DB2104T 0016-2022 清原馬鹿人工授精技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.30CCSB43DB2104撫順市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布IDB2104/T0016—2022本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則-第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由撫順市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)及扶貧開(kāi)發(fā)促進(jìn)中心提出。本文件由撫順市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。本文件起草單位：撫順市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)及扶貧開(kāi)發(fā)促進(jìn)中心、清原滿族自治縣清林畜禽繁育家庭農(nóng)場(chǎng)。本文件主要起草人：劉賀、王哲、那飛、王宇翔、王海豐、于丹、張桐源、崔雨崴、王一瓊、王正欣、馬征、王英林、邸洪菊。本文件發(fā)布實(shí)施后，任何單位和個(gè)人如有問(wèn)題和意見(jiàn)建議，均可以通過(guò)來(lái)電和來(lái)函等方式進(jìn)行反饋，我們將及時(shí)答復(fù)并認(rèn)真處理，根據(jù)實(shí)際情況依法進(jìn)行評(píng)估及復(fù)審。文件起草單位通訊地址：撫順市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)及扶貧開(kāi)發(fā)促進(jìn)中心（撫順市順城區(qū)葛布東街1號(hào)樓聯(lián)系電話本文件為首次發(fā)布。DB2104/T0016—2022清原馬鹿人工授精技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了人工授精的準(zhǔn)備、冷凍精液的檢查、運(yùn)輸、貯存、母鹿的發(fā)情鑒定、冷凍精液解凍與輸精、受胎率計(jì)算方法及記錄。本文件適用于撫順市清原馬鹿人工授精。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。DB2104/T0015-2022清原馬鹿標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)技術(shù)規(guī)范3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1人工授精采用人工方法將公鹿精液輸入發(fā)情母鹿生殖道內(nèi)，以替代公母鹿自然交配而繁殖后代的一種繁殖技3.2發(fā)情周期母鹿初情期后，其生殖器官及性行為發(fā)生一系列周期性變化（非繁殖季節(jié)及母鹿懷孕除外發(fā)情周期的計(jì)算是從這個(gè)發(fā)情之日至下次發(fā)情開(kāi)始的這一段時(shí)間。4準(zhǔn)備工作4.1母鹿群每年9月～10月，選擇年齡為2.5歲～10歲，膘度達(dá)到7成～8成，在8月上旬前斷奶的母鹿組群，每群15只～20只。母鹿逐只核對(duì)和補(bǔ)帶耳標(biāo)，建立人工授精檔案。母鹿的飼養(yǎng)管理按照DB2104/T0015-2022中6.2的規(guī)定執(zhí)行。4.2試情公鹿4.2.1試情公鹿選擇選擇膘度達(dá)到8成以上，體壯、性欲強(qiáng)、健康，年齡為2歲～4歲的公鹿作試情公鹿。試情公鹿按照每百只母鹿配備2只～3只。4.2.2試情公鹿管理試情公鹿單圈飼養(yǎng)。試情公鹿采用輸精管結(jié)扎術(shù)或栓系試情布。試情布選擇加厚紗布和高彈力松緊帶制作，系在下腰部。4.3器械用具4.3.1常用器具12DB2104/T0016—2022生物顯微鏡、移液器、牛用金屬輸精槍、剪毛剪、輸精膠管、長(zhǎng)臂手套、玻璃片、玻璃器皿等。4.3.2清洗各種器材先用肥皂水或2%碳酸氫鈉溶液冼刷，除去污垢，再用經(jīng)沉淀處理的溫開(kāi)水沖冼干凈。4.3.3消毒煮沸消毒——適用于一切玻璃、金屬、塑膠等器皿及溶液，此法滅菌效果較其它法為好。100°C15min即可。稀釋液、解凍液、沖洗液水浴消毒20min。在消毒過(guò)程中，煮沸水應(yīng)浸沒(méi)消毒器皿。塑料、橡膠器材，應(yīng)在水沸騰后立即取出，以免變性。蒸汽消毒——適用于一切器皿及溶液。一般使用在高壓滅菌器。如用自制蒸汽鍋，應(yīng)在水開(kāi)后消毒30min。干熱消毒——適用于玻璃器材和金屬器械。使用電熱干燥滅菌器，160°C，30min～60min滅菌。金屬器材均可用無(wú)煙火焰（酒精燈）燒灼消毒。75%酒精消毒——適用于橡膠、玻璃、金屬器材等具器，器具在使用前用生理鹽水或稀釋液沖洗，去掉殘留的酒精。紫外線光照消毒——適用于操作室及工作衣帽，塑料細(xì)管亦可用此法滅菌。5冷凍精液的檢查、運(yùn)輸、貯存5.1檢查凍精細(xì)管封閉良好，標(biāo)記完整。5.2運(yùn)輸移動(dòng)凍精貯存容器時(shí)，應(yīng)小心輕放，不可碰撞、沖擊、傾斜、倒置。利用車輛運(yùn)輸時(shí)，除利用原保護(hù)套外，應(yīng)另加其它保護(hù)裝備，要鋪設(shè)厚軟墊子，并適當(dāng)加以固定，以免顛簸沖撞。5.3貯存冷凍精液，專人管理。貯存在裝有液氮的精液貯存器中，容器內(nèi)液氮量不得低于總量的二分之一，且保證冷凍精液完全浸沒(méi)在液氮內(nèi)。取放凍精時(shí)，只能將盛凍精的提筒或其它精液包裝提到容器頸基部(10cm以下）。如經(jīng)10s尚未取放完畢時(shí)，應(yīng)將提筒或其它包裝放回液氮中浸泡一下再繼續(xù)提取。貯存的凍精向另一容器轉(zhuǎn)移時(shí)，應(yīng)浸泡在液氮中處理。凍精在容器外停留的時(shí)間不得超過(guò)5s。凍精貯存容器每年在配種期結(jié)束后徹底清洗一次。清洗時(shí)將液氮倒空，待容器內(nèi)的溫度上升至0℃以上時(shí)，用40℃~50℃溫水清洗干凈，倒置晾干。精液貯存器出現(xiàn)液氮消耗顯著或外殼掛霜時(shí)，立即更換。6母鹿發(fā)情鑒定6.1外部觀察母鹿的發(fā)情周期可分為四期：——發(fā)情初期：興奮不安、頻尿、時(shí)走時(shí)吃，輕叫、逗情、拒絕爬跨；外陰部粘膜充血、輕度水腫、少量黏液；卵巢小指肚般大小，直腸觸診有硬性隆起或小球狀波動(dòng)性。3DB2104/T0016—2022——發(fā)情盛期：食欲減退、淚窩張開(kāi)、溜圈、擺頭、舉尾，求偶明顯（嗅、蹭公鹿接受爬跨；外陰水腫明顯、粘膜充血呈潮紅色，排出黏液有“吊線”現(xiàn)象；卵巢中指肚大小，卵泡壁薄有彈力、波動(dòng)明顯或排卵后形成小凹陷。——發(fā)情末期：表現(xiàn)安靜、輕度溜圈、逃避公鹿追逐、拒絕爬跨；外陰水腫減退呈淡紅色、黏液變少而黏稠；直腸觸診摸到質(zhì)地柔軟的血體?！萸槠冢罕憩F(xiàn)安靜；外陰部無(wú)變化、無(wú)水腫、無(wú)黏液；卵巢表面形成略突出的黃體，呈扁圓形。6.2公鹿試情將試情公鹿撥入母鹿群中，發(fā)情初期1d試情2次，發(fā)情盛期和發(fā)情末期每3h試情1次。6.3直腸觸摸卵巢檢查可選擇吊圈或麻醉方式對(duì)母鹿進(jìn)行保定。操作人員要剪短指甲，先用肥皂水清冼潤(rùn)滑手臂，五指并攏呈錐狀，緩緩排出糞便，沿子宮頸、子宮體、子宮角輕輕地觸摸卵巢，觸摸卵巢上有無(wú)卵泡，卵泡形狀、質(zhì)地、大小，判斷發(fā)情周期。7冷凍精液解凍與輸精7.1解凍細(xì)管凍精用溫水直接浸泡解凍，浸泡時(shí)間38°C±2°C為7s～8s，60°C±2°C為2s～3s。精液解凍后，精子活力鏡檢達(dá)到0.3以上，并保證解凍后15min內(nèi)完成輸精。7.2輸精母鹿保定后，用75%酒精棉球擦拭、清洗、消毒外陰部。塑料細(xì)管剪去封口端，裝入牛用金屬輸精槍，安上套管。采用直腸把握子宮頸輸精法，操作者左手臂帶塑料手套，伸入直腸，排出宿糞后把握子宮頸，右手持輸精槍緩