醫(yī)學(xué)教程 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷

地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷

中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院胎兒醫(yī)學(xué)中心黃軒中國(guó)南方地中海貧血人群攜帶率

地區(qū)攜帶率(%)

地貧β地貧

廣東8.532.54

廣西14.956.78

四川1.922.18

臺(tái)灣4.201.10

香港5.023.41Xu,etal.JClinPathol2004,57:517-22.

Cai,etal.ChiJEpidemiol

2002,23:281-5.

地貧攜帶者篩查及產(chǎn)前診斷流程被檢對(duì)象（婚前或孕中期）血液學(xué)分析（MCV

，HbA2變化）排除地貧地貧攜帶者遺傳咨詢，配偶檢查血液學(xué)分析（MCV

HbA2變化）地貧攜帶者排除地貧遺傳咨詢雙親基因分析胎兒產(chǎn)前診斷人類血紅蛋白結(jié)構(gòu)血紅蛋白(Hemoglobin,Hb)是人體紅細(xì)胞內(nèi)的一種主要蛋白質(zhì)，由珠蛋白和血紅素結(jié)合而成，通過(guò)攜氧釋氧實(shí)現(xiàn)氧氣在人體內(nèi)的運(yùn)輸。血紅蛋白是由兩條α珠蛋白鏈(α、ξ)和兩條非α珠蛋白鏈(β、γ、δ、ε)組成的四聚體。人類珠蛋白肽鏈的發(fā)育演變HbGower1:ξ2ε2HbGower2:α

2ε2HbPortland:ξ2γ2HbF:α2γ2HbA2:α2δ2HbA:α2β2ε:elta/'i:t?/ξ：rho/rou/

γ:gamma

δ:delta

成人血紅蛋白成分正常成人血紅蛋白的主要成份

HbA(α2β2)96.5%-97.5%HbA2（α2δ2）

2.5%-3.5%正常成人中次要血紅蛋白均勻分布所有紅細(xì)胞中其生理功能特性和HbA幾乎一致漫長(zhǎng)人類進(jìn)化史上沒(méi)有被淘汰HbF（

α2γ2）

＜1%由于γ鏈有Gγ和Aγ兩種亞型，所以HbF也有兩種構(gòu)成：α2Gγ2和α2Aγ2

。胎兒血紅蛋白（HbF)是胎兒和新生兒血液中的主要血紅蛋白臍血中HbF70%-80%出生后很快減少，至6個(gè)月后絕大部分被HbA替代許多性質(zhì)與HbA不同具有明顯的抗堿性和抗酸性（酸洗脫法）抗原性較HbA大氧親合力較HbA大HbF增高的疾病HPFH、δβ-地貧β-地中海貧血、β-地貧復(fù)合其他地貧HbLeporeHbS病Fanconi貧血F細(xì)胞（有些RBC的HbF含量10%-30%，稱為F細(xì)胞）并非所有的紅細(xì)胞均含有HbF多數(shù)不含有HbFGγ/Aγ臍血中：7：3出生頭幾個(gè)月：3：2出生六個(gè)月后：4：6血蛋白病的定義及分類異常血紅蛋白?。河捎谘t蛋白發(fā)生結(jié)構(gòu)上的異常而導(dǎo)致的貧血癥比如：鐮刀型細(xì)胞貧血病（HbS）、HbC、HbD、HbE等地中海貧血：

由于某類血紅蛋白合成受到抑制所引起的溶血性貧血比如:α-地中海貧血、β-地中海貧血血紅蛋白病由于血紅蛋白在質(zhì)量和數(shù)量上的異常而發(fā)生的一類遺傳性貧血病異常血紅蛋白病鐮刀型細(xì)胞貧血?。℉bS）β6–GluàvolHbC

β6–GluàLysHbDβ121–GluàGlnHbEβ26–GluàLys地中海貧血Thalasso即是“?！钡囊馑糎emia即是“血”的意思指“海洋性貧血”Thalassemia希臘語(yǔ)1925年，意大利第一例地中海貧血的臨床血液學(xué)分類α-地中海貧血靜止型α-地貧標(biāo)準(zhǔn)型α-地貧HbH病HbBart，s胎兒水腫病β-地中海貧血輕型β-地貧中間型β-地貧重型β-地貧少見(jiàn)的地中海貧血γ-地中海貧血δ-地中海貧血（γδ）0-地貧遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白增多癥（HPFH）與異常血紅蛋白病相互作用的地貧α-地貧+α-鏈變異體β-地貧+β-鏈變異體HPFHα-地中海貧血及β-地中海貧血其他HPFH定義當(dāng)成人體內(nèi)持續(xù)存在過(guò)量的HbF時(shí),就稱：

遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白增高癥

(Hereditarypersistenceoffetalhemoglobin,HPFH)沒(méi)有定義HbF達(dá)到多少的比例是一組遺傳異質(zhì)性很大的血紅蛋白病一般情況下是一個(gè)沒(méi)有貧血的“正常人”血紅蛋白量及紅細(xì)胞大小均正?；蚪咏＆林榈鞍祖溑c非α珠蛋白鏈維持正常的合成平衡注意與（γδ）0-地貧、β-地貧鑒別Pedigreefor-thalassemiainatypicalfamily.地中海貧血:常染色體隱性遺傳病地中海貧血的血液學(xué)表型特征

RBC參數(shù)

MCV

MCH

細(xì)胞形態(tài)變化

Hb電泳分析

HbA2

(

)或

(

)HbBart’sHbH(

)HbE(

)血紅蛋白電泳圖譜123451.正常人HB2.輕型

地貧3.異常HBE雜合子4.新生兒HBBart’s(

地貧標(biāo)準(zhǔn)型）5.HBHNormalAA2AEBart’sAFHA+-500V,25min

-50kb-10kb0kb10kb20kb30kb

(--SEA)Deletion(-

4.2)Deletion(-

3.7)Deletion21導(dǎo)致α地貧的不同類型的基因缺失Differentpointmutationsreducing

globingeneexpressionEXON1IVS1

EXON2EXON3

IVS2PromotermutationRNAsplicingInitiationmutationFrameshiftNonsensePoly(A)signalRund.&Rachmilewitz.N.Engl.J.Med.

2005,353:1135-46.

地中海貧血的產(chǎn)前診斷

胎兒取樣技術(shù)

DNA診斷技術(shù)

-地貧的診斷

-地貧的診斷

植入前基因診斷

Preimplantationgeneticdiagnosis(PGD)

超聲產(chǎn)前診斷

Prenataldiagnosis:Ultrasoundmeasurement

母體外周血分離胎兒細(xì)胞進(jìn)行產(chǎn)前診斷

Prenataldiagnosis:Fetalcellsinthematernalcirculation

母體血漿或血清中胎兒DNA分析

AnalysisoffetalDNAinmaternalplasmaandserum目前及今后的胎兒產(chǎn)前診斷新技術(shù)DNA診斷技術(shù)

多重PCR（multiplexPCR）

等位基因特異性性寡核苷酸雜交（ASO）

反向點(diǎn)雜交（RDB）

變性高效液相色譜（DHPLC）

基于微孔板

(microtiterwell-based)高通量檢測(cè)

實(shí)時(shí)PCR(real-timePCR)

-50kb-10kb0kb10kb20kb30kb

(--SEA)Deletion(-

4.2)Deletion(-

3.7)Deletion21導(dǎo)致α地貧的不同類型的基因缺失Locationofprimersanddetectionof--SEAdeletionbygap-PCRGenotypingofthe--SEAallelesbyGap-PCR

寡核苷酸探針雜交技術(shù)ASO探針檢測(cè)

-地貧基因診斷結(jié)果RDBanalysis:applicationtorapidprenataldiagnosisforeightβthalassaemiamutations.GenotypeFatherCDs41-42(