒸餾水沖洗，收集沖洗液進行無菌檢測C．將無菌檢測合格的樣品研磨，經(jīng)稀釋涂布平板法分離得到內(nèi)生菌的單菌落D．判斷內(nèi)生菌的抗性效果需比較有無接種內(nèi)生菌的平板上的病原菌菌斑大小三、非選擇題10．（2024·江西·高考真題）聚對苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一種聚酯塑料，會造成環(huán)境污染。磷脂酶可催化PET降解。為獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物，研究人員試驗了2種方法?；卮鹣铝袉栴}：(1)方法1從土壤等環(huán)境樣品中篩選高產(chǎn)磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯（一種磷脂類物質(zhì)）為唯一碳源制備培養(yǎng)基，可提高該方法的篩選效率。除碳源外，該培養(yǎng)基中至少還應(yīng)該有、、等營養(yǎng)物質(zhì)。(2)方法2采用技術(shù)定向改造現(xiàn)有微生物，以獲得高產(chǎn)磷脂酶的微生物。除了編碼磷脂酶的生態(tài)外，該技術(shù)還需要、、等“分子工具”。(3)除了上述2種方法之外，還可以通過技術(shù)非定向改造現(xiàn)有微生物，篩選獲得能夠高產(chǎn)磷脂酶的微生物。(4)將以上獲得的微生物接種到鑒別培養(yǎng)基（在牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中添加2%的瓊脂粉和適量的卵黃磷脂）平板上培養(yǎng)，可以通過觀察卵黃磷脂水解圈的大小，初步判斷微生物產(chǎn)磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作為判斷微生物產(chǎn)磷脂酶能力的唯一依據(jù)。從平板制作的角度分析，其原因可能是。11．（2024·寧夏四川·高考真題）合理使用消毒液有助于減少傳染病的傳播。某同學(xué)比較了3款消毒液A、B、C殺滅細菌的效果，結(jié)果如圖所示。回答下列問題。(1)該同學(xué)采用顯微鏡直接計數(shù)法和菌落計數(shù)法分別測定同一樣品的細菌數(shù)量，發(fā)現(xiàn)測得的細菌數(shù)量前者大于后者，其原因是。(2)該同學(xué)從100mL細菌原液中取1mL加入無菌水中得到10mL稀釋菌液，再從稀釋菌液中取200μL涂布平板，菌落計數(shù)的結(jié)果為100，據(jù)此推算細菌原液中細菌濃度為個/mL。(3)菌落計數(shù)過程中，涂布器應(yīng)先在酒精燈上灼燒，冷卻后再涂布。灼燒的目的是，冷卻的目的是。(4)據(jù)圖可知殺菌效果最好的消毒液是，判斷依據(jù)是。（答出兩點即可）(5)鑒別培養(yǎng)基可用于反映消毒液殺滅大腸桿菌的效果。大腸桿菌在伊紅美藍培養(yǎng)基上生長的菌落呈色。12．（2023·北京·高考真題）自然界中不同微生物之間存在著復(fù)雜的相互作用。有些細菌具有溶菌特性，能夠破壞其他細菌的結(jié)構(gòu)使細包內(nèi)容物釋出?？茖W(xué)家試圖從某湖泊水樣中分離出有溶菌特性的細菌。(1)用于分離細菌的固體培養(yǎng)基包含水、葡萄糖、蛋白胨和瓊脂等成分，其中蛋白胨主要為細菌提供和維生素等。(2)A菌通常被用做溶菌對象。研究者將含有一定濃度A菌的少量培養(yǎng)基傾倒在固體培養(yǎng)平板上，凝固形成薄層。培養(yǎng)一段時間后，薄層變渾濁（如圖），表明。(3)為分離出具有溶菌作用的細菌，需要合適的菌落密度，因此應(yīng)將含菌量較高的湖泊水樣后，依次分別涂布于不同的渾濁薄層上。培養(yǎng)一段時間后，能溶解A菌的菌落周圍會出現(xiàn)。采用這種方法，研究者分離、培養(yǎng)并鑒定出P菌。(4)為探究P菌溶解破壞A菌的方式，請?zhí)岢鲆粋€假設(shè)，該假設(shè)能用以下材料和設(shè)備加以驗證（主要實驗材料和設(shè)備：P菌、A菌、培養(yǎng)基、圓形濾紙小片、離心機和細菌培養(yǎng)箱）。第38講微生物的培養(yǎng)技術(shù)和應(yīng)用目錄01模擬基礎(chǔ)練【題型一】微生物的實驗室培養(yǎng) 【題型二】分離特定微生物并測定其數(shù)量【題型三】微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用綜合02重難創(chuàng)新練03真題實戰(zhàn)練題型一微生物的實驗室培養(yǎng)1．為研究“使用公筷對餐后菜品細菌數(shù)量的影響”，某研究小組進行了如下實驗。相關(guān)操作或敘述正確的是（）

A．固體培養(yǎng)基X對菜品中的細菌有選擇性，屬于選擇培養(yǎng)基B．配制培養(yǎng)基X并在121℃、100kPa條件下處理15～30minC．在固體培養(yǎng)基X上可用平板劃線法或涂布法接種細菌D．根據(jù)菌落的特征可準(zhǔn)確判斷細菌的種類【答案】B【分析】培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。無菌技術(shù)是獲得純微生物培養(yǎng)物的前提。【詳解】A、實驗?zāi)康氖茄芯俊笆褂霉陮Σ秃蟛似芳毦鷶?shù)量的影響”，固體培養(yǎng)基X沒有做任何處理，不屬于選擇培養(yǎng)基，所以對菜品中的細菌沒有選擇性，A正確；B、為了排除微生物污染，對配制的培養(yǎng)基X需要采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，即在121℃、100kPa條件下處理15～30min，B正確；C、據(jù)題意可知，在固體培養(yǎng)基X上接種后，還需要對微生物進行計數(shù)，因此接種細菌，只能用涂布法，不能用平板劃線法，C錯誤；D、在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征，可以初步區(qū)分出不同種微生物，但不能準(zhǔn)確判斷，D錯誤。故選B。2．防止雜菌污染是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵。下列敘述錯誤的是（

）A．利用微生物能夠寄生于多種細菌體內(nèi)使細菌裂解，可實現(xiàn)生物消毒B．利用紫外線對超凈工作臺進行消毒前，噴灑消毒液可加強消毒效果C．利用干熱滅菌箱對培養(yǎng)基進行滅菌時，應(yīng)在160℃的熱空氣中維持2～3hD．利用酒精燈對金屬用具進行灼燒滅菌時，應(yīng)在酒精燈火焰充分燃燒層進行【答案】B【分析】獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。無菌技術(shù)主要包括消毒和滅菌，常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法等；滅菌的方法有濕熱滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌等。【詳解】A、有的微生物能夠寄生于多種細菌體內(nèi)使細菌裂解，因此可以使用這些微生物進行生物消毒，如凈化污水、污泥，A正確；B、用紫外線照射30min，可以殺死物體表面或空氣中的微生物，在照射前，適量噴灑石炭酸等消毒液，可以加強消毒效果，B正確；C、培養(yǎng)基應(yīng)該用高壓蒸汽滅菌，C錯誤；D、接種環(huán)等金屬用具一般用灼燒滅菌，即直接在酒精燈火焰充分燃燒層灼燒滅菌，D錯誤。故選B。3．瘤胃是牛、羊等反芻動物具有的特殊的器官，其中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后會死亡。如圖表示從牛的瘤胃中分離和鑒定纖維素分解菌。下列敘述正確的是（）A．牛體內(nèi)提取的瘤胃液不能使用干熱滅菌，應(yīng)使用濕熱滅菌B．甲和乙應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．乙和丁的接種方法均可分離純化并進行計數(shù)D．實驗中培養(yǎng)基表面加入一層無菌石蠟?zāi)艽龠M目的菌生長【答案】A【分析】剛果紅可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但與纖維二糖和葡萄糖無法發(fā)生這種反應(yīng)。在含有纖維素的培養(yǎng)基中添加剛果紅，剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素分解菌分解后，復(fù)合物無法形成，培養(yǎng)基中就會出現(xiàn)以這些菌為中心的透明圈?！驹斀狻緼、從牛體內(nèi)提取的瘤胃液不能滅菌，否則不能分離出目標(biāo)微生物，A正確；B、蛋白胨為微生物生長提供的主要營養(yǎng)是碳源、氮源和維生素等，甲和乙的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源培養(yǎng)目的菌，B錯誤；C、乙和丁的接種方法分別是平板劃線法和涂布平板法，平板劃線法不能用于計數(shù)，C錯誤；D、由于瘤胃液中微生物多為厭氧菌，培養(yǎng)基表面加入一層無菌石蠟?zāi)艽龠M目的菌生長，D錯誤。故選A。4．研究員從檉柳根際土壤中篩選出了某種耐鹽堿促生菌，對其分別進行了耐鹽堿能力測試和對植物生長發(fā)育的影響實驗，發(fā)現(xiàn)該菌株不僅能在鹽濃度為0~160g/L、pH為7.0~11.0的條件下生長，還能顯著促進擬南芥、玉米在鹽堿脅迫下的生長發(fā)育。下列敘述錯誤的是（

）A．篩選該促生菌株需要用高鹽、堿性的選擇培養(yǎng)基B．該促生菌株耐鹽堿能力測試的試驗中自變量是鹽濃度C．篩選到的促生菌株可用稀釋涂布平板法進行純培養(yǎng)并計數(shù)D．該促生菌株可以作為研究鹽堿地專用微生物肥料的候選菌株【答案】B【分析】微生物的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法?！驹斀狻緼、促生菌具有耐鹽堿性，故需要用高鹽、堿性的選擇培養(yǎng)基來篩選該菌株，A正確；B、該促生菌株耐鹽堿能力測試的試驗中自變量是鹽濃度和pH值，B錯誤；C、稀釋涂布平板法的原理是在足夠稀釋度下將樣液均勻涂布得到單個獨立的菌落，故該方法可以用于純培養(yǎng)，同時一個菌落是由一個活菌繁殖而來，該方法還可以用于計數(shù)，C正確；D、促生菌具有耐鹽堿性，該促生菌株可以作為研究鹽堿地專用微生物肥料的候選菌株，D錯誤。故選B。題型二分離特定微生物并測定其數(shù)量5．內(nèi)生細菌是指一類存活于植物內(nèi)部而不使植物表現(xiàn)出明顯感染癥狀的微生物，某些內(nèi)生細菌不僅能起到生物防治作用，還能減少農(nóng)藥濫用對環(huán)境的污染，在生產(chǎn)實際中有很大的應(yīng)用價值。下列有關(guān)分離純化內(nèi)生細菌的說法正確的是（）A．要分離出植物的內(nèi)生細菌，需對植物材料進行滅菌處理B．利用平板劃線法可以對內(nèi)生細菌進行分離、純化和計數(shù)C．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中能提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨、瓊脂D．實驗中通常需要設(shè)置一組空白培養(yǎng)基一起培養(yǎng)，以檢驗培養(yǎng)基滅菌是否徹底【答案】A【分析】1、培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)；2、按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長，促進所需要的微生物的生長；3、消毒和滅菌是兩個不同的概念，消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物的方法殺死物體表面或內(nèi)部的一部分微生物。滅菌則是指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。【詳解】A、需要從植物材料中分離目的菌株，不能對植物材料滅菌處理，A正確；B、利用稀釋涂布平板法可以對內(nèi)生細菌進行分離、純化和計數(shù)，平板劃線不能計數(shù)，B錯誤；C、用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)細菌時，牛肉膏和蛋白胨富含蛋白質(zhì)，可以提供氮源，但瓊脂是凝固劑，不能提供氮源，C錯誤；D、實驗中通常需要設(shè)置一組空白培養(yǎng)基一起培養(yǎng)，如果該平板出現(xiàn)菌落則說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，該平板未出現(xiàn)菌落說明培養(yǎng)基滅菌比較徹底，D錯誤。故選A。6．某科研團隊在熱帶雨林土壤中分離獲得了高效分解纖維素的細菌，為探究影響其纖維素酶活性的條件，設(shè)計了如表所示的實驗。下列敘述錯誤的是（）試管底物和試劑實驗條件1纖維素+2mL纖維素酶溶液30℃水?。籶H=72纖維素+2mL纖維素酶溶液①______；pH=33纖維素+2mL纖維素酶溶液0℃水?。籶H=②______A．若試管1和試管2形成對比實驗，則①為30℃水浴處理B．實驗結(jié)束時，試管1中的纖維素含量可能最低C．試管3中纖維素酶的空間結(jié)構(gòu)在低溫條件下遭到破壞D．可增加設(shè)置其他溫度和pH的試管以完善該實驗【答案】B【分析】溫度過高，會使酶的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞，使酶永久失活；而在低溫下，酶的活性明顯降低，但酶的空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，在適宜的溫度下酶的活性可以升高?！驹斀狻緼、若試管1和試管2形成對比實驗，溫度是無關(guān)變量，應(yīng)保證相同且適宜，則①為30℃水浴處理，A正確；B、試管①條件最接近熱帶雨林的土壤，實驗結(jié)束時，試管①中的纖維素含量可能最低，B正確；C、酶絕大多數(shù)是蛋白質(zhì)，少數(shù)是RNA，低溫不會破壞纖維素酶的空間結(jié)構(gòu)，C錯誤；D、本實驗溫度梯度和酸堿度梯度設(shè)置都比較大，所以可增加設(shè)置其他溫度和pH的試管以完善該實驗，D錯誤。故選B。7．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當(dāng)土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細菌并進行計數(shù)，過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．①～⑤系列的操作稱為梯度稀釋，②～⑤應(yīng)加10mL無菌水B．接種培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基C．圖示所用培養(yǎng)基需先用干熱滅菌法進行滅菌后，再調(diào)節(jié)PHD．若接種的三個平板平均菌落數(shù)為62個，則1g土樣中約有菌落6.2×107個【答案】A【分析】微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斀狻緼、①～⑤系列的操作稱為梯度稀釋，②～⑤應(yīng)加9mL無菌水，A正確；B、該培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，能分解尿素的微生物能存活，不能分解尿素的不能存活，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，B錯誤；C、圖示所用培養(yǎng)基需先調(diào)節(jié)pH，再用濕熱滅菌法（高壓蒸汽滅菌法）進行滅菌，C錯誤；D、根據(jù)圖解可知，對菌液進行稀釋時共稀釋了106倍，若接種的三個平板平均菌落數(shù)為62個，則1g土樣中約有菌落62×106=6.2×107個，D錯誤。故選A。8．牛和山羊等反芻動物具有特殊的器官-瘤胃。瘤胃中生活著多種微生物，其中有許多細菌能分解尿素。為了獲得能高效分解尿素的細菌，科研人員利用瘤胃內(nèi)容物進行了如圖所示的實驗。下列說法正確的是（

）A．該過程中所用的試劑和器具都要進行高壓蒸汽滅菌B．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基在有氧條件下能分離瘤胃中的尿素分解菌C．③過程應(yīng)選擇殘余尿素濃度最低的培養(yǎng)瓶中微生物進一步接種D．過程④的結(jié)果是由于菌液稀釋濃度太低導(dǎo)致的【答案】B【分析】在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基；稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外，也常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目；當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌?！驹斀狻緼、該過程中涉及的接種環(huán)使用灼燒滅菌、涂布器使用酒精消毒后灼燒滅菌，吸管、培養(yǎng)皿等玻璃器皿常用干熱滅菌，培養(yǎng)基使用高壓蒸汽滅菌，有些試劑不耐高溫，不能用高溫滅菌，如尿素，A正確；B、因瘤胃中高度缺氧，所以在分離瘤胃中的尿素分解菌時還應(yīng)該提供厭氧的環(huán)境，B錯誤；C、為獲得能高效分解尿素的細菌，在③選擇接種時應(yīng)該選擇尿素濃度最低的培養(yǎng)瓶，說明瓶中微生物分解尿素的能力強，C正確；D、過程④的培養(yǎng)基上菌落局部密集是由于涂布不均勻?qū)е碌慕Y(jié)果，D錯誤。故選B。題型三微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用綜合9．研究人員為探究大蒜汁對4種微生物的抑菌效果。將不同濃度的大蒜汁裝入無菌牛津杯，放在培養(yǎng)基表面，使其與培養(yǎng)基充分接觸。同時用無菌水做對照實驗。再將培養(yǎng)皿放入適宜的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，收集到實驗結(jié)果，如圖所示。據(jù)圖分析下列錯誤的是（）A．不同濃度的大蒜汁對大腸桿菌的抑制效果最強B．實驗證明，大蒜汁對細菌的抑菌效果更顯著C．大蒜汁的濃度越高，對4種微生物的抑菌效果越好D．抑菌圈邊緣的菌落對大蒜汁敏感，所以選擇抑菌圈邊緣的菌落進行擴增培養(yǎng)【答案】B【分析】對照實驗：在探究某種條件對研究對象的影響時，對研究對象進行的除了該條件不同以外，其他條件都相同的實驗。這個不同的條件就是唯一的變量。根據(jù)變量設(shè)置一組對照實驗，使實驗結(jié)果更具有說服力。一般來說，對實驗變量進行處理的就是實驗組，沒有處理的就是對照組。【詳解】A、通過曲線圖可知，不同濃度的大蒜汁對大腸桿菌的抑制效果最強，對毛霉的抑制效果最弱，A正確；B、通過曲線圖可知，大蒜汁對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、黑曲霉、毛霉都有一定的抑制作用，其中對細菌（大腸桿菌、金黃色葡萄球菌）的抑菌效果更顯著，B正確；C、圖示只表示到大蒜濃度為50%，無法說明大蒜汁的濃度越高，抑菌效果越好，C錯誤；D、抑菌圈邊緣的菌落對大蒜汁敏感，所以選擇抑菌圈邊緣的菌落進行擴增培養(yǎng)，D錯誤。故選B。10．牛津杯法可測定發(fā)酵液中抗生素的含量，具體做法是：在培養(yǎng)皿中倒入不含任何營養(yǎng)物質(zhì)的瓊脂凝固成底層平板，同時將牛津杯豎直立在將要凝固的底層平板上；再將含少量瓊脂的培養(yǎng)基熔化并冷卻后加入敏感指示菌，混勻后倒入底層平板上形成雙層平板，后取出牛津杯，形成小孔。向A、B、C小孔中分別加入濃度不同且已知的抗生素，在小孔D、E、F中加入等量的發(fā)酵液，培養(yǎng)一段時間后，測量小孔周圍抑菌圈的大小。下列說法錯誤的是（）

A．雙層培養(yǎng)基滅菌均可以用濕熱滅菌法，培養(yǎng)皿滅菌可以用干熱滅菌法B．底層培養(yǎng)基可以彌補培養(yǎng)皿底部或超凈工作臺不平，利于后續(xù)實驗觀察C．倒入上層平板后，需使用滅菌后的涂布器將敏感指示菌均勻地涂布在培養(yǎng)基表面D．通過比較D、E、F和A、B、C周圍抑菌圈的大小可以比較發(fā)酵液中抗生素的濃度【答案】B【分析】常見物品的消毒或滅菌方法（1）消毒方法及適用對象：①化學(xué)藥劑消毒法：操作者雙手、動植物表面等。②煮沸消毒法：日常食品、罐裝食品等。③巴氏消毒法：牛奶等不耐高溫的液體等。④紫外線消毒法：接種室、接種箱或超凈工作臺等。（2）滅菌方法及適用對象：①灼燒滅菌：接種工具、其他金屬用具等。②干熱滅菌：玻璃器皿、金屬用具等。③濕熱滅菌：培養(yǎng)基等。【詳解】A、濕熱滅菌法是一種利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進行滅菌的方法，培養(yǎng)基的滅菌通常選擇用濕熱滅菌法。耐高溫的和需要保持干燥的物品，如培養(yǎng)皿通常用干熱滅菌法滅菌，A正確；B、加了底層培養(yǎng)基后，可使原來底面不平的玻璃皿的缺陷得到了彌補，使所形成的抑菌圈都接近處于同一平面上，利于后續(xù)實驗觀察，B正確;C、依題意，將含少量瓊脂的培養(yǎng)基熔化并冷卻后加入敏感指示菌，混勻后倒入底層平板上形成雙層平板，敏感指示菌就已經(jīng)接種至上層培養(yǎng)基中了，不用涂布器再進行涂布，C錯誤；D、依題意，A、B、C小孔中分別加入濃度不同且已知的抗生素，作為對照組；在小孔D、E、F中加入等量的發(fā)酵液，產(chǎn)生的抑菌圈與A、B、C周圍對應(yīng)的抑菌圈比較，就可以推斷發(fā)酵液中抗生素的濃度，D錯誤。故選B。11．合理使用消毒液有助于減少傳染病的傳播。某同學(xué)比較了3款消毒液A、B、C殺滅大腸桿菌的效果，結(jié)果如圖所示。下列敘述錯誤的是（

）A．大腸桿菌在伊紅-亞甲藍培養(yǎng)基上生長的菌落呈藍色B．據(jù)該實驗結(jié)果可知，殺菌效果最好的消毒液是AC．可采用顯微鏡直接計數(shù)法或菌落計數(shù)法測定樣品的大腸桿菌數(shù)量D．實驗中用到的吸管、培養(yǎng)皿和金屬用具可采用于熱滅菌法【答案】A【分析】平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細包繁殖而來的肉眼可見的子細包群體，這就是菌落。稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步?！驹斀狻緼、大腸桿菌在伊紅-亞甲藍培養(yǎng)基上生長的菌落呈深紫色，并有金屬光澤，A正確；B、A消毒液活菌數(shù)減少量最多，日殺菌時間較短，效率最高，故A消毒液殺菌效果最好，B正確；C、微生物計數(shù)的方法多種多樣，包括顯微鏡直接計數(shù)法和平板菌落計數(shù)法等，C正確；D、干熱滅菌是一種利用高溫進行滅菌的方法，適用于不便在壓力蒸汽滅菌器中進行滅菌，上不易被高溫損壞的物品。這種方法主要適用于需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，D錯誤。故選A。12．黃瓜枯萎病是由尖鐮孢菌引起的。研究表明，芽孢桿菌能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶等物質(zhì)分解尖鐮孢菌的細包壁而被廣泛用于黃瓜枯萎病的防治。實驗室對抑菌率在69%以上的3株芽孢桿菌進行復(fù)篩，結(jié)果如下圖所示。下列敘述正確的是（）

N1、N2和N3菌株（四周）對尖鐮孢菌（中心）的抑制效果模式圖A．該實驗的對照組設(shè)置是平板上只接種芽孢桿菌B．實驗結(jié)果表明N2菌株抑制尖鐮孢菌的效果最好C．挑選出抑制效果最強的菌株后，需要對其進行純化培養(yǎng)D．利用尖鐮孢菌發(fā)酵生產(chǎn)幾丁質(zhì)酶等物質(zhì)，可用于防治枯萎病【答案】B【分析】題圖分析：據(jù)圖可知，N1菌株組中對應(yīng)的尖廉孢菌的菌落最小，說明N1菌株的抑制效果最佳，其次是N3菌株。N2菌株組中對應(yīng)的尖廉孢菌的菌落最大，說明N2菌株抑制效果最差?！驹斀狻緼、該實驗研究的是芽孢桿菌對尖鐮孢菌的抑制作用，因此對照組設(shè)置與圖中實驗組的區(qū)別是平板上只接種尖鐮孢菌或在接種芽孢桿菌處接種等量的蒸餾水，A正確；B、據(jù)圖可知，這三組實驗中，N1菌株組中平板中央的尖鐮孢菌菌落最小，說明N1菌株抑制尖鐮孢菌增殖的效果最強，B錯誤；C、為了確保所使用的菌株是純凈的，不含有其他雜菌，挑選出抑制效果最強的菌株后，需對其進行純化培養(yǎng)，C正確；D、依題意，芽孢桿菌主要是通過產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶等物質(zhì)來抑制尖鐮孢菌的增殖，因此可利用芽孢桿菌發(fā)酵生產(chǎn)幾丁質(zhì)酶等物質(zhì)，利用這些物質(zhì)防治枯萎病，D錯誤。故選B。一、單選題1．灰霉病是由灰葡萄孢（一種真菌）引起的農(nóng)作物病害。為了綠色、高效地防治灰霉病，研究人員從灰霉病多發(fā)的大棚土壤中取樣、分離出多種單菌落并進行擴大培養(yǎng)，隨后將各組微生物的無菌發(fā)酵濾液與未凝固的普通培養(yǎng)基混合后倒平板，冷卻后在平板中央接種灰葡萄孢，通過比較灰葡萄孢菌絲生長情況，從而篩選出高效的灰葡萄孢拮抗菌。下列敘述，錯誤的是（

）A．在灰霉病多發(fā)的大棚土壤取樣，比普通土壤更有可能獲得灰葡萄孢拮抗菌B．取無菌發(fā)酵濾液的目的是用拮抗菌的代謝產(chǎn)物對灰葡萄孢產(chǎn)生抑制作用C．為篩選出高效拮抗菌，只需在普通培養(yǎng)基接種等量灰葡萄孢作為對照D．灰葡萄孢菌絲生長最緩慢、稀疏的組別對應(yīng)的微生物可能為最高效拮抗菌【答案】B【分析】純化微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法的過程是：由接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他的連續(xù)劃線，微生物細包數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。稀釋涂布平板法是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細包繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細包。【詳解】A、由題意可知，灰霉病是由灰葡萄孢（一種真菌）引起的農(nóng)作物病害，因此在灰霉病多發(fā)的大棚土壤取樣，比普通土壤更有可能獲得灰葡萄孢拮抗菌，A正確；B、取無菌發(fā)酵濾液的目的是排除其他雜菌的干擾，利用拮抗菌的代謝產(chǎn)物對灰葡萄孢產(chǎn)生抑制作用，從而獲得專一性的拮抗菌，B正確；C、為篩選出高效拮抗菌，需在普通培養(yǎng)基中央接種等量的灰葡萄孢，此后將該培養(yǎng)基與其他實驗組置于相同且適宜的條件下培養(yǎng)，而后通過比對挑選出灰葡萄孢幾乎無生長的培養(yǎng)基對應(yīng)的微生物即為拮抗效果最好的拮抗菌，C錯誤；D、最高效拮抗菌對灰葡萄孢的拮抗效果是最好的，導(dǎo)致灰葡萄孢菌絲生長最緩慢、稀疏，D錯誤。故選B。2．某同學(xué)欲檢測消毒餐具中大腸桿菌的數(shù)量是否超標(biāo)，進行如下操作：用蒸餾水分3～5次沖洗待檢餐具內(nèi)表面，制成待測樣液備用；配制伊紅一亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基，將待測樣液接種于瓊脂培養(yǎng)基上。下列敘述錯誤的是（

）A．為了確保檢測的準(zhǔn)確性，沖洗待檢餐具的蒸餾水應(yīng)該換成無菌水B．生長在伊紅一亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落具有金屬光澤C．設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照可檢驗該鑒別培養(yǎng)基的效果D．為便于觀察菌落的顏色，應(yīng)將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性【答案】B【分析】各種微生物培養(yǎng)基的配方一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如，在培養(yǎng)細菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性?！驹斀狻緼、蒸餾水中可能存在大腸桿菌，對檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾，為了確保檢測的準(zhǔn)確性，沖洗待檢餐具的蒸餾水應(yīng)該換成滅菌后的無菌水，A正確；B、生長在伊紅一亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落呈深紫色且具有金屬光澤，B正確；C、為檢驗該鑒別培養(yǎng)基的效果，應(yīng)設(shè)置接種大腸桿菌的伊紅一亞甲藍瓊脂培養(yǎng)基作對照，C錯誤；D、大腸桿菌屬于細菌，在培養(yǎng)細菌時，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性，D錯誤。故選B。3．采用巴氏消毒法進行殺菌處理的牛奶通常被稱為“巴氏殺菌乳”，某款牛奶的產(chǎn)品介紹如圖所示。根據(jù)圖上信息，下列敘述正確的是（

）A．如果盒裝牛奶出現(xiàn)鼓包，很可能是乳酸菌污染導(dǎo)致B．巴氏消毒可以破壞微生物的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，使其失去活性C．巴氏消毒的優(yōu)點是既能殺死所有微生物，又不破壞牛奶的成分D．鮮牛奶應(yīng)保存在2~6℃條件下，因為在這個區(qū)間的溫度能夠殺死微生物【答案】B【分析】消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。滅菌則是指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒和滅菌工作主要包括兩個方面：對操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒；將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒等；滅菌方法有濕熱滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌等。【詳解】A、乳酸菌無氧呼吸不產(chǎn)生氣體，污染不會鼓包，A正確；B、巴氏消毒通過加熱牛奶到一定溫度，可以破壞微生物的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，使其失去活性，從而達到殺菌的效果，B正確；C、巴氏消毒法的優(yōu)點是能夠殺死大部分病原微生物，同時盡量減少對牛奶營養(yǎng)成分的破壞，C錯誤；D、鮮牛奶應(yīng)保存在2-6℃的范圍內(nèi)，因為這個溫度區(qū)間可以抑制微生物的生長和繁殖，而不是直接殺死微生物，D錯誤。故選B。4．木質(zhì)素一種大量存在于秸稈中的含碳有機物。木質(zhì)素降解菌分泌的漆酶不僅能降解木質(zhì)素，還可催化藍色物質(zhì)苯胺藍分解成H2O和CO2。研究人員利用苯胺藍培養(yǎng)基篩選高效降解木質(zhì)素的菌株。下列敘述錯誤的是（

）A．從秸稈還田的土壤中取樣并加入無菌水制備菌懸液B．使用涂布器將稀釋的菌液接種至苯胺藍培養(yǎng)基C．挑選周圍出現(xiàn)較大藍色環(huán)帶的菌落進行后續(xù)實驗D．產(chǎn)漆酶菌能在以木質(zhì)素為唯一碳源的培養(yǎng)基生長【答案】B【分析】在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基?！驹斀狻緼、因為秸稈還田的土壤中通常富含降解木質(zhì)素的微生物，因此從這樣的土壤中取樣來篩選降解菌，為了獲得單菌落，需要加入一定量的無菌水制備菌懸液，A正確；B、研究人員利用苯胺藍培養(yǎng)基篩選高效降解木質(zhì)素的菌株，可以使用稀釋涂布平板法，用涂布器將稀釋的菌液接種至苯胺藍培養(yǎng)基，能降解木質(zhì)素的菌種分泌漆酶會催化苯胺藍分解，在該菌落的周圍會產(chǎn)生透明圈，所以可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈及透明圈的大小篩選出高效降解木質(zhì)素的菌株，B正確；C、能降解木質(zhì)素的菌種分泌漆酶會催化苯胺藍分解，在該菌落的周圍會產(chǎn)生透明圈，為了篩選高效降解木質(zhì)素的菌株，應(yīng)選擇周圍出現(xiàn)較大透明圈的菌落進行后續(xù)實驗，C錯誤；D、產(chǎn)漆酶菌產(chǎn)生的漆酶可以降解木質(zhì)素，為該菌生長提供碳源，所以產(chǎn)漆酶菌能在以木質(zhì)素為唯一碳源的培養(yǎng)基生長，D錯誤。故選B。5．耐高溫纖維素酶可以加速催化纖維素的水解。某研究小組將纖維素分解菌進行誘變和高溫處理獲得新菌株甲，制作出菌株甲培養(yǎng)基的濾液，進行了下列實驗：步驟試管A試管B1加入用2mL緩沖液配制的菌株甲濾液加入2mL緩沖液2在①條件下水浴保溫30min3加入適量的纖維素液，80℃水浴保溫10min4加入適量的斐林試劑，②，觀察溶液顏色下列分析錯誤的是（）A．該實驗?zāi)芴骄烤昙追置诘睦w維素酶能否耐受80℃高溫B．表格中，①處應(yīng)該為80℃，②處可為60℃水浴加熱約2minC．若步驟4中試管A、B溶液顏色分別為磚紅色、藍色，則該酶能耐受80℃高溫D．纖維素酶在80℃下保存，有利于保持酶的活性和結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性【答案】A【分析】本實驗的過程步驟中對纖維素酶進行高溫處理，然后觀察是否能將纖維素水解產(chǎn)生還原糖，還原糖可用斐林試劑鑒定觀察是否產(chǎn)生磚紅色沉淀，可確定本實驗?zāi)康氖菫樘骄啃戮晁a(chǎn)纖維素酶能否耐受80℃高溫。【詳解】A、研究小組將纖維素分解菌進行誘變和高溫處理獲得新菌株甲，制作出菌株甲培養(yǎng)基的濾液，濾液中含有纖維素酶，根據(jù)實驗步驟3、4可確定該實驗可以用來探究菌株甲分泌的纖維素酶能否耐受80℃高溫，A正確；B、①處保溫80℃，是因為步驟3中的纖維素液水浴保溫80℃，兩處保溫溫度應(yīng)保持一致，B正確；C、若步驟4中試管A、B溶液顏色分別為磚紅色、藍色，說明A試管中的纖維素被分解為葡萄糖（還原性糖），說明纖維素酶具有活性，說明該酶能耐受80℃高溫，C正確；D、低溫抑制酶的活性，當(dāng)溫度上升，酶的活性可恢復(fù)，因而酶適合在低溫條件下保存，D錯誤。故選A。6．廢紙主要成分是木質(zhì)纖維，利用發(fā)酵工程可將活動產(chǎn)生的大量廢紙轉(zhuǎn)化為新的資源——燃料乙醇，如圖是利用微生物由纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程，下列說法正確的是（

）A．從土壤中篩選①中的目的微生物時，培養(yǎng)基需添加牛肉膏、葡萄糖等有機物B．沒有接種微生物的培養(yǎng)基上未長出菌落，則說明選擇培養(yǎng)基有選擇作用C．可通過分解纖維素得到的葡萄糖含量判斷②獲得的酶液活性D．滿足④的常見微生物為醋酸菌，應(yīng)保證⑤發(fā)酵罐裝置密閉而產(chǎn)生乙醇【答案】B【分析】據(jù)圖分析：①表示纖維素分解菌的篩選，②表示纖維素酶的活性鑒定，③表示纖維素發(fā)酵，④表示酒精發(fā)酵，⑤表示無氧發(fā)酵，X表示酵母菌?！驹斀狻緼、從土壤中篩選能產(chǎn)生分解纖維素酶的微生物時，培養(yǎng)基應(yīng)只添加纖維素作為唯一碳源，A正確；B、沒有接種微生物的培養(yǎng)基上未長出菌落，則說明該培養(yǎng)過程中沒有雜菌污染，B錯誤；C、可通過分解一定量纖維素得到的葡萄糖含量判斷②獲得的酶液的活性，得到的葡萄糖越多，說明產(chǎn)生的酶活性越高，C正確；D、滿足④的常見微生物為酵母菌，應(yīng)保證⑤發(fā)酵罐裝置密閉而產(chǎn)生乙醇，D錯誤。故選B。7．科研人員計劃從含多種微生物的白酒大曲中分離篩選出能分泌酯化酶的菌株，并用于白酒釀造。白酒大曲中產(chǎn)酯化酶微生物初步篩選時所用培養(yǎng)基成分與操作步驟如下表所示。下列敘述錯誤的是（

）培養(yǎng)基成分牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、聚乙烯醇溶液、三丁酸甘油酯、水等。（其中聚乙烯醇溶液和三丁酸甘油酯會使培養(yǎng)基呈現(xiàn)乳白色，酯化酶可催化乳白色的物質(zhì)反應(yīng)，產(chǎn)生透明物質(zhì)）操作步驟將白酒大曲塊粉碎制成菌懸液→利用①（接種方法）接種后培養(yǎng)→將周邊出現(xiàn)②的菌落挑出→重新劃線接種至分離純化平板培養(yǎng)基上→多次重復(fù)純化至得到不同形態(tài)的單菌落→4℃冰箱保存。A．表中所示培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨可為微生物生長提供氮源B．篩選產(chǎn)酯化酶的霉菌時，應(yīng)將培養(yǎng)基在滅菌前調(diào)至中性或弱堿性C．表中①可代表稀釋涂布平板法，②處應(yīng)填透明圈D．通過劃線操作可將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面【答案】B【分析】微生物的營養(yǎng)物質(zhì)：主要包括水、碳源、氮源、能源、無機鹽等，這些物質(zhì)能夠滿足微生物的生長、繁殖和參與各種生理活動，促進合成新的細包和物質(zhì)，同時將代謝廢物排出?！驹斀狻緼、表中所示培養(yǎng)基中為微生物的生長提供氮源的物質(zhì)是牛肉膏和蛋白胨，A正確；B、若篩選的是產(chǎn)酯化酶的霉菌（真菌），應(yīng)將培養(yǎng)基在用高壓蒸汽滅菌法滅菌前調(diào)至酸性，B錯誤；C、表中①可代表稀釋涂布平板法，聚乙烯醇溶液和三丁酸甘油酯會使培養(yǎng)基呈現(xiàn)乳白色，酯化酶可催化乳白色的物質(zhì)反應(yīng)，因此若被篩選的微生物能分泌酯化酶，則在其菌落的周圍會產(chǎn)生透明圈，因此②處應(yīng)填透明圈，C正確；D、利用平板劃線法分離得到單菌落的原理是通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落，D錯誤。故選B。8．為高效降解農(nóng)業(yè)秸稈廢棄物，研究人員從土壤中篩選纖維素分解菌并計數(shù)，部分操作流程如圖。下列敘述正確的是（

）

①土壤取樣時，應(yīng)做到隨機取樣②富集培養(yǎng)可采用液體培養(yǎng)基，可充分利用其中的營養(yǎng)物質(zhì)③選擇培養(yǎng)的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源④進行系列梯度稀釋的目的是便于涂布平板后得到單菌落⑤涂布平板時，將接種環(huán)從酒精中取出后，應(yīng)放在火焰上灼燒防止污染⑥菌落計數(shù)時，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際數(shù)目少A．①②③④ B．①③④⑥C．②③④⑥ D．②③④⑤【答案】B【分析】在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基?！驹斀狻竣佾@取土壤中纖維素分解菌時需要選擇富含纖維素的環(huán)境，如樹林中堆積的落葉經(jīng)長時間發(fā)酵分解形成的腐殖土，①錯誤；②富集培養(yǎng)可采用液體培養(yǎng)基，可充分利用其中的營養(yǎng)物質(zhì)，②正確；③分析題意，本實驗?zāi)康氖菑耐寥乐泻Y選纖維素分解菌并計數(shù)，選擇培養(yǎng)的培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源，③正確；④進行系列梯度稀釋的目的是便于涂布平板后得到單菌落，④正確；⑤將涂布器從酒精中取出時，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡，然后放在火焰上灼燒，以免引燃酒精，⑤錯誤；⑥菌落計數(shù)時，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際數(shù)目少，這是因為當(dāng)兩個或多個細包連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，⑥正確。故選B。9．下圖是實驗人員利用“影印法”初檢氨基酸S缺陷型菌株的過程，影印法培養(yǎng)微生物可以保證不同培養(yǎng)基中的同種菌株有相同接種位置。結(jié)合圖示分析，下列有關(guān)敘述正確的是（

）A．對菌液進行誘變處理，可使菌種定向變異為氨基酸S缺陷型B．圖示的基本培養(yǎng)基既屬于鑒別培養(yǎng)基，也屬于選擇培養(yǎng)基C．進行過程②的操作時，應(yīng)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上D．圖示菌落B中有氨基酸S缺陷型菌，菌落A能合成氨基酸S【答案】B【分析】影印培養(yǎng)法，是指確保在一系列平板培養(yǎng)基的相同位置上接種并培養(yǎng)出相同菌落的一種微生物培養(yǎng)方法。主要操作方法是：用滅菌的絲絨覆蓋在一塊與培養(yǎng)皿同樣大?。ɑ蚵孕。┑哪局茍A柱體上，輕輕地在母種培養(yǎng)皿的菌苔上印一下，把細菌菌落全部轉(zhuǎn)移到絲絨面上，然后將這一絲絨面再印在另外的選擇性培養(yǎng)基平板上，獲得與原始平板完全相同的接種平板。待培養(yǎng)后，比對各培養(yǎng)皿在相同位置出現(xiàn)相同的菌落，從而篩選出適當(dāng)?shù)木?。【詳解】A、誘變處理可使菌種發(fā)生生態(tài)突變，生態(tài)突變具有不定向性，A正確；B、圖中的基本培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，但不屬于鑒別培養(yǎng)基，B錯誤；C、為避免完全培養(yǎng)基中的氨基酸污染絲絨布，進行過程②的操作時，應(yīng)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上，C正確；D、根據(jù)培養(yǎng)基上的菌落分布可知，菌落B在基本培養(yǎng)基（即選擇培養(yǎng)基）和完全培養(yǎng)基中均有生長，菌落A不能在基本培養(yǎng)基（即選擇培養(yǎng)基）中生長，因此菌落A中有氨基酸S缺陷型菌，D錯誤。故選B。10．野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基上生長，經(jīng)誘變獲得了兩種營養(yǎng)缺陷型的突變體M、N，且單獨培養(yǎng)時均不能在基本培養(yǎng)基上生長。若將兩種突變體在完全培養(yǎng)基（液體）中混合培養(yǎng)一段時間后，再采用稀釋涂布平板法接種在基本培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)后長出了大腸桿菌菌落。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．野生型大腸桿菌誘變時發(fā)生了生態(tài)突變或染色體變異B．突變體M和N能相互為對方提供所缺營養(yǎng)物質(zhì)C．在混合培養(yǎng)期間突變體M和N發(fā)生了遺傳物質(zhì)的交流D．混合培養(yǎng)獲得的大腸桿菌都能在基本培養(yǎng)基中生長【答案】B【分析】生態(tài)突變是指生態(tài)中堿基對的增添、缺失或替換，這會導(dǎo)致生態(tài)結(jié)構(gòu)的改變，進而產(chǎn)生新生態(tài)?！驹斀狻緼、野生型大腸桿菌是原核生物，其遺傳物質(zhì)主要位于擬核的DNA上，并沒有像真核生物那樣的染色體結(jié)構(gòu)。因此，野生型大腸桿菌在誘變時不可能發(fā)生染色體變異，只能發(fā)生生態(tài)突變，A正確；B、根據(jù)題目描述，突變體M和N都是營養(yǎng)缺陷型，且單獨培養(yǎng)時均不能在基本培養(yǎng)基上生長。然而，當(dāng)它們在完全培養(yǎng)基中混合培養(yǎng)一段時間后，再接種到基本培養(yǎng)基上卻長出了大腸桿菌菌落。這說明在混合培養(yǎng)期間，突變體M和N能夠相互為對方提供所缺失的營養(yǎng)物質(zhì)，從而使得雙方都能在基本培養(yǎng)基上生長，B正確；C、根據(jù)題目描述，突變體M和N都是營養(yǎng)缺陷型，且單獨培養(yǎng)時均不能在基本培養(yǎng)基上生長，所以在混合培養(yǎng)期間，突變體M和N能夠相互為對方提供所缺失的營養(yǎng)物質(zhì)，并不一定是發(fā)生了遺傳物質(zhì)的交流，C錯誤；D、雖然混合培養(yǎng)后接種到基本培養(yǎng)基上長出了大腸桿菌菌落，但這并不意味著混合培養(yǎng)獲得的所有大腸桿菌都能在基本培養(yǎng)基中生長。只有那些通過相互提供缺失營養(yǎng)物質(zhì)而恢復(fù)了生長能力的突變體或重組體才能在基本培養(yǎng)基上生長，D錯誤。故選B。二、多選題11．植酸酶能催化分解植酸磷，從而提高植物性物料中磷的利用率?？蒲腥藛T從土壤中分離出5種能夠產(chǎn)生植酸酶的細菌菌株，分別為a、b、c、d和e。植酸磷被分解后培養(yǎng)基上會出現(xiàn)透明圈，分離的操作過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（

）

A．可用干熱滅菌法對土壤樣品進行滅菌B．該實驗采用了平板劃線法進行接種和計數(shù)C．經(jīng)過圖示的操作，土壤樣品被稀釋了10?倍D．e細菌植酸酶的活性比a細菌植酸酶的高【答案】BD【分析】題意分析，由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁，產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶?！驹斀狻緼、干熱滅菌法適用于能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等，土壤樣品中含有各種微生物和有機物，不能用干熱滅菌法進行滅菌，否則會破壞土壤中的微生物和有機物，A正確；B、平板劃線法可以用于分離純化微生物，但不能用于計數(shù)，用于計數(shù)的方法通常是稀釋涂布平板法，B錯誤；C、土壤樣品經(jīng)過一系列稀釋操作，最終取了0.1mL進行涂布培養(yǎng)，1g土壤添加到99mL無菌水中，稀釋了100倍，以后每次稀釋10倍，經(jīng)過3次稀釋，土壤樣品被稀釋了105倍，C正確；D、e細菌形成的透明圈比a細菌形成的透明圈大，說明e細菌分解植酸磷的能力更強，即e細菌植酸酶的活性比a細菌植酸酶的高，D錯誤。故選BD。12．為證明青霉素在某種細菌產(chǎn)生抗藥性過程中所起的作用是選擇而非誘變，實驗方案如圖所示。圖中③平板影印是指用無菌絨布輕蓋在已長好菌落的原培養(yǎng)基上，然后不轉(zhuǎn)動任何角度，“復(fù)印”至新的培養(yǎng)基上進行接種的方法。下列敘述正確的是（

）A．進行擴大培養(yǎng)的培養(yǎng)基配制過程不添加瓊脂，但需進行干熱滅菌B．②過程接種方法為稀釋涂布平板法，此法可用于微生物的分離和計數(shù)C．B組培養(yǎng)基中應(yīng)添加青霉素，且培養(yǎng)過程中應(yīng)進行倒置培養(yǎng)D．該實驗結(jié)果說明青霉素起到了選擇作用【答案】BCD【分析】微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斀狻緼、進行擴大培養(yǎng)若為液體培養(yǎng)基則可不添加瓊脂，通常采用高壓蒸汽滅菌，而非干熱滅菌，A正確；B、②過程接種方法為稀釋涂布平板法，該方法可用于微生物的分離和計數(shù)，B正確；C、B組培養(yǎng)基中應(yīng)添加青霉素，以觀察青霉素對細菌的作用，培養(yǎng)過程中倒置培養(yǎng)可以防止污染，C正確；D、從實驗設(shè)計和結(jié)果可以看出，青霉素起到了選擇作用，使得原本就具有抗藥性的細菌存活下來，D錯誤。故選BCD。13．在一系列微生物的作用下，黑茶（中國邊疆游牧民族的主要飲品）會產(chǎn)生一種對人體非常有益的金黃色顆?！敖鸹ā薄Ｑ芯咳藛T對“金花”中的微生物進行了分離和鑒定，過程如圖。下列說法正確的是（

）

A．向“金花”樣品中加入蒸餾水制成樣品懸液B．稀釋涂布平板法用于微生物的分離計數(shù)，統(tǒng)計結(jié)果可能比實際值偏小C．涂布平板上長出的菌落可通過劃線進一步純化D．可通過生態(tài)組測序?qū)N進行準(zhǔn)確鑒定【答案】BCD【分析】微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！驹斀狻緼、向“金花”樣品中加入無菌水制成樣品懸液，而不是蒸餾水，A正確；B、稀釋涂布平板法用于微生物的分離計數(shù)，統(tǒng)計結(jié)果可能比實際值偏小，這是因為當(dāng)兩個或多個菌落長在一起時，只能計為一個菌落，B正確；C、涂布平板上長出的菌落可通過劃線進一步純化，平板劃線時，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落，達到純化的目的，C正確；D、菌種鑒定有多種方法，生態(tài)組測序進行菌種鑒定的結(jié)果比傳統(tǒng)生化鑒定更為直接，鑒定結(jié)果也更為可靠，D錯誤。故選BCD。14．袋裝酸奶的包裝上通常都會注明“脹袋勿食”。某同學(xué)選擇一袋過期的脹袋密封酸奶，按圖中的操作流程進行實驗，研究其中某微生物的生長情況。下列有關(guān)敘述不正確的是（

）A．酸奶“脹袋”可能是由于混入了醋酸菌等厭氧菌B．培養(yǎng)皿中倒入培養(yǎng)基后要保證一直水平正放C．可通過觀察固體培養(yǎng)基上生長的菌落的形狀、大小和顏色等特征初步鑒定菌種D．若3個平板的平均菌落數(shù)是180個，則1mL酸奶中某微生物數(shù)目為9×105個【答案】ABD【分析】菌落是指由一個微生物細包或一堆同種細包在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長繁殖到一定程度，形成肉眼可見的子細包群體。菌落形態(tài)包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質(zhì)地、顏色和透明程度等，每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特征，不同種或同種在不同的培養(yǎng)條件下，菌落特征是不同的。這些特征對菌種識別、鑒定有一定意義?！驹斀狻緼、酸奶“脹袋”可能是由于混入了代謝會產(chǎn)生氣體的微生物，醋酸菌屬于好氧菌，A正確；B、培養(yǎng)皿中倒入培養(yǎng)基后，待培養(yǎng)基冷卻凝固后應(yīng)倒置，B錯誤；C、每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特征，不同種或同種細菌在不同的培養(yǎng)條件下，菌落特征是不同的，故可通過觀察固體培養(yǎng)基上生長的菌落形狀、大小和顏色等特征初步鑒定菌種，C正確；D、圖中顯示酸奶稀釋倍數(shù)為104、取0.2mL接種，可以計算1mL酸奶中某微生物數(shù)量為180÷0.2×104=9×106個，D錯誤。故選ABD。15．某小組用傳統(tǒng)醬油為樣品，使用了兩個不同的接種方法練習(xí)菌落數(shù)目統(tǒng)計，方法1是將菌液和培養(yǎng)基一起倒入平板中混合均勻，方法2為稀釋涂布平板法，部分實驗流程如下圖，兩種方法計數(shù)結(jié)果如下表，下列有關(guān)說法正確的是（

）培養(yǎng)時間/h244872方法1平板上平均菌落數(shù)479292方法2平板上平均菌落數(shù)170190190A．實驗中，平板上生出的菌落都屬于同一種微生物B．方法1菌落數(shù)較少的原因之一可能是部分不耐熱菌死亡C．根據(jù)方法2菌落數(shù)可推算樣品中微生物密度為1.9×106個/mlD．根據(jù)實驗結(jié)果可得知，該品種醬油微生物嚴(yán)重超標(biāo)，不可食用【答案】BCD【分析】微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。【詳解】A、實驗中，平板上生出的菌落不一定都屬于同一種微生物，A正確；B、方法1是將菌液和培養(yǎng)基一起倒入平板中混合均勻，培養(yǎng)基溫度高，可能是部分不耐熱菌死亡使得菌落數(shù)較少，B正確；C、根據(jù)方法2菌落數(shù)可推算樣品菌落數(shù)為190÷0.1×103=1.9×106個/ml，C正確；D、?合格的醬油產(chǎn)品其雜菌數(shù)不應(yīng)超過5萬個/毫升，根據(jù)實驗結(jié)果可得知，該品種醬油微生物嚴(yán)重超標(biāo)，不可食用，D錯誤。故選BCD。三、非選擇題16．有機農(nóng)藥苯磺隆是一種強效除草劑，長期使用會嚴(yán)重污染環(huán)境；研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某種微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示，請回答相關(guān)問題：(1)微生物的培養(yǎng)基一般都應(yīng)該含有的成分有水、無機鹽和四類，此外，培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對pH、以及氧氣的要求。土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱，為了獲取能降解苯磺隆的菌種，選擇的土壤樣品應(yīng)來自。(2)圖甲中選擇培養(yǎng)的目的是；在劃線純化操作時，劃線工具使用前后都要進行滅菌。(3)若要檢測土樣中的細菌含量，應(yīng)采用法進行接種。運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往比實際值偏小，原因是。(4)為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液作圖乙所示實驗，該實驗設(shè)計不合理之處是因為?！敬鸢浮?1)碳源、氮源特殊營養(yǎng)物質(zhì)被苯磺隆嚴(yán)重污染的土壤(2)增加樣品中目的菌的濃度灼燒(3)稀釋涂布平板兩個或多個細包連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落(4)缺乏對照而無說服力【分析】題圖分析，圖甲中：首先用選擇培養(yǎng)基從土壤中篩選出菌種，再采用平板劃線法純化出相應(yīng)的菌種；圖乙中：通過測定苯磺隆的濃度測定其降解率?！驹斀狻浚?）微生物的各種培養(yǎng)基配方一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽四類營養(yǎng)，此外，培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。根據(jù)題意可知，“苯磺隆能被土壤中某種微生物降解”，因此為了獲取能降解苯磺隆的菌種，選擇的土壤樣品應(yīng)來自被苯磺隆嚴(yán)重污染的土壤。（2）圖甲中選擇培養(yǎng)使用的是液體培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)的目的是增加目的菌落的菌濃度，以便獲得更多的目的菌，使用平板劃線法對微生物進行純合培養(yǎng)時，劃線所用工具在使用前后都要進行灼燒滅菌。（3）若要檢測土樣中的細菌含量，應(yīng)采用稀釋涂布平板進行接種。